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9 篇 河南科技学院
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6 篇 四川农业大学
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6 篇 河南农业大学
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ASPIRIN UPREGULATES αB-CRYSTALLIN TO PROTECT THE MYOCARDIUM AGAINST HEAT STRESS IN CHICKENS

ASPIRIN UPREGULATES αB-CRYSTALLIN TO PROTECT THE MYOCARDIUM...

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者： B.Yin S.Tang H.Chen Y.Cheng X.Zhang E.Bao J.Hartung College of Veterinary Medicine Nanjing Agricultural University Institute for Animal Hygiene Animal Welfare and Farm Animal BehaviourUniversity of Veterinary Medicine HannoverFoundation

We established in vivo and in vitro models to investigate the role ofαB-Crystallin(Cry AB) and assess the ability of aspirin(ASA) to protect the myocardium during prolonged heat *** vivo,Thirty-day-old chickens were divided into three groups(n=90):heat stress(HS,40±1°C);ASA(-)HS(+),1 mg/kg ASA orally 2 h before heat stress;and ASA(+)HS(-),pretreated with aspirin,no heat stress(25?C).Hearts were excised after 0,1,2,3,5,7,10,15 and 24 *** vitro,primary chicken myocardial cells were isolated from the hearts of twelve-day-old specific pathogen free(SPF) embryos and were divided into four groups(HS:2 h,ASA+HS:2 h,HS:24 h,ASA+HS:24 h).In vivo,rectal temperature,pathological changes and Cry AB expression were studied in broiler chickens,while,in vitro,cell viability and Cry AB expression were tested in primary chicken myocardial *** results showed that pre-treated with ASA can reduce the sensitivity to heat and can lower pathological *** indicated ASA induced Cry AB in vivo to protect against heat stress-induced myocardial damage,but ASA did not induce Cry AB in primary chicken myocardial *** conclusion,the study indicates that ASA can induce expression of CryAB and protect the myocardium in vivo,but not in vitro.

关键词： aspirin αB-crystallin myocardium

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Involvement of endothelial progenitor cells in the formation of plexiform lesions in broiler chickens:possible role of local immune/inflammatory response

Involvement of endothelial progenitor cells in the formation...

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：邵冯金谭勋浙江大学动物科学学院

Plexiform lesions(PLs),which are often accompanied by perivascular infiltrates of mononuclear cells,represent the hallmark lesions of pulmonary arteries in humans suffering from severe pulmonary arterial hypertension(PAH).Endothelial progenitor cells(EPCs) have been recently implicated in the formation of PLs in human *** rarely develop in rodent animal models of PAH but can develop spontaneously in broiler *** aim of the present study was to confirm the presence of EPCs in the PLs in *** immune mechanisms involved in EPC dysfunction were also *** were collected from commercial broilers at 1 to 4 weeks of *** right/total ventricle ratios indicated normal pulmonary arterial pressures for all sampled *** was performed to determine the expression of EPC markers(CD133 and VEGFR-2) and proangiogenic molecule hepatocyte growth factor(HGF) in the lung *** EPC/lymphocyte co-culture system was used to investigate the functional changes of EPCs under the challenge of immune *** with different cellular composition were detected in the lungs of broilers regardless of age,and they were commonly surrounded by moderate to dense perivascular mononuclear cell *** analyses revealed the presence of CD133+ and VEGFR-2+cells in *** structures also exhibited strong expression of *** co-culture enhanced EPC apoptosis and completely blocked HGF-stimulated EPC survival and in vitro tube *** together,this work provides evidence for the involvement of EPCs in the development of PLs in *** is suggested that the local immune cell infiltrate might serve as a contributor to EPC dysfunction by inducing EPC death and limiting their response to angiogenic *** chickens may be valuable for investigating reversibility of plexogenic arteriopathy using gene-modified inflammation-resistant EPCs.

关键词： Plexiform lesions Endothelial progenitor cells Immune response Hepatocyte growth factor Broiler chicken

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RIG-1 and MDA-5 signaling pathways contribute to IFN-β production and viral replication in Porcine circovirus virus type 2 infection cells

RIG-1 and MDA-5 signaling pathways contribute to IFN-β prod...

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者： Bei Huang Jiansheng Li Xinchen Zhang Qiling Zhao Mingqing Lu Yingjun Lv College of veterinary science Nanjing agricultural university

Interferon(IFN) is known for its antiviral ***,it is surprising that treatment of IFN-α and IFN-β in vitro enhanced replication of porcine circovirus type 2(PCV2),indicating that complex relationship between interferon and *** now,it is unclear how the interferon is produced during PCV2 infection and also not knowing whether the interferon induced by PCV2 itself can promote the viral *** the study,PCV2 induced up-regulation of IFN-β in PK-15 cell,and treatment of PCV2-infected cell with NF-κB inhibitor BAY11-7082 decreased the expression of INF-β,while treatment with IRF3 inhibitor BX795 do not,indicating that PCV2 can induce IFN-β production and the induction of IFN-β via IRF3 rather than NF-κB mediated signal ***,PCV2 increased the protein expressions of IRF3,p-IRF3,MAVS,RIG-1 and MDA-5,and knockdown of RIG-1 and MDA-5 decreased the level of IFN-β.These results demonstrate that PCV2 induces the IFN-β production by RIG-1/MDA-5/MAVS/IRFs signal ***,the viral load of PCV2 and PCV2 infection decreased after knockdown of RIG-1 and MDA-5,indicating that RIG-1 and MDA-5 signal pathway contribute to the viral *** conclusion,PCV2 induces the production of IFN-β by RIG-1 and MDA-5 signaling pathway,and the IFN-β produced during PCV2 infection facilitate the viral replication.

关键词： PCV2 Interferon Viral replication RIG-1 MDA-5

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鸡白色念珠菌和烟曲霉双重SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法的建立

鸡白色念珠菌和烟曲霉双重SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法的建立

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：沈洁刘建钗刘彦威刘娜史瑞雅张欣李博河北省邯郸市、河北工程大学生命科学与食品工程学院河北省邯郸市、河北工程大学生命科学与食品工程学院河北省禽病工程研究中心

白色念珠菌和烟曲霉菌为鸡真菌病最常见的病原，为快速诊断鸡白色念珠菌病和烟曲霉菌病的快速诊断，建立了鸡白色念珠菌和烟曲霉菌的双重SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 方法.从临床病料中分离白色念珠菌和烟曲霉菌，通过菌落、菌体形态结构和...

白色念珠菌和烟曲霉菌为鸡真菌病最常见的病原，为快速诊断鸡白色念珠菌病和烟曲霉菌病的快速诊断，建立了鸡白色念珠菌和烟曲霉菌的双重SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 方法.从临床病料中分离白色念珠菌和烟曲霉菌，通过菌落、菌体形态结构和ITS 基因比对，对菌株进行鉴定;根据GenBank 已发表的白色念珠菌rDNA 基因和烟曲霉benAfum 基因序列，设计特异性引物，通过反应体系和反应条件优化，建立白色念珠菌和烟曲霉菌双重定量PCR;对双重定量PCR 分别进行特异性、敏感性和重复性检测.结果显示本分离菌株与GenBank 已发表的白色念珠菌和烟曲霉相应序列的序列在97％以上.合成的白色念珠菌和烟曲霉菌引物，溶解曲线各自形成单一的峰，提示引物特异性符合定量PCR 要求.标准曲线表明标准品在浓度范围内均呈现良好的线性关系.特异性检测，与黄曲霉、黑曲霉、塔宾曲霉、聚多曲霉和光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌等病原真菌无交叉反应;敏感性检测，对白色念珠菌和烟曲霉菌最低检出量分别为4.34×102CFU/mL、3.76×101CFU/mL;重复性检测，批内变异系数均小于1％;且该方法耗时短，整个PCR 过程只需2h.这些结果说明该白色念珠菌和烟曲霉菌双重定量PCR 方法，特异性强，敏感性高，重复性好，耗时短，可用于烟曲霉和白色念珠菌感染的快速检测.

关键词：

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***早熟株与强毒株诱导宿主细胞凋亡的比较

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：张黎郑明学白瑞席柔徐之勇张雪松贡鑫郑龙龙郝飞飞冯玉萍弥成龙山西农业大学动物科技学院山西太谷 030801

为了探讨柔嫩艾美耳球虫(***)早熟弱毒株(PTsx)能否诱导宿主细胞凋亡及其与强毒株(Tsx)对宿主细胞凋亡诱导作用的异同,采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、Hoechst 33342/AnnexinV-FITC/PI 荧光染色和ELISA 等技术,对体外接种PTsx 低剂量,... 详细信息

为了探讨柔嫩艾美耳球虫(***)早熟弱毒株(PTsx)能否诱导宿主细胞凋亡及其与强毒株(Tsx)对宿主细胞凋亡诱导作用的异同,采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、Hoechst 33342/AnnexinV-FITC/PI 荧光染色和ELISA 等技术,对体外接种PTsx 低剂量,高剂量和Tsx 低剂量,高剂量宿主细胞的虫体感染率、细胞凋亡率和Caspase-3 酶活性进行了动态检测;采用Hochest 荧光染色法对体内接种PTsx 低剂量,高剂量和Tsx 低剂量,高剂量的鸡盲肠和肠腺上皮细胞凋亡率进行测定.结果显示：在体外培养的宿主细胞上接种*** 后4h-72h,同剂量接种组之间虫体感染率差异不显著(P＞0.05),而120hTsx 组宿主细胞的虫体感染率极显著(P＜0.01)高于PTsx 组.在接种*** 后4h,接种组的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率以及Caspase-3 吸光值均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)低于对照组.接种*** 后24h-120h,对照组的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3 吸光值均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)低于接种组.其中,接种后24h-72h,PTsx 和Tsx 同剂量接种组之间的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3吸光值差异不显著(P＞0.05),但接种后120h,PTsx 组早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3 吸光值均极显著(P＜0.01)低于Tsx 同剂量组;体内接种*** 后第5 天,接种组的盲肠和肠腺上皮细胞的凋亡率均极显著(P＜0.01)高于对照组;PTsx 组盲肠和肠腺上皮细胞凋亡率极显著(P＜0.01)低于同剂量Tsx 组.表明,*** 早熟株和强毒株均可诱导宿主细胞凋亡,且在*** 发育后期早熟株诱导宿主细胞凋亡的作用明显低于强毒株,早熟株与强毒株诱导其宿主细胞凋亡的能力随感染剂量增高而增强.

关键词： E.tenella 早熟株强毒株凋亡

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辽宁省仔猪病毒性腹泻病原学调查及PEDV的遗传变异分析

辽宁省仔猪病毒性腹泻病原学调查及PEDV的遗传变异分析

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：王楠楠王辉暖高慎阳董筱萍李晶刘文军刘全李宁刘丽颖周铁忠锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121001 中国科学院微生物研究所北京100101 辽宁省动物卫生监测预警中心辽宁沈阳110001 营口市动物疫病预防控制中心辽宁营口115000

引起仔猪传染性腹泻病的病原主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV),这三种病原的传染途径和发病过程相类似,具有发病急、传播速度快,哺乳仔猪感染率和死亡率都较高的特点,临床诊断和控制难度较大.... 详细信息

引起仔猪传染性腹泻病的病原主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV),这三种病原的传染途径和发病过程相类似,具有发病急、传播速度快,哺乳仔猪感染率和死亡率都较高的特点,临床诊断和控制难度较大.近年来辽宁省哺乳仔猪传染性病毒性腹泻病发生较为严重,给养猪业造成了巨大的经济损失.为查明辽宁省仔猪病毒性腹泻病主要病原的种类,明确主要流行病原的分布情况,从而制定有针对性的防控措施,开展了辽宁省仔猪病毒性腹泻的病原调查及PEDV 的遗传变异分析.为了解辽宁猪流行性腹泻病毒(PEDV)来源及变异特性,经PCR 诊断,细胞分离,细胞病变观察、RT-PCR 以及S 基因序列鉴定,成功分离1 株PEDV 毒株(LN-2015-1).S基因序列分析显示,与CV777 毒株相比,除点突变外,分离株还出现最长9bp的插入,6bp 的缺失和13bp 连续突变.氨基酸也存在最长3aa 插入和2aa 缺失,同时存在4 处连续3 个及以上的氨基酸突变,抗原表位分析表明在5 个表位区共发生16 个氨基酸的突变.同源性分析显示与HB-HA2015 毒株的同源关系最近,序列相似性为99.2％,与2010 年以来国内外代表变异毒株同源性较高,达到98.5-98.8％,而与2010 年以前的传统同源性较低,在93.2％-95.6％之间;进化树分析显示该毒株与近年来国内外流行的变异毒株属于同一群,并且与HB-HA2015 形成一小的分支,而与传统毒株进化距离较远.

关键词：猪流行性腹泻病原调查辽宁分离株 S基因抗原表位变异分析

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NF-κB信号通路对布鲁氏菌介导的细胞凋亡的影响

NF-κB信号通路对布鲁氏菌介导的细胞凋亡的影响

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：易继海王月丽王震陈创夫石河子大学动物科技学院

研究目的:布鲁氏菌是一种革兰氏阴性、兼性胞内寄生致病菌,侵染力和传染性强,传播途径传播范围广泛。布鲁氏菌病现已波及全球近90%的国家和地区,每年造成数以亿计的经济损失[1]。布鲁氏菌有自己特有的生物活性,具有独特的生物学功能,与... 详细信息

研究目的:布鲁氏菌是一种革兰氏阴性、兼性胞内寄生致病菌,侵染力和传染性强,传播途径传播范围广泛。布鲁氏菌病现已波及全球近90%的国家和地区,每年造成数以亿计的经济损失[1]。布鲁氏菌有自己特有的生物活性,具有独特的生物学功能,与宿主的免疫间存在相互联系,具有复杂的信号调控网络,因此在粗糙型牛种布鲁氏菌感染下探索NF-κB信号通路是否直接调控细胞的凋亡,来影响布鲁氏菌在巨噬细胞内的存活是十分重要的,为进一步明确布鲁氏菌感染后逃避宿主免疫系统的机制,为我们寻找新型的布鲁氏菌控制策略提供新的方向和奠定理论基础。本实验首先建立布鲁氏菌侵染模型,应用Western-blot技术检测布鲁氏菌RB51侵染下NF-κB信号通路的活性;对抑制剂进行毒性检测后,RB51侵染用不同浓度抑制剂处理后的巨噬细胞,Western-blot检测NF-κB信号通路的活性;RB51侵染下流式细胞仪检测不同时间段细胞凋亡。材料方法:1.粗糙型牛种布鲁氏菌RB51的PCR鉴定;2.粗糙型牛种布鲁氏菌RB51分别以0,6,12,24,48 h侵染巨噬细胞后收集蛋白后进Western Blot检测NF-κB信号通路激活状态(0 h是对照组);***-κB抑制剂5、10、15μmol/L孵育细胞后,用粗糙型布鲁氏菌RB51侵染12h后Western-blot检测NF-κB信号通路激活状态;4粗糙型牛种布鲁氏菌RB51侵染细胞流式细胞仪检测巨噬细胞的凋亡率。结果:本试验中我们发现在RB51侵染下,能够强烈激活NF-κB信号通路,且存在时间依赖性,在12h左右激活能力最高,同时不同浓度的抑制剂BAY11-7082对该通路的抑制作用也有差异,在加入10μmol/L抑制剂后NF-κB p-p65的磷酸化程度迅速降低,且存在最佳抑制浓度;NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082可以影响布鲁氏菌侵染下细胞的凋亡。讨论:粗糙型布鲁氏菌能够激活NF-κB信号通路,可能由于缺失了Wbo A基因,强烈激活NF-κB通路,促进了细胞凋亡,降低了布鲁氏菌的部分逃逸能力,LPS介导的细胞炎症反应是一个典型的病原体与机体相互作用的过程[2],由此可以猜测是布鲁氏菌LPS影响着通路的活性从而通过通路的调控进而影响细胞的凋亡,为布鲁氏菌在细胞内的存活提供条件。总而言之,NF-κB信号通路在粗糙型布鲁氏菌RB51侵染巨噬细胞的过程中发挥了重要作用,影响着布鲁氏菌在胞内的存活,为研究布鲁氏菌免疫逃逸以及胞内持续感染的初步机制研究奠定了基础。

关键词：布鲁氏菌细胞凋亡信号通路

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microRNA对TGEV诱导的IPEC-J2线粒体损伤的调控作用及机制

microRNA对TGEV诱导的IPEC-J2线粒体损伤的调控作用及机制

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：马雪连赵晓民童德文西北农林科技大学动物医学院杨凌712100

目的：猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)引起的一种猪的急性、高度接触性传染病,以2 周龄以内仔猪的致死性腹泻为特征,病死率可达100％.TGEV 能在...

目的：猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)引起的一种猪的急性、高度接触性传染病,以2 周龄以内仔猪的致死性腹泻为特征,病死率可达100％.TGEV 能在体外培养的小肠黏膜上皮细胞(IPEC-J2)中复制增殖,引起细胞线粒体损伤,而microRNA 在此过程中的作用及机制尚未见报道,本研究拟确定在TGEV 诱导线粒体损伤过程中起调控作用的microRNA 及其作用机制.材料方法：本研究以TGEV 感染IPEC-J2,通过高通量测序研究TGEV 对细胞中miRNA 表达谱的影响,采用生物信息学技术预测与线粒体相关的差异表达microRNA 及其靶基因；并进一步通过real-time PCR 技术验证测序结果,通过双荧光素酶试验、western blotting 验证microRNA 靶基因,通过流式细胞仪,共聚焦显微镜,多功能微孔板检测仪等检测差异表达的microRNA 对TGEV 诱导的线粒体损伤的作用,并通过microRNA 靶基因阐明microRNA 对TGEV 诱导的IPEC-J2 线粒体损伤的调控机制.结果：高通量测序结果显示TGEV 诱导IPEC-J2线粒体损伤过程中有65 个microRNA 的表达量发生了改变,其中46 个microRNA表达量上调,19 个microRNA 表达量下调；通过对差异表达microRNA 预测靶基因的GO 及KEGG 富集分析,筛选出13 个与线粒体相关microRNA；采用real-time PCR 技术验证13 个差异表达microRNA 表达量结果均与测序结果一致；JC-1 线粒体膜电位检测以及细胞内ROS 水平检测显示miR-22 对TGEV 诱导的线粒体损伤有促进作用；双荧光素酶试验及western blotting 显示HK2 确为miR-22靶基因；过表达及抑制HK2 同时检测JC-1 线粒体膜电位以及细胞内ROS 水平均显示HK2 对TGEV 诱导的IPEC-J2 线粒体损伤具有抑制作用.结论：上述结果表明,TGEV 感染IPEC-J2 后,miR-22 通过与其靶基因HK2 的3'UTR 区结合,抑制HK2 翻译过程,进一步促进TGEV 所诱导的线粒体损伤.

关键词：

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不同理化因素对鼠伤寒沙门菌SL1344crp基因缺失株黏附HeLa细胞能力的影响

不同理化因素对鼠伤寒沙门菌SL1344crp基因缺失株黏附HeLa细胞能...

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：牟霄慧张依盟王月平伟梦亢君芳刘文慧董云翔李静河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室河南洛阳471003

研究目的：鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)为肠杆菌科沙门菌属成员,是一种条件性胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌,具有广泛的宿主感染谱,主要引起动物的肠道性和人类的食源性疾病,在公共卫生学方面具有重要意义[1,2].本研究的目的是...

研究目的：鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)为肠杆菌科沙门菌属成员,是一种条件性胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌,具有广泛的宿主感染谱,主要引起动物的肠道性和人类的食源性疾病,在公共卫生学方面具有重要意义[1,2].本研究的目的是检测不同理化因素对鼠伤寒沙门菌SL1344 crp 基因缺失株(SL1344Δcrp)黏附HeLa 细胞能力的影响.材料方法：本研究将实验室构建并保存的鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 在LB 固体培养基37 ℃培养12 h 后,挑取单菌落于LB 液体培养基中振荡培养过夜,然后按1：33 的比例转接到新鲜的LB 液体培养基中培养约3.5 h,选取对数生长晚期的菌液感染HeLa 细胞.在检测菌液浓度对鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 黏附HeLa 细胞能力的影响时,选取感染复数MOI 分别为200、100、50 感染HeLa 细胞;为了检测孵育时间对鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 黏附HeLa 细胞能力的影响,本试验将SL1344Δcrp 菌株按MOI=100感染HeLa 细胞,孵育时间分别为30 min、1 h 和2 h;在检测胰酶对鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 黏附HeLa 细胞能力的影响时,将胰酶处理10 min,30 min 的SL1344Δcrp 菌株以及胰酶未处理组按MOI=100 分别感染HeLa 细胞,感染时间为30 min.同时设立鼠伤寒沙门菌野生型菌株SL1344 为对照组.用含0.5％TritonX-100 的PBS 裂解HeLa 细胞10 min,最后经倍比稀释后涂板计数,计算黏附率.结果：相同感染复数情况下,与野生株SL1344 相比,鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp对HeLa 细胞的黏附力均降低,且MOI 为100 时鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 较野生株SL1344 相比黏附率发生了极显著的降低(P < 0.01).同一菌株的不同孵育时间之间的黏附率差异极显著(P ＜ 0.01),并且随着孵育时间的延长,两个菌株的黏附率均下降,因此,孵育时间为30 min 时,鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 对HeLa 细胞的黏附能力最佳.SL1344Δcrp 经胰酶处理后对HeLa 细胞的黏附能力降低.本研究结果为鼠伤寒沙门菌SL1344Δcrp 感染HeLa 细胞模型的建立以及在此模型基础上的相关科学研究奠定了基础.

关键词：

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病、死雏鸡病原菌分析

病、死雏鸡病原菌分析

引用

中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会

作者：李博刘娜刘彦威张欣邢鑫沈洁史瑞雅刘建钗河北工程大学生命科学与食品工程学院河北工程大学生命科学与食品工程学院河北省禽病工程研究中心河北邯郸056021

出壳雏鸡的成活率直接影响孵化场和种鸡场的经济效益,为了解导致出壳雏鸡病、死的主要病原菌,减少出壳雏鸡的病死率,提高养鸡业的经济效益,我们先后对两个孵化场的病、死出壳雏鸡做了调查研究.把先后两批共90 只病、死出壳雏鸡解剖,肝...

出壳雏鸡的成活率直接影响孵化场和种鸡场的经济效益,为了解导致出壳雏鸡病、死的主要病原菌,减少出壳雏鸡的病死率,提高养鸡业的经济效益,我们先后对两个孵化场的病、死出壳雏鸡做了调查研究.把先后两批共90 只病、死出壳雏鸡解剖,肝脏分离菌株,培养、纯化,革兰氏染色观察菌落形态,使用鉴别培养基初步判断菌种;又通过DNA 提取,16S rRNA 通用引物PCR 扩增,扩增产物经0.7％琼脂糖凝胶电泳检测;测序结果在GenBank 数据库中进行Blast分析比对,用DNAStar 软件对相近序列进行同源性分析,确定菌种.采用纸片琼脂扩散法对分离出的菌株进行药敏试验,测出对主要病原菌敏感性较高的药物.分离出67 株病原菌,经形态学观察、鉴别培养基培养、鉴定检测、Blast 分析比对,结果如下：肠球菌35 株,占52.2％;大肠杆菌9 株,占13.4％;葡萄球菌8 株,占11.9％;奇异变形杆菌6 株,占8.9％;不动杆菌3 株,占4.5％;考克氏菌2 株,占3％;地衣芽胞杆菌、无色杆菌、柠檬酸菌属、未知菌各1 株,各占1.5％.导致出壳雏鸡病、死的主要病原菌是肠球菌、大肠杆菌和葡萄球菌,其中肠球菌占52.2％,有此可见肠球菌是最主要的病原菌.所以对肠球菌做了药敏试验,试验结果发现：氧氟沙星、氨苄西林、新霉素、左氟沙星、青霉素、大观霉素、恩诺沙星、庆大霉素、万古霉素对肠球菌敏感性较高;强力霉素、链霉素对肠球菌中度敏感;头孢噻肟、林可霉素对肠球菌不敏感.经试验的分离鉴定,导致雏鸡病死的主要病原菌并非之前所报道的沙门氏菌和大肠杆菌,而是肠球菌.据了解,现在肠球菌作为一种致病菌已经严重危害了养殖业的健康发展,所以研究肠球菌耐药性对于防治肠球菌引起的疾病具有很重要意义.我们的调查结果,对导致出壳雏鸡病、死的主要病原菌有了新的发现,有利于出壳雏鸡成活率的提高,药敏试验的结果也对肠球菌引发疾病的防治提供了有力的科学依据.

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