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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：曹君君王新庄夏霞王轶敏牛晖华南农业大学兽医学院广东广州510642 河南省肉牛工程技术研究中心河南郑州450003 河南省肉牛工程技术研究中心河南郑州450003 河南省肉牛工程技术研究中心河南郑州450003 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

比较胚胎的不同处理方法,不同饲养层对兔胚胎内细胞团(ICM)贴壁和增殖的影响.结果显示:消化掉外层粘蛋白和部分透明带的胚胎96h贴壁率(85.29﹪,29/34)较高,内细胞团生长良好;超排组胚胎的贴壁率和内细胞团(ICM)原代克隆率与自然发情组... 详细信息

比较胚胎的不同处理方法,不同饲养层对兔胚胎内细胞团(ICM)贴壁和增殖的影响.结果显示:消化掉外层粘蛋白和部分透明带的胚胎96h贴壁率(85.29﹪,29/34)较高,内细胞团生长良好;超排组胚胎的贴壁率和内细胞团(ICM)原代克隆率与自然发情组差异不显著(85.71﹪vs88.06﹪,21.43﹪vs19.40﹪,P＞0.05);与对照组(12.5﹪,3.13﹪)相比,在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(MEF)和兔胚胎成纤维细胞饲养层(REF)上培养获得的呈聚集状生长ICM及ICM原代克隆率较高(P＜0.01),MEF组和REF组差异不显著(54.1﹪,22.95﹪vs51.92﹪,17.31﹪,P＞0.05),但REF饲养层培养效果不稳定.研究结果表明,兔早期胚胎消化掉外层粘蛋白和部分透明带有利于胚胎内细胞团贴壁和增殖;超排处理不影响从兔胚中分离胚胎干细胞(ES);小鼠胚胎成纤维细胞饲养层能有效支持兔胚内细胞团的贴壁和增殖.

关键词：胚胎胚胎干细胞内细胞团体外培养

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生长猪玉米豆粕型饲粮中添加植酸酶的效果试验研究

生长猪玉米豆粕型饲粮中添加植酸酶的效果试验研究

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：封伟贤廖志超夏中生黄所含谢建华詹志春卢玉发马恒峻广西彼得汉预混饲料有限公司广西南宁530023 广西大学动物科技学院广西南宁530005 武汉新华扬生物有限公司湖北武汉430074

选用体重约30kg的杜×长×大三元杂生长猪96头,随机分成4个处理组,每组6个重复,每重复4头,公母比为1∶1.A组为对照组,饲喂基础饲粮,B、C、D组为试验组(分别以250、500、750U植酸酶/kg饲粮取代基础饲粮中的40﹪、60﹪、80﹪磷酸... 详细信息

选用体重约30kg的杜×长×大三元杂生长猪96头,随机分成4个处理组,每组6个重复,每重复4头,公母比为1∶1.A组为对照组,饲喂基础饲粮,B、C、D组为试验组(分别以250、500、750U植酸酶/kg饲粮取代基础饲粮中的40﹪、60﹪、80﹪磷酸氢钙),以研究玉米豆粕型饲粮中添加植酸酶对生长猪生长性能和血液生化指标的影响.42d的饲养试验结果表明:与对照组相比,B、C、D组的日增重分别提高了1.05﹪(P＞0.05)、4.09﹪(P＜0.05)、2.64﹪(P＞0.05);饲料/增重比分别较对照组降低了2.18﹪、2.62﹪、1.75﹪;生长增重的饲料成本分别是对照组的97.38﹪、97.03﹪和97.73﹪;血清中钙含量分别提高了4.22﹪、4.22﹪、8.12﹪(P＜0.05);血清中磷含量分别提高了1.46﹪、0.36﹪、14.23﹪(P＜0.05),其他生化指标组间无明显差异.

关键词：植酸酶生长猪生长性能血清生化指标

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的...

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异.用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30﹪(3/10),死亡率为10﹪(1/10),非免疫对照组的发病率为100﹪(10/10),死亡率为40﹪(4/10).体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组.从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用.

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白基因工程疫苗

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乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响

乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影...

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：卢晟盛魏凤刘红波房慧伶陆阳清卢克焕王爱德广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

本研究探讨了乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响.利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在不添加或添加不同浓度EDTA-Na的成熟培养液中体外成熟44～48 h,挑选核成熟卵母细胞进行孤雌激活,然后移到不添加或... 详细信息

本研究探讨了乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响.利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在不添加或添加不同浓度EDTA-Na的成熟培养液中体外成熟44～48 h,挑选核成熟卵母细胞进行孤雌激活,然后移到不添加或添加不同浓度EDTA-Na的胚胎培养液中进行体外培养168 h.结果说明:(1)成熟液中添加适当浓度(25～100μmol/L)EDTA-Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用,在EDTA-Na浓度为100 μmol/L时,效果最佳;(2)胚胎培养液中添加适当浓度(25～100 μmol/L)EDTA-Na,对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用,在EDTA-Na浓度为100μmol/L时,效果最佳;(3)成熟液和胚胎培养液中同时添加100μmol/L EDTA-Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用;(4)成熟液或/和胚胎培养液中添加不同浓度EDTA-Na,对体外成熟培养后的猪核成熟卵母细胞及孤雌激活后的4-细胞孤雌胚SDS-PAGE电泳的蛋白质表达图谱都无显著影响.

关键词：猪卵母细胞体外成熟孤雌激活胚胎培养

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鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达

鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的...

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：木古丽王云峰侯绍华石星明王玫冉多良童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

本文根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定.将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别与IL... 详细信息

本文根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定.将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别与ILTV SA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7﹪和99.1﹪,但与其他α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0﹪.对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTV WG株后第10～60 d内均能检测到低水平的ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出.鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTV WG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础.

关键词：传染性喉气管炎病毒 ICP4基因序列分析潜伏感染

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猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：周艳君童光志安同庆刘金霞田志军彭金美华荣虹仇华吉王云峰王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体.将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体.将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDSPAGA分析发现,表达了Mr约为37 000的融合蛋白rtM,Western blot分析证实,重组蛋白能被PRRSV抗血清所识别.收获融合表达的rtM,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用rtM作为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,结果获得了1株能稳定分泌抗rtM蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为M2B3.间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光.亚型鉴定结果显示,单克隆抗体M2B3为IgG1型,其轻链均为κ链.研究获得的融合蛋白rtM及单克隆抗体将为今后深入研究PRRSV病毒结构和功能,分析M蛋白的抗原表位等提供有益帮助.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白蛋白表达单克隆抗体制备工艺

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兔精液冷冻保存的初步研究

兔精液冷冻保存的初步研究

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：杨素芳邹知明张莹石德顺广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

以家兔为试验动物,从精液解冻后的精子活率和复苏率2个指标,分别对3种稀释液(1:Tris0.25 mol/L十蔗糖0.1 mol/L+柠檬酸钠83 mmol/L+卵黄10﹪+二甲基亚砜(DMSO)15﹪;2:配方1+葡萄糖0.47 mmol/L;3:Tris 0.29 mol/L+葡萄糖0.71 mmol/L+柠檬酸钠67 mmol/L+卵黄20﹪+甘油4﹪)、两种抗冻剂(甘油4﹪、DMSO15﹪)、4℃下平衡时间(30、60、120、180 min)三个方面进行了比较试验.公兔采精用假阴道法,采精后立即检查精子活率,达0.60以上的供试验用.结果表明:(1)3种稀释液中,用稀释液2稀释的精液,精子解冻后活率和复苏率显著高于稀释液1和稀释液3(精子活率:0.153 vs 0.103、0.109;复苏率:0.205 vs 0.137、0.147,P＜0.01),而稀释液1和稀释液3之间差异不显著(P＞0.05);(2)在稀释液2中,分别用4﹪甘油和15﹪DMSO作防冻剂,两者的精子解冻后活率之间(0.193 vs 0.261,P＜0.01),复苏率之间(0.250 vs 0.340,P＜0.01)差异极显著;(3)在4℃下平衡30、60、120、180 min,结果发现,在30～60 min之间,解冻后精子活率之间(0.261 vs 0.249),复苏率之间(0.340 vs 0.325)差异均不显著(P＞0.05),但是随着平衡时间(120～180 min)的增加,精子活率明显降低,精子几乎死亡.结论:采用稀释液2的配方,在4℃下平衡30～60 min,可获得较好的兔精液冷冻保存效果.

关键词：兔人工受精精液保存冷冻保存稀释液防冻剂

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家兔超数排卵的研究

家兔超数排卵的研究

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：杨小淦江明生卢晟盛朱佳杰任子利陆阳清张明卢克焕广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005

为了寻求家兔合理的超排方案,构建获得家兔卵子和胚胎的实验平台,进行3个试验:Ⅰ比较不同剂量(40、50、60、70、80和90IU)的孕马血清促性腺激素(PMSG)对家兔超排效果的影响;Ⅱ比较不同的促卵泡素(FSH)处理方法(恒量法和递减法)对超排效... 详细信息

为了寻求家兔合理的超排方案,构建获得家兔卵子和胚胎的实验平台,进行3个试验:Ⅰ比较不同剂量(40、50、60、70、80和90IU)的孕马血清促性腺激素(PMSG)对家兔超排效果的影响;Ⅱ比较不同的促卵泡素(FSH)处理方法(恒量法和递减法)对超排效果的影响;Ⅲ比较手术后重复超排对家兔超排效果的影响.结果显示:(1)经过80IU的PMSG超排处理后,日本长耳白兔卵巢平均排卵点数和平均回收卵子数都显著高于40、50、60、70和90IU组(P＜0.05);(2)用FSH递减法、恒量法和80IUPMSG超排处理时,日本长耳白兔卵巢平均排卵点数和平均回收卵子数的差异不显著(P＞0.05);(3)进行一次手术后重复超排,手术后重复超排的新西兰兔与术前超排效果相比,卵巢平均排卵点数和平均回收卵子数的差异不显著(P＞0.05);(4)激素处理不同品种的家兔,左右两侧卵巢排卵点数和平均回收卵子数的差异均不显著(P＞0.05).结论:(1)应用PMSG进行母兔超排处理时,80IU剂量的超排效果比较好;(2)应用FSH时,采用递减法和恒量法得到的结果差异不显著,在实践中两种方法均可用;(3)适宜的PMSG剂量(80IU)对兔子的超排效果与FSH相似,在兔子超排处理时,可用PMSG代替FSH;(4)两次手术过程并不会影响超排效果.

关键词：超数排卵卵母细胞促卵泡素

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“第二届全国动物生物技术学术研讨会”在广西大学召开

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广西农业生物科学 2006年第4期25卷 362-362页

作者：谭世俭

2006年10月13-15日，由中国农业生物技术学会动物生物技术分会主办，广西大学承办，广西畜牧兽医学会协办的“第二届全国动物生物技术学术研讨会”在广西大学隆重召开。广西大学校长唐纪良出席开幕式并致辞。来自全国的有关高校、科研... 详细信息

2006年10月13-15日，由中国农业生物技术学会动物生物技术分会主办，广西大学承办，广西畜牧兽医学会协办的“第二届全国动物生物技术学术研讨会”在广西大学隆重召开。广西大学校长唐纪良出席开幕式并致辞。来自全国的有关高校、科研院所、医院等生物技术研究领域内的专家、学者共100多人出席了研讨会。

关键词：动物生物技术广西大学学术研讨会畜牧兽医学会农业生物技术科研院所开幕式

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无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的研究

无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的研究

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：冯贵雪杨素芳卞桂华王晓丽石德顺广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005 广西壮族自治区妇幼保健院广西南宁530003 广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005

本研究针对去卵丘细胞的卵母细胞体外培养存在的问题，以卵巢组织、卵丘细胞为介质来模拟卵母细胞在体内的状态，试验分为5组:M1，直接培养法(对照组);M2，与单层卵丘细胞共培养法;M3>未扩展卵丘细胞包围法;M4,扩展卵丘细胞团支撑法;... 详细信息

本研究针对去卵丘细胞的卵母细胞体外培养存在的问题，以卵巢组织、卵丘细胞为介质来模拟卵母细胞在体内的状态，试验分为5组:M1，直接培养法(对照组);M2，与单层卵丘细胞共培养法;M3>未扩展卵丘细胞包围法;M4,扩展卵丘细胞团支撑法;M5,卵巢组织薄片包围法。培养24 h后计算第一极体(PB1)排出率，随后对这些卵母细胞进行孤雌激活。结果发现:成熟24 h时，M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组，其他各组间没有显著差异(P>0. 05);孤雌激活结果显示M5组的卵裂率显著低于M1组(P<0. 05)，而M2组与M1组间没有差异(P>0. 05);但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组(P<0. 05)。结论:(1)扩展卵丘细胞团支撑法支持无卵丘的水牛卵母细胞的体外核质成熟，而未扩展卵丘细胞包围法促进卵母细胞胞质的成熟，这可能是通过重新构建卵丘一卵母细胞间的间隙连接实现的;(2)与单层卵丘细胞共培养法并不能促进无卵丘的水牛卵母细胞的核成熟及其发育潜力;(3)用卵巢组织包围不能模拟体内卵巢的环境，且卵巢组织可能分泌抑制卵母细胞胞质成熟的因子。

关键词：水牛无卵丘卵母细胞体外成熟体外受精

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