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低氧胁迫对菲律宾蛤仔抗氧化酶的影响

低氧胁迫对菲律宾蛤仔抗氧化酶的影响

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：聂鸿涛卢长炜柴成林杨凤闫喜武大连海洋大学水产与生命学院辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心

为了研究不同低氧水平对菲律宾蛤仔的影响,在实验室条件下设置溶解氧为0.5mg/L和2.0mg/L的低氧海水环境,以溶氧水平为7.0mg/L的天然海水为对照组,研究了低氧胁迫对菲律宾蛤仔抗氧化酶的影响。结果表明:在低氧胁迫时间越长的条件下,蛤仔... 详细信息

为了研究不同低氧水平对菲律宾蛤仔的影响,在实验室条件下设置溶解氧为0.5mg/L和2.0mg/L的低氧海水环境,以溶氧水平为7.0mg/L的天然海水为对照组,研究了低氧胁迫对菲律宾蛤仔抗氧化酶的影响。结果表明:在低氧胁迫时间越长的条件下,蛤仔消化腺和鳃中的乳酸脱氢LDH和琥珀酸脱氢酶SDH的活力逐渐降低,而碱性磷酸酶AKP活力在逐渐增大;对于相同的酶,对照组的酶活力高于处理组的酶活力;在溶氧DO越低的情况下,菲律宾蛤仔的死亡率越高。两种低氧水平(0.5mg/L和2.0mg/L)比较发现,在极端低氧条件下,菲律宾蛤仔乳酸脱氢酶活力反而升高,说明乳酸脱氢酶参与了蛤仔机体抵御极端低氧引起的不适,并通过生理生化指标改变以适应低氧环境。通过低氧胁迫处理组和对照组比较可以看出,对照组酶活力高,说明在低氧胁迫下,蛤仔酶活力受到抑制,活力降低。本实验研究了两种低氧胁迫(0.5mg/L和2mg/L)对菲律宾蛤仔抗氧化酶的影响。在低氧胁迫时间越长的条件下,乳酸脱氢和琥珀酸脱氢酶活力逐渐降低,而碱性磷酸酶活力逐渐升高,两种低氧水平蛤仔的抗氧化酶表现出不同的变化规律。研究结果为菲律宾蛤仔在低氧生理生态学奠定了基础,为蛤仔人工养殖提供了参考。

关键词：菲律宾蛤仔低氧抗氧化酶

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泥蚶G2代快速生长家系遗传结构的微卫星分析

泥蚶G2代快速生长家系遗传结构的微卫星分析

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：滕爽爽方军邵艳卿林兴管柴雪良肖国强浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室中国水产科学研究院海洋贝类工程技术研究中心

利用微卫星标记对泥蚶G2代长家系的遗传结构和遗传多样性进行了分析,并结合家系的表型生长数据,提供了用于补充群体选育和构建下一代家系的实验材料的选择依据。利用本实验室自主开发的18对多态性微卫星引物在3个G2代家系中进行PCR扩增... 详细信息

利用微卫星标记对泥蚶G2代长家系的遗传结构和遗传多样性进行了分析,并结合家系的表型生长数据,提供了用于补充群体选育和构建下一代家系的实验材料的选择依据。利用本实验室自主开发的18对多态性微卫星引物在3个G2代家系中进行PCR扩增,遗传结构分析表明,18对引物共检测出59个等位基因,其中家系F19,F21,F22的平均等位基因数（N）分别是2.500,2.722,2.722;平均观测杂合度（H_o）为0.446,0.510,0.628;平均期望杂合度（H）为0.394,0.433,0.464;多态信息含量（PIC）分别是0.346,0.379,0.403。遗传距离和聚类分析表明F19和F22的遗传距离最小,为0.362,即相似度最高,F21和F22遗传距离最远,为0.486。3个家系遗传多样性适中,没有明显的近交效应,在三个家系中,F22遗传多样性最丰富,F21次之,F19相对低。3个家系的表型值测量结果显示,F19家系的生长速度明显快于F21和F22家系。微卫星标记能为育种材料的遗传结构和多样性进行分析,针对性地选择遗传差异大、性状优良的家系进行进一步选育。本研究为泥蚶养殖群体性状改良提供技术支持和参考,为分子标记辅助泥蚶良种选育提供必要的理论指导。

关键词：泥蚶家系表型性状微卫星标记遗传多样性

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Haemocyte responses to salinity change and seawater acidification in the thick shell mussel Mytiluscoruscus

Haemocyte responses to salinity change and seawater acidific...

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：吴芳丽王有基上海海洋大学水产与生命学院

Flow cytometry was used to investigated immune parameters of haemocytes in the thick shell mussel Mytiluscoruscus exposed to different salinities(15‰, 25‰ and 35‰) under two pH levels(7.3 and 8.1) for varied periods using a two-way experimental approach(in vitro and in vivo). In both the experimental conditions, low p H showed significant effects on all immune parameters throughout the experiment. Total haemocyte counting(THC), phagocytosis(Pha), esterase(Est) and lysosomal content(Lyso) were significantly decreased under low p H level, whereas haemocyte mortality(HM) and reactive oxygen species(ROS) were increased under low pH level. Salinity also showed significant effects on all immune parameters of mussels, but not as strong as *** effect of high salinity on immune parameters of haemocyteswas more significant compared with low salinity. The interactive effects between pH and salinity were observed during both experimental exposure conditions in most haemocyte parameters. This study showed that high salinity, low salinity and low pH have negative and synergistic effects on haemocytes of mussels.

关键词： Acidification Salinity Mytiluscoruscus Flow cytometry Immune response Haemocyte

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不同麻醉剂对金乌贼幼体麻醉效果的比较研究

不同麻醉剂对金乌贼幼体麻醉效果的比较研究

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：葛建龙刘琨刘长琳燕敬平陈四清农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

金乌贼(Sepia esculenta)也称为墨鱼、乌鱼、乌子、针墨鱼,是一种重要的经济头足类,有着重要的经济价值。经过多年攻关,国内已突破了金乌贼规模化人工繁育和养殖技术,推动了金乌贼的增殖放流和池塘养殖业的发展。本研究以金乌贼幼体(胴... 详细信息

金乌贼(Sepia esculenta)也称为墨鱼、乌鱼、乌子、针墨鱼,是一种重要的经济头足类,有着重要的经济价值。经过多年攻关,国内已突破了金乌贼规模化人工繁育和养殖技术,推动了金乌贼的增殖放流和池塘养殖业的发展。本研究以金乌贼幼体(胴长:8.25±1.44 mm)为材料,比较了不同浓度条件下四种常用麻醉剂(丁香油、氯化镁、乙二醇苯醚、苯佐卡因)对金乌贼的麻醉效果。研究结果显示,金乌贼在各浓度丁香油试液中(0.6 mg/L～50.0 mg/L)表现为体色反复变化、不断喷水游动等应激状态,最终喷墨死亡,没有明显的麻醉反应;低浓度的乙二醇苯醚(<0.25 ml/L)和苯佐卡因(<1.0 g/L)没有麻醉效果,较高浓度时金乌贼出现麻醉反应,但金乌贼达到麻醉状态时都出现了喷墨现象;氯化镁在浓度为7.5g/L时表现出较好的麻醉效果,同时金乌贼幼体无不良反应,是4种麻醉剂中较理想的麻醉剂;进一步分析氯化镁对金乌贼幼体的麻醉效应显示,氯化镁浓度对金乌贼幼体的麻醉时间与复苏时间均有显著影响(P <0.05),浓度4.0 g/L～6.0 g/L是金乌贼幼体理想的麻醉浓度,麻醉时间快(2 min～4 min)且复苏率高达100%。本研究表明了氯化镁是适宜的金乌贼麻醉剂,研究结果为金乌贼以及其它头足类的麻醉操作提供了重要参考。

关键词：金乌贼麻醉剂氯化镁

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金乌贼胚胎发育不同时期的转录组分析

金乌贼胚胎发育不同时期的转录组分析

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：边力刘长琳陈四清赵法箴葛建龙谭杰中国水产科学研究院黄海水产研究所

金乌贼(Sepia esculenta Hoyle 1885)是我国沿海一种重要的海洋经济头足类,由于近年来自然资源大幅减少,研究人员开始摸索其人工繁育技术。目前金乌贼人工繁育的主要技术难点为幼苗的成活率较低,尤其在开口期,死亡率可以达到80%。对于... 详细信息

金乌贼(Sepia esculenta Hoyle 1885)是我国沿海一种重要的海洋经济头足类,由于近年来自然资源大幅减少,研究人员开始摸索其人工繁育技术。目前金乌贼人工繁育的主要技术难点为幼苗的成活率较低,尤其在开口期,死亡率可以达到80%。对于开口期前的胚胎发育阶段进行组学研究有助于人们理解幼体发育的生物学机理,并为金乌贼及其他乌贼属的人工繁育技术提供理论支持。本研究完成了首个对于金乌贼胚胎发育不同时期的转录组分析工作,共定位出不同发育阶段间1492个差异表达基因(DifferentiallyExpressedGenes,DEGs)。GO富集分析表明这些DEGs大部分归属于生长发育过程以及分子功能方面的GO分类词条之下,如几丁质代谢过程、蛋白酶活性、催化活性以及钙离子结合,这表明与金乌贼内骨骼(海螵鞘)发生及基因调节功能相关的基因在胚胎发育阶段处于活跃状态。主成分分析结果显示,DEGs在不同发育阶段的基因表达水平上存在连续性,即相邻发育阶段之间具有相似的基因表达规律。通过对于相邻发育阶段间DEGs的功能分析,我们定位到了金乌贼胚胎发育过程中起到重要作用的基因及相关生物学通路。本研究加深了人们对于金乌贼早期胚胎发育阶段内在分子机理的认识,获得的转录组数据及定位出的基因将为金乌贼的发育生物学研究提供高质量参考数据,并为优化人工繁育技术提供理论依据。

关键词：金乌贼 Sepia esculenta 转录组学胚胎发育水产养殖

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Pm-miR-183介导的PmRunt在马氏珠母贝珍珠层形成中的调控作用研究

Pm-miR-183介导的PmRunt在马氏珠母贝珍珠层形成中的调控作用研究

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：郑哲杜晓东熊信威焦钰邓岳文王庆恒黄荣莲广东海洋大学

PEBP2/CBF参与多种生命过程的调控。前期通过转录组分析发现PmRunt可能参与贝壳的形成。本研究利用RACE技术对PmRunt进行了克隆,并对其配体PmCBF的CDS区进行了验证。PmRunt基因全长2319bp,5`端非编码区为82bp, 3`端非编码区为599bp,编... 详细信息

PEBP2/CBF参与多种生命过程的调控。前期通过转录组分析发现PmRunt可能参与贝壳的形成。本研究利用RACE技术对PmRunt进行了克隆,并对其配体PmCBF的CDS区进行了验证。PmRunt基因全长2319bp,5`端非编码区为82bp, 3`端非编码区为599bp,编码的蛋白具有545个氨基酸。PmRunt含有典型的DNA结合结构域(RHD)。PmRunt与脊椎动物的RUNX1相似度最高,系统进化分析发现脊椎动物和无脊椎动物分为独立的两支,软体动物的Runt protein来自同一祖先。酵母双杂交结果证明PmRunt和PmCBP蛋白存在相互作用。本研究利用RNA干扰使得PmRunt表达发生显著性下调后(P<0.05),珍珠层形成发生紊乱,暗示PmRunt参与贝壳珍珠层的形成。利用转录组测序检测PmRunt干扰后的效应,发现矿化相关通路发生显著性变化,同时多个珍珠层基质蛋白基因表达量发生显著性下调。利用RO5-3335抑制剂抑制PmRunt与PmCBF的结合,MG4、VWAP、TYR2、Nacrein的表达量均发生显著性下调(P<0.05)。本研究利用双荧光素酶系统检测了PmRunt与VWAP和Nacrein启动子区域的相互作用,发现PmRunt可以增强VWAP和Nacrein启动子的转录活性,提示PmRunt可能参与VWAP和Nacrein基因表达调控。生物信息学分析发现马氏珠母贝Pm-miR-183与PmRunt存在靶向作用关系。Pm-miR-183与包含PmRunt的3`UTR区域的pmi R-report载体共转染HEK293T细胞后,荧光素酶活性发生显著性下调(P<0.05);注射Pm-miR-183 mimics类似物后,马氏珠母贝外套膜组织中的Pm-miR-183表达量发生显著性上调(P<0.05),PmRunt的表达量发生显著性下调(P<0.05),同时珍珠层的形成发生紊乱。以上结果表明Pm-miR-183可能通过与PmRunt的3`-UTR互作抑制基因的表达,参与珍珠层形成的调控。综上所述,受Pm-miR-183调控的PmRunt在马氏珠母贝贝壳珍珠层的形成中发挥重要的调控作用。

关键词： PmRunt 珍珠层生物矿化马氏珠母贝 Pm-miR-183

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两种疑似卵蛸近缘种线粒体全基因组及形态学特征比较分析

两种疑似卵蛸近缘种线粒体全基因组及形态学特征比较分析

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：唐艳郑小东张晓英李琪中国海洋大学水产学院中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所

"卵蛸"一名最早是由日本学家Sasaki(1917)提出的,其显著特征是在第二三对腕基部假眼斑上有紫色荧光环。由于其模式标本保存不完整,至今仍是一个有争议的物种。本研究新测定了两种带有紫色环疑似卵蛸的未定种的线粒体全基因组... 详细信息

"卵蛸"一名最早是由日本学家Sasaki(1917)提出的,其显著特征是在第二三对腕基部假眼斑上有紫色荧光环。由于其模式标本保存不完整,至今仍是一个有争议的物种。本研究新测定了两种带有紫色环疑似卵蛸的未定种的线粒体全基因组,分别称之为Amphioctopus *** 1和Amphioctopus cf. ovulum 2。两种线粒体基因组长度分别为15,646 bp和15,739 bp。其中,trnP在上述两种线粒体基因组中位置的变化揭示了二者较近的亲缘关系,这种较近的亲缘关系也在90%的序列同源性中得以体现。此外,线粒体基因组的密码子使用情况,AT和GC偏斜等均反映了Amphioctopus cf. ovulum 1和Amphioctopus cf. ovulum 2的同源性,与此同时,细微的差异又体现了两个物种的特异性。本研究利用串联的13个蛋白编码基因氨基酸序列作为数据集,分别采用贝叶斯(BI)法和最大似然(ML)法两种方法对两种近缘未定种的系统发育关系及其在整个头足纲中的进化地位进行了分析。结果显示Amphioctopus cf. ovulum 1和Amphioctopus cf. ovulum 2聚为一支,且与拟蛸属其他物种聚在一起,结果在证实了Amphioctopus cf. ovulum 1和Amphioctopus cf. ovulum 2亲缘关系较近的同时,也表明了二者的进化地位。除此之外,本研究对两未定种的形态学特征也进行了初步的比较和分析,发现了二者在环的颜色,腕式和腕间膜式等方面均表现相同。与此同时,诸多特征如眼的大小,两眼之间的斑纹,腹部色素体的分布范围等均在两近缘种之间呈现出差异。通过本研究发现,综合比较分析两近缘种线粒体全基因组特征和形态学特征将成为探索两近缘种之间亲缘关系及进化地位的一个有力工具。但Amphioctopus cf. ovulum 1和Amphioctopus cf. ovulum2真实身份的确定仍需要一定数量的样品补充,这有待于进一步的研究证实。

关键词：卵蛸近缘种线粒体全基因组形态学特征系统发生

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不同饲料对马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响

不同饲料对马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)消化酶、免疫...

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：廖永山杨创业王庆恒孙瑞椒邓岳文杜晓东广东海洋大学水产学院广东省珍珠养殖与加工工程技术研究中心浙江恒兴饲料有限公司

本研究分析了不同人工饲料(S1、S2和S3)对马氏珠母贝(Pinctadafucatamartensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响。共设置了6个实验组(EG1、EG2、EG3、EG4、EG5、EG6)和1个对照组(CG)。实验组EG1、EG2、EG3分别只投喂饲料S1、S2和S... 详细信息

本研究分析了不同人工饲料(S1、S2和S3)对马氏珠母贝(Pinctadafucatamartensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响。共设置了6个实验组(EG1、EG2、EG3、EG4、EG5、EG6)和1个对照组(CG)。实验组EG1、EG2、EG3分别只投喂饲料S1、S2和S3,EG4投喂饲料S1+亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis),EG5投喂饲料S2+亚心形扁藻,EG6投喂饲料S3+亚心形扁藻。对照组CG仅投喂亚心形扁藻。养殖60天后,结果显示:(1) EG5、EG6和CG的蛋白酶活力显著的高于其他组(p<0.05);EG6和CG淀粉酶活性显著高于其他组(p<0.05)。(2) EG5、EG6和CG的FGF18、TβR I和GHITM m RNA的表达水平显著高于其他组(p<0.05)。(3) EG1的免疫酶(ALP、SOD、CAT和POD)活性最低,MDA含量最高;EG1、EG2和EG3中SODm RNA的表达水平显著低于EG5、EG6和CG(P<0.05);EG1、EG2和EG3 GPx mRNA的表达水平显著低于EG5、EG6和CG (p<0.05);EG1、EG2和EG3CATm RNA的相对表达水平显著低于EG6和CG(p<0.05)。因此,饲料S2和S3与微藻混合投喂可以促进马氏珠母贝的消化吸收以及抗应激的能力,从而获得较好的生长性能和保持最佳的免疫机能。

关键词：人工饲料消化酶免疫生长相关基因马氏珠母贝

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浮筏养殖虾夷扇贝糖原含量以及免疫代谢相关指标的变化规律

浮筏养殖虾夷扇贝糖原含量以及免疫代谢相关指标的变化规律

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：刘超于子超王玲玲宋林生大连海洋大学辽宁省海洋动物免疫学与疫病防控重点实验室青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

糖原是虾夷扇贝体内重要的供能物质,免疫代谢能力是影响浮筏养殖虾夷扇贝生长存活的重要因素。为了研究大连市长海县浮筏养殖虾夷扇贝体内的糖原含量以及重要免疫、代谢相关酶活性的变化规律以便为虾夷扇贝的浮筏养殖提供合理的养殖建议... 详细信息

糖原是虾夷扇贝体内重要的供能物质,免疫代谢能力是影响浮筏养殖虾夷扇贝生长存活的重要因素。为了研究大连市长海县浮筏养殖虾夷扇贝体内的糖原含量以及重要免疫、代谢相关酶活性的变化规律以便为虾夷扇贝的浮筏养殖提供合理的养殖建议,我们于2016年11月、2017年1月以及2017年3月对长海县小长山养殖区三个站位(Q-A、Q-B、Q-C)进行养殖调查。调查内容包括虾夷扇贝闭壳肌和性腺中糖原含量、糖原合成酶活性以及糖原磷酸化酶活性。此外闭壳肌和性腺中谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,血淋巴和鳃中热激蛋白70(HSP70)、p53以及去甲肾上腺素(NE)含量也在我们研究的范围之内。2016年11月至2017年3月,浮筏养殖虾夷扇贝闭壳肌和性腺中糖原含量(图1)以及糖原合成酶含量(图2a)均表现出先升高后降低的趋势,而糖原磷酸化酶含量(图2b)则表现出先升高后稳定的趋势。故我们认为秋冬季虾夷扇贝糖原合成酶含量的降低是导致糖原含量降低的主要因素。谷丙转氨酶活性在闭壳肌和性腺中表现出不同的变化规律(图3):闭壳肌中谷丙转氨酶活性先升高后降低,性腺中没有统一的变化规律。乳酸脱氢酶活性在闭壳肌和性腺中均呈现持续上升的趋势(图4)。血淋巴和鳃中HSP70含量呈现逐渐上升的趋势,鳃中HSP70含量显著高于血淋巴中HSP70含量(P <0.05,图5)。p53含量则呈现出先升高后稳定的变化趋势(图6)。去甲肾上腺素含量在血淋巴和鳃中则表现出先升高后降低的趋势(图7)。

关键词：虾夷扇贝糖原含量代谢指标免疫功能

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肠道细菌对厚壳贻贝稚贝附着的作用研究

肠道细菌对厚壳贻贝稚贝附着的作用研究

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：杨娜彭莉华黄道芬梁箫杨金龙水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室(上海海洋大学) 海洋生物科学国际联合研究中心(上海海洋大学) 中国科学技术部

肠道是厚壳贻贝(Mytilus coruscus)重要的消化吸收器官之一,其栖息着大量的细菌群落,而肠道细菌形成的微生物被膜是否会促进厚壳贻贝稚贝的附着尚未有明确报道。为探讨肠道细菌形成的微生物被膜对贝类附着的作用,通过从厚壳贻贝成体肠... 详细信息

肠道是厚壳贻贝(Mytilus coruscus)重要的消化吸收器官之一,其栖息着大量的细菌群落,而肠道细菌形成的微生物被膜是否会促进厚壳贻贝稚贝的附着尚未有明确报道。为探讨肠道细菌形成的微生物被膜对贝类附着的作用,通过从厚壳贻贝成体肠道中分离10株肠道细菌,调查了上述肠道细菌形成微生物被膜特性,并分析了微生物被膜密度、细菌种属与厚壳贻贝稚贝附着之间的相互关系。同时,对高诱导活性菌株和低诱导活性菌株微生物被膜诱导稚贝附着可能的相关因素进行了分析。研究发现,所有肠道细菌均可有效促进稚贝附着。其中,Paracoccus sp. 1微生物被膜诱导的稚贝附着率最高(61%)。只有5株肠道细菌Roseovarius sp. 1、Winogradskyella sp. 1、Tenacibaculum sp. 4、Bacillus sp. 5和Nonlabens sp.1的被膜密度与附着呈显著相关(P<0.05)。系统发育分析发现肠道细菌诱导附着率与其种属无关。高诱导活性菌株Paracoccus sp. 1和低诱导活性菌株Bacillus sp. 5的微生物被膜共聚焦实验表明,Paracoccus sp. 1分布较密集,膜厚也较厚;扫描电镜发现Paracoccus sp. 1菌体呈椭圆形,Bacillus sp. 5菌体呈杆状,且两者的微生物被膜上均存在其分泌的胞外产物。微生物被膜的胞外多糖染色发现,二者分泌的胞外多糖均很少,且无显著性差异,表明胞外多糖可能不是诱导稚贝附着的因素。根据SDS-PAGE分析发现Paracoccus sp. 1和Bacillus sp. 5的胞外蛋白条带分布不同,且二者的胞外蛋白浓度分别是12.4μg/μl和3.7μg/μl,说明胞外蛋白是诱导稚贝附着的一个重要因素。本研究表明源于厚壳贻贝成贝的肠道细菌可以促进其稚贝的附着,其中胞外蛋白在稚贝附着过程中发挥了重要作用。本研究结果为深入探讨肠道细菌与厚壳贻贝相互作用和推动该种规模化养殖提供理论依据。

关键词：厚壳贻贝肠道细菌微生物被膜稚贝附着

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