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长牡蛎多代近交与自交选育系遗传多样性及生长性状比较

长牡蛎多代近交与自交选育系遗传多样性及生长性状比较

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：任晶莹王卫军徐涛王中平李彬孙国华杨建敏上海海洋大学水产与生命学院山东省海洋资源与环境研究院山东省渔业技术推广站崆峒岛实业有限公司

在良种选育过程中,为了尽快得到稳定可遗传的优良性状,常采用近交方式进行纯系选育,而近交会导致群体的遗传多样性下降。为了解长牡蛎(Crassostrea gigas)多代近交和自交选育系的遗传多样性、遗传结构和生长情况,本实验选用长牡蛎近交4... 详细信息

在良种选育过程中,为了尽快得到稳定可遗传的优良性状,常采用近交方式进行纯系选育,而近交会导致群体的遗传多样性下降。为了解长牡蛎(Crassostrea gigas)多代近交和自交选育系的遗传多样性、遗传结构和生长情况,本实验选用长牡蛎近交4代(F4代)、近交5代(F5代)选育系和雌性同体自交1代(自交1代)选育系,采用8对多态性高的微卫星序列进行分析,同时对其成体的三个时间点生长数据进行了显著性差异分析。实验结果表明,8对微卫星位点在野生对照组中表现出较高的多态性,F4代、F5代和自交1代3个群体的遗传多样性指标下降明显,等位基因数由12.25(Na)下降到2,平均观测杂合度(Ho)由0.538下降到0.449,平均多态信息含量(PIC)由0.826下降到0.297;哈迪—温伯格平衡(HWE)检验结果显示,8个位点在三个选育系和野生对照组中不同程度偏离HWE平衡(P<0.05/8)。F4代、F5代和自交1代长牡蛎的生长指标分析表明,三个时间点的壳长、壳宽生长性状没有显著性差异,F5代生长性状指标壳高和湿重均大于F4代和自交1代,且差异显著;但F4代和自交1代之间没有显著性差异。通过本研究发现,F5代选育系可以继续用来进行生长性状新品系的选育,自交1代尽管多样性降低,但对成体的生长性状影响不明显,仍可以用于新品系选育。

关键词：长牡蛎 F4代 F5代雌雄同体微卫星遗传多样性生长性状

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企鹅珍珠贝足丝分泌分子机理的初步研究

企鹅珍珠贝足丝分泌分子机理的初步研究

引用

中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：战欣王俊王爱民南海海洋资源利用国家重点实验室海南大学海洋学院

企鹅珍珠贝(Pteria penguin)在培育圆形游离海水珍珠的过程中,出现插核母贝死亡率高、留核率低、优珠率低的问题,产生这些问题的主要原因是企鹅珍珠贝发达的足丝使其核位偏小。在前期的研究中,我们发现人为的去除企鹅珍珠贝足丝后,部分... 详细信息

企鹅珍珠贝(Pteria penguin)在培育圆形游离海水珍珠的过程中,出现插核母贝死亡率高、留核率低、优珠率低的问题,产生这些问题的主要原因是企鹅珍珠贝发达的足丝使其核位偏小。在前期的研究中,我们发现人为的去除企鹅珍珠贝足丝后,部分个体的足丝不再分泌,或者新分泌的足丝较旧足丝细,这一发现为提高游离珠的获得率奠定了前期基础。本实验的目的是对企鹅珍珠贝足丝生长相关基因进行初步筛查,为探明足丝分泌过程进行前期研究。人工去除企鹅珍珠贝的足丝,暂养三天后,选取3个重新生长足丝的个体(实验组)和3个未长出足丝的个体(对照组),将6个个体的足丝腺放入液氮中,用于转录组文库的构建和测序。测序采用Illumina Hiseq2500平台,共得到40.12 Gb数据,组装并去冗余后得到84,526个Unigene,总长度,平均长度,N50以及GC含量分别为105,801,304 bp,1,251 bp,2,600bp和36.66%。经GO分析后发现,共有12,444个Unigenes属于细胞组成类基因,有7,863个Unigenes注释执行分子功能,有14,291个Unigenes注释为生物过程类基因。KEGG分析表明,共有55,725个Unigenes得到注释。对转录组数据进行筛选后发现实验组和对照组共有1653个基因上调,1715个基因下调,与生物附着有关的基因7个。根据组装结果,我们对Unigene的SSR进行检测,共发现17,420个SSR,在对照组和实验组中分别发现转换型SNP分别为206,583个和248,847个,颠换型SNP分别为123,893个和145,603个。本研究采用二代测序技术进行企鹅珍珠贝足丝腺在分泌足丝和不分泌足丝两种状态下转录的分析,挖掘与足丝分泌相关的基因,为从分子水平上进一步了解足丝分泌机制提供有用的资料。

关键词：企鹅珍珠贝足丝分泌转录组

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马氏珠母贝新型Toll样受体基因的克隆与功能研究

马氏珠母贝新型Toll样受体基因的克隆与功能研究

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：吴羽媛王志新梁海鹰郝瑞娟王庆恒杜晓东广东海洋大学水产学院广东省珍珠养殖与加工工程技术研究中心

Toll样受体(Toll-like receptors)是一类模式识别受体,在机体抵抗病原微生物的感染过程中起重要的作用。本研究采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术获得了马氏珠母贝(Pinctada fucatamartensii)Toll样受体基因(Pm-TLR)cDNA全长序列,并且运... 详细信息

Toll样受体(Toll-like receptors)是一类模式识别受体,在机体抵抗病原微生物的感染过程中起重要的作用。本研究采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术获得了马氏珠母贝(Pinctada fucatamartensii)Toll样受体基因(Pm-TLR)cDNA全长序列,并且运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了Pm-TLR在马氏珠母贝各组织中的表达情况和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)刺激、植核移植后血淋巴中以及脂多糖(lipopolysaccharide)刺激肝胰脏中的表达模式。结果显示Pm-TLRc DNA全长2214 bp,其中5'非编码区(UTR)长33 bp,3'UTR长135 bp,开放阅读框(ORF)长2043 bp,编码681个氨基酸;Pm-TLR具有跨膜域、富含亮氨酸的重复区和TIR域,符合TLRs家族特征;系统进化树显示其与太平洋牡蛎protein toll的亲缘关系最近。q RT-PCR数据分析表明,Pm-TLR在马氏珠母贝肝胰脏、鳃、性腺、血细胞、闭壳肌、外套膜中均有表达,其中肝胰脏中表达量最高,其次是鳃(P<0.05);哈维氏弧菌刺激后,Pm-TLR的相对表达量在12h开始上调,并于16 h达到最大表达量,约为对照组(0 h)的7倍(p<0.05),最后在24 h恢复至原有水平;LPS刺激后,Pm-TLR的相对表达量在6h上调,随后下降,直至24h再一次上调并达到最大表达量,约为对照组(0h)的6倍(p<0.05);植核移植刺激后,Pm-TLR的相对表达量在植核后5-20 d出现上升趋势,但差异不显著(p>0.05),最后于30 d达到最大值,约为空白对照组(0 d)的6.4倍,具有显著性差异(p<0.05)。研究结果表明,Pm-TLR在马氏珠母贝免疫防御反应中担任着重要的角色。

关键词：马氏珠母贝 Toll样受体基因克隆表达分析

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基于GC-MS的代谢组学评价一种马氏珠母贝人工配合饲料

基于GC-MS的代谢组学评价一种马氏珠母贝人工配合饲料

引用

中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：杨创业杜晓东广东海洋大学

马氏珠母贝是我国海水珍珠培育的主要贝种。目前,马氏珠母贝的养殖都是在近岸海湾或港口,采用笼具进行立桩式和浮笩式养殖,这种养殖模式易受自然灾害和环境污染的影响;而室内工厂化养殖可以避免以上影响。但是,室内工厂化养殖需要大量... 详细信息

马氏珠母贝是我国海水珍珠培育的主要贝种。目前,马氏珠母贝的养殖都是在近岸海湾或港口,采用笼具进行立桩式和浮笩式养殖,这种养殖模式易受自然灾害和环境污染的影响;而室内工厂化养殖可以避免以上影响。但是,室内工厂化养殖需要大量的饵料,因此研发人工饲料对马氏珠母贝工厂化养殖至关重要。本研究根据前期研究,配制了马氏珠母贝人工配合饲料P3,并以室内投饲料P3的马氏珠母贝为实验组EG,自然海区养殖的马氏珠母贝为对照组CG。养殖45 d后,比较马氏珠母贝生长率,并应用GC-MS检测马氏珠母贝肝胰腺代谢物,采用正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)进行模式识别,构建模型,采用Met PA数据库进行代谢通路分析。结果显示:(1)EG组存活率显著高于CG组(P<0.05);EG组壳长、壳宽、壳高的绝对增长率显著低于CG组(P<0.05);但两组间总重的绝对增长率不存在显著性差异(P>0.05)。(2)在马氏珠母贝肝胰腺中共鉴定出125个代谢物(similarity>700),并筛选出48个显著差异代谢物(VIP> 1和P <0.05)。(3)代谢通路富集分析显示,差异代谢物共参与34条代谢通路;综合比较通路的原始P值和拓扑分析影响值,筛选出"半胱氨酸和甲硫氨酸代谢"、"硫代谢"和"淀粉和蔗糖代谢"3个代谢通路。(4)在"半胱氨酸和甲硫氨酸代谢"和"硫代谢"中EG组马氏珠母贝肝胰腺L-高丝氨酸的含量显著高于CG组,而L-半胱氨酸和O-乙酰基-L-丝氨酸的含量显著低于CG组;在"淀粉和蔗糖代谢"中EG组马氏珠母贝肝胰腺葡萄糖含量显著高于CG组,而丙酮酸和D-葡糖六磷酸的含量显著低于CG组。综上所述,人工配合饲料P3可以作为马氏珠母贝的替代饲料;但是还存在一些不足,这些不足影响了马氏珠母贝的"半胱氨酸和甲硫氨酸代谢"、"硫代谢"和"淀粉和蔗糖代谢"。因此,还需进一步优化饲料配方,以加强马氏珠母贝对人工配合饲料的利用,进而改善贝体生长。

关键词：马氏珠母贝代谢组学人工配合饲料

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选择顺序和强度对5月龄三角帆蚌生长和壳色性状复合选育效果的影响

选择顺序和强度对5月龄三角帆蚌生长和壳色性状复合选育效果的影响

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：孙朝虎白志毅李清清彭建庆李家乐上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海市水产养殖工程技术研究中心

在培育三角帆蚌"申紫1号"新品种的基础上,为进一步开展生长和壳色性状复合选育工作,本实验以繁育的紫色品系三角帆蚌F6代为研究对象,比较分析了不同复合选育方法对三角帆蚌生长和壳色性状选育效果的影响。根据选育性状的选择... 详细信息

在培育三角帆蚌"申紫1号"新品种的基础上,为进一步开展生长和壳色性状复合选育工作,本实验以繁育的紫色品系三角帆蚌F6代为研究对象,比较分析了不同复合选育方法对三角帆蚌生长和壳色性状选育效果的影响。根据选育性状的选择先后顺序和选择强度,本实验设置了6种顺序选择法:以壳长为第一选育性状,选择强度为50%,贝壳深紫色为第二选育性状,选择强度20%,即第一种选育方法(SC-50%x20%),其他五种方法依次为SC-30%x(?)、SC-20%x50%、CS-50%x20%、CS-30%x(?)、CS-20%x50%。另外,设置经验选择法作为对照组,同时选择贝壳深紫色且个体大的个体,选择强度为10%,简述为SI-10%。养殖5个月后,通过测量蚌的壳长、壳色等性状,对这七种方法的选育效果进行综合评价。结果表明:第一种方法获得的蚌壳色参数明度L*值最小、色度差dE*值最大,说明其选育出的供片蚌内壳颜色丰富,第二种方法选育出的三角帆蚌各生长性状的指标值都最小,说明其选育效果最差;第四种方法的三角帆蚌的壳长、壳宽值最大,第六种选育方法的三角帆蚌的壳高、体质量、外套膜质量和壳质量值最大,表明这两种方法最适合被用于育珠蚌的选育工作。当选育供片蚌时应以贝壳深紫色为第一选育指标进行选育,当选育育珠蚌时应以壳长为第一选育指标进行选育;同其它方法相比,第七种方法选育效果不明显,采用常规经验法开展复合性状选育效果较差,进一步表明开展复合性状选育方法研究对开展三角帆蚌复合性状育种工作具有重要意义。

关键词：三角帆蚌生长性状壳色选择顺序选择强度选育效果

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热处理对华贵栉孔扇贝闭壳肌品质及其流变性的影响

热处理对华贵栉孔扇贝闭壳肌品质及其流变性的影响

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：曾少葵章超桦吴文龙秦小明曹文红林琪广东海洋大学食品科技学院广东省水产品加工与安全重点实验室水产品深加工广东普通高等学校重点实验室国家贝类加工技术研发分中心(湛江)

近十几年来我国的扇贝养殖业发展迅速,在养殖规模和产量上均居世界第一位。2015年我国扇贝产量已达178.5万吨。华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)以营养丰富、味道鲜美、肉质细嫩而著称。其闭壳肌制成的干品俗称"干贝",是著名的... 详细信息

近十几年来我国的扇贝养殖业发展迅速,在养殖规模和产量上均居世界第一位。2015年我国扇贝产量已达178.5万吨。华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)以营养丰富、味道鲜美、肉质细嫩而著称。其闭壳肌制成的干品俗称"干贝",是著名的海八珍之一。然而,扇贝热加工过程常出现肉质变硬、变粗及汁液流失等问题。为此,本文以华贵栉孔扇贝闭壳肌为原料,分析其加热过程中pH值、质构、蛋白组成、持水力及其流变性变化。结果表明:新鲜华贵栉孔扇贝闭壳肌粗蛋白含量高达18.26g/100g,其盐溶性蛋白及不溶性蛋白分别占粗蛋白的49.4%及37.9%,p H值约为6.6。扇贝闭壳肌分别经40、60、80、100℃加热处理30 min后,其p H值及粗蛋白含量几乎不变(P﹥0.05), 40℃30 min加热处理对其盐溶性蛋白含量影响不显著(P﹥0.05),然而60℃30min加热却使其下降了93.6%。此外,热处理温度与扇贝闭壳肌的持水力呈负相关关系,100℃加热30 min后,持水力从新鲜原料的19.89%下降至7.33%,变化显著(P﹤0.01)。40℃30min加热处理的扇贝闭壳肌质构与新鲜原料相似,随着热处理温度的升高,扇贝闭壳肌质构变化明显,60℃开始出现肉质明显变硬现象。分别添加2%氯化钠到新鲜及不同温度处理30 min的栉孔扇贝闭壳肌中,通过研磨制成肉糜,然后测定其20～90℃范围内的动态粘弹性。从动态粘弹性曲线可知,当测定温度低于35℃时,新鲜肉糜的弹性模量(G′)和粘性模量(G″)几乎不变。当温度大于35℃后,G′、G″随着温度升高而增大,当测定温度达到64℃时达到最高值。经40、60、80、100℃分别加热处理30 min的栉孔扇贝闭壳肌G′,G″,热处理温度越高,其弹性模量(G′)和粘性模量(G″)越低,且粘弹性随着测定温度的变化越不明显。由此可见,热加工强度影响华贵栉孔扇贝闭壳肌的品质。就新鲜华贵栉孔扇贝闭壳肌而言,热处理强度超过60℃30min时,肌原纤维蛋白出现收缩变性,持水性降低,从而导致肉质变硬,流变性降低。

关键词：华贵栉孔扇贝闭壳肌热处理蛋白质组成流变性

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总氨对菲律宾蛤仔幼体存活和生长的影响

总氨对菲律宾蛤仔幼体存活和生长的影响

引用

中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：韩天坤贾甲李晓旭杨凤闫喜武大连海洋大学水产与生命学院辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心

为了弄清菲律宾蛤仔（Ruditapes phili ppinarum）(简称蛤仔)幼体阶段对氨态氮的耐受性,在水温21℃～24℃,p H7.9-8.3,盐度27-30条件下,以不加氯化铵（分析纯）的天然海水为对照,进行了总氨对菲律宾蛤仔（简称蛤仔）受精卵、D形幼虫（10... 详细信息

为了弄清菲律宾蛤仔（Ruditapes phili ppinarum）(简称蛤仔)幼体阶段对氨态氮的耐受性,在水温21℃～24℃,p H7.9-8.3,盐度27-30条件下,以不加氯化铵（分析纯）的天然海水为对照,进行了总氨对菲律宾蛤仔（简称蛤仔）受精卵、D形幼虫（103.2±3.04）um和稚贝（318.1±2.73）um的急性毒性试验。结果如下:1.从受精卵开始胁迫,经24h后孵化出D形幼虫。所得孵化率与总氨浓度对数直线相关极显著（r=0.8956,n=8）(p<0.01),以对照组孵化率为100%,由回归方程求得,总氨对蛤仔孵化率的24h EC（半数有效浓度）为7.08mg/L（非离子氨为0.487mg/L）,24hEC（使孵化率下降5%的总氨有效浓度）为0.57mg/L（非离子氨为0.039mg/L）。2.≤0.37mg/L时,D形幼虫96h存活率为100%,≥0.82mg/L时,随着氨氮浓度的增加,死亡率呈增加的趋势,至29.37 mg/L时死亡率为100%。由概率单位法求得总氨对D形幼虫死亡率的96h LC为7.94mg/L（非离子氨为0.21mg/L）,96hEC为1.86mg/L（非离子氨为0.05mg/L）。D形幼虫的相对生长与总氨浓度直线负相关显著（p<0.05）。把对照组的相对生长作为100%,由直线方程计算得到,总氨对D形幼虫相对生长的96h EC为17.83mg/L（非离子氨为0.476mg/L）,96h EC为5.29mg/L（非离子氨为0.141mg/L）。3.胁迫96h,总氨≤14.4mg/L（非离子氨0.645mg/L）时,对稚贝存活没有明显影响（P>0.05）。由概率单位法算出总氨对稚贝死亡率的96h LC为47.56mg/L（非离子氨为2.544mg/L）。总氨浓度对数分别与稚贝的壳长相对生长和壳高相对生长直线负相关显著（p<0.05）,由直线方程求得,总氨对壳长的96hEC为3.69mg/L,对壳高的96hEC为12.25mg/L,总氨对壳长增长影响更大。综合比较,对氨态氮的耐受能力为稚贝>受精卵>D形幼虫,根据对总氨最敏感的D形幼虫的实验结果,建议蛤仔育苗期间非离子氨控制在0.02mg/L以下为好。所得结论为确定蛤仔苗种用水中氨态氮的水质控制标准提供了参考。

关键词：总氨幼体发育生长菲律宾蛤仔

来源：评论

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马氏珠母贝磺基转移酶的克隆及功能分析

马氏珠母贝磺基转移酶的克隆及功能分析

引用

中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：郝瑞娟杜晓东广东海洋大学

马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)是我国海水珍珠培育的主要贝种,其贝壳及珍珠的生物矿化机制已成为广大研究者所关注的热点。磺基转移酶催化磺酸基团的转移在糖胺聚糖的生物合成过程中发挥重要作用。而糖胺聚糖因具有丰富的携带... 详细信息

马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)是我国海水珍珠培育的主要贝种,其贝壳及珍珠的生物矿化机制已成为广大研究者所关注的热点。磺基转移酶催化磺酸基团的转移在糖胺聚糖的生物合成过程中发挥重要作用。而糖胺聚糖因具有丰富的携带大量负电荷的磺酸基团,参与生物矿化的成核过程。本研究室通过基因组比较分析发现,马氏珠母贝磺基转移酶家族基因显著扩张,并且糖胺聚糖合成的代谢通路被显著富集,暗示磺基转移酶及糖胺聚糖在生物矿化中的重要作用。利用AB-PAS组化染色技术对贝壳,珍珠,外套膜,珍珠囊进行组化分析,发现珍珠层及其对应组织均显示酸性粘多糖着色,相应的棱柱层则呈现中性粘多糖着色,提示糖胺聚糖及磺基转移酶在珍珠层的生物矿化中发挥作用。本研究通过对马氏珠母贝磺基转移酶基因家族候选基因进行全长克隆和功能分析,研究磺基转移酶及其参与合成的糖胺聚糖在贝壳珍珠质形成过程中的作用。本研究共获得4个磺基转移酶基因,包括2个参与硫酸角质素合成的磺基转移酶Carbohydrate (keratan sulfate Gal-6)sulfotransferase1(PmCHST1a和PmCHST1b), 2个参与硫酸软骨素合成的磺基转移酶Carbohydrate (chondroitin 4) sulfotransferase 11 (Pm CHST11a和PmCHST11b)。研究结果显示,本研究获得的磺基转移酶均属于膜偶联磺基转移酶(membrane-associatedsulfotransferase),参与硫酸角质素和硫酸软骨素的生物合成过程。多序列比对结果显示,磺基转移酶基因的蛋白质序列的整体保守性较低,但均与牡蛎(Crassostreagigas)的相应磺基转移酶同源性最高。利用荧光定量技术对磺基转移酶基因的组织表达模式分析发现,磺基转移酶基因均在参与珍珠层形成的外套膜中央膜高表达,暗示其可能参与珍珠层的形成。对磺基转移酶基因的m RNA表达抑制后,发现外套膜外液中硫酸基团的浓度显著降低,且贝壳新生珍珠层形成发生明显紊乱。因此,磺基转移酶基因参与的磺酸基团的催化过程,对贝壳珍珠层的形成至关重要,通过参与外套膜外液中糖胺聚糖的形成,调节外套膜外液中贝壳形成的微环境,参与贝壳珍珠层形成。

关键词：马氏珠母磺基转移酶珍珠层生物矿化 RNAi

来源：评论

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蜑螺属Nerita几个混淆种的比较研究(腹足纲,珍珠蜑螺目,蜑螺科)

蜑螺属Nerita几个混淆种的比较研究(腹足纲,珍珠蜑螺目,蜑螺科)

引用

中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：陈志云连喜平谭烨辉中国科学院南海海洋研究所

蜑螺科Neritidae原隶属于腹足纲Gastropoda、前鳃亚纲Prosobranchia、原始腹足目Archaeogastropod,目前已被广泛接受的分类系统将蜑螺科归属于蜑螺亚纲Neritimorpha、珍珠蜑螺目Cycloneritimorpha (Bouchet&Rocroi, 2005;Bouchet, 2011)。目前世界上共记录蜑螺科16属,现生种280余种(Spencer et al, 2007),在我国已发现40种左右,分布于东南部海域(张素萍,2008)。蜑螺科动物生境多样,有的栖息于潮间带岩礁硬底质区,亦有其他类群栖息于咸淡水环境中如红树林、有淡水注入的海滨、河口滩地等区域,有的种类甚至已经适应了淡水环境(Tan&Clements, 2008)。蜑螺属Nerita几乎全部为海产,且具有典型的热带分布特点,对该类群的动物地理学研究将有助于明确物种形成、传播和灭绝等自然进程以及热带海域的地区多样性模式(Frey&Vermeij, 2008);它们中多数是岩相潮间带及硬质海区最为常见的种类之一,其中一些是沿海群众常食用的贝类。长期以来,我国对蜑螺的系统分类研究相对较少,同物异名、近似种混淆以及错误鉴定等现象时有发生,这将会影响和制约蜑螺相关的其他研究工作。本文论述了隶属于蜑螺科Neritidae蜑螺属Nerita四种混淆种的比较研究:1、矮狮蜑螺Nerita chamaeleon Linnaeus, 1758和圆蜑螺Nerita histrio Linnaeus, 1758,两者贝壳形态相近,在我国海区分布重叠,存在混淆以及错误鉴定的现象;2、锦蜑螺Neritapolita Linnaeus, 1758和杂色蜑螺Nerita litterata Gmelin, 1791,长期以来,一直把两个种混淆在一起,都鉴定为锦蜑螺。作者在整理中国科学院南海海洋生物标本馆历年来采集的蜑螺标本时,对这四个混淆种的标本进行了反复地比较研究,分别找出了它们之间外部形态、地理分布以及生活习性方面的差异,澄清了混淆,确立了其分类地位:1、根据螺旋部以及壳面雕刻可将矮狮蜑螺和圆蜑螺区分开,即前者壳面螺肋光滑,后者螺肋粗糙;前者螺旋部较后者高(图1);2、常被误定为锦蜑螺的其实为两个不同的物种,即锦蜑螺NeritapolitaLinnaeus,1758和杂色蜑螺Nerita litterata Gmelin, 1791 (图2),前者贝壳螺旋部低平,壳面无螺肋,内唇微凸,在我国见于台湾、海南岛和西沙群岛,后者螺旋部高于前者,壳面刻有明显的螺纹,内唇微凹,在我国见于台湾、福建、广东、广西和西沙群岛,且不具有类似于锦蜑螺的埋栖习性,此外,杂色蜑螺此前在我国仅见于台湾,本文的报道进一步完善了该种的地理分布信息。

关键词：腹足纲蜑螺科蜑螺属分类混淆种

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瘤背石磺中间丝蛋白基因的克隆与组织表达特性

瘤背石磺中间丝蛋白基因的克隆与组织表达特性

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中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第十八次学术讨论会

作者：顾冰宁杨铁柱沈和定上海海洋大学海洋动物系统分类与进化上海高校重点实验室

瘤背石磺(Onchidium struma)是生活于滩涂湿地的半咸水两栖性生物,隶属于软体动物门(Mollusca)、腹足纲(Gastropoda)、肺螺亚纲(Pulmonata)、缩眼目(Systellommatophora)、石磺科(Onchidiidae),是一种具有很高的食用和药用价值的贝类。其生活分布区域常见于中国的江苏省、上海市、浙江省、福建省、广东省、广西及海南省等地的淡水与海水交汇处的高潮带,温度适应能力强、分布范围广、野生资源量非常丰富。目前国内外学者对于石磺的研究工作主要集中在系统分类学、生物学形态特征、营养价值评定、胚胎发育和繁殖机制、活性物质的分离提取、线粒体基因组及群体多样性分析等,较少涉及功能基因的研究。中间丝蛋白(Intermediate Filament)是细胞骨架中不可或缺的组成成分之一,在维持生物体细胞形态、保障细胞内部结构(细胞器等)的有序性方面起重要作用,且在不同的组织细胞之间具有明显的表达特异性,许多研究表明中间纤维蛋白使某些细胞具有了高强度的张力和抗剪切力的特点,使软体动物的形体变异和运动能力得到明显增强,更能适应环境的变化。本研究采用RACE技术,克隆得到瘤背石磺中间丝蛋白(Os-IF1)基因序列的c DNA全长并进行了序列和表达分析。结果显示,Os-IF1基因的c DNA核酸序列全长为1957bp,其中ORF框为1359 bp,共编码452个氨基酸,5’UTR长度为376 bp,3’UTR长度为220bp。理论分子量为51.54KDa,等电点为5.21,为一偏酸性蛋白质。蛋白磷酸化位点预测显示Os-IF1蛋白含有43个(Ser 23、Thr 14、Tyr 6)潜在的蛋白激酶磷酸化位点。氨基酸序列的同源性比对发现其与中间丝蛋白家族成员的序列同源性较高。在序列比对中发现该基因的保守性非常高,而进化树基本表现为:腹足纲、头足纲、双壳纲、脊索动物和高等脊椎生物各自聚在一起形成分支,与瘤背石磺进化关系最近的是光滑双脐螺。在相对定量表达实验中,可知Os-IF1在瘤背石磺中表达量较高的为前触角和腹足两个组织,推测该基因产物与石磺运动过程中肌肉的收缩有关。本研究为今后瘤背石磺属的基因组学研究提供理论参考,期望能为深入开展海洋无脊椎动物由海洋向陆地进化研究提供新的理论支撑。

关键词：瘤背石磺中间丝蛋白系统进化荧光定量表达

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