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作者

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郑州市动物园野生动物的隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫分子特征研究

郑州市动物园野生动物的隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫分子特征研究

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：李俊强齐萌常艳凯张龙现董海聚李同义河南农业大学牧医工程学院郑州450002 河南省人兽共患病国际联合实验室郑州450002 河南农业大学牧医工程学院郑州450002 河南省郑州市动物园郑州450002

隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫是寄生于人类和家畜、宠物和野生动物的三种常见的肠道寄生虫.主要引起宿主的自限性腹泻,尤其是对于免疫缺陷病人更为严重.到目前这三种肠道原虫新的种类和基因型不断被发现.为了解郑州市动物园野生动物三种...

隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫是寄生于人类和家畜、宠物和野生动物的三种常见的肠道寄生虫.主要引起宿主的自限性腹泻,尤其是对于免疫缺陷病人更为严重.到目前这三种肠道原虫新的种类和基因型不断被发现.为了解郑州市动物园野生动物三种肠道原虫的感染情况和基因型分布,以期研究其在人兽共患传播中的作用.采集郑州市动物园80余种的203份野生动物样品并提取DNA.通过分析隐孢子虫的小亚基核糖体rRNA (SSU rRNA),actin,和70-kDa heat shock protein (hsp70)基因序列鉴定其种类和基因型.通过分析SSU rRNA,triosephosphate isomerase (tpi),glutamate dehydrogenase (gdh),和β-giardin (bg)基因序列鉴定其集聚体和亚型.通过分析微孢子虫Internal Transcribed Spacer (its)基因序列鉴定其基因亚型.结果显示,隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫的感染率分别为1.5％,2.5％和15.8％.在兔狲(Otocolobus manul)、丹顶鹤(Grus japonensis)和玄凤鹦鹉(Nymphicus hollandicus)样品中分别检测到Cryptosporidium felis,Cryptosporidium baileyi和Cryptosporidium avian genotype Ⅲ;在白颊长臂猿(Nomascus leucogenys)和海狸(Castor fiber)样品中均检测到贾第虫集聚体B;在金钱豹(Panthera pardus fontanierii)和东北虎(Panthera tigris altaica)样品中均检测到贾第虫集聚体F.总共鉴定出17种微孢子虫基因型,其中7个基因型之前已经报道,10个为首次报道的新基因型.这是首次应用分子方法系统研究中国中部地区动物园野生动物的隐孢子虫、贾第虫和微孢子虫.

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螺旋藻大型养殖过程中轮虫与原生动物的群落结构特征变化研究

螺旋藻大型养殖过程中轮虫与原生动物的群落结构特征变化研究

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：袁丹妮龚迎春马明洋胡强中国科学院水生生物研究所微藻生物技术与生物能源研发中心武汉430072 中国科学院水生生物研究所藻类生物学重点实验室武汉430072

螺旋藻因其可食用性,在食品、水产饲料、化妆品和营养食品方面的应用,使其大规模的商业生产吸引了广泛关注.但是,微型浮游动物的存在制约了螺旋藻生长量的增长,而关于螺旋藻大型养殖中污染物种的报道很少见诸于文章,因此本研究针对于赐...

螺旋藻因其可食用性,在食品、水产饲料、化妆品和营养食品方面的应用,使其大规模的商业生产吸引了广泛关注.但是,微型浮游动物的存在制约了螺旋藻生长量的增长,而关于螺旋藻大型养殖中污染物种的报道很少见诸于文章,因此本研究针对于赐百年(位于江苏大丰港)和绿蚨源(位于鄂尔多斯)的螺旋藻养殖基地分别进行了为期一年的生物多样性及其对理化因子响应的研究,望对螺旋藻大型培养当中的污染种类鉴定及预防提供理论支持.在调查期间,两者的螺旋藻生物量均在1g/L以下,磷酸根和铵根离子的浓度分别在0.1g/L和0.04g/L以下,硝酸根和亚硝酸根离子的最大浓度分别为0.141g/L在赐百年和0.188g/L在绿蚨源.赐百年和绿蚨源的螺旋藻培养池中的pH值波动范围分别为9.20-11.10和9.60-11.12,两者之间的盐度存在一定的差别,变化分别为3.3-6.1和5.5-12.3.共发现19种微型浮游动物,其中有3种轮虫,3种变形虫和13种变形虫.在赐百年和绿蚨源,轮虫和变形虫均有出现且,轮虫为主要的危害物种一直存在于培养池当中.周年调查发现,赐百年的轮虫和变形虫的丰度要高于绿蚨源,在2014年5月份赐百年螺旋藻养殖池中的变形虫丰度为最大值,而绿蚨源的变形虫峰值出现于2014年9月份.

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一种分离自户外栅藻大规模培养中的食藻变形虫Vemalophrys algivore的鉴定与其摄食特征分析

一种分离自户外栅藻大规模培养中的食藻变形虫Vemalophrys algivo...

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：龚迎春 PATTERSON David J. SOMMERFELD Milton 胡强中国科学院水生生物研究所微藻生物技术与生物能源研发中心武汉430072 中国科学院水生生物研究所藻类生物学重点实验室武汉430072 亚利桑那州立大学科技与创新学院微藻研究与生物化工实验室梅悉尼大学生命科学学院新威尔士澳大利亚2052 亚利桑那州立大学科技与创新学院微藻研究与生物化工实验室梅萨美国85212

微生物污染是微藻室外大规模培养生物产量损失的主要原因,然而目前对于微藻培养中污染类群的物种鉴定及其发生来源等基本信息知之甚少.本研究从二形栅藻(Scenedesmus dimorphus)在室外开放池与平板光生物反应器的培养中分离并鉴定出一...

微生物污染是微藻室外大规模培养生物产量损失的主要原因,然而目前对于微藻培养中污染类群的物种鉴定及其发生来源等基本信息知之甚少.本研究从二形栅藻(Scenedesmus dimorphus)在室外开放池与平板光生物反应器的培养中分离并鉴定出一个新属和新种吮噬变形虫Vernalophrys algivore.该变形虫是二形栅藻中危害十分严重的虫食藻原生动物,常可造成栅藻细胞数量的急剧下降关.本研究分别从显微与亚显微结构,摄食特征、生活史、以及分子系统发育几个层面对该物种进行全面鉴定与分析.结果显示我们所发现的新物种与已知Leptophrys变形虫在滋养体和伪足的形状以及吞噬方式十分相似,不过其可以形成群体且18S rRNA一级结构序列具有两个可以区别于任何已知物种的区域,分别是E10_1(核苷酸114-117,CAA)和E23_1(核苷酸522-523,AG).因此我们建立了一个新属Vemalophrys,以及与之相对应的新种Vemalophrys algivore.本文还研究并讨论了该变形虫的分布与污染起源问题.该研究对于开发一种早期预警系统和控制预防或治疗这种污染物的措施具有十分重要的应用价值.

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小球藻培养中一种摄藻鞭毛虫的鉴定与摄食规律初步研究

小球藻培养中一种摄藻鞭毛虫的鉴定与摄食规律初步研究

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：马明洋龚迎春袁丹妮胡强中国科学院水生生物研究所微藻生物技术与生物能源研发中心武汉430072 中国科学院水生生物研究所藻类生物学重点实验室武汉430072

小球藻(Chlorella)是一种常见单细胞微藻,具有极高的营养和经济价值,被广泛应用到医药保健、化妆品及饲料等行业中,同时在缺氮等胁迫条件下可积累大量油脂,它又被认为是最有可能用于大规模生产生物柴油的藻种.但在长期的养殖和调查过程...

小球藻(Chlorella)是一种常见单细胞微藻,具有极高的营养和经济价值,被广泛应用到医药保健、化妆品及饲料等行业中,同时在缺氮等胁迫条件下可积累大量油脂,它又被认为是最有可能用于大规模生产生物柴油的藻种.但在长期的养殖和调查过程中发现一种鞭毛虫可大量吞食小球藻并时常造成小球藻培养系统的崩溃,对分离出的鞭毛虫进行形态和分子序列上的研究,发现该鞭毛虫属于金滴虫目的Poterioochromonas malhamensis种.在小球藻浓度(5×106个/mL)不变的条件下,研究不同鞭毛虫接种密度的吞噬特征,结果表明:不同浓度鞭毛虫的污染都会造成小球藻系统的崩溃,高浓度(5×105 个/mL)实验组中金藻在48h内对小球藻的抑制率达到99％以上;低浓度(5×104个/mL-5×l03个/mL)实验组中小球藻(第6天)抑制率也都高于40％以上;在一定范围内,随着金藻接种密度的降低,金藻比生长速率也逐渐提高,同时也有发现当小球藻与金藻比值降到15∶1-20∶1范围内,金藻可在短时间内快速吞噬小球藻.本研究首次揭示了该鞭毛虫对小球藻培养系统危害的严重性,实验数据将为深入研究鞭毛虫Poterioochromonas malhamensis对小球藻摄食规律提供基础,同时也为下一步该鞭毛虫的防控提供基础资料.

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南黄海底栖硅藻、原生动物和小型底栖动物的时空分布特点

南黄海底栖硅藻、原生动物和小型底栖动物的时空分布特点

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：孟昭翠徐奎栋周百灵中国科学院海洋研究所海洋生物分类与系统演化实验室青岛266071

利用Ludox-QPS方法并结合沉积环境因子的综合分析,分别于2011年4月、7月、8月和11月在南黄海6个相同站位进行以底栖硅藻、纤毛虫和异养小鞭毛虫为代表的微型底栖生物及小型底栖生物调查.结果表明,丰度上,底栖硅藻8月(216 cells/cm3)＞7...

利用Ludox-QPS方法并结合沉积环境因子的综合分析,分别于2011年4月、7月、8月和11月在南黄海6个相同站位进行以底栖硅藻、纤毛虫和异养小鞭毛虫为代表的微型底栖生物及小型底栖生物调查.结果表明,丰度上,底栖硅藻8月(216 cells/cm3)＞7月(153cells/cm3) ＞4月(113 cells/cm3)＞11月(73 cells/cm3),底栖纤毛虫8月(57 cells/cm3)＞4月(56cells/cm3)＞7月(13 cells/cm3)＞11月(8 cells/cm3),异养小鞭毛虫4月(208 eells/cm3)＞8月(134cells/cm3)＞ 11月(13 cells/cm3)＞7月(12 cells/cm3),小型底栖生物丰度4月＞(90inds/cm3)8月(86cells/cm3)＞7月(28 cells/cm3)＞ 11月(16 cells/cm3);生物量上,除小型底栖生物(8月＞4月＞7月＞11月)外,其余均与丰度变化相同.就底栖纤毛虫的物种数而言,7月(102种)＞11月(98种)＞8月(72种)＞4月(62种).在鉴定出的9个小型底栖生物类群中,线虫最高可占小型底栖生物总丰度和总生物量的98％.在垂直分布上,除底栖纤毛虫外,其余类群在月份间差异较大,4月90％以上的硅藻分布在0-2 cm沉积物表层,而8月仅有62％;异养小鞭毛虫8月47％分布在0-2 cm沉积物表层,而11月高达77％;线虫4月88％分布在0-2 cm沉积物表层,而7月占71％.统计分析表明,各类群的丰度在4个航次差异显著,且4个航次6个相同站位也具有显著差异.此外,底栖硅藻、原生动物和小型底栖生物的分布受多个因子而非单一环境因子的影响,且不同航次受影响因子不同.201 1年水母暴发对微型和小型底栖生物丰度和生物量的时空分布有一定的影响.

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三种粘孢子虫基于18S rDNA的分子系统学研究

三种粘孢子虫基于18S rDNA的分子系统学研究

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：高永杰赵元莙重庆师范大学生命科学学院动物生物学重庆市重点实验室重庆401331

本研究对采自重庆嘉陵江的三种粘孢子虫常兴碘泡虫Myxobolus changshingensis、异型碘泡虫Myxobolus dispar、多涅茨尾孢虫Henneguya doneci进行了分子进化研究.利用核糖体小亚基作为分子标记,从遗传距离、变异位点、GC含量、相似度和...

本研究对采自重庆嘉陵江的三种粘孢子虫常兴碘泡虫Myxobolus changshingensis、异型碘泡虫Myxobolus dispar、多涅茨尾孢虫Henneguya doneci进行了分子进化研究.利用核糖体小亚基作为分子标记,从遗传距离、变异位点、GC含量、相似度和系统发育树进行分析,对三种粘孢子虫分别进行BLAST比对,从GenBank数据库中挑选序列相似度较高的近缘种进行研究,结果显示:1)常兴碘泡虫Myxobolus changshingensis与徐家汇尾孢虫Henneguya zikawiensis具有最近的GC含量,支序树也显示两个种聚为一支,有较近的亲缘关系;2)碘泡虫属、单极虫属、单尾虫属、尾孢虫属的物种聚支较为混乱,且在进化上呈非单系发生;3)异型碘泡虫Myxobolus dispar和多涅茨尾孢虫Henneguya doneci不同种群单从形态学难以区分;4)GenBank数据库中公布的多涅茨尾孢虫重庆南坪种群分子序列(登录号:EU344899),无论在序列的相似度、遗传距离和变异位点,还是在系统发育树中都表现出与其它种群存在明显差异,在多涅茨尾孢虫六个不同种群变异位点分析中显示,总共47个变异位点,重庆南坪种群有45个变异位点.得出结论:GC含量较为相近的种对于支序树聚支有一定影响;形态数据较为接近且仅从形态学难以区分的类群,序列变异位点分析可以作为一种有效区分手段;对多涅茨尾孢虫重庆南坪种群序列对应的物种鉴定准确性提出质疑,并认为该序列对应的可能是其他的物种.

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黄河流域甘肃段常见鱼类外寄生车轮虫的调查研究

黄河流域甘肃段常见鱼类外寄生车轮虫的调查研究

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：张咏唐发辉赵元莙重庆师范大学生命科学学院动物生物学重庆市重点实验室重庆401331

目前,中国鱼类外寄生车轮虫的相关研究工作主要在长江流域及沿海地区开展较多,来自黄河流域的该类资料则极度匮乏,而甘肃地区在车轮虫的研究方面的数据几近空白.故通过对甘肃地区车轮虫的调查研究,可为该地区鱼类养殖生产中该类病原鉴...

目前,中国鱼类外寄生车轮虫的相关研究工作主要在长江流域及沿海地区开展较多,来自黄河流域的该类资料则极度匮乏,而甘肃地区在车轮虫的研究方面的数据几近空白.故通过对甘肃地区车轮虫的调查研究,可为该地区鱼类养殖生产中该类病原鉴定提供理论指导,进而丰富该地区的车轮虫研究资料.本研究涉及的7种寄主鱼皆于2013-2014年采自黄河流域甘肃段自然水体及周边养殖鱼塘,所涉鱼类为:建鲤Cyprinus carpio ***、鲫Carassius auratus、泥鳅Misgumus anguillicaudatus、草鱼Ctenopharyngodon idellus、蛇鮈Saurogobio dabryi、鲶Silurus asotus和虹鳟Oncorhynchus mykiss.对采集到的车轮虫标本采用干银法染色,并运用国际间统一特定方法(Lom,1958)和齿体定位描述法(Van As & Basson,1989)进行形态特征描述.本研究共检获14种车轮虫,其中车轮虫属1 1种,具体为:单型车轮虫Trichodina uniforma Van As & Basson,1989、临岩车轮虫Trichodina linyanta Van As & Basson,1992、迈氏车轮虫Trichodina migala Van As & Basson,1989、黑色车轮虫Trichodina nigra Lom,1960、适度车轮虫Trichodina modesta Lom,1970、网状车轮虫Trichodina reticulate Hirschman & Partsch,1955、显著车轮虫Trichodina nobillis Chen,1963、斜齿车轮虫Trichodina lechriodentata Zhao&Tang, 2006、异齿车轮虫Trichodina heterodentata Duncan,1977、易变车轮虫Trichodina mutabilis Kazubski & Migala,1968与1未定种Trichodina sp.;小车轮虫属2种:周丛小车轮虫Trichodinella epizootica Sramek-Husek,1953与纤细小车轮虫Trichodinella subtilis Lom&Haldar,1977;三分虫属1种:大型三分虫Tripartiella macrosoma Van As & Basson,1987.上述14种车轮虫均为甘肃地区的新记录种,鲶为适度车轮虫、临岩车轮虫的宿主新记录,鲶和蛇鮈为迈氏车轮虫的宿主新记录,虹鳟为易变车轮虫的宿主新记录.

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基于18S rDNA对刺纹车轮虫的系统地位分析

基于18S rDNA对刺纹车轮虫的系统地位分析

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：王琴唐发辉赵元莙重庆师范大学生命科学学院动物生物学重庆市重点实验室重庆401331

采用甲基绿-派咯宁与干银法染色对采自重庆江津地区养殖单性奥尼罗非鱼(Oreochromis aureus♂×Oreochromis niloticus♀)鳃表的刺纹车轮虫(Trichodina centrostrigata Basson,Van As&Papema,1983)进行了核器与附着盘形态学结...

采用甲基绿-派咯宁与干银法染色对采自重庆江津地区养殖单性奥尼罗非鱼(Oreochromis aureus♂×Oreochromis niloticus♀)鳃表的刺纹车轮虫(Trichodina centrostrigata Basson,Van As&Papema,1983)进行了核器与附着盘形态学结构的揭示,并按照Lom(1958)提出的"统一特定方法"和Van As & Basson (1989)倡导的齿体定位描述法对其进行了详细的形态学重描述.本研究首次对刺纹车轮虫进行了18S rDNA的克隆测序,测得刺纹车轮虫18S rDNA序列长度为1594nt,GC含量49.62％;通过ML与BI系统树的构建,并基于18S rDNA序列结构的特征分析了刺纹车轮虫与近缘种的亲缘关系及系统进化地位.结合形态学与分子系统学的结果分析显示:刺纹车轮虫是一种具有辐射状中央颗粒的淡水车轮虫,具有相对较高的GC含量而位于分子系统树的顶枝,它与海水车轮虫具有较高的序列相似性及较近的遗传距离而聚为一枝.在系统进化中分化较晚并与海水车轮虫具有较近的亲缘关系;中央颗粒在车轮虫枝系中是混杂的,能够形成中央颗粒的遗传特征扩散到不同分枝中,中央颗粒的存在与否不能作为车轮虫鉴定的依据,该结论支持先前的研究结果.序列分析揭示了车轮虫的同源性与18S rDNA序列相似性、遗传距离具明显相关性,GC含量与分子支序树分枝具有明显相关性.此外,本研究通过对刺纹车轮虫的寄主及寄生特性分析表明:刺纹车轮虫主要寄生于罗非鱼属鱼类,少数寄生于其他淡水鱼体内,具有较强的宿主适应性.

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纳米银颗粒对纤毛虫小腔游仆虫细胞结构的影响

纳米银颗粒对纤毛虫小腔游仆虫细胞结构的影响

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：任余廷倪兵范鑫鹏顾福康华东师范大学原生动物实验室上海200241

为了探索纳米银颗粒对纤毛虫小腔游仆虫(Euplotes aediculatu)结构的影响,本研究选取了不同浓度的50 nm粒径三角平板状纳米银颗粒对小腔游仆虫进行毒性处理,并通过微分干涉显微镜,扫描电镜和透射电镜进行观察.在光学显微镜下观察结果显...

为了探索纳米银颗粒对纤毛虫小腔游仆虫(Euplotes aediculatu)结构的影响,本研究选取了不同浓度的50 nm粒径三角平板状纳米银颗粒对小腔游仆虫进行毒性处理,并通过微分干涉显微镜,扫描电镜和透射电镜进行观察.在光学显微镜下观察结果显示:当纳米银的浓度低于0.3 μg/mL时,细胞仍然保持正常体型;但随着纳米银浓度的不断增大(最大至0.5μg/mL),细胞游动速度逐渐减慢,开始出现抖动的现象,并向凹面皿底部聚拢,同时在细胞内部出现大量直径不等的空泡,细胞整体由椭圆形转变为纺锤形;当浓度大于0.5 μg/mL时,细胞形态呈近似球形.扫描电镜观察显示,纳米银处理后的小腔游仆虫,其细胞由正常的椭圆形转变为纺锤形.各部位纤毛器出现先后脱落的现象,首先口围带处聚集的的纤毛散乱地分布,自口围带右侧纤毛起因断裂脱落而逐渐缩短,口围带小膜的三列毛基体逐渐裸露;其次聚集的额、腹棘毛的纤毛也开始散乱,第一根额棘毛逐渐断裂变短,其毛基体裸露进而脱落;横棘毛最后脱落.推测纤毛脱落顺序与细胞各部位纤毛的运动有关.透射电镜观察发现,细胞核核膜完整,但染色质凝聚成电子密度相同、直径1-2.5μm的块状结构,部分大颗粒的核仁也发生了扩展延伸;位于表膜下的部分线粒体肿胀成不规则形状,部分线粒体内膜的嵴稀疏,出现断裂瓦解现象,可见细胞核和线粒体是纳米银的主要作用靶器官.同时细胞内出现大量的自噬体以及膜性结构,这预示着纳米银对小腔游仆虫细胞造成了损伤,推测这很可能是细胞的一种防御行为.

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亚显微结构观察--探讨重金属离子及有机农药对纤毛虫的毒性效应

亚显微结构观察--探讨重金属离子及有机农药对纤毛虫的毒性效应

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中国动物学会原生动物学分会第十八次学术讨论会

作者：母伟杰陈瑛王轩张宗瑶蔡兴隆胡鹏月邱子健哈尔滨师范大学生命科学与技术学院原生动物实验室哈尔滨150025

重金属离子和农药毒性是毒理学研究领域的热点,且大多数报道是关于它们在半致死浓度下对多细胞高等动物产生的相关影响.而本工作以易采集、体积小及繁殖快的单细胞原生动物纤毛虫为研究对象,测定了两种有机磷农药乐果(Dimethoate Pestic...

重金属离子和农药毒性是毒理学研究领域的热点,且大多数报道是关于它们在半致死浓度下对多细胞高等动物产生的相关影响.而本工作以易采集、体积小及繁殖快的单细胞原生动物纤毛虫为研究对象,测定了两种有机磷农药乐果(Dimethoate Pesticide)、毒死蜱(Pesticide Chlorpyrifos)对尾柱虫(Urostyla sp.)、两种重金属离子汞离子(Hg2+)、镉离子(Cd2+)对天蓝喇叭虫(Stentor coeruleus)的无性二分裂速度(次/日)分别产生影响的最低有效浓度,并利用透射电镜技术,对比观察在不同重金属离子或农药浓度培养液下虫体与正常对照组的虫体细胞亚显微结构的变化.结果如下:1)乐果和毒死蜱对尾柱虫无性二分裂速度产生影响的最低有效浓度范围分别是:0.264～0.275mg/L和0.0075～0.0093mg/L,汞离子和镉离子影响天蓝喇叭虫无性二分裂速度产生影响最低有效浓度范围分别是0.0090～0.0125mg/L和0.0150～0.0170mg/L;2)乐果和毒死蜱对尾柱虫细胞亚显微结构的影响体现在:大核核膜变形不完整出现断裂,染色质聚缩凝集,核仁数量减少,线粒体颜色发黑、其双层膜结构模糊不清且内部嵴结构不清晰;而汞离子和镉离子影响天蓝喇叭虫细胞亚显微结构的影响体现在:细胞核外形严重变型、褶皱,核膜的双层膜结构变得模糊不清,核仁数量减少,线粒体内折叠的嵴结构不清晰,线粒体外膜模糊不清.本文揭示了不同毒剂在最低有效浓度下,对单细胞生物超微结构产生的不同影响,为探讨重金属离子和农药对生物体毒性效应机理研究提供理论参考.

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