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顶复门原虫入侵与宿主细胞F-actin聚集的关系研究

顶复门原虫入侵与宿主细胞F-actin聚集的关系研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：吴彩艳廖申权李娟戚南山吕敏娜林栩慧于林增张健騑孙铭飞广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省公共卫生公共实验室

顶复门原虫具有保守的入侵宿主细胞机制。在入侵宿主细胞过程中,首先由虫体分泌相关蛋白黏附宿主细胞,而后激活宿主细胞F-actin聚集引起细胞骨架重排从而实现虫体入侵。研究发现,***进入哺乳动物细胞不仅是一个积极主动的入侵过程,而且... 详细信息

顶复门原虫具有保守的入侵宿主细胞机制。在入侵宿主细胞过程中,首先由虫体分泌相关蛋白黏附宿主细胞,而后激活宿主细胞F-actin聚集引起细胞骨架重排从而实现虫体入侵。研究发现,***进入哺乳动物细胞不仅是一个积极主动的入侵过程,而且伴随着宿主细胞骨架重排;入侵行为的发生依赖虫体自身的动力与F-actin聚集引起的宿主细胞骨架重排二者共同作用。利用毒伞素(Phalloidin)染色证实***在感染宿主细胞过程中,F-actin聚集于宿主细胞与虫体的交界处,随着虫体的发育,F-actin聚集的长度增加,并且F-actin只存在于粘附部位,而非整个虫体;当***感染HCT-8细胞30s即可检测到酪氨酸磷酸化,酪氨酸磷酸化被认为与F-actin聚集相关,入侵30min后,在虫体与宿主细胞黏附部位即可检测到F-actin聚集,且聚集的F-actin来源于宿主细胞,由宿主细胞F-actin聚集引起的细胞骨架重排一直持续到纳虫空泡形成。同样***在入侵HCT-8细胞过程中,F-actin聚集依赖的动力也来源于宿主细胞骨架蛋白的磷酸化。利用抑制F-actin聚集的抑制剂—细胞松弛素D(Cytochalasin D)孵育HCT-8细胞后,感染***,结果入侵率明显下降。将***子孢子感染以Cytochalasin D处理的MDBK细胞,子孢子的入侵率也显著下降,免疫组化试验结果显示MDBK与Cytochalasin D共孵育后F-actin聚集明显减少,由于Cytochalasin D破坏了细胞微丝的形成从而阻碍了F-actin的聚集,进而抑制***入侵宿主细胞。在***感染宿主细胞过程中,也有类似结果。综上所述,在顶复门原虫入侵宿主细胞时,宿主细胞F-actin聚集是必须的。

关键词：顶复门原虫入侵宿主细胞 F-actin聚集

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毕氏肠微孢子虫基因型在青海藏羊及牦牛中的分布特征

毕氏肠微孢子虫基因型在青海藏羊及牦牛中的分布特征

引用

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：张强李佩王琳蔡进忠郭亚琼李春花雷萌桐冯耀宇肖立华华东理工大学资源与环境工程学院青海省畜牧兽医科学院华南农业大学兽医学院美国疾病预防控制中心国家新发和人兽共患传染病中心

毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)是一种重要的人兽共患病原,易通过与家畜的接触传播。藏羊和牦牛可以生活在高海拔的极端环境中,通常作为高原地区的主要经济动物饲养,可能成为毕氏肠微孢子虫的潜在传染源。目前,对于毕氏肠微... 详细信息

毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)是一种重要的人兽共患病原,易通过与家畜的接触传播。藏羊和牦牛可以生活在高海拔的极端环境中,通常作为高原地区的主要经济动物饲养,可能成为毕氏肠微孢子虫的潜在传染源。目前,对于毕氏肠微孢子虫在藏羊和牦牛中分布情况的研究较少。本研究中,从我国青海省共采集了312份藏羊样本以及554份牦牛样本,并基于核糖体内部转录间隔区的PCR结合测序的方法,鉴定毕氏肠微孢子虫阳性率及基因型。在312份藏羊和554份牦牛样品中,分别检出毕氏肠微孢子虫阳性样品73个(23.4%)和40个(7.2%)。在藏羊样品中共检出8种毕氏肠微孢子虫基因型,包括3种已知基因型(BEB6,COS-I和NESH5)和5种新基因型(命名为CHS13-CHS17);在牦牛样品中共检出7种基因型,包括5种已知基因型(J,BEB4,BEB6,COS-I和NESH5)以及2种新基因型(分别命名为CHN13和CHN14)。其中,大多数毕氏肠微孢子虫基因型属于Group 2,少数属于Group1,此外,本研究还鉴定出1个属于Group 1的新亚组。在藏羊中,毕氏肠微孢子虫的优势基因型为BEB6(42.5%),而在牦牛中,优势基因型则为J(47.5%)结果显示,即使共享栖息地,毕氏肠微孢子虫基因型在藏羊与牦牛中的分布也是不同的。这表明毕氏肠微孢子虫Group 2基因型间存在一定宿主适应性的差异。

关键词：毕氏肠微孢子虫藏羊牦牛宿主适应性基因型

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甘肃省甘南州部分县(市)牦牛泰勒虫病血清学调查

甘肃省甘南州部分县(市)牦牛泰勒虫病血清学调查

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：陈银银刘军龙李有全刘爱红赵帅阳郭鹏飞李四通韩元殷宏关贵全罗建勋家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

牛泰勒虫病(Bovine theileriosis)是由多种泰勒虫(Theileria)寄生于牛淋巴细胞和红细胞内引起的一种蜱传性血液原虫病,以高热、贫血、黄疸、体表淋巴结肿大及死亡等为临床特征。目前,国内可感染牛的泰勒虫主要有环形泰勒虫(***)、瑟氏... 详细信息

牛泰勒虫病(Bovine theileriosis)是由多种泰勒虫(Theileria)寄生于牛淋巴细胞和红细胞内引起的一种蜱传性血液原虫病,以高热、贫血、黄疸、体表淋巴结肿大及死亡等为临床特征。目前,国内可感染牛的泰勒虫主要有环形泰勒虫(***)、瑟氏泰勒虫(***)和中华泰勒虫(***)三个种,且常呈混合感染状态,给我国养牛业造成了严重的经济损失,但针对牦牛泰勒虫感染状况的调查,报道极少。甘南藏族自治州地处甘肃省南部,是青藏高原东部主要的牦牛饲养区。2016年10月-11月间,本实验室选取甘南州养牦牛数量较多的4个县(市)的11个乡镇,采集了320份牦牛血清,其中合作市37份(佐盖曼玛乡、卡加道乡、佐盖多玛乡、合作市区分别为5、12、14、6份)、夏河县82份(阿木去乎镇29份,牙利吉阿纳扎西村53份)、碌曲县19份(尕海乡秀洼村4份、李恰如种畜场15份)、玛曲县182份(阿万仓乡、玛艾镇、玛曲县城分别为62、53、67份),采用本实验室建立的、可同时检测三种泰勒虫感染抗体的通用方法"重组MPSP抗原间接ELISA"对样品进行了血清学调查。结果显示,合作市、夏河县、碌曲县、玛曲县的平均阳性率分别为67.57%(25/37)、74.39%(61/82)、84.21%(16/19)和69.78%(127/182),其中碌曲县李恰如种畜场的阳性率最高(86.67%)。年龄在1-3岁之间年龄段的牦牛阳性率为68.09%(32/47),4-7岁年龄段的牦牛的阳性率为74.61%(141/189),8岁以上年龄段的牦牛阳性率为66.67%(56/84)。本项研究显示,甘南州牦牛泰勒虫感染普遍,已成为危害养牛业发展的潜在威胁,值得动物疫控部门给予高度重视。

关键词：牛泰勒虫病 MPSP ELISA 血清学调查

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Comparative analyses within Gyrodactylus(Platyhelminthes:Monogenea) mitochondrial genomes and conserved polymerase chain reaction primers for gyrodactylid mitochondrial DNA

Comparative analyses within Gyrodactylus(Platyhelminthes:Mon...

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者： Fei Ye Ping You Co-Innovation Center for Qinba regions’ sustainable development College of Life ScienceShaanxi Normal University

In this study,we describe the complete mitochondrial genomes of Gyrodactylus brachymystacis and Gyrodactylus parvae infecting rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) and the invasive topmouth gudgeon(Pseudorasbora parva),*** two circular genomes have a common genome organization found in other Gyrodactylus *** analyses of mitochondrial genomes from six Gyrodactylus species were carried out to determine base composition,codon usage,transfer RNA and ribosomal RNA genes,major non-coding regions,and nucleotide diversity within the *** also provide the first universal models of the secondary structures of rrn S and rrn L for this group thereby promoting utilization of these genetic *** primers provided herein can be used to obtain more mitochondrial information for pathogen identification and may reveal different levels of molecular phylogenetic inferences for this lineage.

关键词： Gyrodactylus brachymystacis Gyrodactylus parvae Monogenea mitochondrial genome universal primers secondary structure

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Establishment of male mice models of Neospora caninum

Establishment of male mice models of Neospora caninum

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者： LI Hang ZXIE Su-zhu HANG Ning-ning JIA Li-jun Department of Veterinary Medicine Agriculture college of Yanbian University

In order to understand the pathogenicity of Neospora japonicus to male mice,BALB/c mice were used as experimental animals to establish the animal model of male *** on the observation of the main organs of the model mice,PCR was used to detect the major organs and genital organs,also morphological observation of spermatozoa,sperm density and activity analysis,and detection of parasites in *** results showed that the major organ tissues of the model mice showed varying degrees of pathological changes,the Nc-5 gene was detected by PCR in the liver,brain,lung,kidney,testis,epididymis and semen of male mice,compared with the control group,the density of spermatozoa was significantly different(P <0.05),and the sperm motility and sperm deformity were significantly different(P <0.01).Indicating that cannabis can invade the main organs and reproductive system of male mice and affect sperm *** study laid the foundation for the study of the pathogenicity of Neospora canis.

关键词： Neospora caninum male mouse animal model organ sperm

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Sometimes the devil that you know IS worse: How comparative and functional genomics have led to new discoveries about Toxoplasma gondii development and pathogenesis

Sometimes the devil that you know IS worse: How comparative ...

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者： Sarah Sokol Sheen Wong Sethu Nair J.P.Dubey Jon P.Boyle Department of Biological Sciences University of Pittsburgh Animal Parasitic Diseases Laboratory U.S.Department of Agriculture

Hammondia hammondi is the nearest relative of Toxoplasma gondii,but unlike *** this parasite species is obligately *** have compared *** and *** development in vitro and identified multiple ***-specific growth *** replicating slower than ***,*** was resistant to p H-induced tissue cyst formation early after ***,in the absence of stress *** spontaneously converted to a terminally differentiated tissue cyst stage while *** did *** *** could infect new host cells for up to 8 days following excystation,and this period was exploited to generate stably transgenic *** with RNAseq analyses,our data clearly show that *** zoites grow as stringently regulated life stages that are fundamentally distinct from *** tachyzoites and *** are now using this system to better understand bradyzoite development and cyst formation,and to identify differences in the host response to these genetically similar,but phenotypically distinct,parasite species.

关键词： Toxoplasma gondii Hammondia hammondi bradyzoite cyst

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Genome of the coenurosis tapeworm Taenia multiceps

Genome of the coenurosis tapeworm Taenia multiceps

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者： Wenhui Li Bo Liu Yang Yang Yuwei Ren Shuai Wang Conghui Liu Nianzhang Zhang Zigang Qu Wanxu Yang Yan Zhang Hongbing Yan Fan Jiang Li Li Shuqu Li Wanzhong Jia Xuepeng Cai Wei Fan Baoquan Fu State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu ProvinceLanzhou Veterinary Research InstituteChinese Academy of Agricultural Sciences Agricultural Genomic Institute at Shenzhen Chinese Academy of Agricultural Sciences Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Disease

Coenurosis,caused by the larval coenurus of tapeworm Taenia multiceps,is a fatal central nervous system disease in sheep,as well as a parasitic zoonosis,causing serious pathological conditions in human *** several treatment and prevention techniques have been developed,control of coenurosis is still facing great ***,we present a high quality genome sequence

关键词：

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吡喹酮通过上调Smad7抑制肝星状细胞TGF-β/Smad信号通路活化抗肝纤维化作用机制

吡喹酮通过上调Smad7抑制肝星状细胞TGF-β/Smad信号通路活化抗肝...

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：刘劲峰朱燕楠陆忠奎王勇南京医科大学基础医学院

血吸虫病(schistosomiasis)是严重危害人类生命健康的重要寄生虫病,在我国主要流行日本血吸虫病。据2016年底统计,全国推算血吸虫病人数大约7.7万例,累计晚期血吸虫病人数约3万例。我国现行血防策略主要着眼于阻断传播和基于病原因素的... 详细信息

血吸虫病(schistosomiasis)是严重危害人类生命健康的重要寄生虫病,在我国主要流行日本血吸虫病。据2016年底统计,全国推算血吸虫病人数大约7.7万例,累计晚期血吸虫病人数约3万例。我国现行血防策略主要着眼于阻断传播和基于病原因素的临床治疗,而对于血吸虫病肝纤维化代偿期的病理过程,尚缺乏足够的认识。尽管杀虫药物尤其是吡喹酮的广泛使用,使晚期血吸虫病已不再是血吸虫病临床发展的必然阶段,但是晚期血吸虫病的发病机制和影响因素复杂,针对病原的治疗并不能完全阻断慢性血吸虫病向晚期血吸虫病发展。因此,开展血吸虫病肝纤维化致病机制和抗肝纤维化机制研究,对实现消除血吸虫病目标具有重要现实意义。吡喹酮(Praziquantel,PZQ)作为抗血吸虫的首选药物,具有高效、安全、副作用少的特点。除对吸虫、绦虫等蠕虫具有杀虫作用外,近年来还有研究揭示,吡喹酮可以直接作用于宿主的组织和细胞发挥药效。本研究发现,吡喹酮具有明显的抗肝纤维化新药理作用。为了避免吡喹酮自身杀虫作用对血吸虫病肝纤维化模型的影响,本研究分别采用四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型和体外TGF-β1诱导的LX-2肝星状细胞(HSCs)纤维化基因表达模型进行试验。结果显示,吡喹酮能够抑制肝星状细胞表达α-SMA、Collagen I等纤维化相关基因,并改善肝脏损伤程度;进一步观察到,吡喹酮能够上调Smad7表达并下调Smad2/3表达,而采用RNAi敲低Smad7后,吡喹酮即明显失去对肝星状细胞纤维化基因的调控作用。结果提示,吡喹酮对肝星状细胞活化具明显抑制作用,而肝星状细胞TGF-β/Smad信号通路中关键负调控因子Smad7,可能是吡喹酮作用的重要靶点。综上所述,本研究发现,吡喹酮可以通过诱导肝星状细胞表达Smad7,抑制TGF-β/Smad信号通路,干预肝星状细胞的活化以及细胞外基质的合成,从而抑制肝纤维化形成。研究结果初步揭示了吡喹酮直接抑制肝脏纤维化发展的机制,为将吡喹酮发展成抗血吸虫病及其他病因肝纤维化药物,提供了试验基础。

关键词：吡喹酮肝纤维化肝星状细胞 TGF-β/Smad信号通路

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柔嫩艾美耳球虫膜骨架蛋白1基因功能特性初步研究

柔嫩艾美耳球虫膜骨架蛋白1基因功能特性初步研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：谢羽翔黄兵赵其平董辉朱顺海陈婷吕凌赵宗平严茗韩红玉中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海师范大学生命与环境科学学院

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是一种单细胞胞内寄生虫,也是严重危害养鸡业的重要病原之一。目前对于球虫病的防治,仍主要依靠于药物。球虫病防治药物主要分为两大类:离子载体类抗生素和化学合成药物,马杜拉霉素(Maduramycin)和地克... 详细信息

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是一种单细胞胞内寄生虫,也是严重危害养鸡业的重要病原之一。目前对于球虫病的防治,仍主要依靠于药物。球虫病防治药物主要分为两大类:离子载体类抗生素和化学合成药物,马杜拉霉素(Maduramycin)和地克珠利(Diclazuril)是这两类药物中比较具有代表性的药物。在长期用药物控制球虫病的同时,球虫极易对药物产生耐药性,为球虫病的防治带来了困境。为了能揭开球虫耐药性神秘的面纱,实验室前期通过药物诱导获得了马杜拉霉素耐药株和地克珠利耐药株,利用RNA-seq方法比较了柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素耐药株和地克珠利耐药株与敏感株的差异,筛选出部分差异基因。本研究根据柔嫩艾美耳球虫耐药株与敏感株转录组分析比较结果,选取耐药株与敏感株的差异表达下调基因膜骨架蛋白1(IMC1),利用RT-PCR扩增技术,以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊c DNA为模板克隆IMC1,经过PCR和酶切鉴定正确后测序,将测序正确的序列连接到原核表达载体p GEX-4T-2中,构建原核表达重组质粒p GEX-4T-Et IMC1,并在大肠杆菌BL21中诱导表达,获得重组蛋白r Et IMC1,纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用RT-q PCR和Western-blot检测Et IMC1在耐药株和敏感株中的转录水平和表达水平。结果显示,Et IMC1在地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株中的转录水平显著低于敏感株,蛋白在耐药株中为低表达,转录与表达水平趋势一致。间接免疫荧光检测发现该蛋白位于虫体表面,体外抑制试验结果显示用抗r Et IMC1多克隆抗体孵育后的子孢子入侵DF-1细胞,其入侵率比对照组下降80%。研究结果提示,Et IMC1的低表达可能有助于在药物作用前期帮助球虫逃避药物的损害,以及提高对药物损害的抵抗能力,同时Et IMC1可能在子孢子入侵宿主细胞过程中发挥了重要作用。本研究为阐明球虫耐药性产生的分子机理提供了一定基础。

关键词：球虫耐药性膜骨架蛋白1

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Activation of p38 MAPK signaling pathway in sheep PBMCs by Haemonchus contortus soluble antigens

Activation of p38 MAPK signaling pathway in sheep PBMCs by H...

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者： Si Wang Chaoyue Wang Dandan Hu Jingxia Suo Xun Suo Xianyong Liu National Animal Protozoa Laboratory & College of Veterinary Medicine China Agricultural University

Haemonchu contortus,due to its blood-feeding behavior and the potential for the rapid development of large burdens,is by far the most pathogenic nematodes of small *** mitogen-activated protein kinase(MAPK) signaling cascade plays an important role in orchestrating type 2 immunity of host against Schistosma mansoni antigens,we explored this signaling pathway in sheep PBMCs treated with *** soluble *** PBMCs were isolated and stimulated with soluble *** expression profiles of sheep PBMCs showed increased expression of MAPK14(also known as p38α) and MAPK9(also known as JNK2) after ***,the expression level of both molecules remained stable by western blot ***,p38 MAPK could be phosphorylated as early as 10 min after stimulation,and this effect last for 2 *** thus propose that the activation of p38 MAPK signaling pathway may efficiently program Th2 polarization during *** infection.

关键词： Haemonchus contortus sheep PBMCs p38 MAPK Type 2 immunity

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