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3 篇 基因克隆
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17 篇 中国农业科学院植...
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6 篇 河北农业大学
6 篇 中国农业大学
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5 篇 北京市农林科学院...
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4 篇 广西农业科学院植...
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作者

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7 篇 青玲
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6 篇 孙京瑞
6 篇 李克斌
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5 篇 林莉
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钝叶草(Stenotaphrum helferi)叶斑病病原菌鉴定及61份钝叶草对其抗病性分析

钝叶草(Stenotaphrum helferi)叶斑病病原菌鉴定及61份钝叶草对其...

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：秦春秀詹敏林春花靳鹏飞缪卫国王志勇刘文波海南大学植物保护学院/海南省热带生物资源可持续利用国家重点实验室培育基地

分离鉴定钝叶草(Stenotaphrum helferi)叶斑病病原菌,评价来自中国海南、广东、广西、云南、福建、江苏及美国和南非的61份钝叶草对该病原菌的抗性,为钝叶草抗病品种合理选育提供参考。结果表明,经科赫氏法则分离病原菌,经形态观察确定... 详细信息

分离鉴定钝叶草(Stenotaphrum helferi)叶斑病病原菌,评价来自中国海南、广东、广西、云南、福建、江苏及美国和南非的61份钝叶草对该病原菌的抗性,为钝叶草抗病品种合理选育提供参考。结果表明,经科赫氏法则分离病原菌,经形态观察确定为Curvularia sp.;利用通用引物扩增病原菌rDNA-ITS、rDNA-GAPDH、rDNA-TUB2序列,比对显示和***相似性达到99%,确定钝叶草叶斑病的致病菌为新月弯孢霉(***),其分生孢子大小为(19.39～37.45)μm×(7.78～15.80)μm,分生孢子梗大小为(40.41～224.92)μm×(3.84～7.69)μm。对61分钝叶草开展叶片离体接种,实验表明钝叶草11号(海南)、44号(广西)、45号(海南)、49号(福建)、52号(福建)、56号(South Africa),这6种品系病斑大小平均值均小于1mm;扦插喷雾接种表明,钝叶草30号(海南)、44号(海南)、45号(海南)、47号(江苏)、52号(福建),这5份钝叶草病情指数在5～15,表现较强的中等抗性;根据叶片离体接种实验及扦插喷雾接种数据进行综合分析可知,44号(广西)、45号(海南)、52号(福建)对新月弯孢霉表现较好的抗性,该结果为后续抗病的选育奠定基础。

关键词：钝叶草叶斑病新月弯孢霉病原菌鉴定抗病性

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小麦条锈菌效应蛋白Ps23959的靶标筛选及其功能分析

小麦条锈菌效应蛋白Ps23959的靶标筛选及其功能分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：褚秀玲杨倩康振生郭军西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室

小麦条锈菌是由条形柄锈菌小麦专化型(Puccinia striiformis ***)引起的在世界范围内严重危害小麦生产的真菌病害。因其毒性变异频繁,使得现有的小麦品种抗病性减弱甚至丧失。因此,对小麦条锈菌致病机理的研究,尤其对毒性因子——效应... 详细信息

小麦条锈菌是由条形柄锈菌小麦专化型(Puccinia striiformis ***)引起的在世界范围内严重危害小麦生产的真菌病害。因其毒性变异频繁,使得现有的小麦品种抗病性减弱甚至丧失。因此,对小麦条锈菌致病机理的研究,尤其对毒性因子——效应蛋白致病机理的深入研究,将为小麦条锈病的防控提供有力的理论依据。前期通过生物信息学分析、信号肽分泌实验及酵母双杂交技术发现,Ps23959是小麦条锈菌分泌的效应蛋白,且靶向小麦NADH脱氢酶亚基Ⅰ。本研究中,应用双分子荧光互补和Pull-down技术,进一步验证了小麦条锈菌效应蛋白Ps23959与小麦NADH脱氢酶亚基Ⅰ存在互作关系;烟草亚细胞定位发现,小麦NADH脱氢酶亚基Ⅰ定位于烟草细胞的线粒体中;通过qRT-PCR分析其在小麦与条锈菌的非亲和互作中的表达情况,发现该基因受小麦条锈菌诱导表达;在小麦与条锈菌的非亲和互作中,瞬时沉默小麦NADH脱氢酶亚基Ⅰ导致小麦的活性氧积累面积降低、条锈菌菌丝长度及菌丝面积增加,并且在侵染后期有产孢现象。因此,本实验表明小麦NADH脱氢酶亚基Ⅰ参与寄主的抗病过程,起到正调控作用。

关键词：小麦条锈菌 TaNADH脱氢酶亚基Ⅰ 烟草亚细胞定位 VIGS

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小麦CBL结合蛋白激酶TaCIPK14介导的感病机理研究

小麦CBL结合蛋白激酶TaCIPK14介导的感病机理研究

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：季长安谭成龙郭军旱区作物逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学植物保护学院

类钙调磷酸酶B蛋白(Calcineurin B-like proteins,CBL)是植物特有的钙传感蛋白,并通过与CBL互作蛋白激酶(CBL-interacting protein kinases,CIPK)相互作用来解码和传递钙信号。实验室的前期研究发现,小麦TaCIPK14参与了小麦与条锈菌的... 详细信息

类钙调磷酸酶B蛋白(Calcineurin B-like proteins,CBL)是植物特有的钙传感蛋白,并通过与CBL互作蛋白激酶(CBL-interacting protein kinases,CIPK)相互作用来解码和传递钙信号。实验室的前期研究发现,小麦TaCIPK14参与了小麦与条锈菌的亲和互作过程。本研究中,利用小麦原生质体定位、酵母双杂交、qRT-PCR及病毒介导的基因沉默(virus-induced gene silence,VIGS)等技术对该基因的功能进行深入的研究。结果表明,该基因定位于小麦的细胞膜、细胞质及细胞核中;TaCIPK 14与TaCBL1.1、TaCBL3及TaCBL4存在互作关系;在小麦与条锈菌的亲和互作中,瞬时沉默TaCIPK14导致小麦的活性氧面积积累面积降低、条锈菌亲和小种CYR31的菌丝长度及菌丝面积减少,并且在侵染后期产孢量明显降低;利用酵母双杂交技术筛选到TaCIPK14的6个候选靶标,分别为多聚嘧啶结合蛋白、ATP结合转运体F家族成员5、钙依赖蛋白激酶相关激酶3及3个含有信号肽的条锈菌效应蛋白。由此,本实验说明小麦CBL结合蛋白激酶基因TaCIPK14为小麦候选的感病基因,在条锈菌侵染小麦过程中起到重要作用,同时还有可能参与了寄主体内mRNA可变剪接的调节、能量代谢以及脱落酸过程和蛋白磷酸化过程。

关键词：小麦条锈病 TaCIPK14 感病机理小麦抗病性

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河北省致病疫霉群体无毒基因的测定与分布

河北省致病疫霉群体无毒基因的测定与分布

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：马英杨志辉李志芳赵冬梅朱杰华河北农业大学植物保护学院

由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的马铃薯晚疫病是世界范围内普遍发生的一种毁灭性病害。河北省是我国北方重要的马铃薯种薯和商品薯生产基地,每年会因晚疫病而造成损失高达600万元。本研究根据GenBank中无毒基因Avr1、Avr2、Av... 详细信息

由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的马铃薯晚疫病是世界范围内普遍发生的一种毁灭性病害。河北省是我国北方重要的马铃薯种薯和商品薯生产基地,每年会因晚疫病而造成损失高达600万元。本研究根据GenBank中无毒基因Avr1、Avr2、Avr3a、Avr4、Avrblb1、Avrblb2、Avr-vnt、Avr-smiral的序列设计了9对特异性引物。利用PCR方法测定了2013～2017年河北省的97株致病疫霉9个无毒基因的出现频率,结果表明9种无毒基因均被检测到,其出现频率为90.0%～99.0%。其中,Avrblb1的出现频率最高为99.0%,而Avr4出现频率最低为90.0%。不同年份间无毒基因的出现频率有所不同,其中Avr3b、Avrblb2、Avr4与Avr-smiral在2013年出现频率最低为80.0%,而无毒基因Avr1、Avr2、Avr3a、Avr-vnt和Avrblb1在所有年份中的出现频率均在90.0%以上。同时,9个无毒基因在不同年份间的变化趋势也不相同,无毒基因Avr1、Avr2、Avr3b、Avrblb1和Avr-vnt属于上升型,在2叭3年这5个无毒基因的出现频率为80.0%～95.0%,之后上升到100%并保持稳定不变。无毒基因Avr3a、Avr4、Avrblb2和Avr-smiral的出现频率在不同年份间属于波动型,在2013—2015年处于上升阶段,到2016年均有下降,但下降的幅度各不相同,在5%～20%,到2017年,除Avr4的出现频率上升到95.0%,其余3个无毒基因的出现频率均上升到了100%。通过测定无毒基因频率变化有助了解致病疫霉毒力变化情况,可为晚疫病发生趋势预测、抗病品种布局、抗病育种工作提供依据。

关键词：马铃薯晚疫病无毒基因基因频率

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麦根腐平脐蠕孢Tup1基因功能的研究初探

麦根腐平脐蠕孢Tup1基因功能的研究初探

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：马庆周张亚龙李光宇耿月华臧睿徐超丁胜利张猛河南农业大学植物保护学院

小麦根腐病分布广泛,在世界上很多国家都严重发生。在中国,根腐病主要发生在北方地区。随着气候的改变,该病在我国的发生也越来越严重,发病区域呈上升趋势。该病的主要病原为麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)有性态为Cochliobolus... 详细信息

小麦根腐病分布广泛,在世界上很多国家都严重发生。在中国,根腐病主要发生在北方地区。随着气候的改变,该病在我国的发生也越来越严重,发病区域呈上升趋势。该病的主要病原为麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)有性态为Cochliobolus sativus。其初侵染通常是由带菌的土壤或种子以及残留在田地中的病残体引起的。Condon等(2013)对麦根腐平脐蠕孢(***)菌株N190Pr的全基因组进行了测序,基因组序列全长为34 409 167bp,预测12 250个功能基因。Tup1是一种转录抑制因子,从单细胞真菌(酵母)到哺乳动物中它都是相当保守的,但它调控转录的方式在不同物种中有所不同。Tup1和Cyc8组成的一个复合物是多种抑制基因表达机制中的核心部分,称为Tup1-Cyc8辅阻遏物,Tzamarias等通过LexA蛋白融合实验发现当Cyc8缺失时,Tup1依然阻遏报告基因的转录,因此推测Tup1在转录辅阻遏物复合物发挥了主要抑制作用。本研究利用同源重组的方法获得了Tup1的缺少突变体,通过与麦根腐平脐蠕孢野生型对比发现,缺失突变体△K2的生长速度极其缓慢;且缺失突变体不能产生分生孢子;菌丝在生长后期膨大畸形。而且对过氧化氢和氯化钾的压力胁迫特别敏感。也发现缺失突变体不能侵染无伤的大小麦叶片和茎基部,能够引起带伤的大小麦叶片轻微的发病。从而表明了小麦根腐蠕孢Tup1基因与病原对寄主植物的致病性有关系,但是抑制了下游哪些基因的表达还有待进一步的研究。

关键词：麦根腐平脐蠕孢根腐病 Tup1 转录抑制复合物

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禾谷镰刀菌FgCot1基因在菌丝极性生长中的调控作用研究

禾谷镰刀菌FgCot1基因在菌丝极性生长中的调控作用研究

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：李程亮王晨芳许金荣西农-普度大学联合研究中心/旱区作物逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学植物保护学院美国普渡大学植物及植物病理系

小麦赤霉病是一种重要的农作物真菌病害,由禾谷镰刀菌引起。该病害不仅造成小麦减产,还会在染病小麦籽粒中积累真菌毒素,严重威胁人畜健康。蛋白激酶在真核生物中普遍存在,实验室对禾谷镰刀菌的激酶进行了系统的鉴定,并初步分析了它们... 详细信息

小麦赤霉病是一种重要的农作物真菌病害,由禾谷镰刀菌引起。该病害不仅造成小麦减产,还会在染病小麦籽粒中积累真菌毒素,严重威胁人畜健康。蛋白激酶在真核生物中普遍存在,实验室对禾谷镰刀菌的激酶进行了系统的鉴定,并初步分析了它们的功能。其中COT1作为NDR激酶的重要成员,可能与菌丝极性生长有关。本研究在前期获得的cot1基因敲除突变体的基础上,进一步对cot1突变体进行表型分析。我们发现cot1突变体相比野生型菌落生长严重滞缓,产孢量严重降低,致病力下降显著,表明COT1在禾谷镰刀菌生长发育和侵染过程中均发挥了重要的调控作用。有意思的是,研究发现cot1缺失突变体生长不稳定,容易产生角变子从而部分恢复突变体的生长缺陷。通过对三个角变子(S1,S59,S62)进行全基因组重测序,发现了S1在FgFst11发生缺失突变,S59在FgFst7发生点突变,S62在Fst12上发生缺失突变,而Fst11,Fst7以及Fst12均为Gpmk1 MAPK通路成员。另外对其他角变子中的Fst11,Fst7和Fst12进行测序,发现在Fst11发生突变的角变子较多,且多为缺失突变。进一步对FST1 1和COT1进行双敲,发现双敲突变体的生长速率较cot1突变体有所回复。研究结果初步揭示了Cot1与Gpmk1信号通路之间的关系,为进一步探究Cot1激酶的调控机制提供了参考。

关键词：禾谷镰刀菌 COT1 NDR激酶角变

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解淀粉芽胞杆菌Jt84防治水稻稻瘟病机制初探

解淀粉芽胞杆菌Jt84防治水稻稻瘟病机制初探

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：张荣胜王法国齐中强杜艳刘永锋江苏省农业科学院植物保护研究所

生防芽胞杆菌防治植物病害主要通过竞争营养与空间、产生具有抑菌和溶菌活性代谢产物、诱导植株产生系统抗病性等多方面协同作用,同时生防芽胞杆菌发挥作用的前提是在植株上有效定殖。我们研究室前期筛选获得一株解淀粉芽胞杆菌Jt84,通...

生防芽胞杆菌防治植物病害主要通过竞争营养与空间、产生具有抑菌和溶菌活性代谢产物、诱导植株产生系统抗病性等多方面协同作用,同时生防芽胞杆菌发挥作用的前提是在植株上有效定殖。我们研究室前期筛选获得一株解淀粉芽胞杆菌Jt84,通过喷雾干燥法制备成干悬浮剂,田间试验表明该菌对水稻穗颈瘟具有良好的防治效果,防效为79.2%,与化学药剂三环唑防效相当。为了明确其对稻瘟病的防治机制,本研究围绕解淀粉芽胞杆菌Jt84产生抗菌物质的种类和定殖规律开展相关工作,为深入研究解淀粉芽胞杆菌Jt84防治稻瘟病提供理论基础,同时为解淀粉芽胞杆菌Jt84的推广与应用提供技术支撑。通过4对特异性引物PCR检测生防菌Jt84中相关抗菌物质合成基因,表明解淀粉芽胞杆菌基因组中含有sfp、fenB、ituA或bamA、mycB基因。平板对峙试验结果也显示,解淀粉芽胞杆菌Jt84干悬浮剂提取的脂肽类物质对稻瘟病菌拮抗带宽为9.8mm;利用液-质联用方法检测,发现干悬浮剂的甲醇萃取液中含有surfactins、fengycins和iturins三大类家簇脂肽类抗生素。前人研究表明,iturin类抗菌物质在防治植物真菌病害中起着关键作用,我们构建了ituA和mycB双交换载体,经化学转化获得ituA、mycB敲除突变株,平板抑菌试验显示突变株对稻瘟病菌拮抗能力降低约50%。生防菌Jt84定殖动态结果显示:在水稻三叶期时,喷施初始菌量为5.5×10cfu/mL的JT84gfp在水稻叶片上;喷施后2h取样检测,叶片上的菌量为4×10个/cm,喷施后7～11d,芽胞杆菌菌量维持稳定(回收菌量为10个/cm左右),喷施后30d仍然可以回收到菌量为22个/cm,说明解淀粉芽胞杆菌Jt84能够有效定殖于水稻叶片上。建议田间使用解淀粉芽胞杆菌Jt84干悬浮剂防治稻瘟病时,药剂喷施后10d左右,再喷施一次生防菌确保对稻瘟病的有效防治。

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杂草来源梨孢菌的鉴定、生物学性状及对水稻的致病性分析

杂草来源梨孢菌的鉴定、生物学性状及对水稻的致病性分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：贾世双祁鹤兴杨俊张国珍中国农业大学植物保护学院植物病理学系

稻瘟病是水稻重要病害之一,稻瘟病的暴发可引起水稻大规模减产。水稻稻瘟病的病原菌为稻梨孢(Pyricularia oryzae),有性型为(Magnaporthe oryzae)。梨孢属(Pyricularia)真菌除能侵染水稻外,还能侵染牛筋草、狗尾草、稗草、马唐等多种禾... 详细信息

稻瘟病是水稻重要病害之一,稻瘟病的暴发可引起水稻大规模减产。水稻稻瘟病的病原菌为稻梨孢(Pyricularia oryzae),有性型为(Magnaporthe oryzae)。梨孢属(Pyricularia)真菌除能侵染水稻外,还能侵染牛筋草、狗尾草、稗草、马唐等多种禾本科杂草和谷子、小麦、大麦等粮食作物。为了解不同杂草来源的梨孢菌的生物学性状和对水稻的致病性,本研究以2017年从辽宁东港、湖北黄冈和北京稻田周边杂草的疑似病斑上分离得到的梨孢菌作为供试菌株进行了研究和分析。分离获得44株梨孢属的单孢菌株,其中28株来源于狗尾草,8株来源于马唐,来源于牛筋草和野黍的菌株各为4株。分离菌株在OTA培养基上,28℃恒温箱中进行培养,以稻瘟病菌P131作为对照,对分离菌株的菌落形态和生物学性状进行观察,发现不同寄主来源的梨孢菌菌落形态存在一定差异。稻瘟菌P131的菌落颜色呈深灰色,来源于杂草的大部分菌株的菌落颜色较浅,气生菌丝发达。P131的生长速率为7.20mm/d,除7株杂草来源的菌株生长速率快于P131之外,其余梨孢菌的菌株生长速率慢于P131。P131的产孢较多,为15.7×10个/mL,而来源于杂草的梨孢菌产孢较少,其中30株菌株的产孢量均低于2×10个/mL。将44株杂草来源的梨孢菌孢子悬浮液接种水稻丽江新团黑谷的划伤离体叶片,均未引起发病。基于actin、β-tubulin和calmodulin基因对44株菌株进行系统发育分析,8株马唐分离菌株中有2株为***,其余6株与狗尾草、牛筋草和野黍分离菌株聚为一支,均为***。有研究表明稻田及稻田周边的常见杂草可能在稻瘟病的病害循环中发挥一定的作用(Kato et al.,2000;Choi etal.,2013),而本研究中的44株不同杂草来源的梨孢菌菌株均对水稻不致病。要确定稻田及稻田周边常见杂草上的梨孢菌在稻瘟病病害循环中的作用,还需要采集更多不同杂草来源的菌株进行致病性分析。

关键词：梨孢菌生物学性状致病性

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禾谷镰刀菌中TUB1,TUB2功能差异分析

禾谷镰刀菌中TUB1,TUB2功能差异分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：王欢王晨芳许金荣西农-普度大学联合研究中心/旱区作物逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学植物保护学院美国普渡大学植物及植物病理系

小麦赤霉病是小麦的重要真菌病害,引起小麦大面积减产,其致病菌禾谷镰刀菌产生的DON毒素还严重为害人畜健康,威胁我国粮食食品安全。微管作为细胞骨架,是苯并咪唑类杀菌剂的作用靶标。已知微管在真菌极性生长、物质运输、细胞器定位、... 详细信息

小麦赤霉病是小麦的重要真菌病害,引起小麦大面积减产,其致病菌禾谷镰刀菌产生的DON毒素还严重为害人畜健康,威胁我国粮食食品安全。微管作为细胞骨架,是苯并咪唑类杀菌剂的作用靶标。已知微管在真菌极性生长、物质运输、细胞器定位、有丝分裂和维持细胞形态等众多生物学过程中均发挥了重要作用。实验室前期研究发现禾谷镰刀菌中有两个α-微管蛋白基因(TUB4,TUB5)和两个β-微管蛋白基因(TUB1,TUB2),其中TUB1参与有性生殖调控,而TUB2则与营养生长相关。为了进一步研究TUB1和TUB2功能分化的原因以及它们与两个α-微管蛋白的关系,我们首先对Tub1和Tub2进行了共定位分析,结果发现这两个基因在生长阶段的定位并无差异。RNA定量分析显示TUB2,TUB4和TUB5的表达量在野生型PH-1和tub1突变体中无明显变化,而TUB1的表达量在tub2突变体中则有3倍左右的上调。蛋白定量结果同样表明,Tub1的蛋白表达量在tub2突变体中明显升高。蛋白定量的结果显示,Tub1的蛋白表达量在tub2突变体中显著上调,而Tub2的蛋白表达量在tub1突变体中则无明显变化,表明TUB1可能通过提高自身表达量去弥补TUB2的基因缺失。此外,TUB4和TUB5基因缺失会导致Tub1的蛋白表达量下降,而Tub2无明显变化;反之,TUB1基因缺失也导致Tub4和Tub5的蛋白表达量下降。TUB1和TUB2还在营养生长阶段存在部分功能互补;TUB2在DON毒素合成过程中也较TUB1具有更重要的功能。本研究初步揭示了禾谷镰孢菌中两个β-微管蛋白基因的功能分化不是由定位差异引起,而且对α-微管蛋白基因的影响和DON毒素合成也存在一定的功能差异,为进一步研究禾谷镰孢菌中两个β-微管蛋白基因功能分化的分子机制提供了一定的理论基础。

关键词：禾谷镰刀菌基因敲除微管蛋白 DON毒素

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解磷菌株的分离鉴定及对作物生长的促进作用

解磷菌株的分离鉴定及对作物生长的促进作用

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2016年中国微生物学会学术年会暨中国微生物学会第十一次全国会员代表大会

作者：郭立佳黄俊生中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

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