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500 篇 会议

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学科分类号

497 篇 农学
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7 篇 稻瘟病菌
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6 篇 sclerotinia scle...
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5 篇 致病力
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5 篇 生防菌

机构

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15 篇 华南农业大学
15 篇 福建农林大学
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10 篇 河北农业大学
10 篇 河南农业大学
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9 篇 沈阳农业大学
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8 篇 青岛农业大学
8 篇 长江大学
8 篇 内蒙古大学
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作者

24 篇 缪卫国
18 篇 刘文波
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9 篇 韩成贵
9 篇 王颖
8 篇 哈达
8 篇 zhan jiasui
8 篇 姜道宏
8 篇 孙文献
8 篇 谢甲涛
7 篇 刘大群
7 篇 张宗英
7 篇 洪霓
7 篇 王国平
7 篇 刘永锋
7 篇 wang zonghua
7 篇 李保华
7 篇 程家森
7 篇 陈保善
6 篇 靳鹏飞

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365 篇 中文
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梨轮纹病菌株中真菌病毒间的水平传染测定及分析

梨轮纹病菌株中真菌病毒间的水平传染测定及分析

引用

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：胡旺成罗慧洪霓王国平王利平华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学/农业微生物学国家重点实验室

梨轮纹病是由葡萄座腔菌[Botryosphaeria dothidea(Moug:Fr)Ces&De Not]引起的一种枝干真菌病害,除为害枝干外,叶片和果实也收到不同程度的感染及发病。近年来,轮纹病危害逐渐加重,造成重大损失,给果树产业带来严重的经济损失。研... 详细信息

梨轮纹病是由葡萄座腔菌[Botryosphaeria dothidea(Moug:Fr)Ces&De Not]引起的一种枝干真菌病害,除为害枝干外,叶片和果实也收到不同程度的感染及发病。近年来,轮纹病危害逐渐加重,造成重大损失,给果树产业带来严重的经济损失。研究发现,部分真菌病毒(Mycovirus)可以减弱寄主致病力,可对真菌引起的病害进行有效的防控。真菌病毒可通过感染菌株与未感染菌株的菌丝融合进行水平传播,然而菌株间的营养体不亲和性,诱导细胞发生程序性死亡是目前真菌病毒在应用中最主要的限制性因素。探索影响真菌病毒水平传播的因素及寻找传播率较高且能对致病菌株产生影响的真菌病毒显得尤为重要。本研究以分别感染产黄青霉病毒(BdCV1)LW-C、感染双分体病毒(BdPV1)LW-P、复合感染BdCV1和BdPV1的LW-1梨轮纹菌株以及无病毒感染的Mock菌株作为四组材料,在加入ZnCl2(0.75mM)的燕麦培养基上于25℃培养进行四组梨轮纹菌(LW-1/Mock、LW-C/Mock、LW-P/Mock和LW-C/LW-P)对峙培养的传毒测定,8d后选择后代衍生菌株进行dsRNA检测。结果显示,在LW-1/Mock,LW-C/Mock和LW-P/Mock对峙培养中,Mock衍生菌株的dsRNA检测表明,BdCV1+BdPV1,BdCV1,BdPV1分别传入Mock菌株中;在LW-C/LW-P对峙培养中,衍生菌株的dsRNA检测结果为LW-P衍生菌株中检测到BdPV1和BdCV1,而LW-C衍生菌株中仅检测到BdCV1,无BdPV1传入。采用RT-qPCR对LW-C/LW-P对峙培养获得的衍生菌株进行基因沉默相关基因组份进行定量分析,发现Dicer2、Argo、RdRp表达量在LW-P中均低于LW-C菌株中基因的表达量,推测BdCV1触发了LW-C寄主抗病毒的基因沉默反应,影响了病毒的水平传染效率,目前正采用基因敲除方法分析其基因沉默途径相关基因对病毒水平传播效率的影响,相关验证试验还在进一步研究中。以上结果也明确了携带BdCV1的LW-C可作为一种较好的真菌病毒供体,可为探究LW-C对其他菌株的传毒效率以及引起梨轮纹病菌致病力衰退的分子机制,为真菌病毒用于梨轮纹病害生物防治提供重要的参考依据和分子信息。

关键词：梨轮纹病害葡萄座腔菌水平传染 BdCV1 BdPV1 基因沉默途径

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3个梨品种的带病毒与无病毒梨离体植株的生根及移栽成活率比较

3个梨品种的带病毒与无病毒梨离体植株的生根及移栽成活率比较

引用

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：高晓雯王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

苹果茎沟病毒(Apple stemgrooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是侵染我国栽培梨的两种重要病毒,主要通过带病毒繁殖材料调运和嫁接等方式传播。目前防治梨病毒病害的有效方式是培育和栽培无病毒梨苗,茎...

苹果茎沟病毒(Apple stemgrooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是侵染我国栽培梨的两种重要病毒,主要通过带病毒繁殖材料调运和嫁接等方式传播。目前防治梨病毒病害的有效方式是培育和栽培无病毒梨苗,茎尖培养是获得无毒梨种质资源的重要方法之一,而提高梨离体植株的生根效率以及移栽成活率是加快离体植株的应用和快速繁育无病毒种苗的一个重要环节。已有研究表明,不同遗传背景的梨离体植株茎尖培养及生根存在较大差异,同时病毒侵染影响梨离体植株的诱导生根。为明确病毒侵染对不同种质梨的生根影响,本研究分别以ASGV单一侵染及ASGV和ASPV两种病毒复合侵染的西洋梨(Pyrus communis L.)两个品种‘红茄梨’和‘巴梨’以及单一携带有ASGV的新疆(Pyrus sinkiangensis Yü.)‘色尔克甫’的离体植株为研究材料,以这3个梨品种的无病毒离体植株为对照,将带病毒与无病毒离体植株同时置于MS生根培养基培养,于培养5～40d每5d测量一次生根数量、根长及愈伤直径。研究结果表明,病毒对不同品种的梨离体植株生根效率的影响存在较大差异,其中新疆梨‘色尔克甫’的携带有ASGV植株与无病毒植株的生根率和根长有显著差异,生根诱导7d时,两者均形成愈伤组织;至15d时,66%无病毒植株形成幼根,而带病毒植株的生根率仅33%;生根诱导30d时,无病毒植株生根数量和根长均明显高于带病毒植株。ASGV单一侵染及ASGV和ASPV两种病毒复合侵染对西洋梨的两个品种‘巴梨’和‘红茄梨’的生根率、根数、根长和愈伤形成无明显影响。对健壮的梨生根离体植株进行移栽,并在移栽前对植株进行炼苗处理,至40d时统计这些离体植株的移栽成活率,发现‘红茄梨’的带病毒与无病毒离体植株移栽成活率并无显著差异,而新疆梨‘色尔克甫’的无病毒离体植株的移栽成活率为带病毒离体植株的近3倍。这些结果表明,病毒侵染对西洋梨红茄梨’和‘巴梨’及新疆梨‘色尔克甫’具有不同的影响,其中新疆梨‘色尔克甫’对ASGV侵染较敏感,ASGV不仅抑制‘色尔克甫’的诱导生根,而且影响根系发育,从而明显降低离体植株的移栽成活率。

关键词：

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一类潜在的植物病原真菌:大单孢属真菌的研究进展及问题展望

一类潜在的植物病原真菌:大单孢属真菌的研究进展及问题展望

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：李文英李夏邓旺秋毛航球王超群广东省农业科学院农业资源与环境研究所长江大学资源与环境学院

大单孢属(Aplosporella Speg.)真菌分布广泛,尤嗜热带、亚热带雨林生境,常常生于植物枝条,引起植物枝条枯死或溃疡,也可生于叶片,在长势衰弱、濒临死亡的木本组织上较为常见,大多数种类可以在人工培养基上生长。该属真菌营腐生至寄生生... 详细信息

大单孢属(Aplosporella Speg.)真菌分布广泛,尤嗜热带、亚热带雨林生境,常常生于植物枝条,引起植物枝条枯死或溃疡,也可生于叶片,在长势衰弱、濒临死亡的木本组织上较为常见,大多数种类可以在人工培养基上生长。该属真菌营腐生至寄生生活,大多成员属于弱寄生菌,条件合适时会引起寄主植物病害,属重要的潜在植物病原真菌,对农林生产具有一定的经济影响(Pande&Rao,1995)。根据最新分类学观点,大单孢属真菌隶属子囊菌门(Ascomycota),盘菌亚门(Pezizomycotina),座囊菌纲(Dothideomycetes),座囊菌亚纲(Dothideomycetidae),葡萄座腔菌目(Botryosphaeriales),大单孢科(Aplosporellaceae),其典型特征为分生孢子器多腔具单孔口,分生孢子矩圆形,无隔棕色,表面具疣(Slippers etal.,2013;Wijayawardene et al.,2014)。大单孢属Aplosporella(=Haplosporella),按照早期分类系统该类群一直属于半知菌类(Fungi Imperficti)球壳孢目(Sphaeropsidales)杯霉科(Discellaceae),主要以发生寄主报道大量种类,迄今已有记载339个名称(http://*** 2018),目前该属约66种(Kirk et al.,2008)。中国有关大单孢属真菌报道较少,早期专著中根据寄主以Haplosporella为属名收录约10种(戴芳澜,1979;魏景超,1979),近年报道5种(金静,2004;Fan et al.,2015;金宇溪和王爽,2012;Dou et al.,2017;Du etal.,2017)。该属真菌形态特征较简单,且具有一定的寄主专化性,同时受到当时研究手段的局限,过去许多成员都是根据寄主来描述和报道,但是这样的划分标准显然受到质疑。近期相关研究进展较快,该属新物种数量有所增加,表明该属下许多成员寄生范围广泛,分生孢子的形态特征及其分子序列特征才是该属分种的稳定依据,过去报道的许多种类并非同源,这些异源种类有待进一步清理和订正后归到其他相关类群(Damm et al.,2007;Taylor etal.,2009;Jami et al.,2014;Trakunyingcharoen et al.,2015;Crous et al.,2016;Ekanayaka et al.,2016;Dou et al.,2017;Du et al.,2017)。近10年来真菌分子系统学的研究进展与命名法规的变革引起真菌分类系统的巨大变化,提出趋于自然的座囊菌纲分类系统,对大单孢属分类地位进行科学调整和处理(Taylor et al.,2009;Hyde et al.,2011;Slippers et al.,2013;Wijayawardene et al.,2014),但目前该类真菌研究还存在许多悬而未决的问题,如许多种类分类命名有待清理与订正,无型特征与有性特征相关联的证据缺少,真菌与寄主或基物的关系有待考证等。因此,深入开展该属真菌物种多样性研究是认识该类植物病害的基础,可为进一步深入研究其致病机制、病害侵染循环,提出有效防治策略提供基础信息和科学依据。

关键词：大单孢科Aplosporellaceae 大单孢属Aplosporella(=Haplosporella) 植物病原真菌

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南宁市桑白粉病病原菌的种类鉴定

南宁市桑白粉病病原菌的种类鉴定

引用

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：韩宁宁黄元腾吉廖咏梅广西大学农学院

桑白粉病是广西南宁市田间桑叶的重要病害,分为桑里白粉病和桑表白粉病。田间条件下3月开始发生桑里白粉病,一个月后桑表白粉病出现,病害发生后可延续至翌年1月桑叶老化脱落。南宁市栽植的主要桑品种均有桑里白粉病发生,但桑表白粉病仅... 详细信息

桑白粉病是广西南宁市田间桑叶的重要病害,分为桑里白粉病和桑表白粉病。田间条件下3月开始发生桑里白粉病,一个月后桑表白粉病出现,病害发生后可延续至翌年1月桑叶老化脱落。南宁市栽植的主要桑品种均有桑里白粉病发生,但桑表白粉病仅在台湾大果桑品种上发现。在广西大学农场分别采集桑里白粉病和桑表白粉病的病叶,用毛笔扫下病斑表面的白粉及黑色小颗粒,用光学显微镜观察,发现桑里白粉病菌分生孢子棍棒状,闭囊壳球形,附属丝顶端刚直且尖,基部膨大成球状,与杨俐(2013)描述的桑生球针壳(Phyllactinia moricola)的形态特征一致;桑表白粉病菌分生孢子梗顶端单生分生孢子,短圆柱形或椭圆形;闭囊壳球形或扁球形,附属丝顶端有曲膝状弯曲,与Meeboon等(2017)描述的桑白粉菌(Erysiphe mori)的形态特征一致。提取桑白粉病菌总DNA,用真菌通用引物ITSl/ITS4进行PCR扩增及测序,发现桑里白粉病菌与桑生球针壳(D84385.1)的同源性为99%,选取同源性高的桑生球针壳、榛球针壳(***)、杨球针壳(***)等的ITS序列进行系统发育分析,发现桑里白粉病菌与桑生球针壳(D84385.1)聚在同一分枝;根据形态特征和ITS序列分析,鉴定桑里白粉病菌为桑生球针壳(Phyllactinia moricola)。桑表白粉病菌ITS序列与桑白粉菌(KY910120.1)的同源性为99%,系统发育树单独一个分枝;用28s rRNA D1/D2引物(Meeboon etal.,2017)进行PCR扩增及测序,发现桑表白粉病菌与桑白粉菌(KR048132.1)的同源性为99%,与含油白粉菌(***)(LC028999.1)的同源性为99%;下载GenBank上发布的桑白粉菌和含油白粉菌所有28s rRNA序列进行系统发育分析,发现桑表白粉病菌与桑白粉菌(KR048132.1)和含油白粉菌(LC028999.1)聚为一枝。据郑儒永等(1987)报道,含油白粉菌的寄主为椴(Tilia tuan),未见为害桑叶的报道,其子囊孢子为5～8个。桑表白粉病菌与桑白粉菌子囊孢子均为3～5个。根据形态特征和ITS序列、28s rRNA D1/D2序列分析,鉴定桑表白粉病菌为桑白粉菌。郑儒永等(1987)报道桑表白粉病菌为钩丝壳菌(Uncinula mori),本文首次报道桑表白粉病菌为桑白粉菌(Erysiphe mori)。

关键词：桑里白粉病桑生球针壳桑表白粉病桑白粉菌

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核桃细菌性黑斑病菌分泌蛋白的预测及生物信息学分析

核桃细菌性黑斑病菌分泌蛋白的预测及生物信息学分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：祝友朋韩长志西南林业大学生物多样性保护与利用学院/云南省森林灾害预警与控制重点实验室

核桃是我国第一大干果树种,目前我国核桃种植面积和产量均居世界第一。近年来,云南省大力发展核桃产业,目前,该省90%以上的县(市、区)种植核桃,在种植面积、产量、产值方面均居全国之首。核桃产业已成为云南覆盖面最广、惠集群众最多、... 详细信息

核桃是我国第一大干果树种,目前我国核桃种植面积和产量均居世界第一。近年来,云南省大力发展核桃产业,目前,该省90%以上的县(市、区)种植核桃,在种植面积、产量、产值方面均居全国之首。核桃产业已成为云南覆盖面最广、惠集群众最多、持续发展潜力最大的高原特色产业之一。然而,近些年对云南省大理州核桃主产区开展核桃病害调研,明确核桃细菌性黑斑病等病害发生日益严重。前人关于引起核桃细菌性黑斑病的病原报道主要涉及核桃黄单胞杆菌Xanthomonas arboricola ***、Xanthomonas campestris ***、成团泛菌Pantoea agglomerans以及上述细菌的复合等,尤以*** p ***报道为主,受该病菌侵染的核桃,其果实容易腐烂、早落,出仁率和含油率均降低,核桃品质下降并减产,严重时落果率高达60%～80%,严重影响着核桃的产量和品质,阻碍了核桃产业的健康有序发展。植物病原菌中的分泌蛋白在侵染植物的过程中发挥着重要的作用,目前对于植物病原真菌、卵菌中分泌蛋白的研究报道较多,而对植物病原细菌特别是经济林木上的病原细菌中分泌蛋白的研究报道较少。本研究以全基因组序列已经公布的7个核桃细菌性黑斑病菌*** ***菌株CFBP2528、CFBP7179、CFBP8253、DW3F3、.J303、NCPPBl447、Xaj417等所具有的蛋白序列为预测数据,基于分泌蛋白所具有的主要特征,利用SignalP v4.1、ProtCompB v9.0、TMHMMv2.0、big-PI Fungal predictor、TargetP v1.1、LipoP v1.0等在线分析程序对分泌蛋白进行预测,同时,对其氨基酸组成及分布、信号肽长度大小、信号肽切割位点等特征进行分析,明确核桃细菌性黑斑病菌的分泌蛋白平均为74个,其氨基酸长度多集中于101～400 aa,所占比例为63.70%;信号肽氨基酸残基中以A最多,所占比例为22.01%,其次是L,所占比例为19.30%;信号肽长度以19～29 aa最多,所占比例为78.88%,信号肽切割位点属于A-X-A类型。以上述分泌蛋白序列为基础数据,利用PHD、Protscale、TargetP 1.1 Server、SMART等网站在线预测分析疏水性、转运肽及保守结构域等性质,明确核桃细菌性黑斑病菌的分泌蛋白理论等电点集中在5.01～7.00,所占比例高达49.04%;不稳定性系数集中在20.01～40.00,所占比例为63.81%;亲水性蛋白所占比例为76.47%;明确分泌到细胞周质的蛋白所占比例高达95.44%。通过上述研究,有效地实现了核桃细菌性黑斑病菌中分泌蛋白的预测和生物信息学分析,为深入解析核桃细菌性黑斑病菌中分泌蛋白在侵染过程中所发挥的功能提供了理论基础。

关键词：核桃细菌性黑斑病菌全基因组分泌蛋白预测生物信息学分析

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F-box/Kelch类基因在小麦抗/感叶锈菌侵染中的作用

F-box/Kelch类基因在小麦抗/感叶锈菌侵染中的作用

引用

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：魏春茹于秀梅刘大群河北农业大学生命科学学院/河北省植物生理与分子病理学重点实验室河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心

F-box蛋白是一类含有F-box基序(motif)、在泛素介导的蛋白质水解过程中具有底物识别特性的蛋白质,因其专化性识别待降解目标蛋白而在植物生长发育、激素信号转导和抗病、抗逆境胁迫中发挥重要作用。为探讨F-box蛋白是否参与小麦的抗/感... 详细信息

F-box蛋白是一类含有F-box基序(motif)、在泛素介导的蛋白质水解过程中具有底物识别特性的蛋白质,因其专化性识别待降解目标蛋白而在植物生长发育、激素信号转导和抗病、抗逆境胁迫中发挥重要作用。为探讨F-box蛋白是否参与小麦的抗/感叶锈病过程,本研究对小麦F-box/Kelch类基因进行克隆、表达模式分析和互作靶蛋白筛选。以接种非亲和叶锈菌株05-19-43②的小麦抗叶锈病近等基因系Thatcher-Lr15为材料,通过RT-PCR扩增获得4个F-box/Kelch类基因:Ta-FBK1、Ta-FBK2、Ta-FBK3和Ta-FBK4。4个序列均包含完整的开放阅读框,其编码多肽链的长度分别为:Ta-FBK1 383 aa,Ta-FBK2 421 aa,Ta-FBK3 425 aa,Ta-FK4404 aa。4个基因所编码的蛋白质N端均包含一个F-box结构域,C端包含数量不等的Kelch结构域。以Thatcher-Lr15/05-19-43②组成的抗病组合与Thtacher-Lr15/05-5-137③组成的感病组合为材料,利用qRT-PCR技术对这4个基因响应叶锈菌侵染的表达模式进行分析。Ta-FBK1在感病组合中的表达量除48h时稍低于抗病组合外,其他时间点均高于抗病组合,且到96 h表达量达到最大,约为抗病组合的3倍;Ta-FBK3基因在6h、12h和24h的抗病组合中的表达量均高于感病组合,且于24 h达到最大,约为感病组合的3.5倍;Ta-FBK2和Ta-FBK4在感病组合中的表达量虽然均略高于抗病组合,但抗/感组合之间并无明显差异。由此推测Ta-FBK1基因可能在叶锈菌侵染小麦的感病过程中发挥作用,相反,Ta-FBK3基因可能在小麦抵抗叶锈菌侵染的抗病过程中发挥作用。基于此,构建了Ta-FBK1和Ta-FBK3 2个基因的酵母诱饵载体,并对小麦Thatcher-Lr15/05-19-43②的酵母双杂交文库进行互作靶蛋白筛选,与Ta-FBK1互作的靶蛋白有retrotransposon protein、root phototropism protein 2、serine/threonine-protein kinase PBL1 5和Laccase-7等11种,与Ta-FBK3互作的靶蛋白有Skp1/ASK1-like protein、SEC1 family transport protein SLY、RTE1-HOMOLOG protein和obtusifoliol 14-alpha-demethylase(CYP51)等12种。目前为止,通过酵母双杂交一对一回复验证,初步证实Ta-FBK1和Ta-FBK3与Skp1/ASK1-like protein均存在相互作用,由此推断Ta-FBK1和Ta-FBK3可能需要与Skp1/ASK1-like protein形成SCF复合体,进而参与小麦抗/感叶锈病过程。

关键词：小麦 F-box/Kelch 基因克隆表达模式酵母双杂交

来源：评论

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烟田周边植物白粉病菌的分子鉴定及烟草白粉病菌寄主范围的研究

烟田周边植物白粉病菌的分子鉴定及烟草白粉病菌寄主范围的研究

引用

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：向立刚崔梦娇汪汉成陈兴江陈雪代园凤余知和长江大学生命科学学院贵州省烟草科学研究院长江大学农学院贵州省烟草公司毕节市公司

烟草是一种重要的经济作物,广泛种植于我国各个省份。烟草白粉病的发生可造成烟叶质量的大幅下降,严重时可引起植株全株死亡。目前,国内外尚缺乏对烟草白粉病菌寄主范围的系统性研究。本文对引起烟草白粉病的二孢白粉菌(Erysiphe cichor... 详细信息

烟草是一种重要的经济作物,广泛种植于我国各个省份。烟草白粉病的发生可造成烟叶质量的大幅下降,严重时可引起植株全株死亡。目前,国内外尚缺乏对烟草白粉病菌寄主范围的系统性研究。本文对引起烟草白粉病的二孢白粉菌(Erysiphe cichoracearum DC.又为Golovinomyces cichoracearum var.)开展贵州烟区其寄主范围的研究,以期获得烟草白粉病菌的寄主种类。研究结果表明,烟草生产季节在烟田周边共采集获得15种植物白粉病样品,包括菊科大丽花(Dahlia pinnata Cav.)、百日菊(Zinnia elegans Jacq.)、翅果菊[Pterocypsela indica(L.)Shih]、藿香蓟(Ageratum conyzoides L.)、金鸡菊(Coreopsis drummondii *** Gray),旋花科打碗花(Calystegia hederacea Wal.),伞形科天胡荽(Hydrocotyle sibthorpioides),苏木科双荚决明(Cassia bicapsularis Linn.),禾本科牛筋草[Eleusine indica(L.)Gaertn.],玄参科阿拉伯婆婆纳(Veronica persica Poir.),蓼科酸模(Rumex acetosa L.),小檗科十大功劳(Mahonia),马桑科马桑(Coriarianepalensis Wall.),杜鹃花科杜鹃(Rhododendron simsii Planch.),及车前科车前草(Plantago asiaticaL.)。基于引物ITS1F和ITS4扩增的真菌ITS序列的分析表明,大丽花、阿拉伯婆婆纳、车前草上的病原菌为二孢白粉病菌(***);百日菊、藿香蓟、金鸡菊、翅果菊上的病原菌为中国长春瓜类白粉菌(Podosphaera xanthii);打碗花的病原菌为双叉旋花白粉菌(Erysiphe convolvuli);天胡荽的为(Podosphaera aphanis);杜鹃的为(Erysiphe betae);牛筋草的为(Blumeria graminis);双荚决明的为(Oidium neolycopersici);酸模的为(Erysiphepolygoni);十大功劳的为十字花科白粉菌(Erysiphe cruciferarum);马桑的为(Erysiphe sp.)。以菊科大丽花、翅果菊、藿香蓟、金鸡菊、野茼蒿[Crassocephalum crepidioides(Benth.)***]、蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)、苣荬菜(Sonchus brachyotus DC.)、苦苣菜(Sonchus oleraceus L.)、牛膝菊(Galinsoga parviflora Cav.)、一年蓬[(Erigeron annuus(L.)Pers.(Aster annuus L.)]、艾草(Artemisia argyi H.Lév.&Vaniot),车前科车前草,凤仙花科凤仙花(Impatiens balsamina L.),旋花科打碗花,伞形科天胡荽,苏木科双荚决明,禾本科牛筋草,玄参科阿拉伯婆婆纳,蓼科酸模,小檗科紫叶小檗和十大功劳,马桑科马桑,酢浆草科三叶草(Trifolium repens L.),蔷薇科月季(Rosa chinensis Jacq.),大戟科铁苋草(Acalypha australis L.),及茄科番茄(Solanum lycopersicum)共计26种植物叶片为材料,科赫氏法则回接烟草白粉病菌并进行病菌分子鉴定。结果表明,阿拉伯婆婆纳、车前草、大丽花3种植株的白粉病菌与烟草白粉病菌相同。为此,烟草白粉病在贵州烟田的转主寄主包括大丽花、车前草、阿拉伯婆婆纳,烟草白粉病防治时也应同时对这些寄主植物上的白粉病进行防治。

关键词：白粉病二孢白粉菌烟草寄主范围

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芸薹黄化病毒P0蛋白类F-box基序突变体RNA沉默抑制活性和致坏死能力的验证

芸薹黄化病毒P0蛋白类F-box基序突变体RNA沉默抑制活性和致坏死能...

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：张鑫李源源王颖张宗英张永亮王献兵李大伟于嘉林韩成贵中国农业大学植物病理学系/农业生物技术国家重点实验室

芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus,BrYV)是由本实验室首次发现并报道的马铃薯卷叶属新病毒。前期调查结果表明BrYV在我国大陆广泛分布,能够侵染多种十字花科作物,引起叶片黄化和卷曲的症状。本实验室前期的研究表明BrYV P0蛋白(P0)... 详细信息

芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus,BrYV)是由本实验室首次发现并报道的马铃薯卷叶属新病毒。前期调查结果表明BrYV在我国大陆广泛分布,能够侵染多种十字花科作物,引起叶片黄化和卷曲的症状。本实验室前期的研究表明BrYV P0蛋白(P0)是一个强的RNA沉默抑制子,能抑制由GFP在本生烟上诱发的局部RNA沉默及在GFP转基因株系16c上诱发的系统RNA沉默,并诱发本生烟叶片的局限性坏死。研究发现,马铃薯卷叶病毒属的P0蛋白含有类似F-box基序的序列,该基序在植物的F-box蛋白中是高度保守的。虽然马铃薯卷叶病毒属各个病毒P0蛋白的氨基酸同源性很低,但是在氨基酸序列的相似区域都具有类似F-box蛋白保守基序的序列。将P0蛋白类F-box motif区域中的氨基酸进行替换突变,获得了P64S、G68R、H70D、H72D、D73H、R76G、K77E、S78P、P82S、E73K、P84S、HHD70/72/73DDH、RKS76/77/78GEP、PEP82/83/84SKS等14个P0蛋白突变体,并构建了P0及以上14个突变体融合3 X FLAG标签的瞬时表达载体。将获得的质粒和表达正单链GFP的pGDsmGFP质粒分别转化农杆菌菌株C58CI,随后将含有P0及其各突变体瞬时表达载体的农杆菌与含有pGDsmGFP瞬时表达载体的农杆菌共浸润苗龄3～5周的本生烟的叶片,于浸润后2d(day post infiltration,dpi)时在长波紫外灯下观察本生烟叶片浸润区域GFP的表达情况,并在5 dpi时观察本生烟叶片浸润区域的坏死表型。观察结果表明:2 dpi时,pGDsmGFP与空载体pGD共表达的叶片上GFP的绿色荧光几乎消失;GFP与P03FLAG瞬时共表达叶片的浸润区域具有很强的绿色荧光;而P0各个突变体与GFP瞬时共表达叶片的浸润区域同样具有很强的绿色荧光。Western blot检测结果与观察到的表型一致:在P0的14个突变体与GFP共表达的本生烟样品中,GFP的蛋白质积累水平很高;相较之下,在阴性对照样品中,检测不到GFP蛋白质的积累。5 dpi时,对瞬时表达P0及其各突变体的本生烟叶片进行坏死表型的观察。结果表明:P0各个突变体在浸润区域均能产生坏死表型,但较野生型P0引起的坏死表型弱。以上实验均进行了3次独立重复实验,得到了一致的结果。上述结果表明,P0的14个突变体的RNA沉默抑制活性功能较P0没有明显的改变,但导致本生烟叶片坏死的能力均受到一定程度的影响。说明这14个氨基酸位点不是P0发挥RNA沉默抑制活性的关键位点,而与P0致本生烟叶片坏死相关。P0这14个氨基酸位点的突变影响其致坏死能力的机制还有待进一步研究。

关键词：芸薹黄化病毒 P0 类F-box基序替换突变 RNA沉默抑制

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杧果炭疽病菌3个果胶裂解酶基因克隆分析及敲除载体构建

杧果炭疽病菌3个果胶裂解酶基因克隆分析及敲除载体构建

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：李鸿鹏钟昌开吴秋玉张艳杰张贺蒲金基刘晓妹海南大学热带农林学院/海南大学热带生物资源教育部重点实验室中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室

果胶裂解酶(Pectate lyases,PL),是能降解植物细胞壁,导致植物组织软化甚至死亡的一种解聚酶。许多真菌在侵染植物的过程中都可以产生果胶裂解酶,裂解高度酯化的果胶,破坏植物组织的整体性,使薄壁细胞组织软化。果胶裂解酶基因多以基因... 详细信息

果胶裂解酶(Pectate lyases,PL),是能降解植物细胞壁,导致植物组织软化甚至死亡的一种解聚酶。许多真菌在侵染植物的过程中都可以产生果胶裂解酶,裂解高度酯化的果胶,破坏植物组织的整体性,使薄壁细胞组织软化。果胶裂解酶基因多以基因家族形式存在,同一病菌中不同的果胶裂解酶基因作用存在明显差异,如Erwinia chrysanthemi strain3937有5个Pel基因PLa～Ple,其中只有PLa、PLd和Ple对病原菌的致病力有影响,且PLe比Pla和PLd的作用更强,PLe突变后失去了侵染能力(Boccara et al.,1998);辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)的12个候选果胶裂解酶基因中只有Pcpel1、Pcpel16、Pcpel20明显影响致病力(付丽,2012)。杧果是我国热带和亚热带地区重要的经济果树。由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.&Sacc.)引起的杧果炭疽病是杧果生长期及贮藏期的常发性重要病害之一。目前,对该病害的防治以化学方法为主,不仅防效有限,且易产生耐药性或抗药性及农药残留等问题。因此,有必要从分子水平上探究杧果炭疽病菌的致病机理,为开发药剂新靶标提供依据。本课题组前期用实时荧光定量方法分析发现,在胶孢炭疽菌侵染杧果叶片和果实的不同时段,果胶裂解酶基因均持续高效表达,因此推测Pel基因可能是胶孢炭疽菌的重要致病因子之一。为了进一步从分子水平上明确其在杧果炭疽病菌致病机理中的作用,本研究利用同源克隆的策略从杧果炭疽病菌中克隆获得了3个果胶裂解酶基因Cgpel1、Cgpel2和Cgpel3,DNA全长分别为1 037bp、1 498bp、1 089bp,cDNA全长分别为975bp、1 380bp、978bp,分别编码324、459、325个氨基酸,均含1个果胶裂解酶保守结构域,均有典型的信号肽,不存在跨膜结构;其二级结构中α-螺旋分别占16.05%、20.26%、16.92%,延伸链分别占28.09%、21.79%、29.54%,β-转角分别占5.86%、8.93%、7.38%,无规则卷曲分别占50.00%、49.02%、46.15%;三级结构差别很大;Cgpel1、Cgpel2和Cgpel3的氨基酸序列分别与***(KZL77240.1)、草莓炭疽菌(***)(XP-007274932.1)、***(KZL84476.1)果胶裂解酶序列相似度达93%以上。借助In-FusionHD Cloning Kit成功构建了3个果胶裂解酶基因的敲除载体,为后续鉴定其分子功能打下了材料基础。

关键词：杧果胶孢炭疽菌果胶裂解酶基因克隆敲除载体

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苹果MdT5H1的克隆和功能分析

苹果MdT5H1的克隆和功能分析

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：吴成成练森李保华王彩霞青岛农业大学植物保护学院/山东省植物病虫害综合防控重点实验室

苹果炭疽叶枯病(Glomerella leaf spot,GLS)是近年我国新发现的一种病害,其病原菌为Glomerella cingulata,主要为害叶片和果实,严重影响果实产量和品质。目前化学防治是防治该病害的主要方法,但频繁使用杀菌剂导致果园生态环境恶化,并... 详细信息

苹果炭疽叶枯病(Glomerella leaf spot,GLS)是近年我国新发现的一种病害,其病原菌为Glomerella cingulata,主要为害叶片和果实,严重影响果实产量和品质。目前化学防治是防治该病害的主要方法,但频繁使用杀菌剂导致果园生态环境恶化,并给食品安全带来极大隐患。不同苹果品种对炭疽叶枯病抗性存在明显差异,‘富士’‘红星'等高度抗病,而‘嘎啦'‘秦冠'等高度敏感,利用抗病基因育种是防治该病的理想策略和有效途径。褪黑素(melatonin)是一种吲哚胺类小分子物质,在植物生长发育过程中发挥重要作用,最近研究发现外源褪黑素可显著提高植物的抗病性。本研究克隆了苹果褪黑素合成基因色胺-5-羟化酶基因MdT5H1的cDNA全长,对其序列进行了生物信息学分析,并获得了基因过表达拟南芥植株,对该基因功能进行了初步分析。结果表明MdT5H1的cDNA全长为1515bp,编码504个氨基酸(登录号443138),该基因编码的氨基酸序列没有信号肽,为亲水的不稳定非分泌型蛋白,属于P450家族。系统发育树分析表明苹果与青梅聚在一个分支,说明MdT5H1与青梅中T5H的亲缘关系较近。采用荧光定量PCR技术测定了苹果炭疽叶枯病菌接种,外源褪黑素和水杨酸处理对‘富士’和‘嘎啦'叶片中MdT5H1表达的影响。结果表明,炭疽叶枯病菌接种后6h,‘富士’叶片中MdT5H1表达水平开始显著升高,而‘嘎啦'叶片中基因表达量没有明显变化,推测‘富士’对炭疽叶枯病的抗性与MdT5H1显著上调表达有关。外源褪黑素处理后6h,‘富士’叶片中基因表达量为对照3.5倍,随后基因表达量先降低后升高,处理后72h为对照的3.8倍;‘嘎啦'叶片中MdT5H1表达呈先升高后降低的趋势,处理后48h达到峰值,为对照的3.5倍。然而,外源水杨酸处理后,‘富士’和‘嘎啦'叶片中MdT5H1均未上调表达。表明该基因表达收到外源褪黑素的诱导,但不受外源水杨酸的诱导。将MdT5H1与携带GFP报告基因的双元载体pGWB5载体连接,通过蘸花法获得基因过表达拟南芥植株。野生型和转基因拟南芥培养4周时,分别接种灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)和丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae),灰葡萄孢菌接种后36h,可观察到明显的发病症状,相比野生型植株,基因过表达植株的病斑面积降低了55%;丁香假单胞菌注射后3d,野生型植株的接种叶片明显变黄,而基因过表达植株叶片仍为绿色,其菌落数相比野生型植株减少了64.3%。表明MdT5H1过表达植株可通过提高褪黑素的含量,抑制灰葡萄孢菌的扩展和丁香假单胞菌的繁殖,提高植物的抗性,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：苹果炭疽叶枯病菌褪黑素基因克隆基因表达基因功能

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