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6 篇 青岛农业大学
6 篇 plant protection...
6 篇 河北农业大学
6 篇 广西农业科学院微...

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6 篇 xue chunsheng
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枯草芽孢杆菌菌株Bv10胞外抗菌物质的纯化与鉴定

枯草芽孢杆菌菌株Bv10胞外抗菌物质的纯化与鉴定

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：王雅黎起秦谭小艳邱东方郭应臣王坦牛小瑞黄思良南阳师范学院生命科学与技术学院广西大学农学院枣庄学院生命科学学院南阳师范学院化学与制药工程学院

谭小艳等从广西合浦县柑橘叶片表面分离获得一株对柑橘溃疡病菌（Xanthomonas axonopodis ***）具有较强拮抗作用的枯草芽孢杆菌菌株Bv10。研究发现,除Xanthomonas spp.外,菌株Bv10对多种植物病原真菌也有不同程度的抗菌活性。为深入了... 详细信息

谭小艳等从广西合浦县柑橘叶片表面分离获得一株对柑橘溃疡病菌（Xanthomonas axonopodis ***）具有较强拮抗作用的枯草芽孢杆菌菌株Bv10。研究发现,除Xanthomonas spp.外,菌株Bv10对多种植物病原真菌也有不同程度的抗菌活性。为深入了解菌株Bv10抗菌活性的物质基础,作者以芝麻白绢病菌Athelia rolfsii作为指示菌,对菌株Bv10产生的胞外抗菌物质进行了纯化与鉴定。经盐酸沉淀、甲醇萃取以及反相高效液相色谱（RP-HPLC）等方法,从菌株Bv10的无菌发酵液中提取和纯化到A和B两种对芝麻白绢病菌具有较强抑制作用的活性物质,其分子量分别为1 042Da和1 057Da。纯化物A和B浓度都为200mg/L时可以完全抑制芝麻白绢病菌菌核的萌发;当浓度为100mg/L和50mg/L时,纯化物A对菌核萌发的抑制率分别为82.2%和73.3%,纯化物B对菌核萌发的抑制率分别为77.8%和68.9%。纯化抗菌物质A和B对芝麻白绢病菌的抑菌中浓度EC值分别为36.7866mg/L和43.0329mg/L。显微镜观察结果表明,芝麻白绢病菌在菌株Bv10抗菌物质的作用下,菌丝体扭曲变形,生长紊乱,分隔处缢缩,甚至在分枝处断裂,菌丝顶端膨大,原生质体凝聚,顶端成囊泡状。MALDI-TOF-MS/MS CID质谱分析两种纯化物分子的一级结构均为Pro-Asn-Ser-βAA-Asn-Tyr-Asn-Gln,将纯化物A鉴定为脂肽化合物伊枯草菌素iturin A,将纯化物B鉴定为iturin A。胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、果胶酶对纯化物的抗菌活性也没有影响。

关键词：枯草芽孢杆菌芝麻白绢病菌抗菌物质纯化鉴定防治效果

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田间苹果轮纹病菌不同菌株对杀菌剂的敏感性

田间苹果轮纹病菌不同菌株对杀菌剂的敏感性

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：靳丹丹王玉然李保华王彩霞董向丽青岛农业大学农学与植物保护学院/山东省植物病虫害综合防控重点实验室

从不同地区采集的苹果轮纹病病果以及大樱桃流胶病枝条木质部中分离纯化得到7株苹果轮纹病菌,用菌丝生长速率法测定了苯醚甲环唑、嘧菌酯、嘧霉胺、咯菌腈、甲基硫菌灵及戊唑醇等6个不同结构类型的杀菌剂对7株轮纹病菌的毒力。6种杀菌剂... 详细信息

从不同地区采集的苹果轮纹病病果以及大樱桃流胶病枝条木质部中分离纯化得到7株苹果轮纹病菌,用菌丝生长速率法测定了苯醚甲环唑、嘧菌酯、嘧霉胺、咯菌腈、甲基硫菌灵及戊唑醇等6个不同结构类型的杀菌剂对7株轮纹病菌的毒力。6种杀菌剂中,咯菌腈毒力最大,EC值为0.02～0.15μg/mL,从回归方程的b值看,咯菌腈在所有杀菌剂中最大,相应的咯菌腈对不同菌株的最低抑制浓度(即MIC,以EC值表示)也最小,为6.41～308.11μg/mL,说明苹果轮纹病菌对咯菌腈保持极高的敏感性;戊唑醇对各菌株的EC值为0.03～0.41μg/mL,敏感性最大相差13.67倍,从EC值看,有2个菌株都是0.03μg/mL,似乎对戊唑醇的敏感性相同,但是二者的EC值分别是153.99μg/mL和1962.45μg/mL,相差12倍多,说明戊唑醇对前者的毒力要大于后者,其他菌株EC都在600μg/mL以下;甲基硫菌灵的毒力仅次于咯菌腈和戊唑醇,EC值为0.07～0.64μg/mL,EC值为839.66～42 348.19μg/mL;苯醚甲环唑对轮纹病菌的毒力低于同类杀菌剂戊唑醇,甚至低于苯并咪唑类的甲基硫菌灵,EC值为0.51～2.27μg/mL,EC值为1 544.28～36 937.89μg/mL;各菌株对嘧霉胺的敏感性差异较大,EC值为0.02～74.00μg/mL,EC值为2.79×10～3.86×10～6μg/mL;嘧菌酯对轮纹病菌的毒力最低,EC值为20.60～155.39μg/mL,EC值为1.00×10～7.54×10μg/mL。结果表明,田间苹果轮纹病菌对吡咯类的咯菌腈、三唑类的戊唑醇以及苯并咪唑类的甲基硫菌灵敏感性较高,这三种杀菌剂可推荐用于防治苹果轮纹病;苯醚甲环唑的测定结果表明,已经有高抗菌株产生（MIC为36 937.89μg/mL）,并且抗性趋势可能进一步扩大,建议少用或不用;酰胺类杀菌剂嘧霉胺以及甲氧基丙烯酸类杀菌剂嘧菌酯对轮纹病菌的毒力太低,失去应用价值。此外,不同菌株之间对药剂的敏感性也存在较大的差异。

关键词：苹果轮纹病菌杀菌剂毒力测定

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枯草芽孢杆菌EDR4突变体库的构建及拮抗相关基因的检测

枯草芽孢杆菌EDR4突变体库的构建及拮抗相关基因的检测

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：陈永轩高小宁秦虎强黄丽丽韩青梅旱区作物逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学植物保护学院

为筛选枯草芽孢杆菌EDR4拮抗相关基因,利用转座子TnYLB-1构建了该菌株的插入突变体库。通过对种子液OD值、转接培养液一继续培养OD值及转接培养液二后的孵育时间3个因素设计正交试验,转化过程中加入pMarA质粒的不同量及质粒与感受态细... 详细信息

为筛选枯草芽孢杆菌EDR4拮抗相关基因,利用转座子TnYLB-1构建了该菌株的插入突变体库。通过对种子液OD值、转接培养液一继续培养OD值及转接培养液二后的孵育时间3个因素设计正交试验,转化过程中加入pMarA质粒的不同量及质粒与感受态细胞共培养的不同时间研究了两种因素对转化效率的影响,确定了pMarA对EDR4的转化体系。通过50℃高温诱导培养产生了EDR4的插入突变体,挑取单菌落2 756个,构建了EDR4的插入突变体库,随机挑选14株突变体经PCR检测转座子TnYLB-1序列,发现转座子已成功插入到EDR4基因组中,进一步通过Southern杂交验证,发现转座子TnYLB-1主要以单拷贝形式随机插入,也有部分多拷贝插入。以油菜菌核病菌为靶标菌,从640株突变菌株中筛选出两株抑菌活性明显下降的突变株,分别为EDR4-T1272和EDR4-T1473,通过生物学特性观察发现转座子的插入未对EDR4生物学特性产生影响,通过PCR验证转座子序列发现转座子可以在突变体中稳定遗传。经过反向PCR扩增出EDR4-T1272、EDR4-T1473转座子插入的侧翼序列,于NCBI上进行Blastn序列比对发现突变体EDR4-T1473中转座子插入基因序列与BS168基因组中糖基化酶基因yvbX有较高的同源性,突变体EDR4-T1272中转座子插入基因序列与模式菌株BS168基因组中假定蛋白编码基因有较高的同源性,推测此两种基因可能与EDR4的抑菌活性相关,基因的具体功能还需要深入研究。

关键词：内生细菌转化转座诱变 TnYLB-1插入位点

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向日葵菌核萌发及发病规律盆栽试验研究

向日葵菌核萌发及发病规律盆栽试验研究

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：刘佳孟庆林石凤梅马立功李易初张匀华黑龙江省农业科学院植物保护研究所

针对向日葵菌核萌发及发病规律的研究,2013年开展以不同条件对向日葵菌核萌发及向日葵菌核病发病规律盆栽两种试验。萌发试验结果表明各不同处理对向日葵菌核萌发具有一定的影响作用,其中菌核在20℃最适生长及萌发,所需萌发时间较短,第3... 详细信息

针对向日葵菌核萌发及发病规律的研究,2013年开展以不同条件对向日葵菌核萌发及向日葵菌核病发病规律盆栽两种试验。萌发试验结果表明各不同处理对向日葵菌核萌发具有一定的影响作用,其中菌核在20℃最适生长及萌发,所需萌发时间较短,第30天到第50天时萌发率达到最大;土壤含水量为50%时,在菌核培养第50天萌发率达到最大;培养基质偏酸性更有利于向日葵菌核的萌发,萌发和生长的最高峰出现在培养后的第55～60天,但当培养基质为弱碱性即pH为8时也极有利于向日葵菌核的萌发及生长;培养菌核的土壤深度越浅越有利于菌核的萌发及长盘,当土壤深度为0cm时,培养后第50天萌发数量最高;不同培养基质间的萌发率差别不大,各不同处理只能够影响到向日葵菌核的萌发及子囊盘发生的时间早晚,而对菌核萌发和子囊盘生长的数量基本没有影响。盆栽试验结果表明各不同处理对向日葵菌核病发病具有一定的影响作用。在一定范围内随着接菌量增大,各不同处理的感病植株数量有所增加,可以判断在一定的菌量范围内,向日葵发病率与菌量增加成正比。另外大豆菌核可以感染向日葵使其发病,低浓度的使用量(1‰)对向日葵发病无明显作用,随着处理浓度的升高可以看出向日葵的发病率也增高,说明在一定范围内大豆菌核浓度越高向日葵越容易感病。而在不同土壤pH值处理下均有作物感病,说明菌株具有广泛的pH值适应范围,另外pH值为5和8两个处理感病植株数最多,可见土壤pH值对向日葵感病情况无明显规律。菌核所处水平及垂直位置对向日葵菌核病发病也有一定的影响,距离作物种子距离越近,作物越容易感病。

关键词：向日葵菌核萌发发病规律盆栽试验

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稻曲病菌分生孢子高产突变体A2588的T-DNA插入位点侧翼基因克隆

稻曲病菌分生孢子高产突变体A2588的T-DNA插入位点侧翼基因克隆

引用

中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：于俊杰聂亚锋俞咪娜尹小乐黄磊赵洁陈志谊刘永锋江苏省农业科学院植物保护研究所

本研究克隆稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)分生孢子高产突变菌株A2588的TDNA插入突变基因,解析该基因在稻曲病菌分生孢子形成中的功能,为进一步揭示稻曲病菌的分生孢子形成机制提供理论基础。研究通过测定A2588的产分生孢子能力、孢... 详细信息

本研究克隆稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)分生孢子高产突变菌株A2588的TDNA插入突变基因,解析该基因在稻曲病菌分生孢子形成中的功能,为进一步揭示稻曲病菌的分生孢子形成机制提供理论基础。研究通过测定A2588的产分生孢子能力、孢子萌发率、菌丝直线生长能力和热敏感性等生物学特性,利用hiTAIL-PCR、RACE和半定量PCR等方法克隆TDNA插入突变基因,并结合生物信息学方法分析T-DNA插入导致分生孢子产量提高的分子机理。与稻曲病菌野生型菌株70-22相比,突变菌株A2588在PS培养液中可产生数量为10倍以上的分生孢子,在MM培养液中产生数量约20倍的分生孢子,其在PS培养液中培养的菌球较为致密;在PSA和MM固体培养基上A2588产孢周期较短,孢子萌发率较低,虽然菌丝生长速度无明显差异,但热处理后菌丝不能恢复正常生长速率。hiTAIL-PCR和RACE法克隆了A2588中TDNA侧翼基因,并利用RT-PCR检测侧翼基因表达水平,结果表明T-DNA侧翼基因spo76表达水平下降,进一步分析发现T-DNA可能插入至spo76的启动子区域,从而破坏了该基因启动子的部分功能。spo76基因编码区全长4 682bp,含有2个分别为94bp和85bp内含子,可编码1个1 500个氨基酸的SP076蛋白,SP076蛋白通常参与有丝分裂中姐妹染色单体黏合分离和DNA损伤修复。稻曲病菌突变菌株A2588中,T-DNA插入导致spo76启动子功能部分缺失,spo76表达水平下降,可能使A2588产孢周期缩短,产生更多分生孢子,且细胞修复能力降低。

关键词：稻曲病菌分生孢子 ATMT转化 spo76

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灰葡萄孢致病相关基因BC1G07326的克隆及其功能验证

灰葡萄孢致病相关基因BC1G07326的克隆及其功能验证

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：刘信强谢甲涛付艳苹姜道宏陈桃李国庆程家森湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室(华中农业大学) 农业微生物学国家重点实验室(华中农业大学)

由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）引起的灰霉病是一种世界性分布的重要植物病害,灰葡萄孢的寄主范围极其广泛,能侵染400多种植物,造成严重的经济损失。灰葡萄孢对寄主的致病作用是一个极其复杂的过程,多种致病因子参与其中,例如,细胞壁... 详细信息

由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）引起的灰霉病是一种世界性分布的重要植物病害,灰葡萄孢的寄主范围极其广泛,能侵染400多种植物,造成严重的经济损失。灰葡萄孢对寄主的致病作用是一个极其复杂的过程,多种致病因子参与其中,例如,细胞壁降解酶、毒素、抵抗寄主防卫反应的酶类及小分子物质。灰霉病的防治是农业生产上的难题之一,从分子水平上探究灰葡萄孢的致病机制可为灰霉病的防治奠定一定的基础。本研究主要利用基因敲除和基因互补技术对灰葡萄孢基因BC1G7326的功能进行初步研究,目前主要取得以下研究结果。灰葡萄孢基因BC1G7326在致病过程中表达显著上调,该基因开放阅读框1 911bp,包含12个外显子,11个内含子,编码一种含有346个氨基酸的未知蛋白。通过SingalP4.1 server软件预测显示,位于其N端的前20个氨基酸为信号肽序列,因此,推测该蛋白可能是分泌蛋白。通过Blast分析表明,BC1G7326蛋白仅在核盘菌中发现了同源蛋白,未发现保守结构域。我们以灰葡萄孢菌株B05.10为研究材料,利用同源重组的方法对该基因进行了敲除,采用PEG介导原生质体转化技术共获得20个敲除转化子,通过PCR和Southern blot技术对部分敲除转化子进行验证,并对敲除转化子的生物学特性进行了初步研究。结果显示,与出发菌株B05.10相比,敲除转化子的生长速度、菌丝形态、菌落形态和产酸没有显著差异,致病力显著减弱。关于敲除转化子的其他生物学特性的研究正在进行当中。

关键词：灰葡萄孢致病 BC1G07326

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玉米灰斑病的发病程度与玉米主要农艺性状的相关性分析

玉米灰斑病的发病程度与玉米主要农艺性状的相关性分析

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：王桂清李凡海聊城大学农学院

为了探明玉米灰斑病发病程度对玉米产量的影响,试验研究了灰斑病发病程度与参试玉米材料常见农艺性状的相关性。通过对父本齐319、母本A050、F、F和F各世代的种植,并在大喇叭口期进行灰斑病菌的接种,分别在接种30天、60天后调查发病情况... 详细信息

为了探明玉米灰斑病发病程度对玉米产量的影响,试验研究了灰斑病发病程度与参试玉米材料常见农艺性状的相关性。通过对父本齐319、母本A050、F、F和F各世代的种植,并在大喇叭口期进行灰斑病菌的接种,分别在接种30天、60天后调查发病情况,于收获时测定了参试玉米材料的株高、穗长、穗重、最粗穗径、中间穗径、百粒鲜重、百粒干重等,并对7个农艺性状和发病级别的相关性进行了分析。结果表明,玉米常见的7个农艺性状均随玉米灰斑病发病等级的提高而下降,即7个农艺性状与发病程度呈负相关:株高由强到弱（相关系数r=-0.41,rb=-0.05,a为接种30天,b为接种60天）,穗长由强到弱（r=-0.62,r=-0.35）,最粗穗径由弱到强（r=-0.45,r=-0.69）,中间穗径由弱到强（r=-0.47,r=-0.78）,穗重由强到弱（r=-O.56,r=-0.08）,百粒鲜重由强到弱（r=-O.63,r=-0.18）,百粒干重由强到弱（r=-0.66,r=-0.23）;两个调查阶段的发病程度间呈正相关（r=0.55）;玉米灰斑病不同发病等级对株高、穗长和穗重的影响差异性极显著（P值分别为0.009 4、0.000 1和0.009 9）,对最粗穗径、中间穗径、百粒鲜重和百粒干重的影响差异性不显著（P值分别为0.445 7、0.3647、0.454 6和0.551 6）。6个农艺性状对百粒干重的影响,百粒干重主要决定于百粒鲜重（r=0.98）,其次决定于穗重（r=0.81）、株高（r=0.53）、穗长（r=0.65）、最粗穗径（r=0.36）、中间穗径（r=0.33）。百粒干重的预测模型:Y=O.016 3X+0.811 7X十0.047 2X+0.135 4 X+0.093 7 X+0.211 5X_玩62.206 9X+0.542 1X-8.990 5（Y表示百粒干重;X表示株高;X表示穗长;X表示穗重;X表示最粗穗径;X表示中间穗径;X表示百粒鲜重;X表示接种灰斑病菌30天的发病级别;X表示接种灰斑病菌60天的发病级别）。

关键词：玉米灰斑病玉米农艺性状相关性分析主成分回归分析

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内蒙古水稻秧苗立枯病原腐霉菌的分离鉴定

内蒙古水稻秧苗立枯病原腐霉菌的分离鉴定

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：银玲景山幸二田迅李依韦冀照君赵汝张晓宇内蒙古民族大学生命科学学院日本岐阜大学流域圈科学研究中心

近年来内蒙古中东部地区盐碱地大面积开发种植水稻。水稻育苗是水稻生产的一个关键环节,直接关系到水稻的产量问题。目前内蒙古水稻生产还未发展到工厂化水平,秧苗培育是庭院式拱棚技术。在这样的农业种植区每年都有水稻立枯病的爆发,... 详细信息

近年来内蒙古中东部地区盐碱地大面积开发种植水稻。水稻育苗是水稻生产的一个关键环节,直接关系到水稻的产量问题。目前内蒙古水稻生产还未发展到工厂化水平,秧苗培育是庭院式拱棚技术。在这样的农业种植区每年都有水稻立枯病的爆发,给水稻生产带来严重经济损失。水稻立枯病是寒地水稻常见的苗期病害,发生此类病害后,茎部发生枯萎,植株矮化、变黄发生轻时,苗床秧苗变黄,严重发生时会引起秧苗成片枯死甚至全床毁苗。有关水稻立枯病害,国内外学者的研究结果差异较大,对于内蒙古水稻立枯病原菌种类鉴定研究至今还没有报道。本研究在2012～2013年分别从内蒙古通辽市科左后旗3个苏木镇(金宝屯镇、茂道吐苏木、阿都沁镇)和内蒙古赤峰市巴林右旗1个镇(大板镇)水稻产区,采集秧苗立枯病害标样,分离纯化到157个腐霉属菌株,通过形态学观察和rDNA-ITS序列分析以及致病性测定研究,明确了该地区水稻秧苗立枯病原腐霉菌的种类,为内蒙古水稻立枯病的防治奠定重要的基础。研究结果,得到腐霉属的5个种,分别是Pythium arrhenomans为131株,比例最大,占83.4%,而且4个采样区均有分布,具有普遍的分布性;Pythium middletonii为13株,分离比率为8.28%;Pythium torulosum为6株,分离比率为3.82%;Pythium catenulatum为3株,分离比率为1.91%;Pythium plurisporium为1株,分离比率为0.64%。对分离的腐霉属5个株系进行了致病性测定,5个种对水稻秧苗均有致病性,但是从分离比例和分布情况可以判断出,***是内蒙古地区水稻秧苗立枯病原腐霉菌的优势种。

关键词：内蒙古水稻秧苗立枯病腐霉属菌

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中国烟草青枯病菌遗传多样性研究

中国烟草青枯病菌遗传多样性研究

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中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：刘海龙黎妍妍刘浩郑露黄俊斌华中农业大学湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室湖北省烟草科学研究院

烟草青枯病是烟草上发生最为严重的细菌性病害,由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染引起。烟草青枯病在我国主要产烟区普遍发生,其中以广东、广西、福建、湖南及贵州烟区危害最为严重。近年来,由于气候变化等方面原因,该病的发... 详细信息

烟草青枯病是烟草上发生最为严重的细菌性病害,由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染引起。烟草青枯病在我国主要产烟区普遍发生,其中以广东、广西、福建、湖南及贵州烟区危害最为严重。近年来,由于气候变化等方面原因,该病的发生范围在我国有由南向北蔓延之势。青枯菌作为复合种,具有丰富的种内遗传多样性,不同地理起源的青枯菌在进化过程中演化出明显的菌系多样性。目前,国际上已有三个公认的青枯菌亚分类系统,即生理小种、生化型和演化型。作为新的分类体系,演化型的划分能更精确的反映青枯菌这一复合种的地理起源及种内的遗传多样性。本研究从中国福建、广东、广西、贵州、云南、湖南、湖北、安徽、江西、重庆10个省市的烟区采集分离得到116个青枯菌菌株,对其生理小种、生化型和演化型进行了鉴定,并通过内切葡聚糖酶基因(eql)序列对其进行了系统发育分析,基于BOX-PCR技术对烟草青枯菌的多态性进行了研究。结果表明,中国烟草上分离得到的青枯菌均属于1号生理小种;生化型属于Ⅲ型(94.8%)和Ⅳ型(5.2%);演化型属于演化型Ⅰ型;基于eql基因系统发育分析表明,全部烟草青枯菌可以被划分为4个序列变种,即序列变种15、17、34和44,其中序列变种44所包含的菌株数在全部菌株中所占比例最高,为37.1%,主要分布在广西、云南、安徽、湖北、重庆5省市;采用BOX-PCR对116个菌株进行多态性分析表明BOX-PCR扩增出20条特异性条带,条带大小介于300～4 000bp,用UPGMA聚类分析法进行聚类分析,在相似系数为8 1%时可将这些菌株划分为13个类群。本文通过对中国不同省份烟草青枯菌的多样性进行研究,可为青枯病防治和抗青枯病品种选育和利用提供理论依据。

关键词：青枯菌菌系序列变种遗传多样性

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内生性枯草芽孢杆菌的分离、鉴定及其对芝麻枯萎病的防治效果

内生性枯草芽孢杆菌的分离、鉴定及其对芝麻枯萎病的防治效果

引用

中国植物病理学会第十届全国会员代表大会暨2014年学术年会及第四届中美植物病理学学术研讨会

作者：杨辉辉黄思良庞发虎黎起秦王坦广西大学农学院南阳师范学院生命科学与技术学院

由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的芝麻枯萎病为严重影响芝麻生产的土传性病害。为开发防治芝麻枯萎病的生防菌,笔者于2012年夏,从河南省南阳市采集芝麻样品,采用常规组织分离法得到166株内生细菌,经平板对峙和促生试验,筛选到3... 详细信息

由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的芝麻枯萎病为严重影响芝麻生产的土传性病害。为开发防治芝麻枯萎病的生防菌,笔者于2012年夏,从河南省南阳市采集芝麻样品,采用常规组织分离法得到166株内生细菌,经平板对峙和促生试验,筛选到3株对芝麻枯萎病菌***生长有抑制作用的枯草芽孢杆菌(A3-28、A4-2和B5-47)。利用细菌16S rDNA通用引物27F和1492R对3株内生菌的DNA进行PCR扩增,得到1 425～1 433bp的16S rDNA的片段。菌株A3-28、A4-2和B5-47的16S rDNA序列GenBank登录号分别为KJ000099、KJ008914和KJ000100。用BLAST程序进行同源性分析结果表明,供试3株内生菌的16S rDNA序列与GenBank中多株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的相关序列的同源性高达100%。依据菌株的形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析结果,将3株内生菌鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。为检测内生性枯草芽孢杆菌对芝麻枯萎病的生防效果,将芝麻种子(品种:韩芝1号)播种于蛭石与土壤按1:1混合的灭菌基质上,待芝麻幼苗长至2叶期后喷施病原菌分生孢子悬浮液(10～6个/mL),1天后分别喷施枯草芽孢杆菌的NB菌体悬浮液(10～7 cfu/mL),在接种后7～22天观察发病情况。试验结果表明,菌株A3-28、A4-2和B5-47对芝麻枯萎病盆栽防治效果分别为50.12%、46.3%和42.7%。供试3株内生性枯草芽孢杆菌中,菌株A3-28与A4-2对芝麻植株生长有明显促进作用,菌株A3-28有解有机磷和无机磷的活性,而菌株B5-47仅有解有机磷活性。3株生防菌均可在无氮培养基上生长。

关键词：芝麻内生性枯草芽孢杆菌枯萎病生物防治

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