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地昔尼尔对小鼠的致突变毒性研究

地昔尼尔对小鼠的致突变毒性研究

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：彭麟代娟娟季辉张军忍江善祥南京农业大学动物医学院

【目的】为保降地昔尼尔对靶动物的交全性,特别是人的食品消费安全,同时为制订地昔尼尔在动物性食品中最高残留限量提供科学依据,考察了其对小鼠的致突变毒性。【方法】精子畸形试验选用50只体重25～35 g的雄性昆明种小鼠,称重后随机分... 详细信息

【目的】为保降地昔尼尔对靶动物的交全性,特别是人的食品消费安全,同时为制订地昔尼尔在动物性食品中最高残留限量提供科学依据,考察了其对小鼠的致突变毒性。【方法】精子畸形试验选用50只体重25～35 g的雄性昆明种小鼠,称重后随机分成高(2/5 LD)、中(1/5 LD)、低(1/10LD)、5%羧甲基纤维素钠溶剂对照组和环磷酰胺阳性对照组,每组10只。环磷酰胺按40 mg·k·bw剂量腹腔注射,其余各组为灌胃给药,1日1次,连续5 d。首次给药后第35 d每组取5只颈椎脱臼法处死。取双侧附睾制片,镜检观察精子畸形。统计各剂量组正常精子检查数、畸形精子数及各类畸形精子数并统计各组精子畸形率及各类畸形精子百分率。每个剂量组的小鼠精子畸形率分别与阴性（溶剂）对照组的小鼠精子畸形率进行统计比较。骨髓微核试验选用体重25～30 g的昆明种小鼠,雌雄各半,称重后随机分成高(1/2 LD)、中(1/4 LD)、低(1/8 LD),溶剂对照组和环磷酰胺阳性对照组,每组雌、雄各8只。采用灌胃给药,给药两次,两次给药间隔24 h。第二次给药6 h后,采用颈椎脱臼法每组处死雌鼠和雄鼠各5只,取股骨骨髓制片,阅片,分别统计雌、雄小鼠各试验组的嗜多染红细胞（PCE）数、含微核嗜多染红细胞数及成熟红细胞（RBC）数,计算PCE/RBC值和PCE微核率。利用卡方检验分析阳性对照组、3个试验组小鼠PCE微核率与阴性（溶剂）对照组结果的差异显著性。【结果】精子畸形试验中阳性对照组精子畸形率为4.85%,与文献报道的环磷酰胺精子畸形率结果基本一致。各试验组与阴性对照组差异不显著（P>0.05）,与阳性对照组差异极显著（P<0.01）。该结果表明地昔尼尔在该试验条件下对小鼠无致精子畸形作用。骨髓微核试验中PCE/RBC的比值药为1（正常范围为0.6～1.2）,说明试验方法可靠。各试验组微核率与溶剂对照组相比差异不显著（P>0.05）,与阳性对照相比差异极显著（P<0.01）,说明地昔尼尔在该试验条件下对小鼠无致染色体突变作用。【结论】地昔尼尔对小鼠无致突变毒性。

关键词：地昔尼尔小鼠致突变精子畸形微核

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抗球虫新药纳川珠利在大鼠S9中代谢产物鉴定

抗球虫新药纳川珠利在大鼠S9中代谢产物鉴定

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：李素梅张可煜赵树春薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室河北科技大学

【目的】纳川珠利是一种新型三嗪类抗球虫药物,抗球虫指数(ACI)达到185～200,具有高效低毒的优点。目前关于纳川珠利的药代动力学研究仍属空白。本试验旨在通过对纳川珠利体外代谢产物的鉴定,探寻纳川珠利的代谢途径,为体内代谢研究兽... 详细信息

【目的】纳川珠利是一种新型三嗪类抗球虫药物,抗球虫指数(ACI)达到185～200,具有高效低毒的优点。目前关于纳川珠利的药代动力学研究仍属空白。本试验旨在通过对纳川珠利体外代谢产物的鉴定,探寻纳川珠利的代谢途径,为体内代谢研究兽药残留标志物的研究提供依据。【方法】1)纳川珠利与大鼠肝S9在NADPH还原系统存在的条件下进行孵育,反应终体积0.5ml;孵育空白组未加入纳川珠利。孵育时间为2.5h,反应终止后,2倍体积的乙酸乙酯萃取,涡旋离心,取上层液体40℃氮气吹干,乙腈复溶,0.22μm滤膜过滤后,分别进行HPLC和LC-MS检测,得出代谢产物分子的极性特性和分子量,结合常见的代谢途径,推测可能的分子结构。2)合成推测的分子结构,注射杆进样找到该分子的特征离子,利用MRM的方法,检测样品中是否有该物质,作为确证分子结构的依据。【结果】1)HPLC图谱显示纳川珠利经大鼠S9代谢后存在一个主要代谢产物,保留时间为2.5min,而纳川珠利的保留时间为12min,该试验结果提示该代谢产物极性较纳川珠利强;LC-MS检测该物质的分子量为310较纳川珠利分子量340少30,提示可能为纳川珠利的硝基还原产物M1。2)核磁鉴定结果显示成功合成了化合物M1,注射杆进样获得该化合物M1的2个特征离子分别为238,146。MRM方法检测代谢空白组、加M1空白组、代谢孵育组,结果显示代谢产物的保留时间、特征碎片均与M1相同,最终确证该代谢产物即为M1。【结论】该试验成功鉴定出纳川珠利与大鼠S9孵育后的主要代谢产物M1。采用兽药残留较常用的MRM方法进行确证试验。该试验为后续药物残留标志物的研究提供科学依据,同时也为新型二嗪类抗球虫药物的研发创造提供了可能。

关键词：纳川珠利体外代谢产物鉴定

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动物组织中甲氧苄啶和二甲氧苄啶残留量的测定

动物组织中甲氧苄啶和二甲氧苄啶残留量的测定

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：罗浩师张丽芳费陈忠王霄旸王米张可煜郑文丽孟新宇薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫病学重点实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留重点开放实验室

【目的】建立一种同时测定动物组织(鸡和猪的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪及鱼肉)中甲氧苄啶(trimethoprim,TMP)和二甲氧苄啶(diaveridine,DVD)残留量的高效液相色谱串联质谱检测方法。【方法】动物组织用乙腈提取,正己烷去脂,无水硫酸钠脱... 详细信息

【目的】建立一种同时测定动物组织(鸡和猪的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪及鱼肉)中甲氧苄啶(trimethoprim,TMP)和二甲氧苄啶(diaveridine,DVD)残留量的高效液相色谱串联质谱检测方法。【方法】动物组织用乙腈提取,正己烷去脂,无水硫酸钠脱水和浓缩后,过OASIS MCX固相萃取小柱净化,以4%氨水的乙腈溶液作为洗脱液洗脱后浓缩,滤膜过滤后,用高效液相色谱串联质谱测定。色谱柱为Waters Atlantis HILIC Silica柱,通过流动相0.1%甲酸铵水溶液+乙腈梯度分离,用电喷雾-串联质谱进行测定,正离子模式和多反应监测模式进行定性定量分析,以氘代甲氧苄啶为内标,内标法定量。【结果】TMP在九种组织中2～200μg/kg的添加范围内线性良好,DVD在九种组织中1～200μg/kg的添加范围内线性良好;在2、12和100μg/kg的添加水平,TMP在九种组织中的同收率都在78.2%～120.6%的范围内;而在1、6和50μg/kg的添加水平,DVD在九种组织的回收率都在80.2%～119.8%的范围内,TMP在各个组织各个浓度的日内相对标准偏差(RSD)均小于12.9%,日间相对标准偏差均小于15.4%;DVD在各个组织各个浓度的日内相对标准偏差(RSD)均小于14.2%,日间相对标准偏差均小于13.9%。TMP在各个组织的检测限均为1μg/kg,定量限为2μg/kg;DVD在各个组织的检测限为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg。【结论】建立了在猪和禽的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪+皮以及鱼肉+皮等九种动物组织中同时检测甲氧苄啶和二甲氧苄啶残留的高效液相色谱-串联质谱分析方法,本方法灵敏度高,重现性好,涉及的组织较广,适用面广,且准确度和精密度均满足残留检测的要求。

关键词：甲氧苄啶二甲氧苄啶残留 HPLC-MS/MS

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柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王丛丛张可煜郑文丽王霄旸费陈忠李涛薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗... 详细信息

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗球虫药,而药物靶标的鉴定是其中一个重要策略。前期工作中,我们发现柔嫩艾美尔球虫中存在细胞凋亡现象,然而介导该细胞凋亡途径的球虫相关蛋白,尚未见国内外有相关报道。本试验通过柔嫩艾美尔球虫细胞凋亡途径相关蛋白的发现,为抗球虫药物的研制提供新的药物靶标。【方法】通过SEM电镜扫描,观察柔嫩艾美尔球虫经地克珠利处理后,亚细胞结构变化,确定球虫是否存在细胞凋亡现象;利用caspase不同抗体检测试剂盒,确定经地克珠利诱导后,所引发的细胞凋亡通路;通过NCBI BLAST工具,设计PCR保守引物,扩增序列;通过原核表达体系,表达扩增序列,检测该重组蛋白是否具有caspase活性。【结果】在透射电镜下,对照组***第二代裂殖子细胞核双层核膜结构完整,染色质均匀附着在核膜内侧面,且细胞内没有大的空泡。药物处理组***第二代裂殖子细胞核染色质明显减少、发生异染色质化,染色质固缩边集在核膜四周呈新月状小体,胞质中出现了大量的空泡,出现了类似多细胞生物的凋亡特征。使用Promega,不同Caspase活性检测试剂盒,我们发现,地克珠利处理后,相对对照组,Caspase-3活性提高了5倍以上,而Caspase-8活性两组基本相同。通过PCR,我们扩增得到680bp片段,该片段与刚体弓形虫caspase同源蛋白具有很高的同源性。利用大肠杆菌表达体系,我们得到了该片段的重组蛋白,经检测,该重组蛋白具有很高的Caspase-3活性。【结论】我们首次在球虫研究中,发现了caspase-3同源蛋白,为研制抗球虫药物提供了新的药物靶点。

关键词：球虫柔嫩艾美尔球虫 caspase蛋白

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GADD45a与p38/JNK MAPKs信号转导通路在呋喃唑酮诱导的细胞S期阻滞中作用机理的研究

GADD45a与p38/JNK MAPKs信号转导通路在呋喃唑酮诱导的细胞S期阻...

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：孙雨汤树生靳溪张朝明赵文霞肖希龙中国农业大学动物医学院

【目的】探讨GADD45a与p38/JNK MAPKs信号转导通路在呋喃唑酮(Furazolidone,FZD)诱导的人肝癌细胞系(human hepatoblastoma cell line,HepG2)生长增殖及S期阻滞中的作用机理。观察使用RNAi技术,干扰GADD45a基因在HepG2细胞的表达后,对呋喃唑酮诱导的HepG2细胞S期阻滞,以及对p38/JNK MAPKs信号转导通路及其下游细胞周期检测点表达的影响。【方法】以HepG2细胞为实验材料,应用RNAi技术,干扰GADD45a基因在HepG2细胞的表达,并且使用不同浓度的特异性JNK通路抑制剂(SP600125)与p38通路抑制剂(SB203580)对呋喃唑酮刺激的HepG2细胞进行干预,分别以MTT法、流式细胞仪、Western Blotting以及QRT-PCR法检测HepG2细胞存活率、细胞S周期的变化、磷酸化JNK/p38蛋白的表达及下游细胞周期检测点基因、蛋白的变化。【结果】呋喃唑酮染毒HepG2细胞后,能够诱导细胞发生明显的S期阻滞现象,同时降低细胞存活率,并且显著激活GADD45a、磷酸化p38、cyclinD1、cyclinD3和CDK6的表达,抑制磷酸化JNK的表达。相反,干扰GADD45a基因在HepG2细胞的表达后,能够显著缓解呋喃唑酮诱导的细胞S期阻滞,并且明显提高细胞存活率,同时能够下调磷酸化p38、cyclinD1、cyclinD3和CDK6的表达,上调磷酸化JNK的表达。【结论】JNK与p38通路在呋喃唑酮诱导的HepG2细胞S期阻滞与细胞增殖抑制中具有相反的作用。GADD45a的表达上调可以促进呋喃唑酮诱导的HepG2细胞S期阻滞与细胞增殖抑制现象,并且该现象是通过激活GADD45a下游的p38通路与抑制其下游的JNK通路米实现的。GADD45a与p38/JNK MAPKs共同调节下游细胞周期检测点(cyclinD1,cyclinD3和CDK6)的活性来诱导HepG2细胞周期的S期阻滞现象。

关键词： GADD45a RNAi p38/JNK MAPKs 呋喃唑酮 S期阻滞

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苏丹红系列染料致小鼠氧化损伤的研究

苏丹红系列染料致小鼠氧化损伤的研究

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：官佳懿沈红陈舒楠张艳京关亚飞马龙飞冯学俊北京农学院动物科学技术学院

【目的】苏丹红(SD)染料是一种人工合成的脂溶性偶氮类染色剂,主要包括SDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。目前,研究最多的为SDⅠ。有研究表明,肝脏是SDⅠ产生致癌性的主要器官,SDⅠ进入体内后主要经胃肠道微生物还原酶、肝和肝外组织微粒体和细胞质的... 详细信息

【目的】苏丹红(SD)染料是一种人工合成的脂溶性偶氮类染色剂,主要包括SDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。目前,研究最多的为SDⅠ。有研究表明,肝脏是SDⅠ产生致癌性的主要器官,SDⅠ进入体内后主要经胃肠道微生物还原酶、肝和肝外组织微粒体和细胞质的还原酶代谢形成胺类物质,如苯胺,SDⅠ致癌机理可能是苯胺诱发肝脏细胞基因发生变异所致。丙二醛(MDA)是脂质过氧化的最终产物,它可反应脂质过氧化程度,超氧化歧化酶(SOD)能够清除超氧阴离子,保护细胞免受损伤,对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要作用。本研究通过检测系列SD染毒小鼠的肝脏和肾脏MDA和SOD,分析SD对小鼠肝脏和肾脏功能的影响。【方法】首先分别将不同剂量苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(0、40、80、160mg/kg)给小鼠腹腔注射,连续注射染毒12天。采用TBA和ELISA法测定肝脏和肾脏组织MDA和SOD。【结果】肝脏组织MDA结果为低剂量SDⅡ和SDⅢ组MDA值明显高于对照组和SDⅠ及SDⅣ组;中剂量四种SD组MDA值也明显高于对照组,但SD组之间差异不显著;高剂量四种SD组MDA值显著高于对照组,其中以SDⅠ和Ⅳ组最明显。肾脏组织MDA分析结果是低剂量SDⅠ组MDA值极显著高于对照组,而SDⅣ组MDA值极明显高于对照组;中剂量除SDⅡ组,其它三组MDA值明显高于对照组,其中SDⅣ组最显著;高剂量四种SD组MDA值极明显高于对照组,SDⅡ组与其它三组之间差异不显著。肝脏组织SOD分析结果为低剂量四种SD组SOD值明显高于对照组,但各组之间比较差异不显著;中剂量SDⅠ组SOD值明显高于对照组,其它三组不明显;高剂量四种SD组与对照组之间差异不显著。三个剂量SDⅠ组肾脏组织SOD值与对照组没有差异,SDⅡ和Ⅲ组明显高于对照组,而SDⅣ组肾脏组织SOD值显著低于对照组。【结论】结果表明SDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ致小鼠肝和肾组织不同程度的损伤。本项研究为2012大学生科学研究计划项目。

关键词：苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 小鼠 MDA SOD

来源：评论

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亚抑菌浓度鱼腥草醇提物对金黄色葡萄球菌α溶血素分泌的影响

亚抑菌浓度鱼腥草醇提物对金黄色葡萄球菌α溶血素分泌的影响

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王建锋邓旭明吉林大学

【目的】金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种广泛分布的机会致病菌,可引起宿主(人和动物)一系列致命性的感染,如心内膜炎、骨髓炎、角膜炎、肺炎以及脓毒病综合征。而金黄色葡萄球菌的致病性强弱与其分泌的各种毒力因子密切相... 详细信息

【目的】金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种广泛分布的机会致病菌,可引起宿主(人和动物)一系列致命性的感染,如心内膜炎、骨髓炎、角膜炎、肺炎以及脓毒病综合征。而金黄色葡萄球菌的致病性强弱与其分泌的各种毒力因子密切相关,尤其是α溶血素。为了研究亚抑菌浓度鱼腥草醇提物对金黄色葡萄球菌α溶血素分泌的影响,【方法】本论文通过最低抑菌浓度的测定并应用溶血试验、Western-blot分析、荧光定量PCR试验以及细胞毒性试验考察亚抑菌浓度的鱼腥草醇提物对金葡菌α溶血素分泌的影响。【结果】结果显示,鱼腥草醇提物对9株金葡菌的最小抑菌浓度范围为16-64 mg/ml,表明鱼腥草醇提物对金黄色葡萄球菌具有一定的抗菌活性;而溶血试验、Western-blot和细胞毒性试验显示:亚抑菌浓度鱼腥草醇提物呈剂量依赖式抑制金葡菌α溶血素的分泌,尤其当浓度为0.16mg/ml时,基本上能完全抑制金葡菌α溶血素的分泌;因为α溶血素受到agr二元调控系统的调节,因此我们也应用荧光定量PCR实验分析了经亚抑菌浓度鱼腥草醇提物作用后金葡菌α溶血素编码基因hla以及其正向调节系统agr相对表达水平,结果表明鱼腥草醇提物也是以一种剂量依赖式抑制两者的转录。【结论】目前,抗细菌毒力因子而不是直接抑制或杀灭病原菌来控制细菌性感染已成为国际上新药物研发热点。这一策略主要是抑制细菌毒力因子的分泌或者活性来达到减低甚至消除病原菌的致病力,而对靶细菌不直接产生实质性选择压力。本研究中,亚抑菌浓度鱼腥草醇提物在不影响金葡菌生长的情况下,却能抑制α溶血素的分泌,表明鱼腥草醇提物可能是一种潜在的抗毒力药物。本研究可能为抗金葡菌感染提供一种新的策略。

关键词：金黄色葡萄球菌 α溶血素鱼腥草抗毒力

来源：评论

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达氟沙星对LLC-PK1细胞氧化应激机制研究

达氟沙星对LLC-PK1细胞氧化应激机制研究

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：俞春红潘任桃孙志良刘兆颖湖南省兽药工程技术研究中心湖南农业大学动物医学院

【目的】达氟沙星(danofloxacin)是动物专用的第二代喹诺酮类药物,该类药物80%以原形从尿中排泄,尿药浓度高于血药浓度10倍左右,可对肾脏可造成不同程度的损害,但是其损伤机制还不是很清楚。本试验通过研究达氟沙星诱导体外培养的猪近... 详细信息

【目的】达氟沙星(danofloxacin)是动物专用的第二代喹诺酮类药物,该类药物80%以原形从尿中排泄,尿药浓度高于血药浓度10倍左右,可对肾脏可造成不同程度的损害,但是其损伤机制还不是很清楚。本试验通过研究达氟沙星诱导体外培养的猪近端肾小管上皮细胞(LLC-PK1)产生氧化应激的作用,初步探究达氟沙星造成肾损伤的机制。【方法】以不同浓度的达氟沙星孵育LLC-PK1细胞不同时间后,在倒置显微镜观察细胞形态上的变化,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测达氟沙星对细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率,初步研究达氟沙星对LLC-PK1细胞的毒作用。然后通过检测细胞内活性氧ROS、脂质过氧化物MDA,氧化还原酶SOD影响来探究达氟沙星对LLC-PK1细胞氧化还原系统的影响。【结果】结果表明,达氟沙星呈时间和剂量依赖性诱发体外培养的LLC-PK1细胞增值抑制,但是只有400μM孵育48h才对细胞产生较大程度的凋亡,凋亡率为22.7%,其余的都在5%以下。另外,达氟沙星能浓度依赖性诱导细胞内ROS及MDA的产生,在所检测的时间点(6h、12h、24h、48h、72h)内,24h细胞内ROS达到最大值,继续延长孵育时间ROS逐渐减少,并且抗氧化剂GSH、NAC能极显著降低ROS的产生。MDA虽有增加的趋势,但是增加的值比较低,最大为2.72nmol/mg蛋白。说明达氟沙星对LLC-PK1细胞的氧化损伤比较轻微,并且达氟沙星能一定程度诱导SOD活性增加来清除细胞内过多的氧自由基。【结论】达氟沙星能一定程度低诱导体外培养的LLC-PK1细胞产生氧化应激,但是同时也能激发细胞内抗氧化活性降低氧化损伤。

关键词：达氟沙星 LLC-PK1细胞氧化应激肾损伤机制

来源：评论

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C57BL/6J小鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

C57BL/6J小鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

引用

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：李晓冲徐尚张秀英李宏张燕华东北农业大学动物医学院

【目的】人类饮食结构的改变,导致非酒精性脂肪肝的发病率逐年上升。为深入研究非酒精性脂肪肝的发病机制和研发有效防治药物,建立一个与人类病变相似的动物模型极为重要。本试验分别采用高脂旨饲料和高脂饲料复合四氯化碳对C57BL/6J小... 详细信息

【目的】人类饮食结构的改变,导致非酒精性脂肪肝的发病率逐年上升。为深入研究非酒精性脂肪肝的发病机制和研发有效防治药物,建立一个与人类病变相似的动物模型极为重要。本试验分别采用高脂旨饲料和高脂饲料复合四氯化碳对C57BL/6J小鼠进行诱导,研究建立非酒精性脂肪肝模型的条件。【方法】将雄性C57BL/6J小鼠随机分成高脂组、高脂复合四氯化碳组(复合组)和正常组,每组15只。各组分别于饲喂第4、6、8周眼球采血处死5只,称小鼠体重与肝重,测血清中生化指标情况,并取肝组织做病理切片(HE染色、油红O染色)。根据非酒精性脂肪肝诊断标准(草案)(2010),通过肝指数、肝脏病理检查结果(肉眼观测肝脏变化、镜检观察肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润和纤维变性)与血清生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷酰转肽酶、甘油三酯和总胆固醇)来综合评价非酒精性脂肪肝的进程。【结果】结果显示,第4周高脂组和复合组动物的肝指数升高,分别为正常组的1.43倍和1.40倍(P<0.05),在第6～8周两组均可达到正常组的1.6倍以上(P<0.01)。病理检查结果表明,4周时,高脂组动物出现肝脏脂肪变性,6～8周时,脂肪变性逐渐加重;整个过程中复合组动物也出现肝脏脂肪变性,变性程度低于高脂组,但纤维化和炎性浸润较高脂组明显。血清生化检查结果表明4周时,高脂组中谷丙转氨酶和甘油三酯分别为正常组的3.24倍和2.09倍(P<0.01);复合组中谷丙转氨酶和甘油三酯分别为正常组的2.95倍和3.45倍(P<0.01),6～8周时高脂组和复合组中所有生化指标均明显高于正常组,并持续较高水平。整个造模过程中,复合组中谷草转氨酶明显高于高脂组,提示肝组织纤维化过程加速。【结论】综合以上结果,经饲喂高脂饲料4周,高脂组和高脂复合四氯化碳组均达到了非酒精性脂肪肝评定的标准,且均能在6～8周保持稳定;考虑到复合组纤维化和炎性浸润明显,所以高脂饲喂更适合于建立小鼠非酒精性脂肪肝模型。

关键词：非酒精性脂肪肝高脂饲料四氯化碳

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有机砷对鸡肉组织、蔬菜、土壤中总砷残留规律的研究

有机砷对鸡肉组织、蔬菜、土壤中总砷残留规律的研究

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王米姚秀娟孟新宇薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】洛克沙砷和阿散酸是一类广泛应用于畜禽养殖业中有机砷类饲料添加剂,为了研究其对食品和环境中砷含量的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙砷和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中,采用盆栽试验模拟不同污染程... 详细信息

【目的】洛克沙砷和阿散酸是一类广泛应用于畜禽养殖业中有机砷类饲料添加剂,为了研究其对食品和环境中砷含量的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙砷和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中,采用盆栽试验模拟不同污染程度的土壤种植生菜和菠菜,共设4个剂量组,每个剂量6个重复,每盆装土3Kg,每Kg土壤分别添加0g、5g、10g、20g鸡粪,采用氢化物-原子吸收分光光度法对各样品中总砷含量进行测定。【结果】（1）建立鸡肉组织、蔬菜和土壤中总砷含量的检测方法。首先用酸消解法对样品进行前处理,将各种形态的砷转化为可溶性的砷盐,用还原剂将全部砷还原为三价态的砷,然后采用氢化物-原子吸收分光光度法进行分析测定。其结果为砷在1-10 ng/ml范围内具有较好的线性关系（R>0.99）。（2）在各组织中,饲喂阿散酸和洛克沙砷肝脏中砷残留量最大（分别为0.3082mg/kg和0.5179mg/kg）,其次是心脏（分别为0.1121mg/kg和0.1797mg/kg）和肌胃（分别为0.0813mg/kg,和0.1286mg/kg）,胸肌（分别为0.09462 mg/kg和0.0599mg/kg）和腿肌（分别为0.0456 mg/kg和0.051 1 mg/kg）残留较少。停药一周后,砷残留量有了明显的降低,停药两周后,与空白对照组水平相当。（3）添加鸡粪均能够提高蔬菜及土壤中总砷含量,与0g/kg鸡粪添加量相比,3个剂量组样品总砷含量显著升高（p<0.05）;添加含有机砷鸡粪,生菜可食部分总砷残留量大于菠菜;在土壤中,均是添加含洛克沙砷鸡粪组总砷残留量高。蔬菜和土壤中总砷含量均与鸡粪添加量呈显著性正相关,两种蔬菜相比,生菜更容易富集砷。【结论】鸡肉组织中总砷含量与饲料中有机砷添加呈显著性相关,因此饲料中添加有机砷必须遵循休药期;蔬菜和土壤中总砷含量均与鸡粪添加量呈显著性相关,且随着鸡粪添加量的增加总砷含量升高,因此慎将含有机砷的鸡粪用于蔬菜种植,尤其是用于生菜种植。

关键词：有机砷鸡肉组织蔬菜土壤总砷

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