【目的】单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是重要的食源性病原菌,可导致人兽共患病——李斯特菌病(listeriosis)。Lm对环境抵抗力强,能够耐受低温和胆盐,可以形成生物被膜,是动物源性食品贮存和加工场所的重要污染来源。细菌双组分信号转导系统(Two-Component Signal Transduction System,TCS)负责感应环境信号刺激并调控菌体相关基因表达以适应环境变化而生存。研究Lm的TCS能为揭示Lm的生存和致病机理提供重要信息以及为食品中Lm的防控提供理论依据。【方法】本研究以Lm食品分离株LM201为研究材料,以RS08195/RS08200这一对TCS为研究对象,通过构建缺失突变株S6004和测定S6004的生物学特性,以了解RS08195/RS08200对Lm在不同环境下的生存能力的影响和对小鼠毒力的影响。【结果】在生长速率测定、常规生化反应和氧化应激能力测定中,S6004与亲本株LM201相比,均为无显著差异;在溶血性测定中,亲本株溶血效价为24,S6004的为26;在生物被膜形成能力(37℃)和在牛奶中的增殖能力测定中,S6004与亲本株相比,均为显著降低(P<0.05);上皮细胞Caco-2的黏附和侵袭试验、RAW264.7细胞的吞噬试验,以及线虫毒力试验结果显示,S6004与亲本株相比,无显著差异;小鼠LD50的测定结果显示,亲本株的LD50为9.31×104CFU,S6004的为2.36×105CFU,通过非配对实验设计统计学分析可知,S6004的毒力下降差异不显著(t<2.2281);小鼠组织载菌量测定结果显示,在肝脏中,S6004与亲本株的细菌量无显著差异,在脾脏中,S6004的细菌量(24h时)比亲本株的显著减少(P<0.05)。【结论】与亲本株LM201相比,缺失株S6004在37℃和4℃的生长速率及常规生化特性均没有发生改变,但是对动物红细胞的溶血性显著增强,缺失株S6004的生物被膜形成能力和在牛奶中的增殖能力显著降低;与亲本株LM201相比,缺失株S6004对细胞的黏附能力、侵袭能力以及抗吞噬能力均无显著性差异,对小鼠和线虫的毒力没有发生明显改变。
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