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Studies on the activation of isocitrate dehydrogenase kinase/phosphatase（AceK） by Mn2+ and Mg2+

Studies on the activation of isocitrate dehydrogenase kinase...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Yanxia Yin Yadan Gao Guohua Jiang 魏群 Department of Biochemistry and Molecular Biology Beijing Normal UniversityBeijing Key Laboratory

Isocitrate dehydrogenase kinase/phosphatase（AceK） is a bifunctional enzyme with both kinase and phosphatase activities that are activated by *** have studied the interactions of Mnand Mg with AceK using isothermal titration calorimetry（ITC） combined with molecular docking simulations and show for the first time that Mn also activates the enzyme *** Mn and Mg exert their effects by different *** they have similar binding constants(of 1.11×10～5 and 0.98×10～5 M,respectively) for AceK and induce conformational changes of the enzyme they do not compete for the same binding *** Mn appears to bind to the regulatory domain of AceK,and its effect is transmitted to the active site of the enzyme by the conformational change that it induces.

关键词： Kinase phosphatase AceK interaction binding metal ions

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Analysis of alternative splicing events by RNA sequencing in the ovaries of Xiang pig at estrous and diestrous

Analysis of alternative splicing events by RNA sequencing in...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Tang LT Ran XQ Mao N Zhang FP Niu X Ruan YQ Yi FL Li S Wang JF Institute of Agro-Bioengineering/College of Animal Science Guizhou University Tongren University

Alternative splicing (AS) is an important mechanism for controlling gene expression, which regulates multiple biological processes in higher organisms. Chinese indigenous Xiang pig has distinctive biological characteristics, such as small size,early sexual maturity, lower litter size and not very clear exhibition of estrous behaviors. To further understand how AS responds to estrous cycles in Xiang pig, the genome-wide analysis of AS events was performed by RNA-seq method in Xiang

关键词： Analysis of alternative splicing events by RNA sequencing in the ovaries of Xiang pig at estrous and diestrous RNA

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JNK-mediated microglial DICER degradation potentiates inflammatory responses to induce dopaminergic neuron loss

JNK-mediated microglial DICER degradation potentiates inflam...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Qing Wang Qian He Yifei Chen Wei Shao Chao Yuan Yizheng Wang Institute of Military Cognitive and Brain Sciences Academy of Military Medical Sciences National Clinical Research Center for Aging and Medicine Huashan HospitalFudan University

Microglial DICER was phosphorylated at serine 1456 by c-jun N-terminal kinase(JNK) and downregulated in response to 1-methyl-4-phenylpyridinium(MPP+),a causative agent in *** of JNK phosphorylation of DICER at serine 1456 rescued the MPP+-induced DICER degradation,suppressed microglial inflammatory process,and prevented the loss of tyrosine hydroxylase-expressing neurons in the mouse MPTP ***-mediated microglial DICER degradation potentiates inflammation to induce dopaminergic neuronal ***,preventing microglial DICER degradation could be a novel strategy for controlling neuroinflammation in PD.

关键词： DICER Microglia Inflammation Degradation Phosphorylation

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Aptamer/polydopamine nanospheres complex based fluorescent biosensor for sensitive and selective detection of ochratoxin A

Aptamer/polydopamine nanospheres complex based fluorescent b...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Li-Zhuan Zhang Xu-Hua Zhao Department of Biochemistry and Molecular Biology Shanxi Medical University

In this work,based on the high fluorescence quenching efficiency of polydopamine nanospheres(PDANS) and the specific recognition characteristic of aptamer,we construct a rapid,simple,sensitive and economical fluorescent biosensor for "turn-on" detection of ochratoxin A(OTA).In the absence of OTA,the fluorescence of FAM was readily quenched due to the strong binding between aptamer and *** the presence of OTA,the conformation of the OTA-specific aptamer changed from a random-coil to an antiparallel G-quadruplex,which resulted in the dissociation of the FAM from the surface of PDANS and the increasing of fluorescence *** method allowed quantitative detection of OTA with a detection limit of 20 ***,it was applied for the detection of OTA in red wine samples and showed satisfactory results.

关键词： polydopamine nanospheres Fluorescence Aptamer OTA detection Biosensor

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转录因子YY1通过直接激活磷酸戊糖途径促进肿瘤细胞增殖

转录因子YY1通过直接激活磷酸戊糖途径促进肿瘤细胞增殖

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：汪慧敏李燕君黄灿赵和照江启慧吴寿荣重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室国家“111计划”生物力学与组织修复工程学科创新引智基地重庆大学附属肿瘤医院&重庆市肿瘤医院

肿瘤细胞由于其自身的快速增殖、应对氧化应激和对生物大分子的需求会改变其自身代谢。转录因子阴阳1(YY1)在多种肿瘤中呈高表达,并且对肿瘤细胞增殖和转移发挥重要作用。然而,它在肿瘤细胞代谢重编程中是否起到调控作用尚未有报道。本... 详细信息

肿瘤细胞由于其自身的快速增殖、应对氧化应激和对生物大分子的需求会改变其自身代谢。转录因子阴阳1(YY1)在多种肿瘤中呈高表达,并且对肿瘤细胞增殖和转移发挥重要作用。然而,它在肿瘤细胞代谢重编程中是否起到调控作用尚未有报道。本项目中,我们发现了YY1作为转录因子能直接激活磷酸戊糖途径的限速酶葡萄糖六磷酸脱氢酶(G6PD)的转录,从而促进G6PD的表达,导致肿瘤细胞代谢重编程。通过激活肿瘤细胞戊糖磷酸途径(PPP),YY1促进核苷酸和NADPH的生成;而核苷酸和NADPH分别是细胞DNA合成的原料和降低肿瘤细胞内活性氧水平的关键还原剂,是肿瘤细胞快速增值的关键因子。此外,实验研究结果也揭示了在缺乏肿瘤抑制因子p53的条件下,YY1仍然可直接激活G6PD的转录水平。本项目研究不仅阐明了YY1以p53非依赖性方式调控G6PD并激活肿瘤细胞磷酸戊糖途径,同时也揭示了YY1是肿瘤细胞代谢重编程的关键因子,并通过调控肿瘤细胞代谢重编程方式促进肿瘤细胞快速增殖。

关键词： YY1 磷酸戊糖途径(PPP) 葡萄糖六磷酸脱氢酶(G6PD) 细胞代谢重编程 p53非依赖性

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草鱼白细胞介素-2的重组表达及功能鉴定

草鱼白细胞介素-2的重组表达及功能鉴定

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：吕梦圆周红汪新艳电子科技大学信息生物学研究中心电子科技大学生命科学与技术学院

白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)又被称为T细胞生长因子(T cell growth factor,TCGF),是IL-2家族中的一员。在哺乳动物中,IL-2能够促进T细胞的增殖和分化;不仅如此,它还是细胞毒性T淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞的生长因子和刺激... 详细信息

白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)又被称为T细胞生长因子(T cell growth factor,TCGF),是IL-2家族中的一员。在哺乳动物中,IL-2能够促进T细胞的增殖和分化;不仅如此,它还是细胞毒性T淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞的生长因子和刺激因子,因而被用于黑色素瘤等癌症的治疗。鱼类il2基因早在2005年就从红鳍东方鲀中发现,但至今,有关鱼类Il-2功能的认识仍然相对匮乏。在本研究中,我们获得了草鱼Il-2全长编码序列,它编码一个含141个氨基酸的蛋白。生物信息学分析显示:该蛋白由含20个氨基酸的信号肽和121个氨基酸的成熟肽构成,可能含有3对二硫键。荧光实时定量PCR检测显示:草鱼il2 mRNA在胸腺和心脏中表达量最高,在鳃、头肾和肌肉中次之,在肠,脑,中肾,脾和皮肤中表达量较低。通过原核表达及变复性的方法,我们获得了重组草鱼Il-2蛋白(rgcIl-2)。体外实验发现:1)rgcIl-2可促进草鱼头肾白细胞(HKLs)的增殖,且它可显著上调HKLs中ifng及foxp3mRNA的表达。这说明在草鱼头肾中,Il-2可能参与T细胞的增殖和分化;2)在同一细胞模型中,rgcIl-2极显著上调穿孔素和颗粒酶的mRNA水平(近10倍),暗示Il-2可以刺激HKLs中的某类胞毒性细胞。进而,我们通过CFSE/PI双染结合流式细胞术分析发现:rgcIl-2刺激的HKLs对草鱼肾细胞株的杀伤作用相对未刺激组有显著提高,但具体刺激的胞毒细胞类型还需要深入研究确定。

关键词：草鱼 Il-2 克隆重组表达增殖基因表达细胞毒性

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杨梅素抑制Tau蛋白修饰、积聚及毒性的机制研究

杨梅素抑制Tau蛋白修饰、积聚及毒性的机制研究

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：戴斌刘嘉琪王侃刘晓灵陈杰梁毅病毒学国家重点实验室武汉大学生命科学学院

自噬在细胞内蛋白质积聚和功能损害的细胞器清除过程中扮演着重要的角色。Tau蛋白的异常磷酸化与Tau蛋白毒性直接相关,也是阿尔茨海默病另一个重要的病理特征。我们在体外纯化了Tau蛋白及其病理突变体Tau-K280,通过硫黄素T结合实验和透... 详细信息

自噬在细胞内蛋白质积聚和功能损害的细胞器清除过程中扮演着重要的角色。Tau蛋白的异常磷酸化与Tau蛋白毒性直接相关,也是阿尔茨海默病另一个重要的病理特征。我们在体外纯化了Tau蛋白及其病理突变体Tau-K280,通过硫黄素T结合实验和透射电子显微镜观察到低浓度杨梅素显著抑制了Tau蛋白在体外的积聚,通过等温滴定量热法检测到杨梅素与Tau蛋白具有中等强度的结合。我们发现杨梅素明显降低了SH-SY5Y和293T细胞中Tau蛋白及其病理突变体396位丝氨酸的磷酸化修饰水平,同时观察到杨梅素显著促进细胞自噬。我们通过超速离心取沉淀做免疫印迹观察到杨梅素显著抑制Tau蛋白的胞内聚集;同时观察到LC3B在细胞内募集到溶酶体周围以及胞内Tau蛋白聚集体的减少。上述实验表明,杨梅素通过细胞自噬抑制胞内Tau蛋白异常磷酸化。我们通过MTT和细胞早期凋亡检测发现杨梅素能够显著降低由刚果红诱发的细胞毒性以及由Tau蛋白片段引起的细胞早期凋亡水平。综上所述,体外杨梅素直接结合Tau蛋白片段抑制其积聚,细胞内杨梅素通过细胞自噬途径抑制Tau蛋白的异常磷酸化以及胞内积聚从而提高细胞活性。上述研究有益于阐释杨梅素抑制Tau蛋白的病理修饰和积聚的分子机制,为基于杨梅素的小分子抑制剂的设计和研发奠定基础。

关键词： Tau蛋白阿尔茨海默病磷酸化修饰蛋白质聚集自噬细胞凋亡

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CNPY2通过抑制p16/cyclin D1/Rb通路促进小鼠心脏修复

CNPY2通过抑制p16/cyclin D1/Rb通路促进小鼠心脏修复

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：殷文娟宋慧芳何生解军李仁科山西医科大学

目的:明确CNPY2在小鼠心梗后表达的变化。借助CNPY2基因敲除(CNPY2-KO)小鼠和转基因(CNPY2-TG)小鼠,明确CNPY2是否能通过细胞增殖的调控来影响心梗后心功能,并探讨可能的分子机制。方法:结扎C57BL/6(Wildtype,WT)小鼠左冠状动脉前降支,... 详细信息

目的:明确CNPY2在小鼠心梗后表达的变化。借助CNPY2基因敲除(CNPY2-KO)小鼠和转基因(CNPY2-TG)小鼠,明确CNPY2是否能通过细胞增殖的调控来影响心梗后心功能,并探讨可能的分子机制。方法:结扎C57BL/6(Wildtype,WT)小鼠左冠状动脉前降支,制备心梗模型,real time-PCR检测术后心脏CNPY2mRNA表达的变化。结扎WT小鼠、CNPY2-KO小鼠和CNPY2-TG小鼠左前降支制备心梗模型,心脏超声检测评价心功能;Masson染色分析瘢痕厚度和梗死百分比。BrdU掺入技术评估细胞增殖水平,real time-PCR和Western blot方法检测p16的表达。Western blot检测p16下游通路蛋白(cyclin D1、CDK4、CDK6、磷酸化Rb和总Rb蛋白)的表达。结果:(1)小鼠心梗后,心脏组织中CNPY2 mRNA水平显著降低。(2)相比WT小鼠,CNPY2-KO小鼠心梗术后28天心脏功能显著降低,瘢痕增大,瘢痕区变薄。(3)心梗术后3天,CNPY2敲除降低了小鼠心脏梗死区和边缘区的BrdU阳性细胞百分数。(4)在假手术组和心梗术后3天,CNPY2敲除增加p16 mRNA表达和p16阳性细胞百分数。(5)假手术组和心梗术后3天,CNPY2敲除激活p16/cyclin D1/Rb通路,降低了cyclin D1、CDK4、CDK6、磷酸化Rb和总Rb蛋白的表达。(6)过表达CNPY2增高了心梗术后3天心脏BrdU阳性细胞百分比,显著抑制了p16/cyclin D1/Rb通路。结论:CNPY2可能通过调控p16/cyclin D1/Rb通路促进心梗后细胞增殖,改善心功能。

关键词： CNPY2 心梗心脏修复

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原花青素B2经Akt/FoxO4通路干预内皮细胞衰老的实验研究

原花青素B2经Akt/FoxO4通路干预内皮细胞衰老的实验研究

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：熊海容李聪伍学翠刘朝奇肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学)

原花青素B2(procyanidin B2,PCB2)是一种纯天然的多酚化合物,其具有显著的抗氧化活性,参与多种代谢性相关疾病如糖尿病、脂质代谢、炎性疾病、癌症、氧化应激及衰老等的调控,具有多种药理学活性。本实验拟应用高脂诱导血管内皮细胞(MS-1... 详细信息

原花青素B2(procyanidin B2,PCB2)是一种纯天然的多酚化合物,其具有显著的抗氧化活性,参与多种代谢性相关疾病如糖尿病、脂质代谢、炎性疾病、癌症、氧化应激及衰老等的调控,具有多种药理学活性。本实验拟应用高脂诱导血管内皮细胞(MS-1)衰老的损伤模型,研究PCB2的干预作用及其可能的分子机制。本实验使用游离脂肪酸棕榈酸(PA)50μmol/L处理MS-1细胞建立细胞衰老模型,通过细胞增殖活力和β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性以及细胞周期相关基因的表达评估内皮细胞衰老;加入PCB2不同剂量干预,检测衰老相关指标及Akt/FoxO4通路的蛋白表达水平的变化情况。MS-1细胞经PA处理后SA-β-Gal阳性细胞着色阳性明显增加,细胞周期相关基因如p53等上调,表明细胞周期阻滞在G0/G1期,说明PA处理后能诱导内皮细胞衰老发生;经PCB2(50μg/ml)干预后能够有效改善PA诱导的细胞衰老与细胞周期阻滞的现象。相比于正常组,经PA处理后Akt活化,其表达由胞核转至胞浆,在胞核中表达明显减少;Akt进一步活化下游信号,抑制FoxO4的磷酸化,使其在细胞核中明显增加;而应用PCB2(50μg/ml)处理后能有效逆转这一现象;PCB2对棕榈酸诱导的血管内皮细胞衰老有明显的保护作用,其可能的调控机制为Akt/FoxO4信号通路。

关键词：原花青素B2 内皮细胞 Akt FoxO4 细胞衰老

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Pedal and brake the innate immune sensing of pathogen and damage

Pedal and brake the innate immune sensing of pathogen and da...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Shengduo Liu Qian Zhang Shiying Wu Fansen Meng Shasha Chen Pinglong Xu Life Sciences Institute and Innovation Center for Cell Signaling Network Zhejiang University

Cytosolic RNA/DNA sensing warns host cells both microbe invasion and cellular damage,and to initiate counter measures by igniting cascades through MAVS/STING adaptors,TBK1/IKKεkinases and IRF3 transcription ***,how the magnitude of this recently defined innate immune sensing is controlled remains largely *** functional screens of proteomics and analyses of interactome,we defined a few interesting players in governing of cytosolic nucleic acid sensing,via manipulating of phosphate moieties or changing cellular address of *** findings identify some physiological regulators of innate immune sensing,and provide mechanistic insights as well as new prevention strategies for both pathogen infection and tumorigenesis.

关键词： innate immune sensing protein modification cellular damage interferon infection

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