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病理浓度锌离子促进Tau蛋白病理突变体磷酸化修饰和积聚

病理浓度锌离子促进Tau蛋白病理突变体磷酸化修饰和积聚

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：胡吉英张德林刘晓灵高莹莹曾嫣陈杰杜海宁梁毅病毒学国家重点实验室武汉大学生命科学学院

阿尔茨海默病是老年人当中最常见的一种神经退行性疾病,给人类健康带来了重大威胁。人体内的Tau蛋白和锌离子都主要富集在人中枢神经系统神经细胞的轴突中。我们利用可诱导的细胞模型研究了病理浓度锌离子对全长Tau蛋白病理突变体Tau-K... 详细信息

阿尔茨海默病是老年人当中最常见的一种神经退行性疾病,给人类健康带来了重大威胁。人体内的Tau蛋白和锌离子都主要富集在人中枢神经系统神经细胞的轴突中。我们利用可诱导的细胞模型研究了病理浓度锌离子对全长Tau蛋白病理突变体Tau-K280积聚的影响,发现锌离子可以与全长Tau蛋白的Cys-291和Cys-322及其它两个氨基酸(His-330/362)形成四配位结构,使Tau蛋白获得某种倾向于积聚的构象,促进Tau蛋白的积聚及细胞毒性;该聚集体能进一步诱导内源Tau蛋白积聚及异常磷酸化,从而使得Tau蛋白毒性放大;半胱氨酸突变后,锌离子与Tau蛋白相互作用模式改变,四配位结构被打乱从而丧失了这种对Tau蛋白积聚和毒性的促进作用,表明Cys-291和Cys-322是锌离子调控Tau蛋白体外和细胞水平异常积聚与毒性的关键位点。我们也发现半胱氨酸突变显著减弱锌离子与人全长Tau蛋白的结合强度且改变锌离子与Tau蛋白的作用模式,锌离子与全长Tau蛋白以独立位点模式结合,结合比为1:1,而半胱氨酸双突与锌离子则以序列位点模式结合,表明Tau蛋白的两个半胱氨酸是锌离子结合Tau蛋白的关键位点。我们还发现锌离子显著增强全长Tau蛋白的磷酸化修饰,半胱氨酸突变后该促进作用依然存在,表明锌离子的结合与其对Tau蛋白磷酸化修饰的影响是两个独立的事件。我们建立了病理浓度锌离子调控Tau蛋白磷酸化修饰和积聚的细胞模型,锌离子不仅通过与Tau蛋白结合直接促进其积聚,更能对Tau蛋白异常的翻译后修饰起调控作用而进一步促进Tau异常积聚及细胞毒性。这些发现为研究锌离子对Tau蛋白积聚和毒性的调控机制及其在神经退行性疾病中的作用提供了有用的线索。

关键词： Tau蛋白阿尔茨海默病锌离子蛋白质聚集错误折叠 Tau毒性

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miR145在小鼠心梗后心脏重构中的保护作用及机制研究

miR145在小鼠心梗后心脏重构中的保护作用及机制研究

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：宋慧芳何生殷文娟解军李仁科山西医科大学加拿大多伦多大学

目的:心梗后心室收缩功能障碍是造成心室扩张乃至心衰等后果的主要原因。已有研究显示miR145参与调节血管内皮细胞、平滑肌细胞等的增殖与分化等功能。本研究利用miR145敲除小鼠探讨miRNA 145能否通过调节心脏局部成纤维细胞向肌成纤维... 详细信息

目的:心梗后心室收缩功能障碍是造成心室扩张乃至心衰等后果的主要原因。已有研究显示miR145参与调节血管内皮细胞、平滑肌细胞等的增殖与分化等功能。本研究利用miR145敲除小鼠探讨miRNA 145能否通过调节心脏局部成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,降低小鼠心梗后的不良心脏重构,从而保护心功能。方法:在体动物实验中结扎小鼠心脏左冠状动脉前降支建立心梗模型,超声心动图检测心功能。荧光定量PCR检测miR145水平。体外原代培养小鼠心脏成纤维细胞,western blotting技术检测Collagin I,α-SMA表达,评价心脏局部成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化水平;划痕实验检测细胞迁移能力。结果:(1)体内实验部分:1)荧光定量PCR结果显示,与假手术组相比心脏梗死区及周边区miR145水平在心梗后3天显著降低(p<0.05),7-14天逐渐回升(p<0.05),直至28天基本恢复至假手术组水平(p>0.05)。2)心梗28天后miR145敲除小鼠左室短轴缩短率为16.95±1.59%,野生型小鼠为21.41±2.57%,二者比较有统计学意义p<0.01;与野生型小鼠比较,miR145敲除小鼠左室舒张末期内径和收缩末期内径明显增大(p<0.05);心脏梗死面积明显增大(p<0.05)。3)心梗后心脏组织免疫荧光染色结果显示α-SMA阳性范围在miR145组为4.47±0.59%,野生型小鼠组为19.34±2.61%,二者比较有统计学意义(p<0.01)。(2)体外实验部分:1)miR145敲除小鼠心脏成纤维细胞中Collagin I,α-SMA表达水平显著低于野生组;miR145类似物干预后,细胞中Collagin I,α-SMA表达水平进一步提高,提示miR145可促进心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化。2)与野生型小鼠组比较,miR145敲除小鼠心脏成纤维细胞迁移能力低32%(p<0.05)。结论:microRNA 145可以通过促进心脏局部成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,从而降低心梗后的不良心脏重构。

关键词： miR145 心肌梗死心脏重构成纤维细胞

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Novel Inhibitors of Lon Protease Reduce Bacterial Persister Formation

Novel Inhibitors of Lon Protease Reduce Bacterial Persister ...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Qi Sun Tongqing Li Runtao Li Jianfeng Pei Luhua Lai College of Chemistry and Molecular Engineering and Center for Quantitative BiologyPeking University State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs School of Pharmaceutical SciencesPeking University

Bacterial persister is a sub-group of special population of bacteria,and has the distinction marks from the ordinary bacteria and resistant *** presence of persister is believed to be closely associated with the recalcitrance and recurrence of chronic infections,and also can increase the prevalence of multidrug-resistant bacteria and extensive resistance *** toxin-antitoxin systems play pivotal role in bacterial persister formation,but few regulators of toxin-antitoxin systems have been ***,we proposed an anti-persister strategy by inhibiting Lon protease,which is essential for antitoxin *** found 43 peptidyl boronic acids as potent covalent inhibitors of *** further demonstrated that Lon inhibition by these compounds dramatically restricted persister formation,which is independent of the antibiotic types used,and works in a wide range of bacterial *** most potent compound,PKUMDL-SQ-B195 reduced the fraction of *** persister with an EC50 of 0.24 ± 0.04 μ*** work demonstrates that Lon protease inhibition is an effective strategy to reduce bacterial persisters,which is promising in developing novel drugs against multidrug-resistant bacteria.

关键词： Lon protease Toxin-antitoxin system Persister Peptidyl boronic acid

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亚麻胰蛋白酶抑制剂降糖作用的分子机理研究

亚麻胰蛋白酶抑制剂降糖作用的分子机理研究

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：王蕾吴莎莎吴峰石亚伟山西大学生物技术研究所教育部化学生物学与分子工程重点实验室

植物蛋白类的胰蛋白酶抑制剂(TI)具有抗癌、抗炎、抗病、抗虫、以及治疗心血管疾病、人类获得性免疫缺陷症等恶性疾病的潜在应用价值,然而对于其降糖活性的研究,虽有零星的动物实验,但因缺乏对应分子靶标以及相关构效关系研究,国内外对T... 详细信息

植物蛋白类的胰蛋白酶抑制剂(TI)具有抗癌、抗炎、抗病、抗虫、以及治疗心血管疾病、人类获得性免疫缺陷症等恶性疾病的潜在应用价值,然而对于其降糖活性的研究,虽有零星的动物实验,但因缺乏对应分子靶标以及相关构效关系研究,国内外对TI的降糖作用机理以及抑制α-葡萄糖苷酶活性的分子机制研究目前还处于空白阶段。近期,本课题组以抑制α-葡萄糖苷酶活性为评价指标,从对胡麻籽粕中分离到一个分子量为8kD的小分子多肽——亚麻胰蛋白酶抑制剂LUTI,该多肽具有抑制α-葡萄糖苷酶活性。随后,我们对该多肽进行了体外重组表达与纯化,获得了相同分子量的重组LUTI(rLUTI)。经抑制活性测定分析,相比天然LUTI,rLUTI对胰蛋白酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用明显升高。进一步我们利用基因定点突变技术分别获得rLUTI的C4/A,C49/A、D45/A、K46/A单突变体以及C4、49/A双突变体。圆二色谱分析显示, rLUTI第4位半胱氨酸是维持其二级结构稳定的关键位点。双酶抑制活性测定发现rLUTI的C4/A、C49/A及C4、49/A突变对胰蛋白酶抑制活性影响尤为明显,而对α-葡萄糖苷酶的抑制活性影响较小,其中rLUTI的C49/A及C4、49/A突变完全丧失了对胰蛋白酶的抑制活性;D45/A和K46/A突变体对α-葡萄糖苷酶抑制活性影响尤为明显,而对胰蛋白酶抑制活性影响较小。这一结果说明LUTI对胰蛋白酶和对α-葡萄糖苷酶活性的抑制机理存在明显不同。为了进一步分析LUTI抑制α-葡萄糖苷酶活性的构效关系,我们运用分子对接技术对LUTI与α-葡萄糖苷酶的结合位点进行了分析。结果显示,LUTI主要通过其N端与α-葡萄糖苷酶结合, Ser1、Arg2、Arg3和Pro5这4个氨基酸可能是二者结合的关键位点。

关键词：重组LUTI 胰蛋白酶 α-葡萄糖苷酶定点突变分子对接

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RNA Methylation Code: Regulations and Mechanisms

RNA Methylation Code: Regulations and Mechanisms

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者：杨运桂中国科学院北京基因组研究所

Over 100 types of chemical modifications have been identified in various types of RNAs including noncoding RNA and mRNA,among which methylation is the most common *** N6-methyladenosine(m6 A) and N5-methyl-cytosine(m5 C) are the most common and abundant internal modifications on mRNA *** recent identification of methyltransferases METTL3/METTL14/WTAP and NSUN2,and m6 A demethylases ALKBH5 and FTO,supports the reversibility of RNA *** YTH-domain-containing proteins YTHDF1-3 and YTHDC1-2 specifically binding to m6 A and ALYREF recognizing m5 C have been identified to regulate various mRNA processing,suggesting vital roles of RNA modifications in gene expression *** recent works revealed indispensable roles of m6 A in mRNA translation,spermatogonial differentiation,and haematopoietic stem and progenitor cell specification,and 5-methylcytosine promotes mRNA *** have further performed RNA-BisSeq to map transcriptomic profiles of m5 C in early embryos of Zebra fish and human *** will discuss the recent progress in RNA modifications and their potential biological significance in this seminar.

关键词： RNA甲基化 m6A m5C RNA加工

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Structure of the NS5 methyltransferase from Zika virus and implications in inhibitor design

Structure of the NS5 methyltransferase from Zika virus and i...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Caiying Zhang Tingting Feng Jinbo Cheng Yajuan Li Xueying Yin Weihong Zeng Xiangyu Jin Yuelong Li Feng Guo Tengchuan Jin Laboratory of Structural Immunology University of Science and Technology of China School of Medicine Stanford University

Recent outbreak of flavivirus Zika virus(ZIKV) in America has urged the basic as well as translational studies of this important human *** nonstructural protein 5(NS5) of the flavivirus has an N terminal methyltransferase(MTase) domain that plays critical roles in viral RNA genome *** null mutant of NS5 MTase is lethal for ***,NS5 is a potential drug target for the treatment of Zika virus *** this study,we determined crystal structures of the ZIKV MTase in complex with GTP and RNA cap analogue 7 *** analyses revealed highly conserved GTP/cap-binding pocket and S-adenosylmethionine(SAM)-binding *** conformations of the second base of the cap were identified,which suggests the flexibility of RNA *** addition,the ligand binding pockets identified a continuous region of hotspots suitable for drug *** calculation shows that the Dengue virus inhibitor compound 10 may bind to the ZIKV MTase.

关键词： Flavivirus family virus Zika virus Methyltransferase RNA cap Antiviral inhibitor design

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Activation of AKT-AP1-FOXM1 signaling pathway confers sorafenib resistance to hepatocellular carcinoma cells

Activation of AKT-AP1-FOXM1 signaling pathway confers sorafe...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Xiaojing Yan Lingxi Chen Liangbo Sun Tao Li Fengtian He Jiqin Lian Department of Biochemistry and Molecular Biology Army Medical University

Sorafenib is the first-line drug for advanced hepatocellular carcinoma(HCC),but the clinical response to sorafenib is seriously limited by drug *** this study,we investigated the molecular mechanisms of sorafenib resistance in HCC *** data indicate that FoxM1 was significantly over-expressed in sorafenib-resistant cells,both at mRNA and protein *** of FoxM1 made drug-tolerant cells sensitive to ***,we found that FOXM1 was upregulated at transcriptional *** the overexpression of c-jun was associated with the up-regulation of *** binding site of AP1 in the promoter of FOXM1 located *** of c-jun significantly decreased the level of FOXM1 accompanied with enhanced cell sensitivity to ***,the activation of AKT contributed to the upregulation of c-jun and *** of AKT BEZ-235 dramatically suppressed the up-regulation of c-jun and FOXM1,and increased the sensitivity of drug-tolerant cells to sorafenib in vitro and in *** data imply that the activation of AKTAP1-FOXM1 signaling axis is an important determinant of sorafenib tolerance.

关键词： AKT AP1 FOXM1 HCC sorafenib resistance

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Macrophage-associated PGK1 phosphorylation promotes aerobic glycolysis and tumorigenesis

Macrophage-associated PGK1 phosphorylation promotes aerobic ...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Yajuan Zhang Guanzhen Yu Huiying Chu Guohui Li Weiwei Yang

Macrophages are dominant leukocyte population in tumor microenvironment and actively promote cancer ***,molecular mechanism underlying such role of macrophages remains poorly *** we show that polarized M2 macrophages enhance 3-phosphoinositide dependent protein kinase 1(PDPK1)-mediated phosphoglycerate kinase 1(PGK1) threonine(T) 243 phosphorylation in tumor cells by secreting interleukin 6(IL6).This phosphorylation facilitates PGK1-catalyzed reaction towards glycolysis by altering substrate *** of PGK1 T243 phosphorylation or PDPK1 in tumor cells or neutralization of macrophages-derived IL6 abrogates macrophages-promoted glycolysis,proliferation and *** addition,PGK1 T243 phosphorylation correlates with PDPK1 activation,IL6 expression and macrophages infiltration in human glioblastoma multiforme(GBM).Moreover,PGK1 T243 phosphorylation also correlates with malignance and prognosis of human *** findings demonstrate a novel mechanism of macrophages-promoted tumor growth by regulating tumor cell metabolism,implicating the therapeutic potential to disrupt the connection between macrophages and tumor cells by inhibiting PGK1 phosphorylation.

关键词： PGK1 macrophage aerobic glycolysis tumorigenesis

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Peptides from sesame cake reduce oxidative stress and amyloid-β toxicity of Caenorhabditis elegans

Peptides from sesame cake reduce oxidative stress and amyloi...

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Xiaoli Ma Xiaodong Cui Jiao Li Fang Li Zhuanhua Wang School of Life Science Shanxi University Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education Institute of BiotechnologyShanxi University

Alzheimer's disease(AD) is widely recognized as a serious public health problem,of which Amyloid-β(Aβ)-induced oxidative stress and toxicity are suggested as the leading risk *** from sesame cake(PSC) are a group of novel bioactive peptides derived from an agricultural *** employed an AD model Caenorhabditis elegans(***)(CL4176) to study the effects of PSC on Aβ-induced toxicity,oxidative stress and possible molecular *** prolonged the lifespan,increased locomotion,and delayed paralysis phenotype in ***,PSC enhanced oxidative stress resistance,reduced ROS levels and up-regulated the mRNA level of antioxidant enzyme *** S staining showed PSC reduced Aβ ***,the downregulation of skn-1-a gene previously shown to play an important role in alleviating Aβ toxicity in ***-by treatment with skn-1 RNAi bacteria,was found to block the PSC-mediated protective effect in AD *** together,these data indicated PSC reduced oxidation stress to reduce the Aβ-induced toxicity via skn-1,implying PSC as nutraceuticals can be used to prevent AD-related oxidative stress complications.

关键词： Peptides from sesame cake Caenorhabditis elegans Alzheimer's disease amyloid-β oxidative stress skn-1

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Neural Regulation of White Adipose Tissue Metabolism

Neural Regulation of White Adipose Tissue Metabolism

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中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Haochen Jiang Xiaofan Ding Ying Cao Huanhuan Wang Wenwen Zeng School of Medicine and Institute for Immunology Center for Life SciencesBeijing Key Laboratory for Immunological Research on Chronic DiseasesTsinghua University Center for Life Sciences and Academy for Advanced Interdisciplinary Studies Peking University

Efferent signals from the nervous system are critical in regulating the physiology of white adipose tissues,malfunction of which contributes significantly to obesity,type 2 diabetes and other metabolic *** the underlying mechanism of the neural control of WAT homeostasis is of great importance for understanding the physiopathology of metabolic *** reveal the significant roles of neural inputs in white adipose tissues,we established a volume fluorescence-imaging technique for adipose tissues,which has enabled us to visualize the sympathetic network in white adipose *** investigating the anatomical structures of neural innervations on a whole tissue level,we found that sympathetic arborizations are prevalent at a density that had been drastically underestimated before,and in fact sympathetic fibers are in close apposition to the majority of adipocytes in the inguinal white adipose *** addition,we demonstrated that adrenergic receptors are important for beiging process by relaying the signaling from sympathetic *** data revealed the structural basis connecting neural efferent signals with individual adipocytes,which have important implications for our better understanding of the white adipose tissue metabolism under physiological and disease conditions.

关键词： adipose tissues sympathetic neurons metabolism

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