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51 篇 工学
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- 2 篇 畜牧学
- 1 篇 兽医学
2 篇 经济学
- 2 篇 应用经济学

主题

4 篇 代谢工程
3 篇 酿酒酵母
3 篇 中国科协
2 篇 铁皮石斛
2 篇 免疫原性
2 篇 生物膜
2 篇 抗原性
2 篇 代谢途径
2 篇 磷酸转酮酶
2 篇 蛋白表达
2 篇 symbiont
2 篇 糖酵解途径
2 篇 耐受性
2 篇 活性测定
2 篇 大肠杆菌
2 篇 cyanobacteria
2 篇 噬菌体
2 篇 核小体定位
2 篇 枯草芽孢杆菌
2 篇 可变剪接

机构

11 篇 南京工业大学
8 篇 中国科学院天津工...
7 篇 内蒙古科技大学
5 篇 华东理工大学
4 篇 江苏师范大学
4 篇 中国药科大学
4 篇 上海交通大学
4 篇 南京医科大学
4 篇 温州医科大学
3 篇 黑龙江省科学院大...
2 篇 武汉轻工大学
2 篇 海南大学
2 篇 天津大学
2 篇 华东生物医药研究...
2 篇 中国科学院成都文...
2 篇 中国农业科学院生...
2 篇 山东大学
2 篇 车用生物燃料技术...
2 篇 南京军区军事医学...
2 篇 江西农业大学

作者

7 篇 蔡禄
6 篇 马红武
5 篇 应汉杰
4 篇 李越希
4 篇 陈晨
4 篇 李素梅
4 篇 潘英
4 篇 齐永
4 篇 李素芹
4 篇 陈集双
4 篇 王新国
4 篇 徐艺菲
4 篇 蒋继宏
4 篇 李佳萌
4 篇 徐亭亭
3 篇 刘宇峰
3 篇 杨庆丽
3 篇 邢永强
3 篇 李校堃
3 篇 马兴元

语言

84 篇 中文
15 篇 英文

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类泛素介导和热激响应协同提高酿酒酵母的热稳定性

类泛素介导和热激响应协同提高酿酒酵母的热稳定性

引用

中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：肖冰李珺李春北京理工大学生命学院生物工程系

本研究通过调节酿酒酵母内部的活性蛋白质平衡,以提高酵母细胞的热稳定性和发酵性能,从而降低其乙醇发酵过程的控温能耗。为此,克隆了多个与蛋白质平衡机制紧密相关的、分别来自类泛素、泛素蛋白酶系统和热激蛋白的基因,并与调控基因FB... 详细信息

本研究通过调节酿酒酵母内部的活性蛋白质平衡,以提高酵母细胞的热稳定性和发酵性能,从而降低其乙醇发酵过程的控温能耗。为此,克隆了多个与蛋白质平衡机制紧密相关的、分别来自类泛素、泛素蛋白酶系统和热激蛋白的基因,并与调控基因FBA1p组合构建了耐热元器件,并分别将其导入酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeINVSC1,通过梯度升温培养筛选到能赋予酵母较好耐热性的类泛素元器件FBA1p-atg8和热激蛋白元器件FBA1p-hsp104,其相应的工程菌S.c-ATG8和S.c-HSP104在40℃恒定培养时,84h细胞浓度均比对照高50%以上,72h细胞存活率分别是对照的1.64和3.01倍,两株工程菌都具有较好的细胞壁完整性、海藻糖合成量、细胞活性和乙醇合成能力。进一步提高酵母的热稳定性,将atg8与hsp104进行组合构建双功能耐热元器件,其工程菌S.c-ATG8-HSP104在40℃恒定发酵的耐热能力和乙醇生产能力都明显优于单功能菌S.c-ATG8与S.c-HSP104。通过类泛素、泛素蛋白酶体系统与热激蛋白响应联动调节胞内活性蛋白质平衡可以有效地提高酿酒酵母的热稳定性。

关键词：酿酒酵母热激蛋白类泛素蛋白质平衡热稳定性

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茶皂素的纯化及其苷元的制取

茶皂素的纯化及其苷元的制取

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：陈绪涛霍光华肖大瑾惠亚勇江西农业大学生物科学与工程学院生物资源保护与利用研究所

市售茶皂素纯度低,所含色素等杂质制约着茶皂素的应用范围,混合茶皂素不便活性精确定位和构效关系确认,更不利于获取单一茶皂苷元而进行的多样性药物分子设计合成。制取单体茶皂素及其苷元将为深度开发利用该天然产物提供可能性。采用... 详细信息

市售茶皂素纯度低,所含色素等杂质制约着茶皂素的应用范围,混合茶皂素不便活性精确定位和构效关系确认,更不利于获取单一茶皂苷元而进行的多样性药物分子设计合成。制取单体茶皂素及其苷元将为深度开发利用该天然产物提供可能性。采用溶剂沉淀和树脂吸附纯化市售茶皂素,酸水解、溶剂萃取和柱层析,获得其茶皂苷元,并通过色谱和波谱验证。结果显示,分离市售茶皂素粗品中主要单体的工艺为:80%乙醇溶解茶皂素,料液比为1:20(m/v),然后加入2倍于80%乙醇的丙酮,静置过夜,4℃冷冻离心;沉淀过AB-8型树脂,依次用水、稀碱、水和90%乙醇洗脱,醇洗脱液浓缩获得茶皂素,纯度从55%提高到96%。然后对其盐酸水解,工艺为:3mol/L HCL,料液比为1:15(m/v)的60%甲醇水溶液85℃加热回流5h;乙酸乙酯萃取液硅胶柱层析,收集石油醚-乙酸乙酯洗脱液,获得茶皂素苷元,波谱数据并与文献比对,确定其结构为:21-当归酰基22-乙酰茶皂苷元E。

关键词：茶皂素纯化和水解茶皂苷元制备

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丙丁菌生物膜提高丁醇耐受性的微观机制研究

丙丁菌生物膜提高丁醇耐受性的微观机制研究

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：杨静庄伟应汉杰南京工业大学国家生化工程技术研究中心生物与制药工程学院

细胞固定化发酵具有发酵产率高、可连续、性能稳定、工艺简单等优势而广受关注。然而,固定化细胞发酵提高耐受性和活性的机制尚需深入研究。本文通过微观表征手段,分析了经吖啶橙染色后的游离细胞及生物膜;细胞在棉纤维表面的生长过程... 详细信息

细胞固定化发酵具有发酵产率高、可连续、性能稳定、工艺简单等优势而广受关注。然而,固定化细胞发酵提高耐受性和活性的机制尚需深入研究。本文通过微观表征手段,分析了经吖啶橙染色后的游离细胞及生物膜;细胞在棉纤维表面的生长过程和丁醇耐受性情况。研究发现,细胞会粘附到载体表面,并不断聚集、生长增殖,最终形成被胞外基质包裹的三维的生物膜结构。对比不同时期额外加入3 g/L丁醇对游离及固定菌的发酵性能及形态变化的影响,发现固定化菌对丁醇的耐受性高于游离菌,稳定期细胞,及成熟的生物膜耐受性最好。生物膜的耐受性增强与生物膜不均一性及胞外基质对有害物质的传递阻碍有关。从而得出以稳定期细胞为固定化细胞,培养36 h得成熟生物膜,应用于连续批次发酵产丁醇。

关键词：生物膜耐受性不均一性传递阻碍

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由乙肝病毒核心蛋白(HBc-VLP)递载的流感通用疫苗Flu@uV设计构建、表征及初步活性研究

由乙肝病毒核心蛋白(HBc-VLP)递载的流感通用疫苗Flu@uV设计构建...

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：张旭凡胡发彪马兴元王天文王平王晓丽华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室

目的构建以HBc为载体的甲型流感病毒HA和M2e流感通用疫苗(Flu@uV),利用大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,进行初步的蛋白表达及纯化。在此基础上,构建DNA流感通用疫苗。方法利用全基因合成的序列为模板,成功构建HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc、3M2... 详细信息

目的构建以HBc为载体的甲型流感病毒HA和M2e流感通用疫苗(Flu@uV),利用大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,进行初步的蛋白表达及纯化。在此基础上,构建DNA流感通用疫苗。方法利用全基因合成的序列为模板,成功构建HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc、3M2e-HBc和3HA-3M2e-HBc基因的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE、Western Blot和电镜检测其表达。将纯化的蛋白与弗氏佐剂共同免疫小鼠,取小鼠外周血进行流式细胞分析。通过荧光分析和WesternBlot初步验证DNA流感通用疫苗在人源胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达情况。结果成功表达纯化了HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc和3M2e-HBc四种蛋白,经电镜观察到30nm左右的蛋白纳米颗粒样结构。小鼠外周血流式细胞分析显示HBc和3M2e-HBc可以增加小鼠的免疫力,而HA-M2e-HBc和M2e-HBc对小鼠免疫力的提高没有影响。通过荧光检测和Western Blot检测说明DNA流感通用疫苗在真核细胞中成功表达。结论成功构建HBc与甲型流感病毒HA和M2e的病毒样颗粒,为流感通用疫苗的研制奠定了重要基础。

关键词：流感通用疫苗 HBc-VLP 设计构建与表征免疫活性

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仿生氧化硅-交联酶聚体大孔杂化生物催化剂的制备及性能

仿生氧化硅-交联酶聚体大孔杂化生物催化剂的制备及性能

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：崔建东河北省发酵工程技术研究中心生物科学与工程学院河北科技大学

交联酶聚体(CLEAs)是一种无需载体、无需酶的纯化、制备简单的新型固定化酶方法,由于所制备的CLEAs具有较高比酶活和稳定性,目前已被用于多种酶的固定化。但该技术也存在所制备的CLEAs颗粒小、机械强度低,颗粒均匀度差,离心或过滤回收... 详细信息

交联酶聚体(CLEAs)是一种无需载体、无需酶的纯化、制备简单的新型固定化酶方法,由于所制备的CLEAs具有较高比酶活和稳定性,目前已被用于多种酶的固定化。但该技术也存在所制备的CLEAs颗粒小、机械强度低,颗粒均匀度差,离心或过滤回收易导致较小的CLEAs颗粒结块,难以重新分散在反应液中,导致较大的扩散限制阻力和传质问题。为了克服上述问题,本研究以苯丙氨酸解氨酶(PAL)为模型酶,以可溶性淀粉为造孔剂,将CLEAs技术与仿生硅化技术相结合,制备出新型大孔杂化的氧化硅-交联酶聚体生物催化剂。具体制备过程如下:首先利用CLEAs技术将可溶性淀粉与PAL共沉淀交联,制备出含有淀粉的PAL-CLEAs,然后利用仿生硅化技术将上述PAL-CLEAs和淀粉共包埋在仿生氧化硅中,最后用淀粉酶水解掉包埋在CLEAs和仿生硅胶中的淀粉,获得新型大孔杂化的氧化硅-交联酶聚体杂化生物催化剂。与传统CLEAs和仿生硅化固定化酶相比,这种新型固定化酶表现出较高的催化活性,以及储存稳定性、机械稳定性、热稳定性和优越的重复使用性。因此,这种新型的固定化酶方法在酶的工业化应用中具有非常好的应用前景。

关键词：交联酶聚体技术仿生硅化技术大孔杂化固定化酶氧化硅

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胞磷胆碱生产过程中的关键酶—胆碱激酶的表达优化

胞磷胆碱生产过程中的关键酶—胆碱激酶的表达优化

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：王骏之应汉杰南京工业大学国家生化工程技术研究中心生物与制药工程学院

胞磷胆碱是核苷酸类衍生物,药理上有改善脑组织代谢,调节脑血管张力及保护脑神经的作用。生物合成法是目前制备胞磷胆碱的主要方法,然而传统方法是以酵母菌泥为生物酶源催化产胞磷胆碱,其底物转化率低,催化周期长,且有大量中间产物积累... 详细信息

胞磷胆碱是核苷酸类衍生物,药理上有改善脑组织代谢,调节脑血管张力及保护脑神经的作用。生物合成法是目前制备胞磷胆碱的主要方法,然而传统方法是以酵母菌泥为生物酶源催化产胞磷胆碱,其底物转化率低,催化周期长,且有大量中间产物积累,不利于大规模工业化过程中的成本节约。本研究旨在提高胞磷胆碱合成过程中关键酶—胆碱激酶的蛋白表达水平。大肠杆菌蛋白融合表达技术取得了很好的效果,通过融合可溶蛋白标签,如GST(谷胱甘肽S-转移酶)标签或MBP(麦芽糖结合蛋白)标签,胆碱激酶表达水平有了显著提升。其中含有MBP-CKI融合蛋白的重组大肠杆菌*** Rosetta(DE3)/pET42a-CKI中胆碱激酶酶活更是达到了达到1.48 U/mg,是酵母野生型Saccharomyces cerevisia X2180-1A酶活的近80倍。进一步,又构建了胆碱激酶和磷酰胆碱胞苷酸转移酶共表达系统,含有CCT-CKI融合蛋白的*** Rosetta(DE3)/pET28a-CCT-CKI中胆碱激酶酶活达到1.94U/mg,且大部分蛋白以可溶表达的形式存在于细胞内,其胆碱激酶活性高于已报道过的和本研究构建的其他所有基因工程菌株,同时该菌也具有一定的磷酰胆碱胞苷酸转移酶活性。

关键词：胞磷胆碱胆碱激酶蛋白表达水平磷酰胆碱胞苷酸转移酶融合表达

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一株祼脚菇属菌株产抗菌活性物的基础液体培养碳、氮源等优化及其对柑橘青绿霉菌的作用

一株祼脚菇属菌株产抗菌活性物的基础液体培养碳、氮源等优化及其...

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：吴胜霍光华韩启灿龙昊知江西农业大学生物资源保护和利用研究所生物科学与工程学院

江西是柑橘类水果的主要产区之一,青绿霉菌是导致柑橘采后腐烂的主要病害,化学杀菌剂已产生病原抗药性和残留,一株具有拮抗此病菌的祼脚菇属菌株0612-9被发现。为了探索其产活性物质的代谢培养和活性作用,采用菌丝生长速率法和显微观察... 详细信息

江西是柑橘类水果的主要产区之一,青绿霉菌是导致柑橘采后腐烂的主要病害,化学杀菌剂已产生病原抗药性和残留,一株具有拮抗此病菌的祼脚菇属菌株0612-9被发现。为了探索其产活性物质的代谢培养和活性作用,采用菌丝生长速率法和显微观察法测定了其抗菌活性,单因素试验、Plackett-Burman、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验响应面设计等优化出液体培养基组成和培养条件。结果显示:液体培养基组成和培养条件为:马铃薯279.94g/L,葡萄糖30g/L,麸皮8.87g/L,MgSO·7HO 0.47g/L,KHPO 2g/L,发酵周期10d,接种量5 mL/100m L,转速180r/min,摇床温度26℃,装液量100mL/250mL,发酵液抗病菌活性从42.26%提高到55.77%。对意大利青霉和指状青霉的EC分别为69.25g/L和56.70g/L,最小杀菌浓度250μg/mL低于阳性对照物抑霉唑的500μg/mL,并且对病原菌菌丝体有一定的毒害作用。该祼脚属菌株有潜在开发成柑橘采后保鲜剂的价值。

关键词：裸脚菇属菌株碳、氮源优化活性物质抗青、绿霉菌作用

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酵母菌油脂含量测定方法的比较研究

酵母菌油脂含量测定方法的比较研究

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：张艳平白新鹏郭书贤王冬梅刘欢海南大学食品学院南阳理工学院生物与化学工程学院南阳市工业微生物重点实验室车用生物燃料技术国家重点实验室

为确定一种快速简便、准确可靠的酵母菌油脂含量测定方法,本文通过磷酸香草醛显色法、氧化酶法与重量法的比较分析,结果表明:1.在测定酵母菌体总脂含量时,(1)重量法准确度和精确度高,最低检测量为10mg,成本低,但操作过程繁琐、耗时长,... 详细信息

为确定一种快速简便、准确可靠的酵母菌油脂含量测定方法,本文通过磷酸香草醛显色法、氧化酶法与重量法的比较分析,结果表明:1.在测定酵母菌体总脂含量时,(1)重量法准确度和精确度高,最低检测量为10mg,成本低,但操作过程繁琐、耗时长,溶剂有毒易污染环境;(2)磷酸香草醛显色法的平均回收率为93%,准确度和精确度较高,需时少,最低检测浓度为0.08g/L。测定时需与相应的菌体油脂标准曲线匹配使用。其测定发酵液油脂含量与重量法差异不显著(P>0.05),可以作为酵母菌油脂含量测定的方法;2.在测定酵母菌体内甘油三脂时,氧化酶法平均回收率达到98.03%,准确度和精确度好,其测定结果与重量法之间差异达到极显著水平(P<0.01),这是由于氧化酶法测定的是甘油三酯的含量,而不是总脂的含量。该方法操作简便,耗时少,最低检测浓度为1.2g/L。氧化酶法需与甘油三酯标准曲线匹配使用,同时还需对细胞进行破壁,但由于其快速准确性,也不失为一种酵母菌油脂含量测定的好方法。

关键词：酵母菌油脂含量总脂甘油三脂重量法磷酸香草醛显色法氧化酶法

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拟微绿球藻生长条件优化的研究

拟微绿球藻生长条件优化的研究

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：乔岩季祥成杰张凯凯赵昕宇李红霞巩东辉蔡禄内蒙古科技大学数理与生物工程学院

拟微绿球藻属于真眼点藻纲（Eustigmatophyceae）,是近似球形的单细胞真核生物,具有较高的光合作用效率和油脂含量,生长速度快,适合做水生动物的饵料,藻中的多不饱和脂肪酸如二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）等对水产动物的... 详细信息

拟微绿球藻属于真眼点藻纲（Eustigmatophyceae）,是近似球形的单细胞真核生物,具有较高的光合作用效率和油脂含量,生长速度快,适合做水生动物的饵料,藻中的多不饱和脂肪酸如二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）等对水产动物的影响效果明显。目前拟微绿球藻可作为饵料藻、能源藻和产业化藻种,但易受环境和不同营养盐等多种条件的影响,其质量和产量均不稳定。在生产过程中资金投入大,成本高,产量和生物量都较低。为了在最优生长状况下最大化收获拟微绿球藻生物质的产量,以使其能满足现代化的大规模生产,本研究采用了单因素试验和L（4～5）的正交试验,研究了不同浓度N、P、Fe、Mg以及维生素混合液对拟微绿球藻生长条件的影响。结果表明,最适拟微绿球藻生长的优化组合是:NaNO浓度为0.225g/L,NaHPO·2HO浓度为0.01g/L,FeCl·6HO浓度为0.00473g/L,MgCl浓度为1.245g/L,维生素混合液体积为0.25 mL/L。

关键词：拟微绿球藻生长条件优化饵料微藻单因素实验正交实验

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大肠杆菌集成生物网络的构建

大肠杆菌集成生物网络的构建

引用

中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：毛志涛马红武中国科学院天津工业生物技术研究所

优质高效的工业菌株是工业生物技术的核心,而要筛选设计改造得到优良的菌株要解决的一个关键问题就是要重定向细胞内的代谢流将底物最大程度的转化为目的产物。随着基因组测序等技术的快速发展,构建针对特定菌株的基因组规模的代谢网络... 详细信息

优质高效的工业菌株是工业生物技术的核心,而要筛选设计改造得到优良的菌株要解决的一个关键问题就是要重定向细胞内的代谢流将底物最大程度的转化为目的产物。随着基因组测序等技术的快速发展,构建针对特定菌株的基因组规模的代谢网络,通过对大规模代谢网络的结构与功能进行分析,以找出实现某种生物转化的最优途径已成为当前系统生物学和合成生物学研究的一个热点。但在实际的菌种开发过程中人们发现仅仅依靠代谢网络往往是不够的,要重定向胞内代谢流以将其导向目的产物更多的需要对胞内各种水平的调控机制进行分析改造。与代谢网络相比,目前并没有成熟的直接由基因组数据构建调控网络的方法。而且调控可能发生在不同的水平上(DNA,mRNA,蛋白质和代谢物等),具有完全不同的调控机理。我们从已发表的文献、数据库等资源中,通过脚本代码和手工挖掘修改得到了大肠杆菌蛋白互作、蛋白化合物互作、化合物化合物互作、代谢网络以及转录调控网络等多种可能的调控信息,并且获取了较为详细的基因和化合物注释信息,包括不同数据库间的交联信息、各种修饰信息、GO注释等等。我们以这些数据为核心,构建出大肠杆菌的集成生物网络,并建立对应的网站(EcoIN,http://***/ecoin/)以方便进行数据检索和分析。这一集成网络将大肠杆菌胞内已知的各种相互作用集成在一起,使人们可以真正的从整体系统水平上对大肠杆菌的生理功能有一个更全面的认识,从而更准确的指导对其进行改造以得到优质高效的工业菌株。

关键词：集成生物网络数据库数据整合

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