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作者

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3 篇 王建华
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2,4-D、BA对杂种落叶松(日x华)体细胞胚胎发生过程中原胚发育与子叶胚形成关系的研究

2,4-D、BA对杂种落叶松(日x华)体细胞胚胎发生过程中原胚发育与子...

引用

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：齐力旺张守攻韩素英王建华中国林科院林业研究所细胞生物学实验室中国林科院林业研究所细胞生物学实验室中国林科院林业研究所细胞生物学实验室中国林科院林业研究所细胞生物学实验室

2,4-D、BA常用于针叶树体细胞胚胎发生初期,尤其2,4-D是诱导体细胞胚发生的必需条件,由于在体细胞胚胎发生的各个阶段对2,4-D要求不同,2,4-D是胚性感受态表达的重要因子,胚性状态的表达是以2,4-D存在为前提的;如不经2,4-D预培养,起始状... 详细信息

2,4-D、BA常用于针叶树体细胞胚胎发生初期,尤其2,4-D是诱导体细胞胚发生的必需条件,由于在体细胞胚胎发生的各个阶段对2,4-D要求不同,2,4-D是胚性感受态表达的重要因子,胚性状态的表达是以2,4-D存在为前提的;如不经2,4-D预培养,起始状态的细胞则会丧失全能性,不能形成胚性细胞和体细胞胚;2,4-D在不同的体细胞胚胎发生阶段起着不同的生理作用,高浓度的2,4-D、BA 组合对快速诱导产生胚性愈伤组织有利,而在胚性愈伤组织形成以后,通常必须调整2,4-D和BA浓

关键词：杂种落叶松体细胞胚胎发生胚发育

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长效人重组白细胞介素2(IL-2)的研制

长效人重组白细胞介素2(IL-2)的研制

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：唱韶红巩新马清钧吴军军事医学科学院生物工程所军事医学科学院生物工程所军事医学科学院生物工程所军事医学科学院生物工程所

白细胞介素2(IL-2)是T细胞和NK细胞产生的15．5kD糖蛋白,在机体免疫应答中起重要作用。目前临床上广泛用于肿瘤、病毒性肝炎等治疗,疗效显著。但上述疾病一般病程较长,因而需长期使用IL-2,而IL-2的血浆半衰期仅为2小时左右,为维持药效... 详细信息

白细胞介素2(IL-2)是T细胞和NK细胞产生的15．5kD糖蛋白,在机体免疫应答中起重要作用。目前临床上广泛用于肿瘤、病毒性肝炎等治疗,疗效显著。但上述疾病一般病程较长,因而需长期使用IL-2,而IL-2的血浆半衰期仅为2小时左右,为维持药效需大剂量频繁注射,这不仅大大提高了治疗成本,而且增加了病人的痛苦,增加了副反应。肾小球滤过和尿排泄是IL-2等小分子多肽因子从血浆清除的主要途径之一。人血清白蛋白(HSA)是人体血浆主要成份,无免疫原性,人体相容性好,且本身在体内即作为多种药物的载体,水溶性好,分子量为66kd,不易被肾小球滤过,体内半衰期长达2 周,本研究的目的是通过与HAS的融合来延长IL-2的体内半衰期。为此我们构建了高效表达HSA 与IL-2融合蛋白的工程酵母,并在此基础上研究了该融合蛋白最适表达条件及表达产物的纯化,初步建立了该融合蛋白制备工艺,融合蛋白表达量大于50mg／L,IL-2比活性为1．6×105／mL。为长效IL-2 药物的研制和开发提供了基础。

关键词：重组白细胞介素

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抗TNF-α单链抗体的构建、表达及一步柱上纯化和复性

抗TNF-α单链抗体的构建、表达及一步柱上纯化和复性

引用

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：刘梦元黄华樑尹长城王祥斌北京安波特基因工程技术有限公司

单链抗体是通过一段柔性的连接肽把抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)连接在一起而构成的小分子抗体,与完整的抗体分子相比,单链抗体具有分子量小、穿透性强、易于构建和表达等优点。肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-...

单链抗体是通过一段柔性的连接肽把抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)连接在一起而构成的小分子抗体,与完整的抗体分子相比,单链抗体具有分子量小、穿透性强、易于构建和表达等优点。肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)最初被发现是因为它能引起某些特定肿瘤组织的出血性坏死,现在已经知道其具有潜在的抗肿瘤作用外,还在机体免疫、炎症和病理中发挥重要作用。TNF-α的拮抗剂包括具有中和活性的抗体被证明是类风湿关节炎,局部性回肠炎和牛皮癣的有效治疗剂。在美国,经FDA批准的TNF-α拮抗剂有etanercept,一种可溶性的TNF-α受体;infliximab, 一种人-鼠嵌合抗TNF-α单克隆抗体以及adalimumab,一种人源抗TNF-α单克隆抗体,这些药物在临床上主要用于重症或对传统抗炎药物治疗不敏感的类风湿关节炎(RA)病人,还有一些小分子的生物拮抗剂如CDP870-聚乙二醇化Fab片段,PEG-TNF-R1-聚乙二醇化的可溶性受体等正处于研发阶段。利用单链抗体作为TNF-α拮抗剂进行上述疾病治疗,目前还没有报道。

关键词：

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柚苷酶制剂的研究

柚苷酶制剂的研究

引用

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：蔡华静张璟晶涂国全江西农业大学生物工程系江西农业大学生物工程系江西农业大学生物工程系

柑桔类水果包括柠檬、脐橙柚、葡萄柚等是世界上主要的亚热带水果之一。柑桔类水果中苦味物质主要是柚皮苷(Naringin)和柠檬苦素,其中柚皮苷含量较大,使柑桔水果加工过程会出现明显苦味。酶法脱苦不仅具专一性强,而且对橙汁的营养成分... 详细信息

柑桔类水果包括柠檬、脐橙柚、葡萄柚等是世界上主要的亚热带水果之一。柑桔类水果中苦味物质主要是柚皮苷(Naringin)和柠檬苦素,其中柚皮苷含量较大,使柑桔水果加工过程会出现明显苦味。酶法脱苦不仅具专一性强,而且对橙汁的营养成分无破坏、效果好、成本低等优点。本研究根据柚皮苷的理化特性,以柚皮苷为唯一碳源的富集培养和分离筛选模型,分离筛选到一株产柚苷酶高效菌株,经菌种初步鉴定该菌株为一株黑曲霉,命名为黑曲霉A166菌株。通过对菌株分别进行液体和固体发酵工艺研究,以及发酵培养基优化筛选,发酵条件的优化,使该菌株分别液体深层发酵和固体发酵的酶活力分别达到1200μg／ml和50000μg／g;进行柚苷酶制剂工艺研究,制备含酶活力单位 10000μg／ml的柚苷酶制剂100kg;采用该制剂进行橙汁脱苦试验,加酶用量28μg／ml,温度40℃,反应时间1．5h,柚皮苷脱苦达到95％,制得果汁清凉透明．酸甜可口,果香明显,无苦味,提高了橙汁的品质,使每吨橙汁出口价值提高了2000元人民币。

关键词：柚苷酶抽皮昔酶制剂酶活力

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结核杆菌D29噬菌体几丁质酶基因的表达及功能研究

结核杆菌D29噬菌体几丁质酶基因的表达及功能研究

引用

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：朱成钢浙江大学生命科学学院生物化学研究所

噬菌体是一种细菌病毒,可分为温和性和烈性噬菌体两大类。噬菌体寄生于细菌中,并在细菌中复制。在感染细菌的后期,噬菌体可水解细菌的细胞壁,从而释放出子代噬菌体。自然界中,基本所有的细菌都有相应的噬菌体。目前研究认为,各种噬菌体... 详细信息

噬菌体是一种细菌病毒,可分为温和性和烈性噬菌体两大类。噬菌体寄生于细菌中,并在细菌中复制。在感染细菌的后期,噬菌体可水解细菌的细胞壁,从而释放出子代噬菌体。自然界中,基本所有的细菌都有相应的噬菌体。目前研究认为,各种噬菌体都是通过表达内溶素(Endolysin或Lysin)打开细胞壁上的各种分子共价键,使细胞壁水解,从而杀死细菌。Endolysin降解细菌细胞壁的机理与溶菌酶不同,溶菌酶是在肽聚糖上的N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间切开,而Endolysin是切开肽聚糖上糖基与肽之间或肽与肽之间的共价键,从而使细胞壁降解。如大肠杆菌的λ噬菌体表达的R 和Rz蛋白,李斯特菌噬菌体表达的A118、A500、A511蛋白、肺炎链球菌噬菌体Dp-1的内溶素Pal,A 族链球菌噬菌体的内溶素C1、碳疽杆菌γ噬菌体的PlyG等,都是噬菌体表达的用于降解宿主细胞壁肽聚糖的Endolysin。因此,表达内溶素被认为是噬菌体裂解宿主细胞壁的普遍方式,内溶素高效抗菌效率也使其被认为是新一代抗菌药物。

关键词：噬菌体几丁质酶基因 D29 结核杆菌功能研究

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重组人胶质细胞源性神经营养因子的高效表达

重组人胶质细胞源性神经营养因子的高效表达

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：吴海祥吴建国孟小林王革非文力朱俊铭湖北丝宝药业有限公司博士后科研工作站武汉大学生命科学院武汉大学生命科学院丝宝集团科研中心生命科学研究所丝宝集团科研中心生命科学研究所丝宝集团科研中心生命科学研究所

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF),是一种分泌型神经营养因子,1993年Leu-Fen Lin等首先从大鼠胶质细胞系B49的无血清培养基中经浓缩、分离纯化出来。GDNF能专一性促进体外培养的鼠胚腹侧中... 详细信息

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF),是一种分泌型神经营养因子,1993年Leu-Fen Lin等首先从大鼠胶质细胞系B49的无血清培养基中经浓缩、分离纯化出来。GDNF能专一性促进体外培养的鼠胚腹侧中脑多巴胺能神经元摄取多巴胺,并促进其存活与形态分化,是目前发现的特异性最强的多巴胺能神经元营养因子。研究表明,GDNF对周围神经系统运动神经元和感觉神经元的发育、存活和再生也有促进作用,这提示GDNF具有治疗一些难治性神经系统疾病,如帕金森病(PD)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、脊髓性肌肉硬化(SMA)等的临床应用前景。

关键词：人胶质细胞源性神经营养因子高效表达 Rosetta

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人抗凝血酶Ⅲ在巴斯德毕赤酵母中表达与纯化研究

人抗凝血酶Ⅲ在巴斯德毕赤酵母中表达与纯化研究

引用

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：于群贺敏宋丽雅章金刚军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所

抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)是一种相对分子质量(Mr)为58×103的血浆糖蛋白,是血浆中最重要的生理性抗凝血因子,在维持血液的凝血与抗凝血平衡中起重要作用,它是多功能丝氨酸蛋白酶抑制剂, 承担血浆中70％的生理性抗凝血酶活性。AT-Ⅲ在血液... 详细信息

抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)是一种相对分子质量(Mr)为58×103的血浆糖蛋白,是血浆中最重要的生理性抗凝血因子,在维持血液的凝血与抗凝血平衡中起重要作用,它是多功能丝氨酸蛋白酶抑制剂, 承担血浆中70％的生理性抗凝血酶活性。AT-Ⅲ在血液凝固级联反应和维持血液流动性方面发挥主要调节作用,它的缺乏将易导致血栓形成。血浆中纯化的AT-Ⅲ制剂广泛应用在多种疾病的治疗上, 如AT-Ⅲ缺陷(包括先天和后天)、弥漫性血管内凝血、再发性凝血疾病、外伤、肝病等,因此AT-Ⅲ有广泛的临床应用前景。目前在临床使用的均是血浆来源的AT-Ⅲ,但是,血浆来源的AT-Ⅲ最终将被重组产品所取代;原因如下:(1)血源性病毒如肝炎及艾滋病毒传播;(2)血液供应日趋紧张;(3)治疗费用高昂等。本研究的宗旨是利用基因重组技术表达AT-Ⅲ,大幅度降低其临床使用成本,为临床广泛应用奠定基础。

关键词：巴斯德毕赤酵母临床使用

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微生物代谢工程与新材料的合成

微生物代谢工程与新材料的合成

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：陈国强清华大学生物系

对微生物合成的聚羟基脂肪酸酯的深入认识需要联合应用生物学、化学、物理、化学工程、高分子化学和材料科学的知识。我们首次将傅立叶变换红外光谱技术(FT-IR)用于筛选能合成聚羟基丁酸羟基已酸酯(PHBHHx)的细菌,并发现分离出的细菌中... 详细信息

对微生物合成的聚羟基脂肪酸酯的深入认识需要联合应用生物学、化学、物理、化学工程、高分子化学和材料科学的知识。我们首次将傅立叶变换红外光谱技术(FT-IR)用于筛选能合成聚羟基丁酸羟基已酸酯(PHBHHx)的细菌,并发现分离出的细菌中至少有30％能合成各种PHA。用化学工程的手段,我们在小规模发酵中一株筛选的嗜水气单胞菌生产聚羟基已酸酯——3-羟基丁酸和含有10- 15％3-羟基已酸的共聚酯。分子生物学研究发现,这株嗜水气单胞菌的合成酶系统只能合成含有10 -15％3-羟基已酸的PHBHHx。将其他PHA合成相关基因如β-酮硫解酶基因(phbA)、乙酰乙酰-CoA 不原酶基因(phhB)、PHA颗粒结合蛋白基因(vgb)转入到这株菌中并同时改变培养条件,可以调控 PHBHHx中两种单体的组成。我们已经成功地生产出了具有各种不同3-羟式已酸含量的PHBHHx, 并发现PHBHHx中3-羟基已酸的含量不仅影响到它的物理性能,还与其生物相容性和生物可降解性有关,而后二者对其在生物材料中的应用有重要意义。最近的研究结果表明,PHA在降解过程中释放出来的单体对细胞的粘附、分化和增殖有重要的影响。此外,通过与有机合成化学家的紧密合作,有希望合成出含有全新单体结构的PHA以满足不同的用途。

关键词：微生物代谢 PHA PHBHHx 嗜水气单胞菌

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转基因植物中外源基因时空动态表达及遗传分离的研究进展

转基因植物中外源基因时空动态表达及遗传分离的研究进展

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：王军辉王念张建国张守攻中国林业科学研究院林业科学研究所中国林业科学研究院林业科学研究所中国林业科学研究院林业科学研究所中国林业科学研究院林业科学研究所

转基因植物近年来得到迅猛发展。在转Bt基因植株中,外源基因的时空动态表达对于害虫的防治和转基因安全评价管理具有重要意义。本文综述了转基因植物,特别是转基因林木的的发展现状。并从单基因位点孟德尔遗传,多基因位点孟德尔遗传以... 详细信息

转基因植物近年来得到迅猛发展。在转Bt基因植株中,外源基因的时空动态表达对于害虫的防治和转基因安全评价管理具有重要意义。本文综述了转基因植物,特别是转基因林木的的发展现状。并从单基因位点孟德尔遗传,多基因位点孟德尔遗传以及非孟德尔式遗传三个方面介绍了外源基因在转基因植物后代中遗传分离的研究进展。并就影响外源基因遗传分离的因素进行了讨论。利用生物测定法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)对植物不同组织在同一发育阶段、同一组织在不同的发育阶段以及不同转基因植株的外源基因的时空动态表达进行研究。最后展望了转基因植物中外源基因时空动态表达的研究进展和现状。

关键词：时空动态外源基因

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人骨髓红系细胞在无血清体外培养过程中珠蛋白基因表达变化的分析

人骨髓红系细胞在无血清体外培养过程中珠蛋白基因表达变化的分析

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：张昕马艳妮张俊武中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

人类珠蛋白基因的表达具有严格的红系组织特异性和发育阶段特异性。在个体发育过程中,红细胞内珠蛋白基因的表达存在由胚胎型(ε)到胎儿型(γ)及胎儿型(γ)到成人型(β)两个开关过程, 是研究真核生物基因表达调控重要的天然模型。尤其... 详细信息

人类珠蛋白基因的表达具有严格的红系组织特异性和发育阶段特异性。在个体发育过程中,红细胞内珠蛋白基因的表达存在由胚胎型(ε)到胎儿型(γ)及胎儿型(γ)到成人型(β)两个开关过程, 是研究真核生物基因表达调控重要的天然模型。尤其是对开关机制的深入研究对β-地中海贫血及镰形细胞贫血(SCD)等危害严重的血红蛋白病的治疗具有重要意义。已有的研究显示,正常成人红系造血过程中,在红系分化发育过程中简单重现了γ到β基因的开关过程,被称为生理性开关(或压缩

关键词：骨髓红系细胞珠蛋白体外培养无血清基因表达变化

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