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用精原干细胞移植技术制作转基因动物的研究前景

用精原干细胞移植技术制作转基因动物的研究前景

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：吴应积罗奋华旭日干内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术教育部重点实验室内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术教育部重点实验室内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术教育部重点实验室

在生物科学、生物医学、畜牧业科学和生物反应器的研究中,转基因动物是非常有用的工具。有多种方法产生转基因动物。最通用的制作转基因动物的方法是原核显微注射法和核移植法。然而, 这些方法往往效率很低,引起嵌合体(在原核显微注射法... 详细信息

在生物科学、生物医学、畜牧业科学和生物反应器的研究中,转基因动物是非常有用的工具。有多种方法产生转基因动物。最通用的制作转基因动物的方法是原核显微注射法和核移植法。然而, 这些方法往往效率很低,引起嵌合体(在原核显微注射法中)或产生不正常的个体(在核移植法中)。 1994年,Brinster等人发表了精原于细胞移植的新方法,实现了供体小鼠的精原干细胞在受体中进行精子发生和单倍体的生殖遗传。通过移植,供体的精原干细胞在适当的受体中定居并分化产生精子, 与母体交配后,经过怀孕分娩,产生具有供体遗传特性的后代。这一发明是生殖生物学上里程碑式的建树。精原干细胞移植法不仅为精子发生过程的研究提供了有力的工具,也为转基因动物的制作指出了可能实现的新途径。

关键词：精原干细胞移植原核显微注射核移植注射法精子发生技术制作

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125I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布

125I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：汪海洋刘海波董艳秋杨建虹程联胜刘兢中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室中国科学技术大学生命科学学院细胞与分子免疫学实验室

目的:研究125I标记的抗p185抗体(鼠mAbA21、人鼠嵌合抗体A21scFv-Fc及单链抗体A21scFv) 在体外细胞代谢和在体内生物学分布,为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据。方法: 1 抗体与高表达p185的人卵巢癌细胞SKOV3特异结合的... 详细信息

目的:研究125I标记的抗p185抗体(鼠mAbA21、人鼠嵌合抗体A21scFv-Fc及单链抗体A21scFv) 在体外细胞代谢和在体内生物学分布,为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据。方法: 1 抗体与高表达p185的人卵巢癌细胞SKOV3特异结合的FACS检测。 2 荷人卵巢癌细胞SKOV3裸鼠模型的建立。将高表达p185人卵巢癌细胞株SKOV3接种于3- 4week的BALB／cAnude免疫缺陷裸鼠左胸部皮下,1×107个细胞／只,5week后肿瘤直径达到1．5cm 左右。

关键词：生物学分布人卵巢癌细胞体外代谢

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产黄原胶降解酶菌种的选育及发酵条件的研究

产黄原胶降解酶菌种的选育及发酵条件的研究

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：刘晗白雪芳杜昱光中国科学院大连化学物理研究所中国科学院大连化学物理研究所中国科学院大连化学物理研究所

黄原胶是一种由野油菜黄单孢菌分泌的中性水溶性多糖,又称汉生胶。其结构由五糖单位重复构成,主链与纤维素相同即由β-1,4糖苷键相连的葡萄糖构成,三个相连的单糖组成其侧链:甘露糖→葡萄糖→甘露糖。黄原胶由于其独特的剪切稀释性质,... 详细信息

黄原胶是一种由野油菜黄单孢菌分泌的中性水溶性多糖,又称汉生胶。其结构由五糖单位重复构成,主链与纤维素相同即由β-1,4糖苷键相连的葡萄糖构成,三个相连的单糖组成其侧链:甘露糖→葡萄糖→甘露糖。黄原胶由于其独特的剪切稀释性质,良好的增稠性,理想的乳化稳定性,对酸、碱、热、反复冻融的高度稳定性,以及对人体的完全无毒害等许多优良的特性,因而在食品、石油、医药、日用化工等十几个领域有着极其广泛的应用,其商品化程度之高,应用范围之广,令其他任何一种微生物多糖都望尘莫及。但同时也引起了一些应用问题。采油过程中黄原胶的使用可提高采油率, 但也增加了原油的粘度,使后续工艺如油料运输及产品纯化的成本增高,为此需要能方便降解黄原胶的方法。同时,由于寡糖具有抗病毒、抑菌、植物诱抗、提高免疫力等功能,由植物致病菌分泌的黄原胶降解得到的寡糖是否也拥有某种生物活性也激起了人们强烈的兴趣。

关键词：黄原胶降解酶酶解法

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抗人红细胞表面抗原单抗可变区基因克隆

抗人红细胞表面抗原单抗可变区基因克隆

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：邵长利王娜吕茂民李伟静李卉章金刚军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所军事医学科学院野战输血研究所

利用已经发表的抗体可变区简并引物,克隆抗人红细胞单克隆抗体可变区重链和轻链基因,获得350bp和 340bp产物,经与抗体库基因进行相似性比较,证实所克隆的DAN片段与抗体可变区框架结构一致,分别属于小鼠抗体重链可变区基因家族I(B)亚群... 详细信息

利用已经发表的抗体可变区简并引物,克隆抗人红细胞单克隆抗体可变区重链和轻链基因,获得350bp和 340bp产物,经与抗体库基因进行相似性比较,证实所克隆的DAN片段与抗体可变区框架结构一致,分别属于小鼠抗体重链可变区基因家族I(B)亚群和小鼠抗体轻链可变区基因家族的轻链可变区I亚群。 1．抗红细胞单抗细胞株的获得用五人红细胞膜混合物免疫BALB／c小鼠,经过筛选获得一株稳定分泌抗红细胞抗体的细胞株, 命名为2E8。该株细胞染色体计数平均为98条,IgG1、K链。与人四型红细胞均发生强凝集反应,凝集效价1:1024,腹水单抗凝集效价．1:64×106,无血型交叉反应性和种属交叉反应性。ADCC与补体结合实验证实抗体活性良好。

关键词：可变区基因简并引物抗体可变区细胞表面抗原

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新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性

新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：杨振泉刘巧泉于恒秀潘志明焦新安扬州大学扬州大学扬州大学扬州大学扬州大学

利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。本研究以新城疫病毒融合蛋白(NDV F)基因1．7 kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子组成嵌合基因... 详细信息

利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。本研究以新城疫病毒融合蛋白(NDV F)基因1．7 kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子组成嵌合基因,构建了适宜于农杆菌介导转化水稻的转化载体pUNDV,经根癌农杆菌介导的遗传转化方法将由Ubi启动子驱动的NDV F嵌合基因导入水稻细胞中,经潮霉素抗性筛选,共再生获得了6个独立的转基因株系。PCR分析结果表明NDV F基因已整合到水稻基因组中。ELISA和Western blot分析结果证实NDV F蛋白在部分转基因水稻叶片组织中获得表达,其中植株F5叶片组织中具有较高的表达水平。将F5叶片可溶性总蛋白皮下注射免疫 BALB／c小鼠,结果表明能够诱导小鼠产生一定水平的NDV F蛋白特异抗体。

关键词：水稻叶片新城疫病毒免疫原性

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新药发现和发展的新途径:天然产物的组合生物合成研究

新药发现和发展的新途径:天然产物的组合生物合成研究

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：刘文中国科学院上海有机化学研究所生命有机国家重点实验室

组合生物合成是近年来在生物技术的推动下、发展起来的一种用于新药发现和发展的新方法。它是以天然产物的代谢合成机制研究为基础,从基因水平对天然产物的生物合成途径进行合理化的遗传修饰或重组,建立结构复杂的天然产物类似物库,以... 详细信息

组合生物合成是近年来在生物技术的推动下、发展起来的一种用于新药发现和发展的新方法。它是以天然产物的代谢合成机制研究为基础,从基因水平对天然产物的生物合成途径进行合理化的遗传修饰或重组,建立结构复杂的天然产物类似物库,以利于从中开发更具有临床应用价值的药物。由于目的代谢产物可以由获得的重组菌株发酵大量生产,因而可以降低生产成本和减少环境污染。目前,组合生物合成无论是在学术研究还是工业领域,对于新药开发和生产的巨大影响力正逐渐为科学家们所认识。它们的成功运用,关键是在基因和蛋白功能水平上认识和理解复杂天然产物的生物合成及其调控机制,这是在微生物体内针对代谢途径进行遗传操作的分子和生化基础。天然产物的生物合成——即如何从小分子的前体经过顺序协作的酶催化反应形成不同的化学结构——是一个相当复杂的过程,不但包括多步骤的生物合成途径,还需要对代谢网络的协调控制。其中,阐明负责独特化学结构和生物活性中心形成的关键酶反应机制是研究的核心内容。

关键词：组合生物合成生物活性化学结构生物合成途径生物合成基因簇重组菌株新药发现天然产物

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重组大肠杆菌表达的人胸腺素α原存在部分N-末端乙酰化修饰

重组大肠杆菌表达的人胸腺素α原存在部分N-末端乙酰化修饰

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：吴军唱韶红巩新熊凌霜汪建华马清钧军事医学科学院生物工程研究所军事医学科学院生物工程研究所军事医学科学院生物工程研究所军事医学科学院生物工程研究所军事医学科学院生物工程研究所军事医学科学院生物工程研究所

蛋白和多肽的N-末端乙酰化修饰是真核细胞普遍存在的一种翻译后修饰功能,乙酰化修饰对许多蛋白和多肽的体内稳定性具有重要作用。而大肠杆菌中蛋白的N-乙酰化修饰则非常罕见。胸腺素α原(prothymosinα proTα)是一种起先在胸腺中发现... 详细信息

蛋白和多肽的N-末端乙酰化修饰是真核细胞普遍存在的一种翻译后修饰功能,乙酰化修饰对许多蛋白和多肽的体内稳定性具有重要作用。而大肠杆菌中蛋白的N-乙酰化修饰则非常罕见。胸腺素α原(prothymosinα proTα)是一种起先在胸腺中发现的酸性蛋白,现已证明该蛋白的组织分布非常广泛。它具有免疫刺激活性,可增强机体抗病毒、肿瘤和真菌等能力。它是胸腺素α1(合成的N-端乙酰化胸腺素α1已上市,用于治疗乙肝等)和胸腺素α11的前体。天然来源的哺乳动物胸腺素α原和胸腺素α1、α11为N-末端乙酰化修饰的,乙酰化修饰对提高其体内稳定性具有重要作用。胸腺素α原和胸腺素α1及其融合蛋白均已在大肠杆菌中获得高效表达,但未见乙酰化修饰的报道。本研究建立了大肠杆菌表达的胸腺素α原的制备工艺,通过质量肽谱和串连质谱序列分析,发现制备的重组人胸腺素α原的N-末端存在乙酰化修饰。该发现为在原核表达系统高效制备乙酰化修饰的proTα和胸腺素α1提供了基础。同时也为研究大肠杆菌的乙酰化修饰功能提供了一个模型。

关键词：大肠杆菌表达乙酰化修饰胸腺素

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用体外培养的牛乳腺上皮细胞检测乳腺生物反应器表达载体的方法

用体外培养的牛乳腺上皮细胞检测乳腺生物反应器表达载体的方法

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：多曙光吴应积罗奋华旭日干内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室

乳腺生物反应器的制备是生物工程领域研究的热点。然而乳腺生物反应器研究和开发的周期长,成本大,风险高。因此,在生产转基因动物之前对所构建的乳腺特异表达载体的合理性和有效性进行检测是非常必要的。目前,国内外普遍采用制作转基因... 详细信息

乳腺生物反应器的制备是生物工程领域研究的热点。然而乳腺生物反应器研究和开发的周期长,成本大,风险高。因此,在生产转基因动物之前对所构建的乳腺特异表达载体的合理性和有效性进行检测是非常必要的。目前,国内外普遍采用制作转基因小鼠作为检测乳腺表达载体构建合理性的方法,对转基因的表达水平、组织特异性和产生蛋白的活性进行分析,为转基因家畜制备提供科学依据。但是制作转基因小鼠的技术难度大,周期长,而且一定的基因构件在转基因小鼠模型中的表达量与大动物中的表达量并不一致,使这种方法的可行性受到一定的限制。而用体外培养的具有正常生理功能的牛乳腺上皮细胞检测乳腺特异性表达载体的功能,具有方便、快捷且能够反映载体在体内表达水平等优点。

关键词：牛乳腺上皮细胞乳腺表达载体乳腺生物反应器体外培养

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左旋咪唑增强传统疫苗免疫效果的研究

左旋咪唑增强传统疫苗免疫效果的研究

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：康友敏金华利张晓莹解启发尹江梅于扬王宾中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室

传统的灭活疫苗能诱导较强的体液免疫反应,但其诱导的细胞免疫反应较弱。佐剂是增强灭活疫苗免疫效果的有效策略之一。灭活疫苗常用的是油佐剂,但其有严重的副作用。研究证明左旋咪唑(LMS)是一种良好的免疫增强剂,它能使受抑制的吞噬细... 详细信息

传统的灭活疫苗能诱导较强的体液免疫反应,但其诱导的细胞免疫反应较弱。佐剂是增强灭活疫苗免疫效果的有效策略之一。灭活疫苗常用的是油佐剂,但其有严重的副作用。研究证明左旋咪唑(LMS)是一种良好的免疫增强剂,它能使受抑制的吞噬细胞和淋巴细胞功能恢复正常,而且也可增强细胞免疫机能,大大提高疫苗的免疫效果。而且左旋咪唑还应用于癌症的治疗上。本实验室研究证明LMS不但能够增加口蹄疫核酸疫苗的抗体水平,还能激发有效的细胞免疫。本研究利用蓝耳病灭活疫苗,进一步探讨LMS作为佐剂对灭活疫苗免疫效果的影响,并阐明其作为佐剂的作用机理。

关键词：传统疫苗灭活疫苗左旋咪唑共刺激分子细胞免疫免疫效果油佐剂

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对加工番茄主要病害具有促生和防病作用的复合细菌组合的筛选及稳定性测试

对加工番茄主要病害具有促生和防病作用的复合细菌组合的筛选及稳...

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：陶晶吴艳岳海涛赵思峰李春李晖石河子大学农学院植保系石河子大学农学院植保系石河子大学农学院植保系石河子大学农学院植保系石河子大学生物化工实验室石河子大学农学院植保系

新疆加工番茄具有较高的番茄红素和可溶性固形物含量,且新疆生产的番茄酱成色好、营养价值高、品质优良,因此,加工番茄应在新疆规模化生产。但是近年来,新疆加工番茄各种病害经常发生, 严重制约了新疆加工番茄产业的持续、稳定发展。植... 详细信息

新疆加工番茄具有较高的番茄红素和可溶性固形物含量,且新疆生产的番茄酱成色好、营养价值高、品质优良,因此,加工番茄应在新疆规模化生产。但是近年来,新疆加工番茄各种病害经常发生, 严重制约了新疆加工番茄产业的持续、稳定发展。植物病害的微生物防治是病害综合治理的重要方法之一,通过加强筛选有益微生物,研制微生物制剂,配合适当的农艺措施来改善、维护、培育土壤微生物群落,使之保持和谐、稳定的功能,从而提高土壤微生物多样性,进而实现土壤稳定、适度的生态肥力,可以从很大程度上抑制植物病害的发生,实现农业的可持续发展。近十多年来微生物制剂发展较快,其剂型由单一的菌种发展为多个菌种的培养物,混合成为复合微生物肥料,生产规模和应用面积呈增长趋势。然而,此类接种剂对作物效应的基础研究相对不足,因此,有必要继续进行深入研究, 筛选确实具有防治植物病害、促进作物生长作用的复合增效型菌株,并明确其作用机理。

关键词：防病作用加工番茄植物病害主要病害稳定性测试

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