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壳聚糖通过减少自由基堆积提高抗疲劳能力的实验研究

壳聚糖通过减少自由基堆积提高抗疲劳能力的实验研究

引用

2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：王耀东孙梦佳王侯杰中国矿业大学(北京)体育教研部

目的:探讨游泳运动配合服用壳聚糖对小鼠剧烈运动后对疲劳的恢复和延缓的影响及其可能机制。方法:本实验选取雄性昆明(KM)小鼠,共82只,按体重随机分为8组,每组10-11只。具体分为:安静对照组,训练对照组,服药安静组(低、中、高剂量),服... 详细信息

目的:探讨游泳运动配合服用壳聚糖对小鼠剧烈运动后对疲劳的恢复和延缓的影响及其可能机制。方法:本实验选取雄性昆明(KM)小鼠,共82只,按体重随机分为8组,每组10-11只。具体分为:安静对照组,训练对照组,服药安静组(低、中、高剂量),服药训练组(低、中、高剂量)。除安静组之外,其他训练组每天进行一次游泳训练,服药组按不同剂量每天灌服壳聚糖。实验最后,服药组给药30分钟后,全部小鼠按组分别进行游泳运动,至力竭取眼球血后,处死解剖,测定以下六个数据:一次性力竭时间﹑血红蛋白力竭前后含量﹑血乳酸力竭前后含量、超氧化物歧化酶的活力、丙二醛含量和肌/肝糖原含量。结果:训练组和中剂量服药训练组小鼠游泳力竭时间增加(P<0.01, P<0.01),中剂量服药组小鼠血红蛋白含量增加(P<0.01),血乳酸积累量减少(P<0.01),中剂量服药组小鼠的肌/肝中超氧化物歧化酶(SOD)的活力增加(P<0.01),对细胞的损伤程度(MDA)减小(P<0.01),肌/肝糖原含量增加(P<0.01)。结论:类比高水平游泳运动员赛前6周训练计划,设计出的实验小鼠的训练方案,对小鼠的耐力、机体的运动机能、以及对疲劳的恢复有增强作用;根据实验中小鼠灌胃不同剂量的壳聚糖溶液,对比得出中剂量(0.3g壳聚糖/kg小鼠体重)有效延长小鼠的运动时间,增强其耐力,增加血液中红细胞的携氧的能力,减少了血液中乳酸含量的堆积;进行合理训练配合适量的壳聚糖对机体抗疲劳具有协同作用,对改善自由基的代谢速度、减小自由基对身体脏器及细胞的损伤程度效果明显,更有效延长小鼠游泳时间,增强其运动能力。

关键词：壳聚糖抗疲劳性运动训练

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TGF-β1/Smads通路参与内皮-间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的作用

TGF-β1/Smads通路参与内皮-间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：黄丹娜张晶晶武垣伶高慧楼国强周卓琳 Lingfang Shi 王万铁温州医科大学病理生理学教研室 Division of Pulmonary and Critical Care Medicine Stanford University Medical School

目的:该文主要探讨转化生长因子β1(Transforming growth factor,TGF-β1)/Smads通路与大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压及内皮-间质转分化(endothelialmesenchymal transition,EndoMT)的关系。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞随机分为6组:常... 详细信息

目的:该文主要探讨转化生长因子β1(Transforming growth factor,TGF-β1)/Smads通路与大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压及内皮-间质转分化(endothelialmesenchymal transition,EndoMT)的关系。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞随机分为6组:常氧(N)组、低氧高二氧化碳(H)组、TGF-β受体激动剂rhTGF-β1(T)组、TGF-β受体抑制剂SB-431542(S)组、溶剂柠檬酸(A)组和溶剂DMSO(D)组。N组置于常氧环境,其余5组置于低氧高二氧化碳环境并用不同药物处理。采用CD31和α-SMA免疫荧光双标法鉴定大鼠肺动脉内皮细胞;CCK-8法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞迁移;逆转录-PCR和Western blot分别检测细胞CD31、α-SMA、Smad2/3 mRNA和蛋白质的表达情况。结果:低氧高二氧化碳环境下,细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平上调,Smad2/3mRNA和P-Smad2/3蛋白质表达水平上调,而CD31 mRNA和蛋白质表达水平下调,细胞活性降低而迁移增多;使用外源性TGF-β1可促进低氧高二氧化碳环境下的上述作用;而使用SB-431542则逆转低氧高二氧化碳环境下TGF-β1的作用。结论:低氧高二氧化碳能促进大鼠肺动脉内皮细胞发生EndoMT;抑制TGF-β1/Smads通路能抑制EndoMT,从而缓解低氧高二氧化碳性肺动脉高压。

关键词：低氧高二氧化碳内皮-间质转分化 TGF-β1/Smads通路肺动脉内皮细胞

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miR-31通过调节TLR4/NF-κB信号通路以及凋亡相关蛋白促进肠炎发生

miR-31通过调节TLR4/NF-κB信号通路以及凋亡相关蛋白促进肠炎发生

引用

2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：刘凯丽王茜都新新张文琴崔香丽山西医科大学生理学系

目的:探讨miR-31对DSS诱发结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路和凋亡相关蛋白的影响。方法:(1)小鼠结肠炎实验:14只FVB非转基因小鼠随机分为control组(n=6)只,DSS组(n=8),16只FVB miR-31转基因小鼠随机分为miR-31过表达组(n=8),miR-31过表达... 详细信息

目的:探讨miR-31对DSS诱发结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路和凋亡相关蛋白的影响。方法:(1)小鼠结肠炎实验:14只FVB非转基因小鼠随机分为control组(n=6)只,DSS组(n=8),16只FVB miR-31转基因小鼠随机分为miR-31过表达组(n=8),miR-31过表达+DSS组(n=8),用1%DSS(葡聚糖硫酸钠,Dextran Sulfate Sodium)诱发小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)。DSS组和miR-31+DSS组以一周的1%DSS水,一周正常无菌水为一个周期,2.5个周期后造模结束。Western Blot和IHC检测小鼠结肠组织NF-κB p65、TLR4、iNOS、Bax、Bcl-2蛋白的表达;TUNEL检测小鼠结肠组织细胞凋亡。(2)细胞培养实验:HCT 116细胞过表达或敲低miRNA-31,Western Blot检测NF-κB p65、TLR4蛋白的表达。结果:(1)小鼠结肠组织中DSS组NF-κB p65(p<0.01)、TLR4(p<0.01)、iNOS (p<0.01)蛋白表达水平均高于control组,Bcl-2/Bax比值(p<0.01)低于control组;miR-31过表达组NF-κB p65(p<0.05)、TLR4(p<0.05)、iNOS(p<0.01)蛋白表达水平也均高于control组,Bcl-2/Bax比值(p<0.05)低于control组;且与DSS组相比,miR-31+DSS组NF-κB p65(p<0.01)、TLR4(p<0.01)、iNOS(p<0.01)蛋白表达水平显著升高,Bcl-2/Bax比值(p<0.01)显著降低。(2) HCT 116细胞过表达miR-31后,NF-κB p65(p<0.05)、TLR4(p<0.01)蛋白表达水平较control组升高,敲低miR-31后,与control组相比NF-κB p65、TLR4(p<0.05)蛋白表达水平下降。(3) TUNEL法检测结果显示,DSS组(p<0.01)和miR-31(p<0.05)组相比于control组凋亡细胞数增加,同样与DSS组相比,miR-31+DSS组(p<0.01)凋亡细胞数也增加。结论:miR-31通过促进TLR4/NF-κB信号通路和介导肠上皮细胞凋亡促进结肠炎的发展。

关键词： miR-31 溃疡性结肠炎 DSS TLR4/NF-κB信号通路细胞凋亡

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白藜芦醇通过抑制miR-31表达下调Wnt/β-catenin信号通路抑制肠炎发生

白藜芦醇通过抑制miR-31表达下调Wnt/β-catenin信号通路抑制肠炎...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：都新新刘鑫刘凯丽张文琴张一楠崔香丽山西医科大学生理学系

目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)通过抑制miR-31表达下调Wnt/β-catenin信号通路发挥抗结肠炎作用的机制。方法:1.动物实验:1%DSS(葡聚糖硫酸钠,Dextran Sulfate Sodium)3周诱发小鼠肠炎。28只C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS组、DS... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)通过抑制miR-31表达下调Wnt/β-catenin信号通路发挥抗结肠炎作用的机制。方法:1.动物实验:1%DSS(葡聚糖硫酸钠,Dextran Sulfate Sodium)3周诱发小鼠肠炎。28只C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS组、DSS+Res组和Res组。DSS组和DSS+Res组小鼠在第1和3周饮用1%DSS水,第2周饮用无菌水,对照组和Res组小鼠3周均饮用无菌水。DSS+Res组和Res组小鼠在第3周每天灌胃均给予0.2ml 8mg/ml的白藜芦醇1次,其他两组给予等量0.5%的CMC-Na 灌胃1次,造模结束后取结肠组织,石蜡包埋、切片,免疫组化法检测β-catenin、TCF1/TCF7、Cyclin D1蛋白表达。***-31敲低和过表达实验:HCT116细胞分为对照组、Res组(10mg/mL),mRi-31-mimic组、mRi-31-inhibitor组、mRi-31-inhibitor+Res组。Western Blot检测Wnt通路相关蛋白LRP-6、FDZ3、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白的表达。结果:(1)免疫组化结果显示,与对照组相比,DSS组小鼠结肠β-catenin(p<0.05)、TCF1/TCF7(p<0.0001)、Cyclin D1(p<0.01)表达增多,DSS+Res、Res组蛋白表达与control组相比没有明显差异。(2)Western Blot结果显示,与对照组相比,白藜芦醇可降低β-catenin(p<0.05)、LRP6(p<0.05)、FDZ3(p<0.05)、c-Myc(p<0.001)、Cyclin D1(p<0.05)表达。(3)与对照组相比,HCT116细胞抑制miRNA-31后,β-catenin(p<0.05)、LRP6(p<0.05)、、c-Myc(p<0.001)表达减少;而过表达miRNA-31后,β-catenin、LRP6、c-Myc蛋白表达有所增加。在抑制miRNA-31并给予白藜芦醇后,LRP6(p<0.001)、FDZ3(p<0.01)、c-Myc(p<0.0001)、Cyclin D1(p<0.01)的表达较对照组显著减少,并且较单纯Res组的减少更显著。结论:白藜芦醇能够缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。此作用与抑制miRNA-31的表达、下调Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：白藜芦醇 DSS Wnt/β-catenin信号通路肠炎 miRNA-31

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不同乐器演奏的古典音乐对自闭症模型大鼠疼痛共情的影响

不同乐器演奏的古典音乐对自闭症模型大鼠疼痛共情的影响

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：徐诗逸李岩陈哲平李光建杭荣华汪萌芽皖南医学院细胞电生理研究室皖南医学院启明星小组皖南医学院心理学教研室

目的:探究不同乐器演奏的古典音乐对自闭症模型大鼠疼痛共情的影响。方法:采用丙戊酸钠(600mg/kg)腹腔注射入孕12.5天大鼠建立其子代自闭症模型,通过对子代体质量、方向趋能、游泳能力、睁眼时间检测进行模型鉴定。造模和正常仔鼠随机... 详细信息

目的:探究不同乐器演奏的古典音乐对自闭症模型大鼠疼痛共情的影响。方法:采用丙戊酸钠(600mg/kg)腹腔注射入孕12.5天大鼠建立其子代自闭症模型,通过对子代体质量、方向趋能、游泳能力、睁眼时间检测进行模型鉴定。造模和正常仔鼠随机分为正常提琴组(NV,n=21)、自闭症提琴组(AV,n=12)、正常钢琴组(NP,n=18)、自闭症钢琴组(AP,n=18)、正常空白组(N,n=24)、自闭症空白组(A,n=15)。音乐干预的大鼠在子代出生后每周5天每天两小时暴露于古典音乐环境下(D大调Canon,并控制环境噪声<60dB)。于P35天将子代分亚组,以随机三只分别为示教鼠、观察鼠、对照鼠,给示教鼠腹腔注射0.6%醋酸(100mg/kg)并与观察鼠同笼30min进行观察鼠的疼痛共情建模。在疼痛共情建模前、后,用Von Fery纤维丝检测机械刺激缩足反应阈值(PWMT),并用光辐射热测痛仪检测不同光强度下的热辐射甩尾反应潜伏期(TEL)。结果:(1)与正常组相比,造模组仔鼠的PWMT升高(P<0.05);(2)AV组和AP组仔鼠的PWMT均较A组降低(P<0.05),但仍高于NV、NP和N组(P<0.01);(3)疼痛共情建模后NV、NP、N组,以及AV和AP组的观察鼠PWMT均下降(P<0.01);(4)造模组较正常组仔鼠的TEL延长(P<0.05),且未受音乐干预和疼痛共情建模的影响(P>0.5);(5)AV组和AP组的观察鼠在疼痛共情建模后机械痛阈均有下降,但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:自闭症模型鼠痛觉出现耐受,古典音乐干预有缓解作用,但不同乐器演奏的音乐对其疼痛共情的影响无明显差异。

关键词：音乐干预自闭症疼痛共情

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脊髓Fractalkine-CX3CR1促进慢性功能性内脏痛中枢敏化的形成

脊髓Fractalkine-CX3CR1促进慢性功能性内脏痛中枢敏化的形成

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：曹晨曦曹阳龚进林春福建省神经胶质与疾病重点实验室疼痛研究实验室福建医科大学生理与病理生理学系

目的本研究主要探讨脊髓Fractalkine/CX3CR1信号通路在慢性功能性内脏痛大鼠中枢敏化中的作用及其可能的机制,为慢性功能性内脏痛的临床治疗提供新靶点。方法:(1) SD新生大鼠(8-14 d)每天相同时间给予结直肠扩张刺激(压力60mmHg,1min),... 详细信息

目的本研究主要探讨脊髓Fractalkine/CX3CR1信号通路在慢性功能性内脏痛大鼠中枢敏化中的作用及其可能的机制,为慢性功能性内脏痛的临床治疗提供新靶点。方法:(1) SD新生大鼠(8-14 d)每天相同时间给予结直肠扩张刺激(压力60mmHg,1min),建立IBS慢性功能性内脏痛大鼠模型。对照组不做处理。6周后检测大鼠腹外斜肌对结直肠扩张(压力40mmHg、60mmHg)所引发的放电反应,评估大鼠的内脏痛觉敏感性。(2) Western blot检测大鼠的脊髓胸腰段及腰骶段Fractalkine、CX3CR1的蛋白表达量。(3)大鼠行鞘内置管术,观察比较鞘内给予Fractalkine中和抗体前后大鼠的腹外斜肌放电幅值的差异。(4)免疫组化检测对照组和IBS模型组的脊髓胸腰段及腰骶段CX3CR1的表达量及分布情况。(5)观察比较鞘内给予CX3CR1中和抗体前后大鼠的腹外斜肌放电幅值的差异,及脊髓磷酸化的p38MAPK的表达量。结果:(1)IBS模型大鼠的内脏痛敏反应较对照组显著增高(p<0.05)。(2)Western blot结果显示IBS模型大鼠脊髓胸腰段及腰骶段Fractalkine和CX3CR1的蛋白表达量较对照组显著升高(p<0.05)。(3)Fractalkine中和抗体可以缓解IBS模型大鼠的内脏痛觉敏感性(p<0.05)。(4)免疫组化提示CX3CR1主要表达在脊髓背角小胶质细胞胞质内,且模型组较对照组表达量显著增加(p<0.05)。(5)CX3CR1中和抗体可以呈剂量依赖性抑制IBS模型大鼠的内脏痛敏反应(p<0.05),鞘内给予CX3CR1中和抗体后,IBS模型大鼠脊髓磷酸化的p38MAPK蛋白的表达量显著下降(p<0.05)。结论:脊髓Fractalkine/CX3CR1信号通路参与结直肠扩张所致的IBS大鼠慢性内脏痛觉中枢敏化,其机制可能是Fractalkine与CX3CR1结合激活下游的其中一个信号靶点p38MAPK,介导慢性功能性内脏痛中枢敏化的形成。

关键词：慢性功能性内脏痛脊髓 Fractalkine CX3CR1 P38促丝裂原活化蛋白激酶

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三个不同海拔世居藏族居民体质指数与血脂相关性

三个不同海拔世居藏族居民体质指数与血脂相关性

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：次仁卓玛李娟玉珍崔超英欧珠罗布祈学斌边巴西藏大学高原医学研究中心中国科学院昆明动物研究所

目的调查西藏三个不同海拔世居藏族居民体质指数(BMI)的分布情况及超重和肥胖的检出率,并进一步探讨BMI与血脂的相关性。方法随机选取西藏自治区昌都市八宿县郭庆乡(4500m,定义"高海拔组")、芒康县纳西乡(2516m,定义"低... 详细信息

目的调查西藏三个不同海拔世居藏族居民体质指数(BMI)的分布情况及超重和肥胖的检出率,并进一步探讨BMI与血脂的相关性。方法随机选取西藏自治区昌都市八宿县郭庆乡(4500m,定义"高海拔组")、芒康县纳西乡(2516m,定义"低海拔组")和拉萨(3660m,定义"中海拔组")世居藏族居民648名。受试者测量身高、体重,并留取血样标本进行血脂检测。符合正态分布的计量资料采用均值±标准差表示,组间比较采用单因素ANOVA分析。不符合正态分布的计量资料采用M(P25,P75)表示,组间比较采用(KruskalWallis)秩和检验;率的比较采用χ2检验;采用Pearson相关性进行相关分析,P<0.05差异有统计学意义。结果三组不同海拔人群BMI水平无显著差异(P>0.05)。整合三组不同海拔人群进行超重和肥胖检出率分析,分别为:体重过低4.3%、体重正常44.4%、超重33.5%、肥胖17.7%。与正常体重相比,超重和肥胖组的TG、TC、LDL-C显著增高,而HDL-C显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。血脂各项指标分别与BMI进行Pearson相关分析,结果提示:TC、LDL-C与BMI呈弱正相关(R=0.15、R=0.25、R=0.13,P<0.05);HDL-C与BMI呈弱负相关(R=-0.261,P<0.05);TG与BMI之间呈高度正相关(R=0.9,P<0.001)。线性回归模型分析结果提示:经性别、年龄、职业校正后,BMI和血脂仍有相关性,血脂异常人群的BMI均值比血脂正常人群高1.93kg/m2(P>0.05)。结论三组不同海拔世居藏族居民BMI无显著差异;整合后数据显示超重和肥胖检出率较高。BMI和血脂有相关性,并且与TG呈高度正相关。本研究结果提示,高原世居人群超重和肥胖检出率不容乐观。因此,应进一步扩大样本量验证本研究结果,并对其形成机制进行深入研究。

关键词：不同海拔藏族世居居民血脂血糖肥胖超重

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负载Sca-1+干细胞的壳聚糖-胶原复合水凝胶在改善小鼠心肌梗死预后中的作用及机制

负载Sca-1+干细胞的壳聚糖-胶原复合水凝胶在改善小鼠心肌梗死预...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：陈思宇牛宝龙高尔和李燕楠颉丽英左琳山西医科大学生理学系教育部细胞生理学重点实验室太原理工大学材料科学与工程学院教育部新材料界面科学与工程重点实验室天普大学医学院转化医学中心

目的本研究制备可注射性壳聚糖-胶原复合水凝胶作为Sca-1+干细胞移植的3D支架材料,通过研究其理化特性及对干细胞移植治疗心梗的辅助疗效来对其性能及作用进行评估。方法(1)复合水凝胶的理化表征:SEM扫描电镜、FT-IR光谱分析、万能力学... 详细信息

目的本研究制备可注射性壳聚糖-胶原复合水凝胶作为Sca-1+干细胞移植的3D支架材料,通过研究其理化特性及对干细胞移植治疗心梗的辅助疗效来对其性能及作用进行评估。方法(1)复合水凝胶的理化表征:SEM扫描电镜、FT-IR光谱分析、万能力学实验仪测定。(2)将Sca-1+干细胞与水凝胶进行2D和3D复合培养,评估干细胞在复合支架上的生长情况。(3)构建C57BL/6J小鼠MI模型,通过心肌局部注射负载Sca-1+干细胞的复合水凝胶和PBS比较其对心功能和结构、炎症反应及梗死区域血管化程度的影响。结果(1)理化表征:SEM结果显示复合支架的平均孔径为268±8.9μm,适合干细胞黏附及扩散;FT-IR图谱显示水凝胶分子间化学键稳定形成且成功交联;万能实验仪测定水凝胶的力学性能为34.48±1.47 Kpa,可以明显延缓MI后期由于室壁变薄造成的急性心脏破裂。(2)Sca-1+干细胞种植于支架7天内,2D和3D培养组细胞生长状态均优于对照组,其中2D组部分细胞浸润生长进入支架内部;7天以后,3D组细胞生长状态优于2D组和对照组,其细胞呈持续增殖的趋势。(3)Echo结果:缺血前及心梗后第1、7、14、28天依次进行Echo检测,证实MI后28天时,干细胞+凝胶组LVEF和LVFS显著高于PBS组(P<0.001),心肌收缩功能(LV±dP/dt)和HW/BW比值也明显高于PBS组(P<0.05)。Masson结果:MI后28天,干细胞+凝胶组MI面积较PBS组明显减小(P<0.05)。HE结果显示:干细胞+凝胶组出现细胞肥大、间质增加及炎性细胞浸润等变化均明显弱于同期PBS组。CD31染色结果:干细胞+凝胶组可显著改善心梗区缺血状况,促进毛细血管增生。结论 Sca-1+干细胞结合理化性能优良的壳聚糖-胶原复合水凝胶支架材料移植治疗MI,可从结构和功能角度显著改善其预后。

关键词： Sca-1+干细胞复合水凝胶小鼠心肌梗死

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BMP-7/Smads通路参与EndoMT在大鼠HHPH中的作用

BMP-7/Smads通路参与EndoMT在大鼠HHPH中的作用

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：武垣伶张晶晶黄丹娜高慧楼国强周卓琳 Lingfang Shi 王万铁温州医科大学病理生理学教研室 Division of Pulmonary and Critical Care Medicine Stanford University Medical School

目的:探讨骨形成蛋白-7(BMP-7)/Smads通路参与的内皮-间质转分化(endothelial-mesenchymal transdifferentiation,EndoMT)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压(Hypoxia-hypercapnia pulmonary hypertension,HHPH)中的作用。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)分为常氧对照(C)组、低氧高二氧化碳(HH)组、BMP受体激动剂rhBMP-7(HB)组、BMP受体抑制剂DMH-1(HBD)组和溶剂(HD)组。C组置于常氧培养箱中培养,其余4组置于低氧高二氧化碳培养箱中培养。采用免疫荧光标记法观察细胞CD31和α-SMA表达水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测各组细胞α-SMA、CD31、Smad1/5/8 mRNA和蛋白质的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖水平;Transwell小室法检测细胞迁移水平。结果:与C组相比,HH组α-SMA mRNA和蛋白质表达水平升高(P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8 mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平降低(P<0.01),细胞增殖减少而迁移增多(P<0.01)。与HH组相比,HB组细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平降低(P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8 mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平升高(P<0.05,P<0.01),增殖增多而迁移减少(P<0.05,P<0.01)。与HB组相比,HBD组细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平升高(P<0.05,P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8 mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平降低(P<0.05,P<0.01),增殖减少而迁移增多(P<0.05)。结论:低氧高二氧化碳可促进RPAECs发生EndoMT,从而促进HHPH的发展,其机制可能与抑制BMP-7/Smads通路有关。

关键词： BMP-7/Smads通路内皮-间质转分化 HHPH 肺动脉内皮细胞

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有氧运动干预增龄小鼠骨骼肌的线粒体UPR机制研究

有氧运动干预增龄小鼠骨骼肌的线粒体UPR机制研究

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：舒田薄海张勇天津市运动生理学与运动医学重点实验室天津体育学院

目的:本文旨在观察增龄和有氧运动训练对衰老骨骼肌线粒体非折叠蛋白反应(UPRmt)的影响,并探讨相关分子机制。方法:研究选取C57BL/6小鼠,分为5月龄组(5MC)、5月龄运动组(5MT)、12月龄组(12MC)、12月龄运动组(12MT)、19月龄组(19MC)、19... 详细信息

目的:本文旨在观察增龄和有氧运动训练对衰老骨骼肌线粒体非折叠蛋白反应(UPRmt)的影响,并探讨相关分子机制。方法:研究选取C57BL/6小鼠,分为5月龄组(5MC)、5月龄运动组(5MT)、12月龄组(12MC)、12月龄运动组(12MT)、19月龄组(19MC)、19月龄运动组(19MT)。运动组小鼠每日跑台运动1h,中等强度运动负荷(～54%VO2max),5次/周,持续12周。采用JC-1探针法检测小鼠骨骼肌中线粒体膜电位水平,DCFH-DA探针法检测小鼠骨骼肌线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,使用Western-blotting进行小鼠骨骼肌相关蛋白表达量的检测:UPRmt基质途径相关蛋白热休克蛋白HSP60(heat shock protein60),UPRmt膜间腔途径相关蛋白蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和线粒体膜间隙蛋白酶HtrA2(high temperature requirement protein A2),UPRmt基质氧化途径相关蛋白去乙酰化酶SIRT3(NAD-dependent deacetylase sirtuin-3)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD2),线粒体生物合成相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactiva-tor-1α,PGC-1α)和核呼吸因子(nuclear respiratory factor 1,NRF1)。结果:1.线粒体相关功能指标:在增龄过程中,线粒体膜电位水平显著下降(P <0.05),线粒体ROS水平显著升高(P <0.05);经过有氧运动后,T组与C组比较,线粒体膜电位显著升高(P <0.05),线粒体ROS水平显著降低(P <0.05),但5MT相比5MC线粒体ROS水平并没有显著变化;2.线粒体相关蛋白变化趋势:在增龄过程中,HSP60、AKT、Sirt3、PGC-1α和TFAM蛋白表达显著降低(P <0.05), HtrA2和SOD2无明显变化;经过有氧运动后,T组与C组比较,HSP60、Sirt3、SOD2和PGC-1α蛋白表达显著升高(P <0.05),HtrA2和AKT蛋白表达无明显变化,TFAM蛋白表达只有在5M时显著性升高(P <0.05)。结论:有氧运动激活UPRmt,通过增加其下游分子伴侣和抗氧化酶表达,修复受损线粒体,部分改善增龄导致的骨骼肌线粒体稳态异常。

关键词：增龄有氧运动骨骼肌线粒体非折叠蛋白反应线粒体生物合成

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