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作者

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26 篇 胡肄农
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16 篇 王靖飞
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我国南部三省2014-2016年猪瘟的分子流行病学研究

我国南部三省2014-2016年猪瘟的分子流行病学研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：米士江包菲吕宗吉葛猛吴健敏余兴龙龚文杰涂长春军事医学科学院军事兽医研究所佛山科学技术学院湖南农业大学动物医学院广西兽医研究所

猪瘟(Classical swine fever)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus)引起以高热、免疫抑制和高发病率以及高死亡率为特征的高度接触性传染病,严重危害我国养猪业的健康发展。猪瘟病毒分为3个基因型,其中基因2.1亚型是我国当前的优... 详细信息

猪瘟(Classical swine fever)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus)引起以高热、免疫抑制和高发病率以及高死亡率为特征的高度接触性传染病,严重危害我国养猪业的健康发展。猪瘟病毒分为3个基因型,其中基因2.1亚型是我国当前的优势流行毒株,其可被进一步分为10个亚亚型(2.1a-2.1j)。除2.1d亚亚型仅在印度流行外,其余9个亚亚型毒株在我国都有流行。作为我国南部的养猪大省,湖南、广东和广西的猪瘟流行情况十分复杂,前期研究发现湖南地区流行有6个基因2.1

关键词：分子流行病学

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鉴别猪伪狂犬病病毒的双重PCR方法建立及初步应用

鉴别猪伪狂犬病病毒的双重PCR方法建立及初步应用

引用

中国畜牧兽医学会信息技术分会第十二届学术研讨会

作者：练斯南梁淋白挨泉崔尚金佛山科学技术学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

为了检测猪伪狂犬病病毒感染的情况,并进行强弱毒的鉴别诊断,本研究建立了快速、简便、灵敏度高、特异性强的鉴别猪伪狂犬病病毒的双重PCR方法。研究中针对PRV gE基因和gB基因序列,分别设计了2对特异性弓物,通过对退火温度(50～60℃,按... 详细信息

为了检测猪伪狂犬病病毒感染的情况,并进行强弱毒的鉴别诊断,本研究建立了快速、简便、灵敏度高、特异性强的鉴别猪伪狂犬病病毒的双重PCR方法。研究中针对PRV gE基因和gB基因序列,分别设计了2对特异性弓物,通过对退火温度(50～60℃,按照1℃递增)、引物浓度(0.2～1.4μL,依次增加0.2μL)的优化,结果表明双重PCR反应的最佳退火温度为56℃、最适引物添加量为1 u L,建立了快速鉴别PRV的双重PCR检测方法,并进行了特异性和敏感性试验。特异性试验结果表明该方法可以扩增出PRV gE(316 bp)和gB(432 bp)长的目的片段对PCV2、PTV、CSFV、PPV、PRRSV、大肠杆菌的DNA或cDNA均无扩增;敏感性试验结果表明,PRV gE和gB的最低核酸检出量分别为4.4×10～3和3.3×10～3拷贝/μL,与单一PCR方法的敏感性相近。应用该方法对广东、广西地区临床送检的56份组织样品进行检测,检测结果显示强毒感染阳性率为53.6%,阴性率为46.4%,未发现有弱毒感染。

关键词：伪狂犬病病毒双重PCR 检测方法

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SNP芯片在家畜育种中的应用

SNP芯片在家畜育种中的应用

引用

2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会

作者：徐冰冰王瑞军王志英李学武李宏伟王振宇苏蕊张燕军刘志红李金泉内蒙古农业大学动物科学学院

引言SNP芯片技术是能够同期对大量SNP进行分型以获得庞大的SNP分析信息的生物技术。SNP芯片在家畜育种中的应用范围颇广,尤其是在基因连锁分析定位、遗传图谱构建、QTL定位、全基因组关联分析和群体进化分析等方面的研究中贡献颇丰。利... 详细信息

引言SNP芯片技术是能够同期对大量SNP进行分型以获得庞大的SNP分析信息的生物技术。SNP芯片在家畜育种中的应用范围颇广,尤其是在基因连锁分析定位、遗传图谱构建、QTL定位、全基因组关联分析和群体进化分析等方面的研究中贡献颇丰。利用SNP芯片技术进行基因分型,拥有两家主流分型平台,分别是Affymetrix基因分型平台以及Illumina分型平台。SNP芯片虽然在芯片制备、样品预处理以及检测方法上有所差异,但是基本原理均是应用已知核

关键词：家畜育种 SNP 产羔数

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2012年至2014年宠物源肠杆菌科细菌对多黏菌素的耐药情况筛查

2012年至2014年宠物源肠杆菌科细菌对多黏菌素的耐药情况筛查

引用

中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会

作者：欧嫣然雷蕾沈张奇汪洋沈建忠中国农业大学动物医学院

【目的】随着抗生素滥用和耐药基因的全球蔓延,多重耐药菌感染率急剧增加,从而使多黏菌素这类被人们"遗忘"的抗生素重新得到了关注。但相较于国外较丰富的资料,我国对多黏菌素在临床应用方面的研究较少,在伴侣动物方面的研究... 详细信息

【目的】随着抗生素滥用和耐药基因的全球蔓延,多重耐药菌感染率急剧增加,从而使多黏菌素这类被人们"遗忘"的抗生素重新得到了关注。但相较于国外较丰富的资料,我国对多黏菌素在临床应用方面的研究较少,在伴侣动物方面的研究则更有限。2015年,中外研究者在人和动物源肠杆菌科细菌中发现了一种可水平传播的、介导多黏菌素耐药的基因——mcr-1,这意味着作为"最后选择"的多黏菌素有被攻破的风险。鉴于我国对宠物源细菌耐药性研究的匮乏,以及mcr-1的发现,我们亟待调查宠物源细菌,尤其是获得性耐药细菌对多黏菌素的耐药情况,通过耐药性分析为宠物医师提出更合理的抗菌治疗方案。【方法】本研究以从2012-2014年在中国农业大学动物医院收集的673只宠物样品(618个肛门拭子、533个鼻腔拭子以及13个伤口拭子)中分离的413株宠物源肠杆菌科细菌作为研究对象采用琼脂稀释法测定MIC值,获得了耐多黏菌素的宠物源肠杆菌科细菌;运用PCR技术检测了耐多黏菌素的基因mcr-1;并分析了耐药率和mcr-1阳性率之间的关系;同时根据mcr-1的可能传播方式,推测了宠物源肠杆菌科细菌获得mcr-1的途径。【结果】通过多黏菌素耐药菌株筛选和种属鉴定后,获得66株多黏菌素耐药菌,包括46株大肠杆菌、15株肺炎克雷伯菌、4株阴沟肠杆菌、1株产气肠杆菌。药敏试验结果表明:2012-2014年宠物源肠杆菌科细菌对多黏菌素的耐药率分别为12.0%、6.43%、26.01%,且宠物源肠杆菌科细菌的多重耐药情况也日益严重。同时还应用聚合酶链式反应对mcr-1基因进行了检测,结果显示分离的宠物源多黏菌素耐药肠杆菌科细菌中有37株携带mcr-1,其中大肠杆菌36株,肺炎克雷伯菌1株,且携带mcr-1的菌株均对多黏菌素表现耐药;另外,统计得到2012-2014年的mcr-1阳性率分别为9.0%,4.29%和12.72%。【结论】我国宠物源肠杆菌科细菌已出现多黏菌素类抗生素的耐药性,并可从耐药菌株中检测到较高比例的mcr-1,且这些菌株的mcr-1阳性率与耐药率呈明显的正相关。提示了宠物可能作为携带mcr-1超级细菌的贮库,危害宠物主人及其家庭的公共安全。本次研究初步探讨了宠物源肠杆菌科细菌对多黏菌素的耐药情况,有利于下一步耐药性监测工作的进行,并对宠物临床抗生素的应用和管控提供了一个重要的参考建议。

关键词：多黏菌素宠物源肠杆菌科细菌耐药性 mcr-1

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抗冻蛋白对山羊精子结构和功能的冷冻保护作用分析

抗冻蛋白对山羊精子结构和功能的冷冻保护作用分析

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2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会

作者：权国波吴国权吕春荣梁家充邵庆勇洪琼花云南省畜禽遗传资源保护和种质创新工程实验室云南省肉羊工程技术研究中心云南省畜牧兽医科学院

引言/目的精液冷冻保存质量直接影响着人工授精技术的效果和推广。目前,国内外对山羊精子的冷冻保存研究报道要明显少于牛、猪和绵羊。目前,在大多数的试验中,山羊冻精解冻后的活率不能稳定地超过50%,无法满足日常生产的需要。冷冻过程... 详细信息

引言/目的精液冷冻保存质量直接影响着人工授精技术的效果和推广。目前,国内外对山羊精子的冷冻保存研究报道要明显少于牛、猪和绵羊。目前,在大多数的试验中,山羊冻精解冻后的活率不能稳定地超过50%,无法满足日常生产的需要。冷冻过程中,精子面临的最大挑战是冰晶形成对细胞结构功能造成的理化损伤。自然界中,为了降低冷冻对组织细胞的不利影响,

关键词：冷冻保护冷冻保存精子质膜 AFP 抗冻蛋白结构和功能

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miR-142a-5p靶向调控Ulk1在PHEV致神经损伤中的作用

miR-142a-5p靶向调控Ulk1在PHEV致神经损伤中的作用

引用

中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：李姿贺文琦高丰赵魁吕晓玲胡诗雨吉林大学动物医学学院

目的:研究PHEV感染小鼠的mi RNA、m RNA表达谱及其分子调控网络,对宿主差异表达mi R-142a-5p的靶基因进行筛选与验证,探讨mi R-142a-5p及其靶基因Ulk1在PHEV致神经损伤过程中的调控机制。材料与方法:应用基因芯片技术及生物信息学分析,... 详细信息

目的:研究PHEV感染小鼠的mi RNA、m RNA表达谱及其分子调控网络,对宿主差异表达mi R-142a-5p的靶基因进行筛选与验证,探讨mi R-142a-5p及其靶基因Ulk1在PHEV致神经损伤过程中的调控机制。材料与方法:应用基因芯片技术及生物信息学分析,完成PHEV感染小鼠大脑皮质mi RNA及m RNA差异表达谱的构建与整合。分别于体外原代培养神经

关键词： RNA 神经损伤靶向调控 miR-142a-5p

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同时鉴别感染人的三种H5亚型禽流感病毒组合GeXP多重PCR方法的建立

同时鉴别感染人的三种H5亚型禽流感病毒组合GeXP多重PCR方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：李孟谢芝勋谢志勤罗思思谢丽基黄莉范晴黄娇玲曾婷婷张艳芳王盛广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室

引言禽流感是由禽流感病毒(AIV)引起的一种禽类急性传染病,同时某些亚型AIV还能跨越种属屏障感染人类。H5亚型AIV的一些亚型组合除了其对禽类的高致病性外,还能跨种属感染人。1997年香港地区首次出现人感染H5N1禽流感病例,目前已有多个... 详细信息

引言禽流感是由禽流感病毒(AIV)引起的一种禽类急性传染病,同时某些亚型AIV还能跨越种属屏障感染人类。H5亚型AIV的一些亚型组合除了其对禽类的高致病性外,还能跨种属感染人。1997年香港地区首次出现人感染H5N1禽流感病例,目前已有多个国家的800多人感染发病,患者死亡率高达50%以上。据报道日本至少发现有77人感染低致病性H5N2亚型AIV。2014年5月中国四川省检测出全球第一例人感染H5N6禽流感病例,目前全球共报告16例感染H5N6禽流感病例。

关键词： AIV 禽流感病毒 PCR

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疯草棘豆蠕孢菌基因组测序可为苦马豆素生物合成通路和疯草病防治研究提供新思路

疯草棘豆蠕孢菌基因组测序可为苦马豆素生物合成通路和疯草病防治...

引用

中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会

作者：路浩宋润杰任祯慧权海云孙璐赵宝玉西北农林科技大学动物医学院

【目的】疯草(Locoweed)是豆科棘豆属(Oxytopis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物的总称,是世界范围内危害草原畜牧业发展的主要毒草。众所周知,引起动物疯草中毒的主要原因是疯草中含有有毒生物碱—苦马豆素(Swainsonine)。1999年,Braun... 详细信息

【目的】疯草(Locoweed)是豆科棘豆属(Oxytopis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物的总称,是世界范围内危害草原畜牧业发展的主要毒草。众所周知,引起动物疯草中毒的主要原因是疯草中含有有毒生物碱—苦马豆素(Swainsonine)。1999年,Braun等从疯草中发现内生真菌并初步认为疯草产毒机制与其内生真菌感染有关。随后,Cook等(2011)、Gao等(2012)和Grum(2013)先后通过qPCR及LC.-MS证明棘豆蠕孢菌是苦马豆素生物合成的根本原因。2014年,课题组对采自青海省祁连县的甘肃棘豆进行了内生真菌分离与鉴定,结果显示,629块组织(茎、叶、花、种子)中分离得到433株内生真菌,分属8科15属28种,其中分离获得最多的是棘豆蠕孢菌(分离率为46.19%),为甘肃棘豆内生真菌的优势菌株,而种子(种皮)中只分离到棘豆蠕孢菌。在此基础上,课题组运用TLC、GC和LC-MS对该菌发酵产物中苦马豆素的含量进行了测定,证实该菌产苦马豆素,上述实验结果也与国内外相关报道相一致。那么,疯草棘豆蠕孢菌是如何合成苦马豆素的呢?【方法】为了弄清楚这个问题,课题组前期从采自甘肃天祝的甘肃棘豆种子中分离获得了产苦马豆素内生真菌—棘豆蠕孢菌(Undifilum oxytropis),通过高通量测序技术对该菌进行了全基因组测序,运用GO、KEGG、Swiss-Prot、NR等数据库对该菌基因功能进行了分析。【结果】该菌基因组大小为70 048 771 bp,含有1 1 057个基因,总长度为18400 467 bp,其中外显子总长15 471 930 bp,CDS区总长15 471 930 bp,内含子总长2 928 537 bp。该菌基因组注释结果显示,共有164个基因注释到5个可能与苦马豆素合成有关的酶,即酵母氨酸脱氢酶(saccharopine dehydrogenase,SDH)、酵母氨酸氧化酶(saccharopine oxidase,FAP2)、吡咯啉-5-羧化还原酶(pyrroline-5-carboxylate reductase,P5CR),聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)和细胞色素P450(cytochrome P450,P450)。【结论】本研究可明确疯草棘豆蠕孢菌的苦马豆素生物合成通路,为后续不含苦马豆素疯草新品种培育和从根本上解决我国动物疯草中毒问题奠定理论基础。

关键词：疯草内生真菌棘豆蠕孢菌苦马豆素生物合成疯草病防控

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莱克多巴胺在绵羊体内的主要代谢途径及其产物研究

莱克多巴胺在绵羊体内的主要代谢途径及其产物研究

引用

中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会

作者：王瑞国苏晓鸥张维高忠武中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

【目的】莱克多巴胺（Ractopamine,RAC）是一种典型的β-激动剂类药物,属于间苯二酚型。RAC于2000年被美国食品药品管理局（FDA）批准作为促生长饲料添加剂应用于动物生产,我国农业部将其作为"瘦肉精"的一种列入动物饲料和饮... 详细信息

【目的】莱克多巴胺（Ractopamine,RAC）是一种典型的β-激动剂类药物,属于间苯二酚型。RAC于2000年被美国食品药品管理局（FDA）批准作为促生长饲料添加剂应用于动物生产,我国农业部将其作为"瘦肉精"的一种列入动物饲料和饮水中禁止使用物质名单。目前,有关莱克多巴胺在动物体内代谢残留研究报道很少,关于莱克多巴胺在绵羊体内代谢研究尚未见报道。本研究利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱鉴（UPLC/Q-TOF MS）技术,检测和鉴定绵羊口服RAC后尿液、血液和肝脏中的主要代谢产物,并推测RAC在绵羊体内的主要代谢途径,为RAC残留监测和风险评估提供科学依据。【方法】24只体重30-35kg健康雄性小尾寒羊,平均分为4个实验组:空白对照组、低剂量给药组（500μg/kg BW·d）、中剂量给药组（1000μg/kg BW·d）和高剂量给药组（2000μg/kg BW·d）。RAC按照剂量拌入每日晨饲饲料中,连续给药21 d,采集各组最后一次给药后6 h内的尿液、血浆和肝脏样品,于-20℃冷冻保存待用。尿液样品0.5ml加入0.5mL 0.1%甲酸水溶液,震荡混匀,10000 rpm离心5 min,取上清液并过0.22μm尼龙滤膜后,上机测定。血浆样品1ml中添加3 mL乙腈,振荡0.5 min,10000 rpm离心5 min,取出上清液于离心浓缩仪中浓缩至近干,用0.1%甲酸水溶液定容于0.5 mL,过0.22μm尼龙滤膜后,上机测定。肝脏样品2g加入10 mL乙腈,匀浆,10000 rpm离心5 min,取出上清液于离心浓缩仪中浓缩至近干,用0.1%甲酸水溶液定容于1 mL,过0.22μm尼龙滤膜后,上机测定。采用UNIFI软件对UPLC/Q-TOF MS采集的数据进行处理,应用质量亏损过滤（mass defect filtering,MDF）消除内源性代谢物的干扰。根据离子色谱峰提取（extracted ion chromatogram,EIC）的方法,筛查可能的代谢产物。【结果】根据UPLC/Q-TOF MS采集的分子离子和碎片离子信息（图1）,RAC的分子离子（m/z 277）可以产生4个主要离子碎片,分别是m/z222、m/z 166、m/z 148和m/z 130。除RAC原型外,在绵羊样品中共检测到2种RAC代谢产物。其中,Ⅰ相代谢产物1种,为RAC的氧化和甲基化产物(分子式:CHNO);Ⅱ相代谢产物1种,为葡萄糖醛苷酸化产物(分子式:CHNO)。【结论】根据代谢产物鉴定结果,推测克伦特罗在绵羊体内主要代谢途径为氧化、甲基化和葡萄糖醛苷酸结合。这些代谢产物从相对含量上来看,氧化甲基化代谢产物远低于原型药物,葡萄糖醛苷酸结合态与原型药物基本相当,提示莱克多巴胺在绵羊体内残留形态以葡萄糖醛苷酸结合态和原型药物为主。

关键词：莱克多巴胺绵羊代谢

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不同产羔数绵羊性腺轴比较转录组研究

不同产羔数绵羊性腺轴比较转录组研究

引用

2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会

作者：付绍印刘永斌何小龙王标祁云霞荣威恒内蒙古自治区农牧业科学院

引言/目的绵羊的繁殖特性已成为绵羊生产的一个重要研究方向,对绵羊繁殖力进行遗传改良是提升中国绵羊生产水平的必由之路。转录组研究是基因功能及结构研究的基础和出发点,通过新一代高通量测序,能够全面快速地获得某一物种特定组织或... 详细信息

引言/目的绵羊的繁殖特性已成为绵羊生产的一个重要研究方向,对绵羊繁殖力进行遗传改良是提升中国绵羊生产水平的必由之路。转录组研究是基因功能及结构研究的基础和出发点,通过新一代高通量测序,能够全面快速地获得某一物种特定组织或器官在某一状态下的几乎所有转录本序列信息,已广泛应用用于差异基因筛选、等位基因特异性表达、可变剪接和融合基因等相关研究中。为了进一步从全局了解巴美肉羊产羔数差异的分子机理,本研究中,以自

关键词：产羔数巴美肉羊绵羊繁殖力性腺轴

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