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金霉素对獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响

金霉素对獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：文斌邹芙沁曾东汪平郭小林倪学勤傅祥超刘宁张凯杜丹徐昌文四川省草原科学研究院四川农业大学动物医学院/动物微生态研究中心

为研究饲用金霉素对獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）和实时荧光定量PCR（qPCR）技术分析獭兔盲肠菌群;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子;qPCR技术对TLR2、TLR4 mRNA进行定量检测... 详细信息

为研究饲用金霉素对獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）和实时荧光定量PCR（qPCR）技术分析獭兔盲肠菌群;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子;qPCR技术对TLR2、TLR4 mRNA进行定量检测。试验分为2组:对照组饲喂基础日粮;金霉素组在基础日粮中添加金霉素50 mg/kg。结果表明:1)PCR-DGGE图谱显示,与对照组比较,金霉素组盲肠菌群结构和多样性等没有显著变化（P>0.05）;2)qPCR检测金霉素组普雷沃氏菌属数量是10.48(Lg),对照组是10.10(Lg),差异显著（P<0.05）;3)金霉素组獭兔外周血细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α的浓度显著升高（P<0.05）,脾脏和肝脏指数均降低;4)回肠的TLR2、TLR4 mRNA相对表达量和肝脏的TLR2 mRNA相对表达量均高于对照组,但差异不显著（P>0.05）。在饲料中添加50 mg/kg金霉素,对獭兔盲肠菌群结构和免疫功能均没有显著影响。

关键词：金霉素獭兔盲肠微生物细胞因子 TLR2/4

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以CotB作为融合基序在枯草杆菌芽孢表面展示鸡白痢沙门氏菌OmpC的研究

以CotB作为融合基序在枯草杆菌芽孢表面展示鸡白痢沙门氏菌OmpC的...

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：刘明刚刘红露戴茜茜徐毓琴张飞燕谷笑笑潘康成四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心四川成都611130 四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

本文旨在通过使用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotB作为融合基序,构建表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组芽孢,为防控沙门氏菌感染提供新的思路。分别PCR扩增鸡白痢沙门氏菌OmpC编码基因与含自身启动子的芽孢衣壳蛋白CotB编码基因,... 详细信息

本文旨在通过使用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotB作为融合基序,构建表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组芽孢,为防控沙门氏菌感染提供新的思路。分别PCR扩增鸡白痢沙门氏菌OmpC编码基因与含自身启动子的芽孢衣壳蛋白CotB编码基因,以质粒pDG364为基础进行二者融合并构建整合型重组质粒pDG364-cotB-ompC,将融合基因整合于枯草芽孢杆菌168 amyE基因位点,通过淀粉酶活性、PCR技术、免疫荧光显微镜进行分析。以芽孢衣壳蛋白CotB为融合基序,成功构建获得携带CotB和OmpC融合基因的整合型重组质粒pDG364-cotB-ompC,并经同源双交叉重组将其整合于枯草芽孢杆菌168基因组上,通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定表明该融合基因成功整合于amyE基因位点,使用OmpC特异性抗体探测的免疫荧光显微镜分析检测到特异性的荧光信号。结果表明,鸡白痢沙门氏菌OmpC以具有生物活性的形式成功表达并展示于枯草芽孢杆菌168芽孢表面。

关键词：沙门氏菌枯草芽孢杆菌芽孢表面展示粘膜疫苗

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产γ-氨基丁酸益生菌的筛选及其生物活性研究

产γ-氨基丁酸益生菌的筛选及其生物活性研究

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：徐毓琴戴茜茜唐慧琴谷笑笑潘康成四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物医学院四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

为筛选具有生物拮抗活性和耐酸耐胆盐能力的高产γ-氨基丁酸(GABA)的菌株,首先从待分离样品中筛选出可疑菌株,然后利用纸层析和HPLC-MS进行定性和定量分析,筛选出高产γ-氨基丁酸菌株.通过细菌形态、生理生化特性并结合细菌16S rDNA序... 详细信息

为筛选具有生物拮抗活性和耐酸耐胆盐能力的高产γ-氨基丁酸(GABA)的菌株,首先从待分离样品中筛选出可疑菌株,然后利用纸层析和HPLC-MS进行定性和定量分析,筛选出高产γ-氨基丁酸菌株.通过细菌形态、生理生化特性并结合细菌16S rDNA序列分析对高产菌株进行鉴定,同时研究高产菌株对3株动物性病原菌的生物拮抗作用及其耐酸耐胆盐试验.结果表明,从泡菜中筛选出的菌株GA8为高产γ-氨基丁酸菌株,在含有1％L-谷氨酸钠的GYP培养基中37℃培养48 h,产GABA量达3.50 g·L-1,经鉴定该菌株为植物乳杆菌;该菌株菌悬液对鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,其上清液无抑菌能力;该菌初始活菌数为***-1时,在pH 2.0的酸性环境中处理4h后,活菌数能达到106 cfu·mL-1以上;0.3％胆盐处理4h,活菌数达到103 ***-1左右.表明所筛选出的产γ-氨基丁酸菌株GA8具有一定的抑菌性能和耐酸能力,但耐胆盐能力不强.

关键词：益生菌 γ-氨基丁酸生物拮抗耐酸耐胆盐

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苏云金芽孢杆菌BtZ01对胚后小鼠生长、肠道发育和微生物菌群的影响

苏云金芽孢杆菌BtZ01对胚后小鼠生长、肠道发育和微生物菌群的影响

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：谷明娟陈波朱遥陶柳清梁华阳汪俊杰潘康成四川农业大学动物医学院动物微生态工程研究中心成都611130

本试验旨在研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) BtZ01对胚后小鼠生长、肠道发育及微生物菌群的影响.选取妊娠0d的孕鼠48只,随机分为4组：对照组饮用灭菌水,试验组分别饮用添加106、108、5×109CFU·mL-1浓度BtZ01... 详细信息

本试验旨在研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) BtZ01对胚后小鼠生长、肠道发育及微生物菌群的影响.选取妊娠0d的孕鼠48只,随机分为4组：对照组饮用灭菌水,试验组分别饮用添加106、108、5×109CFU·mL-1浓度BtZ01菌的灭菌水,试验从母鼠妊娠起至胚后小鼠成年,试验期66d.结果表明：1)饮水中添加BtZ01菌对胚后小鼠体重、体长及料重比没有显著影响(P＞0.05).2)饮水中添加5× 109 ***-1水平的BtZ01菌显著降低了胚后小鼠断奶时空回肠相对重量(P＜0.05);饮水中添加106、108 CFU·mL-1水平的BtZ01菌对胚后小鼠断奶与成年时小肠的相对重量和体重校正长度没有影响(P＞0.05).3)饮水中添加108、5×109 CFU·mt-1水平的BtZ01菌显著增加了胚后小鼠成年时的空肠绒毛长度及V/C值(P＜0.05).4)饮水中添加108、5×109 CFU·mL-1水平的BtZ01菌极显著降低了胚后小鼠肠道中大肠杆菌数(P＜0.01).由此可见,高浓度的BtZ01菌对胚后小鼠幼年肠道发育具有一定的抑制作用,但从长期饲养效果来看,饮水中添加BtZ01菌能够促进小肠绒毛的增长,提高消化吸收和抑制有害菌群定植的能力.

关键词：苏云金芽胞杆菌胚后小鼠肠道发育微生物菌群

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产脂肪酶菌株的分离鉴定及其脂肪酶A基因(Lipase A)序列分析

产脂肪酶菌株的分离鉴定及其脂肪酶A基因(Lipase A)序列分析

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：古从伟何敏王振华潘康成冯杰唐慧琴张飞燕四川农业大学动物微生态研究中心四川成都611130 西南医科大学四川泸州646000 德阳市畜牧食品局四川德阳618000 成都农业科技职业学院四川成都611100 四川农业大学动物微生态研究中心四川成都611130

文章旨在筛选高产脂肪酶能力的细菌,并对其脂肪酶A基因进行克隆测序分析.采用含有维多利亚蓝的分离培养基平板从富油脂的土壤中分离到筛选得到相对高产的脂肪酶细菌,利用碱滴定法测定其酶活力大小,通过细菌形态、生理生化和细菌16S rRN... 详细信息

文章旨在筛选高产脂肪酶能力的细菌,并对其脂肪酶A基因进行克隆测序分析.采用含有维多利亚蓝的分离培养基平板从富油脂的土壤中分离到筛选得到相对高产的脂肪酶细菌,利用碱滴定法测定其酶活力大小,通过细菌形态、生理生化和细菌16S rRNA序列分析;设计脂肪酶基因引物并对脂肪酶LipA基因进行克隆测序分析.结果,筛选得到l株产脂肪酶能力相对较高的细菌A05,利用碱滴定法测定其酶活力大小为1.07 U/ml;通过细菌形态、生理生化和16S rRNA序列鉴定该高产脂肪酶细菌为铜绿假单胞菌;根据GenBank中报道的铜绿假单胞菌脂肪酶A基因设计引物,成功扩增得到长1094bp的酶基因DNA序列,该序列与铜绿假单胞菌脂肪酶A基因序列同源性高达98％以上,该序列包含1个完整的开放阅读框,936bp,共编码311个氨基酸,前26个氨基酸残基组成信号肽和后285个氨基酸残基组成成熟肽.

关键词：铜绿假单胞菌筛选脂肪酶脂肪酶基因克隆

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比格犬源乳酸菌的分离鉴定

比格犬源乳酸菌的分离鉴定

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：刘慧程善菊陈泽庆邹玲尹燕博温建新青岛农业大学动物科技学院

乳酸菌在自然界中分布十分广泛,并且具有丰富的物种多样性。这是一种数量非常多,结构复杂的细菌,目前可以将其分为18个属,200多个种。乳酸菌是犬源益生菌研究过程中最为广泛的一种微生物。21世纪初,犬源乳酸菌的分离、筛选、鉴定和动物... 详细信息

乳酸菌在自然界中分布十分广泛,并且具有丰富的物种多样性。这是一种数量非常多,结构复杂的细菌,目前可以将其分为18个属,200多个种。乳酸菌是犬源益生菌研究过程中最为广泛的一种微生物。21世纪初,犬源乳酸菌的分离、筛选、鉴定和动物试验在国外逐渐被研究]。从犬肠道和粪便中分离出乳酸菌,经加工后制成菌液或者混入饲料中饲喂动物,观察动物的生长状况和对疾病的预防作用。结果表明犬源乳酸菌对犬具有益生作用,基本没有不良反应,可以用来当做犬源微生态制剂的菌种。犬用微生态制剂是一种新型绿色饲料添加剂,具有无毒、无污染、无残留等特点,并且近些年已广泛被人们接受并应用于动物养殖和饲养中。本试验从比格犬粪便中分离出乳酸菌,并对其进行生化鉴定和测序鉴定。为本实验室以后比格犬乳酸菌的研究奠定基础。本试验对比格犬源乳酸菌从形态特征、生理生化和分子生物学测序方面进行了鉴定,确定分离的乳酸菌为粪肠球菌。

关键词：比格犬乳酸菌分离鉴定

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枯草芽孢杆菌发酵产物对黄羽肉鸡肠道菌群及免疫功能影响的研究

枯草芽孢杆菌发酵产物对黄羽肉鸡肠道菌群及免疫功能影响的研究

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：陈飞洋崔志英刘晓琳李鸿鑫毕英佐谢青梅华南农业大学动物科学学院广东海纳川生物科技股份有限公司

研究选用黄羽肉鸡共2400只,随机分成5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复120只。A组(空白组)饲喂无抗生素基础日粮及正常饮水,B组(抗生素组)饲喂含200g/t速大肥的基础日粮及正常饮水;C组饲喂含200g/t枯草芽孢杆菌发酵产物的基础日粮... 详细信息

研究选用黄羽肉鸡共2400只,随机分成5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复120只。A组(空白组)饲喂无抗生素基础日粮及正常饮水,B组(抗生素组)饲喂含200g/t速大肥的基础日粮及正常饮水;C组饲喂含200g/t枯草芽孢杆菌发酵产物的基础日粮及正常饮水;D、E组饲喂无抗基础日粮及在饮水中分别添加液态枯草芽孢杆菌发酵产物2L/m3、1L/m3,实验期为64d。应用实时荧光定量PCR等技术研究枯草芽孢杆菌发酵产物对黄羽肉鸡肠道菌群与免疫功能的影响。结果表明:C、D、E处理组回肠食糜乳酸杆菌菌群数量均极显著高于A组(p<0.01)、显著高于B组(p<0.05),C、D、E处理组盲肠乳酸杆菌菌群数量均显著高于A、B组(p<0.05),B、C、D、E组回肠食糜双歧杆菌菌群数量显著高于A组(p<0.05);D组的总蛋白和白蛋白含量均高于A、B组;C、D组IL2的含量均显著高于A组(p<0.05),E组IL2、IL10含量显著高于A、B组(p<0.05),C、E组IFN-gamma的值显著高于B组(p<0.05)。

关键词：黄羽肉鸡枯草芽孢杆菌发酵产物肠道菌群

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猪胰岛素样生长因子IGF-1与生长发育的相关研究进展

猪胰岛素样生长因子IGF-1与生长发育的相关研究进展

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：张飞燕张钧利李伟潘康成四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心四川成都611130 江苏无锡阿尔宝尔生物工程有限公司江苏无锡214046

胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一种与胰岛素原结构高度同源的多肽,调控脊椎动物机体生长的所有发展阶段,属于胰岛素样生长因子家族中的一员,具有非常复杂的生物学功能,在细胞的分化、增殖及个体的生长发育... 详细信息

胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一种与胰岛素原结构高度同源的多肽,调控脊椎动物机体生长的所有发展阶段,属于胰岛素样生长因子家族中的一员,具有非常复杂的生物学功能,在细胞的分化、增殖及个体的生长发育中有重要促进作用,主要介导生长激素(GH)发挥促生长作用,故也称其为生长介素C(SM-C).本文从IGFBPS、猪IGF-1基因SNP位点、IGF-1受体、IGF-1信号通路和饲料水平方面综述其对IGF-1的影响并进一步影响猪生长发育的关系.研究证实，IGF-1是与动物生长、发育等密切相关的主要内分泌激素之一，猪血液中IGF-1含量与体重及增重呈正相关，可作为影响猪生长性状的候选基因，参与机体多种组织和器官的发育，有广泛的生理作用，在许多疾病治疗方面也有作用。故而，在猪的生长发育过程中调控体内IGF-1的表达水平，进而提高猪的生长发育有很大的空间，IGFBPS、IGF-1基因SNP位点、IGF-1受体、IGF-1信号通路和饲料水平等因素直接影响体内IGF-1的表达量，进而影响猪的生长发育，并与其它因素(如环境等)共同调控猪的生长发育。

关键词：猪胰岛素样生长因子-1 基因表达生长发育

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靶向树突状细胞重组猪流行性腹泻病毒S基因乳酸菌的制备及免疫原性分析

靶向树突状细胞重组猪流行性腹泻病毒S基因乳酸菌的制备及免疫原...

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：黄科谚杨文涛晋玉北刘晶王占楠王棋杨桂连王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心

为了构建S-DCpep融合基因重组乳酸菌和检测其基因表达产物的免疫原性,根据猪流行性腹泻病毒S基因序列,合成S-DCpep基因融合。将目的基因克隆至片段亚克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8(*** NC8),经SppI... 详细信息

为了构建S-DCpep融合基因重组乳酸菌和检测其基因表达产物的免疫原性,根据猪流行性腹泻病毒S基因序列,合成S-DCpep基因融合。将目的基因克隆至片段亚克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8(*** NC8),经SppIP诱导和Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8/pSIP409-S-DCpep的裂解物中出现大小约为80ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。NC8/pSIP409-S-DCpep口服免疫BALB/c小鼠后,结果表明,能够有效的诱导小鼠小肠派氏集合淋巴结(pp)中IgA的分泌,增加肠系膜淋巴结(MIN)抗原特异性IFN-γ的分泌。应用重组菌NC8/pSIP409-S-DCpep免疫BALB/c小鼠能刺激机体产生特异性细胞免疫应答反应,这为研制预防猪流行性腹泻的重组乳酸菌口服制剂奠定了基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S-DCpep基因乳酸菌表达载体免疫原性

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三种不同包衣材料对五种益生菌保存期的研究

三种不同包衣材料对五种益生菌保存期的研究

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会

作者：刘慧邹玲温建新青岛农业大学动物科技学院

益生菌具有促进机体健康的作用,同时还有抗癌作用、对肠炎类疾病也有抑制作用。益生菌制剂没有残留、没有副作用、不会产生抗药性,其开发前景以及发展前景非常广阔。在加工、运输、贮存过程中益生菌的活菌制剂容易失活,或者生物活性降低... 详细信息

益生菌具有促进机体健康的作用,同时还有抗癌作用、对肠炎类疾病也有抑制作用。益生菌制剂没有残留、没有副作用、不会产生抗药性,其开发前景以及发展前景非常广阔。在加工、运输、贮存过程中益生菌的活菌制剂容易失活,或者生物活性降低,产品质量不稳定。在此方面包衣材料有着明显的优势。包衣技术是当今世界发展最为迅速的新型细胞技术之一,且用途广泛。包衣材料应用于益生菌的生产中很好地解决了益生菌不易大量生产和储存期短等问题。益生菌在防治疾病和抗生素替代等方面展现出非凡的潜力,国际营养学界公认益生菌是一种可定植于人体肠道、生殖系统内,并可起到改善宿主健康和体内微生态平衡,并起到健康益的作用。益生菌可以促进机体健康,但在生产、保存过程中常使其活性降低。包衣材料可以提高益生菌的稳定性,从而更好的发挥其益生作用。通过平板计数法来评价三种包衣材料(包液1、2、3)对五种不同益生菌(粪肠球菌、双歧杆菌、酵母菌、芽孢杆菌、乳酸菌)的保护作用。结果表明,三种包衣材料对粪肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、酵母菌和芽孢杆菌均有保护作用,其中包衣材料3的保护作用最弱,且对粪肠球菌和酵母的保护作用最低。

关键词：包衣材料益生菌保护作用

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