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443 篇 会议
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441 篇 农学
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3 篇 经济学
- 3 篇 应用经济学
2 篇 医学
- 2 篇 公共卫生与预防医...
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- 1 篇 农林经济管理

主题

17 篇 prrsv
14 篇 分离鉴定
10 篇 大肠杆菌
9 篇 疫苗
9 篇 rt-pcr
9 篇 禽流感病毒
8 篇 耐药性
8 篇 原核表达
8 篇 猪瘟病毒
8 篇 单克隆抗体
8 篇 pcv
8 篇 检测
8 篇 猪圆环病毒
8 篇 鉴定
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7 篇 沙门氏菌
7 篇 致病性
7 篇 序列分析
6 篇 猪圆环病毒2型
6 篇 副猪嗜血杆菌

机构

27 篇 甘肃农业大学
23 篇 河南农业大学
20 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 南京农业大学
19 篇 吉林大学
19 篇 中国农业大学
17 篇 华中农业大学
13 篇 军事医学科学院军...
13 篇 四川大学
12 篇 吉林农业大学
12 篇 山东农业大学
11 篇 扬州大学
10 篇 西北农林科技大学
10 篇 广西大学
10 篇 江苏省农业科学院...
10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 中国农业科学院上...
9 篇 河南省动物疫病预...
9 篇 四川农业大学
9 篇 甘肃省动物生殖生...

作者

16 篇 张勇
13 篇 王红宁
12 篇 赵兴绪
12 篇 丁壮
11 篇 王川庆
11 篇 刘长明
11 篇 赵军
10 篇 吴志明
10 篇 闫若潜
10 篇 赵明军
10 篇 金梅林
9 篇 杨霞
9 篇 常洪涛
9 篇 危艳武
9 篇 万遂如
8 篇 卢冰霞
8 篇 陈创夫
8 篇 李斌
8 篇 梁家幸
8 篇 乔军

语言

442 篇 中文
6 篇 英文

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猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792E基因主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定

猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792E基因主要抗原域的原核表达及抗原...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：卢冰霞李斌秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲梁保忠李莹莹姜佳佳杨盛斌黄伟坚广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院广西田林县动物疫病预防控制中心

为了猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)诊断抗原和基因工程疫苗的研制做准备,对广西猪JEVFC792株的E基因主要抗原域Ⅰ、Ⅱ基因(Ea基因)进行原核表达及抗原性鉴定。结果表明,成功构建广西猪JEV FC792株Ea基因的克隆重组质粒pMD18-T-Ea及表达重... 详细信息

为了猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)诊断抗原和基因工程疫苗的研制做准备,对广西猪JEVFC792株的E基因主要抗原域Ⅰ、Ⅱ基因(Ea基因)进行原核表达及抗原性鉴定。结果表明,成功构建广西猪JEV FC792株Ea基因的克隆重组质粒pMD18-T-Ea及表达重组质粒pET32a-Ea,经SDS-PAGE及Western blot鉴定表明,JEV FC792株Ea蛋白在Rosetta(DE3)菌中成功进行融合表达,表达出约58KDa的融合蛋白;经抗原性鉴定表明,表达的融合蛋白Ea能与猪JEV阳性血清抗体发生特异性反应,融合蛋白Ea具有良好的JEV抗原性。这为下一步猪JEV诊断抗原和基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪流行性乙型脑炎病毒 Ea基因原核表达抗原性鉴定

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鸭坦布苏病毒AH-F10株全基因组的分子克隆与序列分析

鸭坦布苏病毒AH-F10株全基因组的分子克隆与序列分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：王蓓王楠楠毕庄莉王晓旭李传峰朱良强刘光清王桂军安徽农业大学动物科技学院中国农业科学院上海兽医研究所安徽动物疫病疾控中心

为了解鸭坦布苏病毒安徽分离株AH-F10的分子特征及构建该病毒的感染性克隆,本文利用RT-PCR方法对其全基因组序列进行了测定,并将全基因组及其推导的氨基酸序列与参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果表明,AH-F10株的全基因组序列长... 详细信息

为了解鸭坦布苏病毒安徽分离株AH-F10的分子特征及构建该病毒的感染性克隆,本文利用RT-PCR方法对其全基因组序列进行了测定,并将全基因组及其推导的氨基酸序列与参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果表明,AH-F10株的全基因组序列长10,990nt,含有一个大的阅读框架,两侧各有一个非编码区(Untranslationregion,UTR)。序列比对结果表明,AH-F10株与13株参考毒株的基因编码区具有较高的氨基酸序列同源性。其中,与JS2010株的同源性最高,达98%,提示安徽和江苏省流行的鸭坦布苏病毒可能来自同一祖先。相比之下,鸭坦布苏病毒的5’UTR的序列表现一定程度的变异,AH-F10株与参考株的核苷酸序列同源性在94%-97%之间。本文研究结果为了解鸭坦布苏病毒的遗传变异及构建该病毒的反向遗传学操作系统奠定了基础。

关键词：鸭坦布苏病毒 AH-F10株全基因组序列分析

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携带猪流行性腹泻病毒S基因的减毒沙门氏菌的构建与鉴定

携带猪流行性腹泻病毒S基因的减毒沙门氏菌的构建与鉴定

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：梁恩涛廖晓丹文心田黄小波曹三杰阳酉萍段素芬张丹张小会四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心

本研究以RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒SC-L株的S基因抗原区域(简称S1,1-2367bp,编码S蛋白N末端1-789氨基酸位点),插入pMD19-T载体,酶切并回收目的片段插入双启动子真核表达载体pVAXD中,构建了pVAXD-S1表达载体。经免疫荧光法鉴定目的基... 详细信息

本研究以RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒SC-L株的S基因抗原区域(简称S1,1-2367bp,编码S蛋白N末端1-789氨基酸位点),插入pMD19-T载体,酶切并回收目的片段插入双启动子真核表达载体pVAXD中,构建了pVAXD-S1表达载体。经免疫荧光法鉴定目的基因可在COS7细胞中正常表达后,将pVAXD-S1电转入鼠伤寒减毒沙门氏菌SL7207,构建了携带S基因的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAXD-S1),对该重组菌株的生长特性、携带质粒的稳定性、口服小鼠的安全性及目的基因在体内表达等进行鉴定。结果表明SL7207(pVAXD-S1)在含卡那霉素(100μg/mL)的培养环境中稳定,在1×109CFU/只口服免疫小鼠具有良好的安全性,携带的S1基因能在小鼠组织(回肠末端)内正常转录及表达。本研究为后续开展减毒沙门氏菌疫苗菌株SL7207(pVAXD-S1)的免疫评价及应用奠定了基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因减毒沙门氏菌构建鉴定

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布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析

布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：杨艳玲郭利王建科孙娜温永俊中国农业科学院特产研究所特产研究所吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地

目的意义:本研究欲对布鲁氏菌BCSP31的免疫原性进行分析,为利用其作为诊断抗原研制布鲁氏菌病的新型诊断方法提供科学依据。方法:利用原核表达的方法制备了布鲁氏菌BCSP31蛋白的可行性表达产物SUMO-BCSP31,并将原核表达菌与自然感染布... 详细信息

目的意义:本研究欲对布鲁氏菌BCSP31的免疫原性进行分析,为利用其作为诊断抗原研制布鲁氏菌病的新型诊断方法提供科学依据。方法:利用原核表达的方法制备了布鲁氏菌BCSP31蛋白的可行性表达产物SUMO-BCSP31,并将原核表达菌与自然感染布鲁氏菌病的牛血清,免疫制备的小鼠血清进行免疫印迹分析,同时利用该重组表达菌免疫小鼠,检测小鼠血清中抗体亚型IgG1,IgG2a,以及细胞因子IL-2和IFN-γ的表达水平。结果:本研究成功地构建了布鲁氏菌SUMO-BCSP31原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中成功诱导表达。该重组蛋白能够和牛血清和小鼠血清发生特异性的免疫反应。小鼠血清中IgG亚型分析结果显示该抗原刺激小鼠产生了以IgG1为主的体液免疫反应,然而却没有诱导小鼠产生以IFN-γ和IL-2为主的细胞免疫反应。结论:本研究成功地表达了布鲁氏菌BCSP31蛋白,该蛋白具有很强的反应原性,同时刺激小鼠产生了高水平的体液免疫反应,说明该蛋白是具有高度的特异性,是布鲁氏菌很好的抗原物质,可以用其作为布鲁氏菌的检测抗原来研制布鲁氏菌病的新型诊断产品。

关键词：布鲁氏菌 IFN 原核表达小鼠血清免疫原性分析重组表达 SUMO-BCSP31

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同时鉴别6种鸡病毒性呼吸道病GeXP检测方法的建立

同时鉴别6种鸡病毒性呼吸道病GeXP检测方法的建立

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：罗思思谢芝勋刘加波谢志勤谢丽基庞耀珊邓显文范晴广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室

为了建立一种能够同时鉴别H5、H7、H9亚型禽流感、新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎6种鸡病毒性呼吸道传染病病原体的GeXP检测方法,本研究根据这些病原体各自的基因保守序列,设计合成了7对特异性引物,优化反应条件,用单一病毒、... 详细信息

为了建立一种能够同时鉴别H5、H7、H9亚型禽流感、新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎6种鸡病毒性呼吸道传染病病原体的GeXP检测方法,本研究根据这些病原体各自的基因保守序列,设计合成了7对特异性引物,优化反应条件,用单一病毒、混合病毒样品来验证所建立的GeXP方法的特异性和准确性,以不同拷贝数的克隆质粒来检测GeXP方法的灵敏度。检测34份临床阳性样品,进一步验证该法的可靠性。结果显示,在7对引物同时存在的GeXP反应体系中,可特异性地扩增出相关6种病毒目的片段,并可在102拷贝/μL水平同时特异地检测出鸡6种病毒性呼吸道传染病,GeXP方法检测34份临床阳性样品结果与病毒分离一致。该研究所建立的GeXP方法不仅可高通量检测6种病原体,而且具有特异性强和灵敏度高的特点,适用于临床样品混合感染的快速鉴别诊断,对这6种发病特征及临床症状相似的鸡病毒性呼吸道病的有效防控有很高的实际应用价值。

关键词： GeXP检测鸡呼吸道病多重PCR

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多重PCR快速鉴别伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的研究

多重PCR快速鉴别伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰刘建王洪光贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病预防控制中心

根据GenBank中相关的基因序列,设计了3对引物分别用于扩增PRVTK、gB、gE基因的部分片段。对样品中的PRVDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,PRV野毒得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为282bp(TK)、549bp(gB)、829bp(gE)。利... 详细信息

根据GenBank中相关的基因序列,设计了3对引物分别用于扩增PRVTK、gB、gE基因的部分片段。对样品中的PRVDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,PRV野毒得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为282bp(TK)、549bp(gB)、829bp(gE)。利用这3对引物对市售的伪狂犬病活疫苗Bartha-K61株及三基因缺失疫苗SA215株样品DNA进行多次多重PCR扩增,均能稳定得到与设计相符的特异性条带,Bartha-K61株出现两条特异性条带为282bp(TK)和549bp(gB),SA215株出现一条特异性条带为549bp(gB)。敏感性和特异性试验结果表明,该mPCR对PRV野毒和疫苗毒的最低核酸检测量分别为Guizhou-DY株4.1pg、Bartha-K61株10.8pg、SA2153.8pg,对猪圆环病毒2型、猪细小病毒扩增结果均为阴性。表明该mPCR可用于临床病料的快速诊断和流行病学调查。

关键词： PRV 多重PCR 野毒与疫苗毒快速诊断

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泰山松花粉多糖对鸡奇异变形杆菌亚单位疫苗免疫效果的影响

泰山松花粉多糖对鸡奇异变形杆菌亚单位疫苗免疫效果的影响

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：崔国林钟世勋杨世发左雪梅朱瑞良山东农业大学动物科技学院山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室

按照改良的Wooldridge法提取鸡奇异变形杆菌的外膜蛋白(OMP),并将其分别加入泰山松花粉多糖、白油、蜂胶,分别研制成相关佐剂亚单位疫苗(分别称为松花粉多糖佐剂亚单位苗、白油佐剂亚单位苗、蜂胶佐剂亚单位苗)。将150只1日龄雏鸡随机分... 详细信息

按照改良的Wooldridge法提取鸡奇异变形杆菌的外膜蛋白(OMP),并将其分别加入泰山松花粉多糖、白油、蜂胶,分别研制成相关佐剂亚单位疫苗(分别称为松花粉多糖佐剂亚单位苗、白油佐剂亚单位苗、蜂胶佐剂亚单位苗)。将150只1日龄雏鸡随机分为5组,分别为白油组(Ⅰ)、蜂胶组(Ⅱ)、松花粉多糖组(Ⅲ)、阴性对照组(Ⅳ)和空白对照组(Ⅴ)。分别于3、7、12日龄对雏鸡进行疫苗免疫,然后分别于首免疫后的3、7、14、21、28、35、42和49d检测外周血抗体效价、白细胞介素2(IL-2)含量、淋巴细胞增值率和小肠SIgA含量。试验结果表明,松花粉多糖组细胞、体液和粘膜免疫水平显著提高;蜂胶组细胞和体液免疫水平显著提高,但与松花粉多糖组差异不显著;白油组则仅有体液免疫水平显著提高,细胞和粘膜免疫水平提高不显著。这说明,松花粉多糖能够显著提高鸡奇异变形杆菌亚单位疫苗的免疫效果。

关键词：泰山松花粉多糖蜂胶白油鸡奇异变形杆菌亚单位疫苗免疫效果

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鉴别高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

鉴别高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光定量RT-PCR检测...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：赵明军吴志明闫若潜王东方赵雪丽刘梅芬河南省动物疫病预防控制中心

根据GenBank登录的高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP/LP-PRRSV)的非结构蛋白(NSP2)基因序列设计特异性引物和TaqManMGB荧光探针,经优化反应条件,建立了鉴别HP/LP-PRRSV二重TaqMan MGB实时荧光定量RT-PCR((fluorescent quantitative real-timePCR,FQ-PCR)检测方法;进行了二重FQ-PCR检测方法的敏感性、特异性和重复性实验,并对疑似PRRSV感染临床样品进行了应用检测,同时与HP/LP-PRRSV二重RT-PCR方法进行了对比实验。结果显示:成功建立了鉴别HP/LP-PRRSV的二重FQ-PCR检测方法,HP/LP-PRRSV标准曲线的曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数分别为0.998和0.997;该方法灵敏度可达101copies/μL;特异性高,对HP/LP-PRRSV阳性对照扩增呈现阳性反应曲线,而对5个对照病原扩增曲线均呈现阴性反应;不同浓度的HP/LP-PRRSV重组质粒分别重复扩增3次,重复结果良好;对25份临床疑似PRRSV感染样品进行了应用检测,阳性检出率为92%,较二重RT-PCR方法阳性检出率高。

关键词：高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征实时荧光定量二重RT-PCR TaqMan MGB荧光探针检测应用

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三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李斌苏乾莲赵武秦毅斌梁家幸肖爱欢卢冰霞李莹莹何颖段群棚姜佳佳梁保忠广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,在由猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N端及中间部分三个连续基因片段B1、B2、B3所构建的原核表达质粒pET32a-B1、pET32a-B2、pET32a-B3的基础上,设计引物扩增基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEAS... 详细信息

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,在由猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N端及中间部分三个连续基因片段B1、B2、B3所构建的原核表达质粒pET32a-B1、pET32a-B2、pET32a-B3的基础上,设计引物扩增基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1 Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到重组真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c。将真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c分别转染293T细胞,经实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,证实这三个真核表达质粒可转染293T细胞表达目的蛋白。经SDS-PAGE电泳分析、WesternBlot鉴定,结果表明真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c在转染293T细胞中表达的目的蛋白具有良好的HEV抗原性。从而获得了三个HEVORF2连续片段的候选核酸疫苗,为今后进一步深入研究奠定了基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒 ORF2 真核表达质粒鉴定核酸疫苗

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广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析

广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李莹莹何颖李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸赵武周英宁陆芹章广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院

为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,以2011年至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩增,将克隆出与目的基因大小... 详细信息

为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,以2011年至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩增,将克隆出与目的基因大小相符的片段回收,再与载体连接,转化到大肠杆菌DH5a中,筛选阳性克隆及测序,扩增获得的4株Mhp毒株(GXLC1、GXLC2、GXLC3和GXLC4),随后用DNASTAR软件对P46基因序列进行比对分析。结果表明,已克隆出的P46基因序列长度为1104bp,编码368个氨基酸,其中该序列中含有3个编码色氨酸的TGA密码子,而不是终止密码子,1个CGG为编码精氨酸的稀有密码子,而不是其他支原体中的无义密码子。所获4株P46的基因序列与所参考的猪肺炎支原体J株、232株、7448株及168株的核苷酸同源性为98.4%～99.4%,氨基酸同源性为98.6%～99.5%,毒株之间P46基因的同源性很高,保守性较强。

关键词：广西陆川猪猪肺炎支原体 P46基因克隆序列分析

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