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19 篇 吉林大学
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10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 中国农业科学院上...
9 篇 河南省动物疫病预...
9 篇 四川农业大学
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作者

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11 篇 刘长明
11 篇 赵军
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10 篇 赵明军
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排序：

B亚型禽白血病病毒所致免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌对雏鸡致病性的影响

B亚型禽白血病病毒所致免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌对雏鸡致...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：郭繁霞朱瑞良赵雪吴村曲亭和贺晓华郭中坤潘德琴黄璇李奕芙山东农业大学动物科技学院山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室

近些年,在养禽业中,免疫抑制性病毒所致雏鸡免疫抑制条件下继发其它病毒、细菌或寄生虫的混合感染的现象越来越普遍、越来越严重。本研究选择B亚型禽白血病病毒(ALV-B)感染雏鸡造成免疫机能低下,建立免疫抑制模型,以探索免疫抑制条件下... 详细信息

近些年,在养禽业中,免疫抑制性病毒所致雏鸡免疫抑制条件下继发其它病毒、细菌或寄生虫的混合感染的现象越来越普遍、越来越严重。本研究选择B亚型禽白血病病毒(ALV-B)感染雏鸡造成免疫机能低下,建立免疫抑制模型,以探索免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌后对雏鸡致病性的影响。研究中设计了ALV-B单独感染组,***单独感染组,ALV-B和***共感染组,空白对照组,并且比较相互之间的差异。通过对雏鸡免疫学指标、生长性能及病毒血症和排毒状况的检测,对二者混合感染雏鸡的影响进行了研究。结果显示,ALV-B和***共感染能引起雏鸡的免疫力低下,表现为免疫器官的发育、抗体的产生、淋巴细胞的转化、IL-2和IFN-γ的合成和分泌等受到明显抑制;混合感染组延长了***的病程,增强其对雏鸡的致病性;同时机体出现明显的生长迟滞现象,尤其是第5周龄,共感染组平均体重仅相当于对照组的40%;本研究提示ALV-B和***在雏鸡体内的增殖方面起协同作用,从而促进了病原在鸡群间的散播;而***对ALV-B导致的病毒血症有一定的抑制作用。总之,在ALV-B免疫抑制作用下,***对雏鸡的致病性显著增强。本研究为生产中家禽感染免疫抑制病毒造成的免疫抑制条件下继发其它疾病的普遍发生提供了理论依据,提醒国内外兽医工作者和养禽界对免疫抑制状态下继发其它病原的感染应引起密切的关注。

关键词： B亚型禽白血病病毒禽波氏杆菌免疫抑制共感染致病性

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减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律

减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张鑫淼文心田黄小波曹三杰汪洋阳张丹段素芬阳酉萍张小会四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心

以小鼠为动物模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平。结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEVS、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA。在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显著差异,均在免疫后第6w诱导产生的抗体滴度达到最高峰。免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)。在免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的γ-干扰素的水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显著差异(P>0.05)。在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显著差异(P>0.05)。研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌传染性胃肠炎 S/N双基因小鼠口服免疫

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携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答研究

携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：熊朝丽张华程振涛周碧君王开功文明贵州大学动物疫病研究所贵州省动物疫病预防控制中心贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室

(目的)为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答效果。(方法)本研究将60只黑山羊随机分为3组即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门氏菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对... 详细信息

(目的)为探讨携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌诱导山羊免疫应答效果。(方法)本研究将60只黑山羊随机分为3组即重组细菌组、弱毒疫苗组和空白对照组,重组细菌组灌服重组减毒沙门氏菌,弱毒疫苗组股内侧皮内注射山羊痘弱毒疫苗,空白对照组不作任何处理;于不同时间段采集山羊血液、呼吸道/消化道分泌液及组织样本进行检测。结果:(1)在免疫后7d、15d、30d和45d的山羊消化道SIgA含量中,重组细菌组明显高于弱毒疫苗组(P<0.05),45d时到达最高值(21.924±1.122ug/L);(2)在消化道/呼吸道粘膜肥大细胞数量上,重组细菌组与弱毒疫苗组基本一致,从大到小依次是十二指肠、空肠、回肠、真胃和气管;(3)在诱导产生P32抗体上,重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但差异不明显(P>0.05);(4)在淋巴细胞转化效率上,免疫15d前重组细菌组略低于弱毒疫苗组,但免疫30d后重组细菌组高于弱毒疫苗组,但差异均不显著(P>0.05);(5)在诱导产生细胞因子上,重组细菌组山羊血清IL-2含量低于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清IL-5含量高于弱毒疫苗组,差异极显著(P<0.01),血清TNF-β高于弱毒疫苗组,差异显著(P<0.05),而血清IFN-γ和TNF-α含量与弱毒疫苗组差异不明显(P>0.05)。(结论)上述实验结果表明,构建的携带pVAX1-GPV-P32重组减毒沙门氏菌能诱导山羊产生较好的免疫应答反应。

关键词：重组减毒沙门氏菌免疫应答山羊

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猪Toll样受体配体对PRRSV免疫佐剂作用

猪Toll样受体配体对PRRSV免疫佐剂作用

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张莉莉白娟刘捷王晓晔李玉峰姜平南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室

猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了巨大的经济损失,目前商品化疫苗仅能提供部分保护力。近来关于人和猪的一些研究表明Toll样受体(TLR)的配体有免疫佐剂效应,如合成的双链RNA(dsRNA)[poly(I:C)]、脂磷壁酸(LTA)和CL097... 详细信息

猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了巨大的经济损失,目前商品化疫苗仅能提供部分保护力。近来关于人和猪的一些研究表明Toll样受体(TLR)的配体有免疫佐剂效应,如合成的双链RNA(dsRNA)[poly(I:C)]、脂磷壁酸(LTA)和CL097。为了研究这些化合物是否诱导PRRSV特异性免疫应答效果,本试验采用PRRSV灭活病毒液(KV)与TLR配体组合后皮下免疫小鼠。结果表明,单独的poly(I:C)和CL097诱导小鼠IFN-γ和PRRSV特异性抗体水平高于KV组或KV-LTA组。将20头6周龄PCV2和PRRSV抗原、抗体均阴性的断奶仔猪,随机分为4组,第1组接种由100μgpoly(I:C)、80μgDOTAP和灭活病毒配制而成的灭活苗,第2组接种8μgCL097、80μgDOTAP和灭活病毒配制而成的灭活苗,第3组接种的是灭活病毒配制而成的灭活苗,第四组接种DMEM。每头猪通过颈部肌肉进行免疫,首免后2周加强免疫一次。首免后14天和28天,采血分离血清,用于PRRSV抗体及细胞因子(IL-4和IFN-γ)的检测;同时分离外周血淋巴细胞,测定淋巴细胞增殖反应,并测定细胞分泌细胞因子(IL-4和IFN-γ)的量。首免后28天,肌肉接种2×105.0TCID50 PRRSVS Y0608病毒液。攻毒后隔离饲养,每天观察仔猪临床表现,测量直肠温度。攻毒后第7、14和21天采血分离血清,用于病毒及抗体的检测。攻毒后第21天扑杀所有试验猪,采集肺脏组织,并进行病理学检查。结果为,KV混合poly(I:C)或CL097后诱导猪体产生的PRRSV特异性抗体和T淋巴细胞增殖水平高于KV组。攻毒后,与KV或对照组相比,KV-poly(I:C)或-CL097免疫组患猪产生的临床症状较轻、病毒血症更低、肺部的病理损伤更少。表明KV-poly(I:C)或-CL097能提高抵抗PRRSV的保护力。TLR3和TLR7/8的配体为新PRRSV疫苗的开发提供了候选佐剂。

关键词： PRRSV 灭活病毒(KV)疫苗 TLR配体佐剂

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嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗对商品猪免疫保护效力的研究

嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗对商品猪免疫保护效力的研究

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：汪正亮周金柱王小波李基棕高杏俞天琦高崧扬州大学农业部禽用生物制剂创制重点实验室

(目的)本文运用多功能细胞电穿孔仪将本实验室构建的重组pSK-dPCV1-2质粒转染Dulac细胞,传代培养后收获嵌合型猪圆环病毒PCV1-2。将该重组病毒灭活后与ISA206VG佐剂乳化制成灭活苗,免疫商品猪以评价其免疫保护效力。(方法)将42日龄PCV2... 详细信息

(目的)本文运用多功能细胞电穿孔仪将本实验室构建的重组pSK-dPCV1-2质粒转染Dulac细胞,传代培养后收获嵌合型猪圆环病毒PCV1-2。将该重组病毒灭活后与ISA206VG佐剂乳化制成灭活苗,免疫商品猪以评价其免疫保护效力。(方法)将42日龄PCV2母源抗体较低的20头商品猪随机分成5组,另外2头作为健康对照组。通过检测不同时间的间接免疫荧光抗体、中和抗体、攻毒后病毒血症以及病理变化和组织中的病毒载量等评价疫苗的免疫保护效果。(结果)结果显示:二免后14d,所有免疫组试验猪都表现为PCV2血清学阳性,且中和抗体水平在1/15～1/20。攻毒后21d扑杀试验猪,免疫组猪的淋巴结和各脏器的大体和显微病变都比攻毒对照组轻微。攻毒对照组的淋巴结出现多核巨细胞和嗜酸性粒细胞,且有多量的淋巴细胞缺失,免疫组未见多核巨细胞,淋巴细胞缺失也较少。淋巴结中PCV2病毒载量在攻毒对照组为5.566±0.432,在104.0TCID50,105.0TCID50,106.0TCID50免疫组分别为4.469±1.023,4.434±0.716,3.521±0.958,其中105.0TCID50,106.0TCID50免疫组与攻毒对照组差异显著(P<0.05),但是,试验期间各试验组和健康对照组均未观察到明显的临床症状。(结论)断奶仔猪免疫105.0TCID50以上嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活苗可以有效地抵抗PCV2b/1B/Jiangsu/Jingjiang/2012/11/08病毒感染。

关键词：嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗商品猪 ISA206VG佐剂免疫保护

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2012年河南省猪流行性腹泻病毒S1基因遗传变异分析

2012年河南省猪流行性腹泻病毒S1基因遗传变异分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：陈慧娟闫若潜赵雪丽赵明军周兵强吴志明河南农业大学牧医工程学院河南省动物疫病预防控制中心

为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的特异性引物,利用RT-PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明:5株PEDVS1基因核... 详细信息

为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的特异性引物,利用RT-PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明:5株PEDVS1基因核苷酸同源性为98.3%～99.5%,氨基酸同源性为97.1%～98.9%。与2012年国内登陆的PEDV流行株相比较核苷酸同源性为97.8%～99.2%,氨基酸同源性为97.4%～99.1%。与参考毒株CV777相比较核苷酸同源性为88.7%～89.1%,氨基酸同源性为87.3%～88.4%。同源性分析结果表明:5株分离株S1基因变异情况基本一致,存在相同的插入和缺失,并且与国内2012年登陆的毒株相比没有突变倾向;但与参考毒株CV777相比较,在第163bp～166bp处有3个核苷酸插入,在173bp～174bp之间有9个核苷酸插入,在405bp～406bp之间有3个核苷酸插入,在463bp～464bp之间有3个核苷酸缺失,这些位点核苷酸的插入和缺失导致了其编码的氨基酸相应改变。PEDVS1基因在我国只有一个血清型,但PEDV分3个群,系统进化树分析表明5株分离株S1基因与2012年国内登陆的毒株均属于Ⅲ群,与2011年国内登陆的PEDVⅠ群流行毒株相比较核苷酸同源性为88.6%～89.3%,氨基酸同源性为85.3%～86.9%,而参考毒株CV777属于Ⅱ群。目前我国流行的PEDVS1基因有PEDV群和Ⅲ群的存在,但这些毒株的致病性和抗原性差异仍有待进一步研究。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S1基因遗传变异分析

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重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强机理研究

重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：闫若潜闫志玲吴志明赵明军程俊贞刘梅芬赵雪丽谢彩华安春霞河南省动物疫病预防与控制中心

为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄健康SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄时进行免疫接种和rChIL-6蛋白注射。... 详细信息

为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄健康SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄时进行免疫接种和rChIL-6蛋白注射。分别检测4组鸡免疫前和免疫后不同时间血清中IBDV抗体水平、不同细胞因子表达水平、脾淋巴细胞增殖活性和外周血T淋巴细胞增殖活性等指标以揭示rChIL-6蛋白在机体内对疫苗的免疫增强机理。结果表明:免疫后7～49d,rChIL-6蛋白与IBDV灭活疫苗共免疫组(第4组)鸡血清中IBDV抗体水平极显著高于IBDV灭活疫苗对照组(p<0.01);免疫后7～35d,第4组鸡血清中的白细胞介素-4、6、2(ChIL-4、ChIL-6、ChIL-2)和γ干扰素(ChIFN-γ)等4种细胞因子的表达水平极显著高于其他3组对照组(p<0.01),α干扰素(ChIFN-α)的表达水平于免疫后14～35d期间极显著高于其他3组对照鸡(p<0.01);rChIL-6蛋白单独应用后可显著提高机体的ChIL-4、ChIL-6和ChIL-2的表达水平,但对ChIFN-γ、ChIFN-α的表达水平无明显影响。免疫后7～14d,第4组鸡的脾淋巴细胞增殖活性显著高于其他3组对照鸡(p<0.01);免疫后7～21d,第4组鸡的外周血T淋巴细胞的增殖活性稍高于其他3组对照组(p>0.05)。结果表明:rChIL-6在体液免疫和细胞免疫水平对鸡传染性法氏囊灭活疫苗免疫后均具有免疫增强作用;对机体体液免疫应答的增强能力高于细胞免疫应答。

关键词：重组鸡白细胞介素-6蛋白鸡传染性法氏囊病毒灭活疫苗免疫增强机理

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猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析

猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院广西田林县动物疫病预防控制中心

为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分... 详细信息

为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。

关键词：猪乙型脑炎病毒 E基因克隆生物信息学

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的效力评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：孙元秦华洋袁晋王春花赵碧波李素罗玉子仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。系统评价显示,该疫苗初步具备了理想猪瘟疫苗的特征。本研究对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV-SFV-E2以三种免疫途径(肌肉、皮下、滴鼻)在猪体上的免疫效果进行了比较。选取21头5周龄左右猪瘟抗体及抗原均为阴性的健康仔猪,将所有仔猪随机分成A、B、C和D四组,其中A、B、C三组分别经肌肉、皮下和滴鼻方式注射5×106TCID50rAdV-SFV-E2,D组分别经三种途径免疫5×106TCID50rAdV-SFV-empty。免疫后3周以同种疫苗、同样途径和剂量进行加强免疫。加强免疫后4周,所有猪用猪瘟病毒石门株进行攻毒。研究结果显示,皮下免疫组诱导的体液免疫水平较其他途径免疫组较高。在攻毒前,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为46.28%、51.66%和31.94%。皮下免疫组与滴鼻免疫组在攻毒前的抗体水平比较上差异显著(p<0.05)。攻毒后3d,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为54.28%、62.39%和39.35%。皮下免疫组与肌肉免疫组、滴鼻免疫组间差异显著(p<0.05)。在细胞免疫方面,皮下免疫组诱导了高水平的特异性的淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4的分泌,与rAdV-SFV-empty免疫组及肌肉和滴鼻免疫组之间差异显著(p<0.05)。本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性,将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体疫苗免疫途径效力

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中国地方黑猪血液红细胞源抗菌肽的纯化及活性鉴定

中国地方黑猪血液红细胞源抗菌肽的纯化及活性鉴定

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：尚田田王青杭柏林赵志雨张庆华徐彦召胡建和河南科技学院动物科学学院

分离纯化中国地方黑猪血液红细胞中的抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)并对其体外抗菌活性进行初步分析。以中国地方黑猪血液为材料,于4℃700×g离心15min,弃去上层液,用灭菌生理盐水洗涤红细胞,重复3次,再用0.83%氯化铵溶液溶... 详细信息

分离纯化中国地方黑猪血液红细胞中的抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)并对其体外抗菌活性进行初步分析。以中国地方黑猪血液为材料,于4℃700×g离心15min,弃去上层液,用灭菌生理盐水洗涤红细胞,重复3次,再用0.83%氯化铵溶液溶解红细胞(比例为3:1),然后于4℃ 700×g离心15min去除白细胞,将含血红细胞裂解的溶液经冷冻干燥,冻干物即为猪红细胞抗菌肽粗提物。通过离子交换层析法纯化抗菌肽粗提物,进样速度20mL/h,用25mmol/L乙酸铵洗去非阳离子成分、10%乙酸洗脱阳离子成分。紫外分光光度检测器在230nm处监测其吸光度。收集洗脱峰(5mL/管),冻干后用0.01%乙酸重悬。再用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)进一步纯化分离有活性的阳离子峰抗菌肽,用梯度为30%～35%的乙腈和0.1%三氟乙酸进行洗脱。缓冲液A:5%乙腈,0.1%三氟乙酸;缓冲液B:95%乙腈,0.1%三氟乙酸。A到B的梯度为30%～35%,时间为80min。用紫外分光光度计检测器在215nm处监测其吸光度,收集峰液,冻干,用0.01%乙酸溶解。用双层琼脂糖弥散法测定其对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等受试菌株抗菌活性。结果表明,通过离子交换层析获得的阳离子峰有抗菌活性,通过RP-HPLC对阳离子峰纯化后获得了6个峰;6个峰液对大肠杆菌和沙门氏菌均具有抗菌活性,峰液F1、F2和F3对金黄色葡萄球菌具有抗菌活性,仅峰液F1对白色念珠菌具有抗菌活性。本试验首次从中国地方黑猪红细胞中的分离出来具有抗菌活性的物质,为进一步研究猪红细胞源抗菌肽奠定基础。

关键词：抗菌肽粗提物抗菌活性阳离子猪血液金黄色葡萄球菌活性鉴定红细胞

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