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文献类型

594 篇 会议

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594 篇 电子文献
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学科分类号

530 篇 农学
- 499 篇 兽医学
- 26 篇 畜牧学
- 3 篇 林学
- 1 篇 作物学
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52 篇 医学
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- 9 篇 中药学(可授医学、...
- 5 篇 公共卫生与预防医...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
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- 3 篇 生物学
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5 篇 工学
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- 1 篇 农业工程
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- 1 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 生物工程
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

29 篇 分离鉴定
20 篇 病理学观察
19 篇 病理学诊断
16 篇 组织病理学观察
14 篇 prrsv
14 篇 大肠杆菌
14 篇 巨噬细胞
13 篇 混合感染
13 篇 宿主细胞
13 篇 布鲁氏菌
13 篇 病理诊断
13 篇 信号通路
10 篇 原核表达
10 篇 鼠伤寒沙门菌
10 篇 rna
9 篇 生物学特性
9 篇 pcr
8 篇 毒力基因
8 篇 实验动物
8 篇 流感病毒

机构

88 篇 中国农业大学
46 篇 山东农业大学
42 篇 石河子大学
40 篇 河南科技大学
27 篇 四川农业大学
26 篇 东北农业大学
24 篇 洛阳职业技术学院
22 篇 内蒙古农业大学
20 篇 华中农业大学
16 篇 安徽农业大学
16 篇 山西农业大学
15 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 甘肃农业大学
14 篇 河南科技学院
11 篇 南京农业大学
11 篇 西北农林科技大学
11 篇 扬州大学
11 篇 天津农学院
10 篇 宁夏大学
10 篇 内蒙古民族大学

作者

56 篇 赵德明
56 篇 周向梅
47 篇 杨利峰
37 篇 陈创夫
31 篇 廖成水
31 篇 程相朝
27 篇 成子强
25 篇 张春杰
17 篇 谷长勤
16 篇 李静
15 篇 程国富
15 篇 佘锐萍
15 篇 刘思当
14 篇 汪开毓
14 篇 郁川
13 篇 张万坡
13 篇 祁克宗
13 篇 胡薛英
12 篇 刘晓丽
12 篇 张辉

语言

585 篇 中文
9 篇 英文

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单增李斯特菌诱导食管癌细胞自噬形成的研究

单增李斯特菌诱导食管癌细胞自噬形成的研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会

作者：赵莹莹贾艳艳李静廖成水程相朝张春杰河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室洛阳职业技术学院

【目的】将单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, L. monocytogenes)感染人食管癌细胞EC9706,分析单增李斯特菌诱导EC9706细胞自噬的发生情况。【方法】本试验利用单增李斯特菌感染EC9706细胞后,测定其侵袭率和胞内增殖率;通过透射电... 详细信息

【目的】将单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, L. monocytogenes)感染人食管癌细胞EC9706,分析单增李斯特菌诱导EC9706细胞自噬的发生情况。【方法】本试验利用单增李斯特菌感染EC9706细胞后,测定其侵袭率和胞内增殖率;通过透射电镜观察EC9706细胞内的自噬现象;westernblot检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值变化,实时定量PCR检测自噬基因m RNA的相对表达水平。【结果】结果显示单增李斯特菌对人食管癌细胞EC9706的侵袭率为5.2%,当LM侵

关键词：单增李斯特菌食管癌细胞自噬

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鸡氨肽酶N噬菌体高亲和配体筛选及其抑制IBV感染研究

鸡氨肽酶N噬菌体高亲和配体筛选及其抑制IBV感染研究

引用

作者：孙晓琦李兰兰潘龙李伟群陈慧杰黄小丹张瑞莉李广兴东北农业大学动物医学学院

研究目的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)为鸡传染性支气管炎(IB)的病原,属冠状病毒科冠状病毒属。氨肽酶N(APN)是细胞表面的一种金属糖蛋白,是大多数I型和II型冠状病毒的细胞受体。在之前的研究中,我们发现IBV可以与天然和原核表达的鸡APN(g... 详细信息

研究目的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)为鸡传染性支气管炎(IB)的病原,属冠状病毒科冠状病毒属。氨肽酶N(APN)是细胞表面的一种金属糖蛋白,是大多数I型和II型冠状病毒的细胞受体。在之前的研究中,我们发现IBV可以与天然和原核表达的鸡APN(g APN)蛋白结合。那么,阻断g APN是否能够抑制IBV感染将成为一个有意义的研究方向。噬菌体展示技术是一种可利用生物淘选,获得靶蛋白的亲和配体的生物试验技术。本试验以原核重组蛋白p ET-g APN为靶蛋白,利用噬菌体展示技术,筛选出其高亲和性噬菌体,并合成其特异性十二肽序列,分别在体内和体外两种条件下检测该亲和配体的抗病毒活性。

关键词： IBV 生物淘选噬菌体亲和配体氨肽酶

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携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌对肿瘤细胞的作用

携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌对肿瘤细胞的作用

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会2016年学术研讨会

作者：田文静郁川陈桂华廖成水翟崇凯张春杰程相朝河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室洛阳职业技术学院

为研究携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌对肿瘤细胞的作用,将构建好的能稳定携带TAT-Apoptin的重组减毒沙门菌体外感染黑色素瘤细胞B16F10和肺癌细胞LL/2,Western-blot检测TAT-Apoptin在不同肿瘤细胞内的表达情况,CCK-8法检测不同MO... 详细信息

为研究携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌对肿瘤细胞的作用,将构建好的能稳定携带TAT-Apoptin的重组减毒沙门菌体外感染黑色素瘤细胞B16F10和肺癌细胞LL/2,Western-blot检测TAT-Apoptin在不同肿瘤细胞内的表达情况,CCK-8法检测不同MOI及感染时间条件下细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,并分析Caspase-1,3,6,8,9和细胞色素C等信号蛋白的表达情况。Western-blot结果显示,重组菌感染两细胞后,均可检测到约20KD的TAT-Apoptin蛋白条带;CCK-8法实验结果表明,MOI浓度越大,抑制率越高,并且随着感染时间的增加,抑制率逐渐下降,说明重组菌抑制B16F10和LL/2细胞增殖具有浓度依赖性和时间依赖性;重组菌感染B16F10、LL/2细胞24h后,荧光显微镜下可观察到TUNEL阳性细胞;这表明重组菌能够诱导B16F10和LL/2细胞凋亡;进一步对凋亡信号蛋白分析发现,重组菌感染肿瘤细胞B16F10和LL/2后,能诱导Caspase-3,Caspase-6,Caspase-8,Caspase-9和细胞色素C的表达,互补菌对照组和细胞培养空白组均不能诱导上述信号蛋白的表达,此外Caspase-1在LL/2细胞中表达显著升高,以上结果表明,重组减毒鼠伤寒沙门菌能够有效递呈TAT-Apoptin基因在黑色素瘤细胞B16F10和肺癌细胞LL/2内表达,且能够诱导这两种肿瘤细胞凋亡,其可能通过外源性死亡受体途径和内源性线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡,并且诱导肺癌细胞LL/2凋亡还与炎症相关因子Caspase-1的介导有关。

关键词：减毒鼠伤寒沙门菌 TAT-Apoptin 表达信号通路抗肿瘤

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双峰驼IgM重链的原核表达及其多克隆抗体的制备

双峰驼IgM重链的原核表达及其多克隆抗体的制备

引用

作者：李敏吴秀萍张旺东张亮何晚红李建飞李瑞火兴民刘丽萍王雯慧甘肃农业大学动物医学院

为获取双峰驼免疫球蛋白M(IgM)重链恒定区的表达产物及抗体,首先找出Gen Bank收录的双峰驼IgM、IgA、IgE、IgG重链恒定区基因序列,比对IgM与IgA、IgE和IgG的氨基酸序列,选取一段差异较大的蛋白序列片段,转换成相对应的基因片段,PCR扩增... 详细信息

为获取双峰驼免疫球蛋白M(IgM)重链恒定区的表达产物及抗体,首先找出Gen Bank收录的双峰驼IgM、IgA、IgE、IgG重链恒定区基因序列,比对IgM与IgA、IgE和IgG的氨基酸序列,选取一段差异较大的蛋白序列片段,转换成相对应的基因片段,PCR扩增选取的基因片段,插入pET-28a(+)载体构建重组载体,转化进大肠杆菌BL21,并诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE鉴定重组蛋白,后利用纯化的蛋白免疫家兔,制备抗血清,ELISA和Western Blot鉴定获得的血清。结果显示,成功构建了载体pET-28a-IgM,诱导表达的目的蛋白分子量为18.7ku,与预期相符。ELISA方法检测抗血清效价为1:32000,Western Blot结果显示该血清具有良好的反应原性,这表明了双峰驼Ig M兔抗血清的成功制备。

关键词：双峰驼免疫球蛋白M 原核表达抗体制备

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鸡沙门氏菌套式PCR方法的建立及初步临床应用

鸡沙门氏菌套式PCR方法的建立及初步临床应用

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：胡尊楠刘志科张秋雨李村院陈创夫石河子大学动物科技学院河南科技学院石河子大学生命科学学院

沙门氏菌是一种寄生在人和多种动物肠道内的革兰氏阴性菌,其传播快、血清型繁多、是危害严重的一种食源性的致病菌。该菌多危害20日龄以内的雏鸡,患病鸡表现为白痢、高死亡率;成年鸡则主要感染生殖器官,多数呈隐形局部炎症,并通过卵黄... 详细信息

沙门氏菌是一种寄生在人和多种动物肠道内的革兰氏阴性菌,其传播快、血清型繁多、是危害严重的一种食源性的致病菌。该菌多危害20日龄以内的雏鸡,患病鸡表现为白痢、高死亡率;成年鸡则主要感染生殖器官,多数呈隐形局部炎症,并通过卵黄内带菌而传播给雏鸡。实验目的:建立一种快速、高效的鸡沙门氏菌套式PCR方法。方法:本研究根据沙门氏菌侵袭蛋白基因invA的高度保守区域,利用Primmer 5.0软件设计两对特异性的套式引物,利用提取的沙门氏菌DNA克隆出invA基因,将其连入T载体计算出拷贝数作为套式PCR的模板。对其反应条件进行优化,建立最佳的套式PCR反应条件。应用该方法对已构建好模板的标准曲线进行灵敏度检测。结果:套式PC条件为:上下游引物用量分别为0.3μL,套式PCR的第一次退火为57.4℃,第二次为53.5℃。该方法的灵敏度为102拷贝数/μL的标准质粒,远高于常规PCR的105拷贝数/μL。用建立的套式PCR方法对新疆石河子某鸡场进行临床采集的100样品进行检测,与传统的细菌分离鉴定方法比较其符合率为91.67%。结论:本研究建立了鸡沙门氏菌的套式PCR方法,具有快速、可行、特异性强、准确率高等特点,可为鸡沙门氏菌病的早期现场诊断和研究提供了一种新的思路。讨论:目前,鸡沙门氏菌检测方法种类繁多,但都存在一定的缺点。常规PCR方法和胶体金等检测方法假阳性过多,使其只能成为临床诊断的一种辅助手段。环介导等温扩增鉴定方法,克服传统方法的局限性,但该方法对引物的要求比较高。而本实验根据沙门氏菌的特异性invA基因,用BLAST检索进行核苷酸序列分析表明:在沙门氏菌的两个种属中存在较高的同源性,而与其它生物无同源关系,该套式PCR方法对于阳性标准质粒的最小检出量为102拷贝数/μL,是常规PCR方法的1000倍。本研究建立的鸡沙门氏菌套式PCR检测方法,不需要特殊的仪器和设备,优化了反应的引物用量和退火温度,实验要求和技术条件一般实验室都能满足,其优势是常规检测方法不能比拟的。用该方法对采集到的100份临床样品进行检测,与传统的细菌分离鉴定方法的符合率为91.67%,为鸡沙门氏菌病的流行病学调查提供一种方便、快速的检测手段,是诊断鸡沙门氏菌病的一种较好的方法。

关键词：鸡沙门氏菌检测方法 PCR 鸡沙门氏菌病

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检测牛轮状病毒抗体的诊断方法的建立与初步应用

检测牛轮状病毒抗体的诊断方法的建立与初步应用

引用

作者：陆亚冬刘贤侠陈创夫石河子大学动物科技学院

目的:原核表达牛轮状病毒VP6蛋白,检测该蛋白的反应原性以纯化的VP6蛋白为抗原。目的是建立一种新的牛轮状病毒胶体金免疫层析试纸条检测方法。方法是对牛轮状病毒内衣壳蛋白VP6保守区设计并合成引物,表达牛轮状病毒VP6蛋白,应用Western... 详细信息

目的:原核表达牛轮状病毒VP6蛋白,检测该蛋白的反应原性以纯化的VP6蛋白为抗原。目的是建立一种新的牛轮状病毒胶体金免疫层析试纸条检测方法。方法是对牛轮状病毒内衣壳蛋白VP6保守区设计并合成引物,表达牛轮状病毒VP6蛋白,应用Western Blot分析该蛋白的反应原性。结果利用RT-PCR方法成功扩增出目的基因,经过测序与酶切鉴定,正确构建了表达载体p ET-28a-VP6,SDS-PAGE实验显示表达产物为44KD、37KD、27KD 3种不同相对分子质量的重组蛋白;同时构建了p ET-32a-VP6,SDS-PAGE电泳显示表达产物在60KD表达重组蛋白。经过Western Blot检测,该蛋白具有良好的反应原性。经亲和层析纯化好的牛轮状病毒重组VP6蛋白包被酶标板,进行间接ELISA实验,经各个环节的优化,确定好反应条件,初步建立了牛轮状病毒间接ELISA诊断方法,同时经原核表达、蛋白纯化的牛轮状病毒内衣壳蛋白VP6作为检测抗原,利用柠檬酸三钠还原氯金酸的方法,制备不同粒径的胶体金颗粒,进行筛选金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)为胶体金标记抗原的最佳条件,制备牛轮状病毒免疫胶体金试纸条,检测犊牛血清中轮状病毒特异性抗体,并验证制备的试纸条的特异性和敏感性,用建立好的间接ELISA的方法与进口的比利时瑞尔检测牛轮状病毒抗体的试剂盒同时对采集的新疆北疆部分地区:石河子、沙湾、奎屯、昌吉等10多个规模化牛场的腹泻犊牛血清26份和部分健康犊牛血清进行检测,符合率达到92.3%,用30nm金颗粒制备的牛轮状病毒试纸条敏感性最高,胶体金最适标记PH为6.8,SPA蛋白最佳标记量是10ug/m L,试纸条最高可检出牛轮状病毒阳性血清1:100,用制备的免疫层析试纸条与WB、ELISA分别对26份临床样本进行检测。阳性率分别为76.9%(20/26)、69.2%(18/26)、84.6%(22/26),WB检出的阳性的均能被试纸条检出,2份疑似阳性的血清也能被检出,与ELISA符合率90.9%,整个过程在5min内出结果,本试纸条在室温可保存3个月。结论说明此方法适合用于规模化牛场致犊牛腹泻病原和血清抗体的初步检测,制备的检测牛轮状病毒抗体胶体金免疫层析试纸条具有敏感、简便、快速、特异等优点,为规模化牛场犊牛轮状病毒抗体检测提供了基础。

关键词：牛轮状病毒 VP6 原核表达间接ELISA 免疫胶体金

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NF-κB信号通路差异性调控布鲁氏菌强弱毒株的胞内存活

NF-κB信号通路差异性调控布鲁氏菌强弱毒株的胞内存活

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作者：易继海邵志然张欢王月丽邓肖玉陈创夫新疆石河子大学动物科技学院

布鲁氏菌是一种兼性胞内寄生革兰氏阴性菌,其具有独特的生物学活性,并且和宿主的免疫系统间存在着复杂的相互作用。布鲁氏菌强毒株能抵抗细胞的杀伤作用,能部分削弱巨噬细胞的吞噬能力,从而使巨噬细胞的杀伤作用和抗原呈递能力部分减弱... 详细信息

布鲁氏菌是一种兼性胞内寄生革兰氏阴性菌,其具有独特的生物学活性,并且和宿主的免疫系统间存在着复杂的相互作用。布鲁氏菌强毒株能抵抗细胞的杀伤作用,能部分削弱巨噬细胞的吞噬能力,从而使巨噬细胞的杀伤作用和抗原呈递能力部分减弱,使得逃避宿主免疫防御,造成持续感染[1]。目前对布鲁氏菌侵入宿主细胞后引起的信号通路改变已经取得了一定的进展,但是这些研究主要集中在对布鲁氏菌感染巨噬细胞过程中在细胞抵抗凋亡的作用。研究目的:布鲁氏菌能够造成慢性感染但其具体的致病机制仍然不清楚,特别是与免疫细胞之间的交互作用,NF-κB通路参与了早期炎症反应是免疫反应的重要环节,因此探讨布鲁氏菌感染与NF-κB通路调控的关系是本研究的最终目的。实验方法:通过Western Blot与实时定量PCR实验检测了布鲁氏菌感染后NF-κB通路的激活状态,加入NF-κB抑制剂后,通过ELISA试验与细菌CFU计数检测了布鲁氏菌强弱毒株的感染过程中细胞内外免疫相关因子的表达,胞内荷菌量,脾指数,以及脾脏CFU计数。研究结果:疫苗株布鲁氏菌菌株(RB51)能够激活NF-κB信号通路,当加入NF-κB抑制剂(BAY11-7085)后NF-κB p65的磷酸化将会受到抑制,呈剂量依赖性。在胞内对NF-κB信号通路进行抑制后能够显著降低了Th1免疫应答,提高了布鲁氏菌RB51在细胞内外的复制率。在细胞外,当NF-κB通路被抑制后,能够不同程度的增加细菌在脾脏内的复制和繁殖,影响小鼠的生存率。然而NF-κB信号通路在感染布鲁氏菌菌株(2308)中只能微弱被激活,加入NF-κB抑制剂后,不能够影响Th1免疫反应,也不能影响布鲁氏菌在胞内外的生存.结论与讨论:本研究表明NF-κB信号通路在体外和体内对Th1免疫应答和布鲁氏菌疫苗株RB51的存活起重要调控作用。此外,NF-κB信号通路不能够调控布鲁氏菌强毒株2308在胞内胞外的生存繁殖。因为布鲁氏菌疫苗株RB51是由于布鲁氏菌强毒株2308LPS突变而来,本试验中巨噬细胞被不同结构LPS的布鲁氏菌刺激后,可能通过NF-κB活化后诱导NF-κB p65的磷酸化来调控胞内促炎因子的基因转录和蛋白分泌,而该通路的激活是否和LPS的差异有关还有待进一步研究。总而言之,我们初步得出布鲁氏菌疫苗株RB51在胞内外的生存与NF-κB信号通路活性密切相关,不同种型的布鲁氏菌对NF-κB信号通路活性的影响也有差异,可为进一步研究布鲁氏菌的胞内致病机制奠定理论基础。

关键词：布鲁氏菌强毒株强弱毒株信号通路胞内存活差异性

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表达猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白CHO-K1稳转细胞系的建立

表达猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白CHO-K1稳转细胞系的建立

引用

作者：武乐祎卞广林吴素芳车影李鹏任鹏举王选年郑州大学新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心浙江海隆生物技术有限公司

猪圆环病毒在我国广泛流行,给我国养猪业带了严重危害,Cap蛋白是PCV2唯一的结构蛋白,能诱导中和抗体的产生,因此被用于猪圆环病毒亚单位疫苗的研究。目的:建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHOK1悬浮稳转细胞系,表达Cap蛋白,为开发新型有效防治... 详细信息

猪圆环病毒在我国广泛流行,给我国养猪业带了严重危害,Cap蛋白是PCV2唯一的结构蛋白,能诱导中和抗体的产生,因此被用于猪圆环病毒亚单位疫苗的研究。目的:建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHOK1悬浮稳转细胞系,表达Cap蛋白,为开发新型有效防治猪圆环病毒的疫苗奠定基础。方法:优化PCV2-Cap蛋白的基因序列,并在目的片段的N端连接一段信号肽序列,使目Cap蛋白能够分泌到胞外;将载体用Hind III和Eco RI双酶切后利用T4 DNA连接酶将目的片段与线性载体连接,构建表达PCV2-Cap蛋白的真核表达质粒p EE12.4-PCV2-Cap,利用脂质体转染的方法将重组质粒转入CHO-K1细胞,通过嘌呤霉素和蛋氨酸亚氨基代砜（MSX）加压筛选出能够在正常生长的细胞,7天后收集细胞,通过有限稀释的方法,将细胞转至96孔板,挑选出单个细胞的孔,做Western blot检测目的蛋白的表达,从而得到能够表达Cap蛋白的单克隆细胞株;选择其中蛋白表达量相对较高的单克隆细胞株,进行一系列的悬浮驯化,然后摇瓶发酵,期间检测细胞的活力和活细胞密度,并取样用SDS-PAGE和Western blot检测蛋白的表达状况。结果表明:PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达,且表达的蛋白能够分泌到细胞外;成功驯化表达目的蛋白的单克隆细胞株至悬浮生长;发酵结果显示,发酵过程中活细胞密度可达6×10～6个/ml,细胞活力达80%以上,且目的蛋白的表达产量较高。结论:成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1稳转细胞系,为新型猪圆环病毒疫苗的发展奠定了基础。讨论:目前CHO细胞已经成为生物药物重要的表达和生产系统1]。与其他的蛋白表达体系系相比,CHO细胞系具有能够在无血清培养基中悬浮生长,抵抗大多数人类致病病毒的感染,生产的产品安全性高的优点,因此适用于大规模生产,而且CHO属于哺乳动物细胞系,可以进行蛋白翻译后加工修饰2],保持蛋白天然的活性和免疫原性。据了解目前还没有利用CHO细胞表达体系来制备预防猪圆环病毒的疫苗出现。本研究率先在CHO-K1细胞表达体系上获得了具有蛋白活性的PCV2-Cap蛋白,为猪圆环病毒亚单位疫苗的制备提供了新思路。

关键词： CHO-K1 PCV2-Cap 悬浮稳转细胞系

来源：评论

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CHIFNs对鸡CD4+、CD8+ T淋巴细胞PD-1及其配体PD-L1表达的影响

CHIFNs对鸡CD4+、CD8+ T淋巴细胞PD-1及其配体PD-L1表达的影响

引用

作者：王玲玲孙国鹏徐若楠闫占鹏邢瑞林王亚平任鹏举何海汛王选年新乡学院生命科学技术学院新乡学院生物技术研究中心河南科技大学动物科技学院

本研究旨在获得ChIFNs调节鸡CD4、CD8T淋巴细胞表面免疫抑制性受体PD-1及其配体PD-L1的表达模式;明确ChIFNs介导的STATs信号通路对PD-1及PD-L1转录调控的分子机制。通过流式细胞术分选得到鸡的CD4、CD8T淋巴细胞。利用荧光定量PCR和West... 详细信息

本研究旨在获得ChIFNs调节鸡CD4、CD8T淋巴细胞表面免疫抑制性受体PD-1及其配体PD-L1的表达模式;明确ChIFNs介导的STATs信号通路对PD-1及PD-L1转录调控的分子机制。通过流式细胞术分选得到鸡的CD4、CD8T淋巴细胞。利用荧光定量PCR和Western-blot技术分别检测不同ChIFNs刺激条件下,鸡PD-1及其配体PD-L1的表达变化,以及抑制ChIFNs下游主要信号通路对PD-1及PD-L1表达的影响。利用Westernblot技术对ChIFN-γ作用条件下,AG490抑制剂对STAT1的磷酸化以及PD-1和PD-L1表达变化的影响进行研究。结果显示ChIFN-α、β和γ均可诱导PD-1及其配体PD-L1的上调表达,并在效果上呈依次增强趋势,同时表现出一定的剂量依赖性关系;结合不同抑制剂对PD-1或PD-L1上调表达影响的显著性的结果来看,STATs较其它通路与ChIFNs诱导PD-1及PD-L1表达上调存在紧密的关联性,且抑制STATs信号通路后对二者的表达上调呈现了更为显著的影响（P<0.01）;STAT1蛋白的磷酸化水平与PD-1及PD-L1的表达水平呈现显著正相关,进一步证实STATs信号通路是ChIFN-γ调控鸡PD-1及PD-L1上调表达的主要信号通路之一。以上结果明:ChIFNs可诱导CD4、CD8T淋巴细胞表面PD-1及其配体PD-L1的上调表达,STATs信号通路是ChIFN-γ调控鸡PD-1及PD-L1上调表达的主要信号通路之一。本研究为进一步在PD-1及PD-L1基因编码区域上游筛选调控二者表达的STATs相关顺势作用元件（ISRE或GAS）、丰富PD-1/PD-L1免疫抑制信号通路激活引起的禽类免疫抑制和持续性感染疾病的防控提供理论指导、并为从基因转录水平上寻求能够阻断或抑制由于PD-1/PD-L1免疫抑制信号通路激活引起的禽类免疫抑制和持续性感染疾病的靶点奠定基础。

关键词： ChIFNs PD-1 PD-L1 STATs信号通路

来源：评论

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两种不同方法诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝模型及其机制的比较研究

两种不同方法诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝模型及其机制的比较研...

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作者：金毅吕爱贞邢伟黄宝明杨雯徐愉林王茜李静深圳市药品检验研究院(深圳市医疗器械检测中心)深圳药品质量标准研究重点实验室广东东阳光药业有限公司

目的研究2种不同方法(四氯化碳(CCl4),高脂饲料)诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholicsimplefattyliver,NAFL)模型对血生化,肝内脂质,主要细胞色素P450(Cytochrome P450 proteins, CYP)酶活性及其代谢产物的影响。方法将实验动物... 详细信息

目的研究2种不同方法(四氯化碳(CCl4),高脂饲料)诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholicsimplefattyliver,NAFL)模型对血生化,肝内脂质,主要细胞色素P450(Cytochrome P450 proteins, CYP)酶活性及其代谢产物的影响。方法将实验动物分为模型组和溶媒/空白对照组,模型组采用每周2次皮下注射40%CCl4,连续9周(CCl4模型)或连续给予高脂饲料9周(高脂模型)。通过组织病理学观察,测定肝脏脂质含量及肝脏系数(肝脑比)等确认大鼠NAFL造模成功,并测定血生化谷丙转氨

关键词：非酒精性单纯性脂肪肝 CYP 酶活性模型组高脂饲料高脂模型比较研究

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