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文献类型

594 篇 会议

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594 篇 电子文献
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学科分类号

530 篇 农学
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52 篇 医学
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5 篇 工学
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- 1 篇 农业工程
- 1 篇 生物医学工程（可授...
- 1 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 生物工程
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

29 篇 分离鉴定
20 篇 病理学观察
19 篇 病理学诊断
16 篇 组织病理学观察
14 篇 prrsv
14 篇 大肠杆菌
14 篇 巨噬细胞
13 篇 混合感染
13 篇 宿主细胞
13 篇 布鲁氏菌
13 篇 病理诊断
13 篇 信号通路
10 篇 原核表达
10 篇 鼠伤寒沙门菌
10 篇 rna
9 篇 生物学特性
9 篇 pcr
8 篇 毒力基因
8 篇 实验动物
8 篇 流感病毒

机构

88 篇 中国农业大学
46 篇 山东农业大学
42 篇 石河子大学
40 篇 河南科技大学
27 篇 四川农业大学
26 篇 东北农业大学
24 篇 洛阳职业技术学院
22 篇 内蒙古农业大学
20 篇 华中农业大学
16 篇 安徽农业大学
16 篇 山西农业大学
15 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 甘肃农业大学
14 篇 河南科技学院
11 篇 南京农业大学
11 篇 西北农林科技大学
11 篇 扬州大学
11 篇 天津农学院
10 篇 宁夏大学
10 篇 内蒙古民族大学

作者

56 篇 赵德明
56 篇 周向梅
47 篇 杨利峰
37 篇 陈创夫
31 篇 廖成水
31 篇 程相朝
27 篇 成子强
25 篇 张春杰
17 篇 谷长勤
16 篇 李静
15 篇 程国富
15 篇 佘锐萍
15 篇 刘思当
14 篇 汪开毓
14 篇 郁川
13 篇 张万坡
13 篇 祁克宗
13 篇 胡薛英
12 篇 刘晓丽
12 篇 张辉

语言

585 篇 中文
9 篇 英文

检索条件"任意字段=中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会2016年学术研讨会"

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排序：

牛妊娠相关糖蛋白BoPAG1的制备及生物信息学分析

牛妊娠相关糖蛋白BoPAG1的制备及生物信息学分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会

作者：杨航杨亚军王震张洁徐明国陈创夫新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学生命科学学院

牛妊娠相关糖蛋白（pregnancy-associated glycoprotein PAG）最初从妊娠奶牛胎盘中发现[1],目前在奶牛胎盘共发现22种不同的Bo PAGc DNA[2-4]。在牛妊娠期间,不同的Bo PAG表达在时间和空间上存在差异。开始形成胎儿胎盘含胞体时,PAG可... 详细信息

牛妊娠相关糖蛋白（pregnancy-associated glycoprotein PAG）最初从妊娠奶牛胎盘中发现[1],目前在奶牛胎盘共发现22种不同的Bo PAGc DNA[2-4]。在牛妊娠期间,不同的Bo PAG表达在时间和空间上存在差异。开始形成胎儿胎盘含胞体时,PAG可在外周血液中检测到,血浆中PAG的浓度随妊娠时间的增加而增加。关于PAG蛋白的功能,有人推断局部免疫特性用以维持胎儿和母体的组织不相容性,并参与对母体免疫系统的调节。这种蛋白可调节胚胎的黏附、炎症反应和血管生成,且与着床有关。尽管对PAG蛋白有着不同的研究和推断,但PAG真正的功能目前尚不清楚[8]。研究目的:获得高效表达并且抗原性较好的Bo PAG1（bovin Pregnancy associated glycoproteins1）蛋白,并分析其生物信息学功能。实验方法:扩增荷斯坦奶牛Bo PAG1基因,并将其连接在表达载体p ET-30a,并转化至大肠杆菌（DE3）中表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用生物信息学方法对Bo PAG1基因编码蛋白的蛋白修饰、结构、线性B细胞抗原表位进行预测分析。并对不同物种间的PAG1以及荷斯坦奶牛Bo PAG的氨基酸做同源性分析。研究结果:成功克隆Bo PAG1基因并表达相应蛋白,大小与预期结果相符,预测Bo PAG1蛋白具有18个B细胞抗原表位,其N端具有十五个氨基酸组成的信号肽,并且有四处N连接糖基化,不同物种间PAG1氨基酸的同源性为95.1%7.9%,Bo PAG蛋白家族氨基酸的同源性为86.4%7.2%。结论与讨论:成功表达并纯化获得了Bo PAG1蛋白。Bo PAG1蛋白N连接糖基化有4处并且预测出18个B细胞抗原表位以及15个氨基酸组成的信号肽。不同物种间PAG1及Bo PAG蛋白家族同源性较高。为Bo PAG1蛋白抗体的制备和功能的研究提供了基础。

关键词： PAG 抗原表位 BoPAG1 同源性氨基酸组成糖蛋白信号肽生物信息学分析

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羊源A型产气荚膜梭菌的分离鉴定与进化树分析

羊源A型产气荚膜梭菌的分离鉴定与进化树分析

引用

作者：石芸崔一龙刘锴马德慧内蒙古民族大学动物科技学院

目的:产气荚膜梭菌又称为魏氏梭菌或产气荚膜杆菌,随着养羊业大规模的发展,各地都出现了膘情较好的青年羊发生发病急,死亡快,以肠道出血为主要症状的疾病,给养羊业造成了巨大的损失。通过流行病学调查显示,出血性肠炎是威胁养羊业重大... 详细信息

目的:产气荚膜梭菌又称为魏氏梭菌或产气荚膜杆菌,随着养羊业大规模的发展,各地都出现了膘情较好的青年羊发生发病急,死亡快,以肠道出血为主要症状的疾病,给养羊业造成了巨大的损失。通过流行病学调查显示,出血性肠炎是威胁养羊业重大传染病之一。为鉴定从内蒙古通辽市某羊场病死羊十二指肠内分离到的一株疑似致病菌。材料方法:无菌采取肠道内容物、肝脏和肺脏,进行细菌的分离培养,纯化培养,观察菌落形态特征,革兰氏染色镜检,分离菌株进行生化试验、小鼠致病性试验,再将致病菌通过产气荚膜梭菌多重PCR实验、产气荚膜梭菌ELISA实验及16S rRNA PCR试验进行鉴定。将PCR产物进行测序并进行了16SrRNA基因的进化树分析。结果:经细菌生化试验发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和蔗糖,产酸产气,不发酵甘露醇和水杨苷,明胶、H2S和卵磷脂试验均为阳性,脂酶试验阴性等。小鼠致病性试验结果:对照组小鼠在试验期无任何不良反应,注射106 cfu/mL菌液的小鼠6 h后全部死亡,而注射108 cfu/mL菌液的小鼠2 h内全部死亡。多重PCR试验结果与标准菌株扩增条带大小一致、ELISA试验检测A型产气荚膜梭菌为阳性,B型,C型、D型和E型产气荚膜梭菌均为阴性。20种常见药物的药敏的药敏试验结果显示此菌对多粘菌素庆大霉素等药物敏感,对新霉素、卡那霉素等药物中度敏感,对头孢他啶、阿莫西林等药物耐药。药敏试验结果为有针对性地选择药物防治产气荚膜梭菌引起的疾病提供了参考。16S rRNA试验blast比对结果证实为A型产气荚膜梭菌。进化树分析显示该菌与序列号为HQ808749.1(美国)的A型产气荚膜梭菌遗传距离最近。结论:该羊的致病菌为A型产气荚膜梭菌。

关键词：产气荚膜梭菌 ELISA 生化试验分离鉴定树分析

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BALT在双峰驼肺脏的分布与结构特征研究

BALT在双峰驼肺脏的分布与结构特征研究

引用

作者：何晚红张旺东程翠翠李建飞吴秀萍李敏陈智华王雯慧甘肃农业大学动物医学院

(目的)支气管相关淋巴组织(bronchus-associated lymphoid tissue,BALT)是分布于支气管黏膜的淋巴组织,在维持下呼吸道黏膜免疫稳态中发挥核心作用。支气管树则是维持肺脏形态的基本功能单位。(方法)为探讨BALT在双峰驼肺脏的分布及结... 详细信息

(目的)支气管相关淋巴组织(bronchus-associated lymphoid tissue,BALT)是分布于支气管黏膜的淋巴组织,在维持下呼吸道黏膜免疫稳态中发挥核心作用。支气管树则是维持肺脏形态的基本功能单位。(方法)为探讨BALT在双峰驼肺脏的分布及结构特征,将12峰成年(2～7岁)健康双峰驼分成两组(每组6峰),通过解剖学和组织学方法,系统观察了BALT分别在导气部和呼吸部的分布特点及形态表现。(结果)结果表明,双峰驼肺脏由左前叶、左后叶、右前叶、右后叶和副叶构成,但缺乏中叶,且前叶较窄小,后叶较发达(几乎是前叶的4倍),副叶比前叶更小。支气管树为不对称二分叉,分别由背侧、腹侧、外侧和内侧段支气管系统构成,且在高于气管杈约3个气管环处向右分出一气管支气管分支。BALT主要沿支气管树散布于导气部,且分布密度从气管向后呈升高趋势,至细支气管最为密集,之后呈下降趋势,在呼吸性细支气管周围、肺间质内可偶见;BALT有孤立淋巴滤泡(主要类型)和滤泡聚合体两种类型,且发育较好者具生发中心和滤泡相关上皮;在导气部,多数BALT分布于黏膜固有层,也可在黏膜下层、肌层下、黏膜下腺及软骨周围分布。(结论)结果证明,双峰驼肺脏的形态与马的相似,但支气管树分支与反刍动物更接近,该特征与肺脏随物种进化而呈现的形态及结构变化规律一致。BALT主要随支气管树呈弥散分布,且细支气管处是其最核心的分布区域,是肺换气前,监测、捕获和识别相关抗原的最后"关卡"。而分布于导气部不同区域内的BALT与其所处的不同发育时期关系密切。该研究为进一步揭示BALT在双峰驼呼吸系统中的黏膜免疫调节机制提供依据。

关键词：双峰驼肺脏支气管黏膜相关淋巴组织分布与结构特征

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药物临床前安全性评价实验动物甲状腺及甲状旁腺自发性病变的病理形态学观察

药物临床前安全性评价实验动物甲状腺及甲状旁腺自发性病变的病理...

引用

作者：陈云戴益民孙远芹马招娣孙如芳中国人民解放军海军军医大学卫生毒理学教研室第二军医大学药物安全性评价中心毒性病理室

目的观察药物临床前安全性评价中常用实验动物食蟹猴、比格犬和SD大鼠内分泌系统中甲状腺及甲状旁腺自发性病变的情况,为药物安全性评价提供实验动物背景的资料及药物相关性作用的鉴别诊断依据。材料与方法运用常规组织学的方法,对2013... 详细信息

目的观察药物临床前安全性评价中常用实验动物食蟹猴、比格犬和SD大鼠内分泌系统中甲状腺及甲状旁腺自发性病变的情况,为药物安全性评价提供实验动物背景的资料及药物相关性作用的鉴别诊断依据。材料与方法运用常规组织学的方法,对2013年10月至2018年10月5年间本中心86个单次和重复给药毒性试验的食蟹猴、比格犬及SD大鼠的内分泌器官甲状腺及甲状旁腺的阅片结果进行分析。其中食蟹猴试验31个,比格犬试验28个和SD大鼠试验27个。结果⑴食蟹猴:受检动物数中检出甲状腺囊肿16例,淋巴细胞性甲状腺炎6例,甲状腺异位胸腺25例;单侧甲状腺缺失4例;甲状旁腺囊肿9例。⑵比格犬:受检动物数中检出甲状腺囊肿4例;淋巴细胞性甲状腺炎1例;甲状腺异位胸腺2例;甲状旁腺囊肿30例。⑶SD大鼠:受检动物中检出甲状腺异位胸腺10例,甲状腺囊肿2例;淋巴细胞性甲状腺炎1例;甲状腺的鳃后体残留2例。讨论与结论哺乳动物作为整体发挥功能依靠两个主要的控制机制,即神经系统和内分泌系统,内分泌系统是机体的重要调节系统。本组3种动物内分泌器官甲状腺及甲状旁腺自发性病变的分布,以甲状腺异位胸腺数目为多,甲状腺及甲状旁腺囊肿有一定比例,单侧甲状腺缺失、甲状腺的鳃后体残留及淋巴细胞性甲状腺炎等,皆有个例的检出。有的甲状旁腺囊肿源于胚胎发育时期连接甲状旁腺和胸腺原基的导管持续扩张[1]。胸腺异位:由于甲状旁腺来自第三对咽囊背部的上皮细胞,胸腺的胚胎发育与甲状旁腺相似,在胚胎发育向心底部迁徒的过程中,小巢状的胸腺组织可残存在在甲状腺/甲状旁腺的附近或腺体内,这种发育异常形态学表现无重要的临床意义[2]。辨别这些与胚胎发育有关的自发性病变,以减少或避免自发性病变对研究结果的干扰,对于药物毒性病变的鉴别诊断具有重要的意义。尽管通常内分泌器官能够抵抗外源物的直接毒性作用,但是它们对营养物质或非营养物质以及终末器官反馈的刺激或抑制是相当敏感的。长期高剂量外源物的摄入会导致内分泌的紊乱,内分泌器官也会发生改变[3]。比较医学是介于人类医学和实验动物医学之间一门非常重要的学科,通过对不同种类对的动物(包括人)之间健康和疾病现象进行比较研究,以阐明疾病的发生机制和发展规律,为人类疾病的防治提供可靠的实验依据。

关键词：食蟹猴比格犬 SD大鼠甲状腺甲状旁腺自发性病变

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牛坏死杆菌43 kDa OMP黏附宿主细胞及受体蛋白的初步筛选

牛坏死杆菌43 kDa OMP黏附宿主细胞及受体蛋白的初步筛选

引用

作者：蒋剑成张思瑶贺显晶肖佳薇王丽娜汪锋锋郭东华黑龙江八一农垦大学动物科技学院

坏死杆菌(Fusobacterium necrophorum)是一种革兰氏阴性无芽孢专性厌氧菌,是人类和动物消化道常在菌。坏死杆菌感染宿主细胞的过程一般包括细菌黏附宿主靶细胞、细菌大量繁殖以及细菌产物引起宿主细胞损伤或死亡等阶段,其中细菌黏附靶... 详细信息

坏死杆菌(Fusobacterium necrophorum)是一种革兰氏阴性无芽孢专性厌氧菌,是人类和动物消化道常在菌。坏死杆菌感染宿主细胞的过程一般包括细菌黏附宿主靶细胞、细菌大量繁殖以及细菌产物引起宿主细胞损伤或死亡等阶段,其中细菌黏附靶细胞是病原菌侵袭、致病的前提。因此本试验目的是明确牛坏死杆菌43 kDa外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)对宿主细胞的黏附作用,并对43 kDa OMP与宿主细胞的互作蛋白进行初步筛选。本试验首先通过原核表达获得重组43k DaOMP,并提取天然的43k DaOMP。培养BHK(仓鼠肾细胞)、BEND(牛子宫内膜细胞)和BMEC(牛乳腺上皮细胞),利用间接免疫荧光方法,明确43 kDa OMP对细胞的黏附作用。其次应用重组43 kDa OMP兔多克隆抗体与坏死杆菌A25菌株共孵育进行黏附抑制试验,明确重组43 kDa OMP兔多克隆抗体对细菌黏附细胞的抑制作用。最后构建pCAGGS-43 kDa OMP的真核表达载体(同时制备43 kDa OMP的单克隆抗体),利用43 kDa OMP的单克隆抗体通过免疫共沉淀初步筛选牛坏死杆菌43k DaOMP与BHK细胞的互作蛋白。结果如下:(1)成功获得纯化的重组43k DaOMP及天然43 kDa OMP;(2)间接免疫荧光方法明确了坏死杆菌43 kDa OMP能够黏附BHK细胞、BEND细胞和BMEC细胞;(3)重组43k DaOMP兔多克隆抗体对坏死杆菌黏附有抑制作用;(4)免疫共沉淀方法初步筛选出差异性条带,质谱分析结果检测出70个疑似差异蛋白。本试验证实了坏死杆菌重组43 kDa OMP能黏附于BHK细胞、BEND细胞和BMEC细胞;并初步筛选牛坏死杆菌43 kDa OMP与BHK细胞互作蛋白,为探讨牛坏死杆菌43 kDa OMP与牛宿主细胞相互作用的蛋白提供理论依据,对深入研究坏死杆菌的发病机制提供了更多的参考,对牛坏死杆菌的抗菌药物设计研究提供新的理论基础。

关键词：牛坏死杆菌外膜蛋白黏附蛋白互作

来源：评论

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***强毒株和早熟株对宿主细胞自噬影响的比较

引用

作者：张黎郑明学张雪松康慧鑫段步婷张琦范炳灵殷丽阳郑龙龙白瑞山西农业大学动物科技学院

为了探讨柔嫩艾美耳球虫(***)对宿主细胞的自噬影响,及***早熟株(PTsx)与强毒株(Tsx)对宿主细胞自噬的影响异同,为研究抗球虫药和疫苗提供理论依据。采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、RT-q PCR和WesternBlot等方法,分别对体内、外接种不... 详细信息

为了探讨柔嫩艾美耳球虫(***)对宿主细胞的自噬影响,及***早熟株(PTsx)与强毒株(Tsx)对宿主细胞自噬的影响异同,为研究抗球虫药和疫苗提供理论依据。采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、RT-q PCR和WesternBlot等方法,分别对体内、外接种不同剂量的PTsx和Tsx宿主细胞的虫体感染率、Beclin-1m RNA的相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值进行了动态检测。结果显示:接种***后4h-72h,同剂量接种的PTsx和Tsx体外培养的宿主细胞感染率差异不显著(P>0.05),而120h Tsx组宿主细胞的感染率极显著(P<0.01)高于PTsx组。接种***后4h-120h,除早熟株低剂量组外;早熟株高剂量组和强毒株接种组的Beclin-1 m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均显著高于(P<0.05)不接种组和早熟株同剂量接种组;强毒株组的Beclin-1m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均显著高于(P<0.05)同剂量接种的早熟株组;同类型虫株的高剂量接种组的Beclin-1 m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均高于(P>0.05或P<0.05)低剂量组。组同类型虫株的高剂量接种组的Beclin-1m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均高于(P<0.05)低剂量组。体内接种***后第5天,除早熟株低剂量组外,高剂量早熟株和强毒株接种组的Beclin-1 m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均高于(P<0.05或P<0.01)不接种组;当接种剂量相同时,早熟株接种组的Beclin-1m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均显著低于(P<0.05)强毒株组,接种同类型虫株的高剂量组的Beclin-1 m RNA相对表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ比值均高于(P<0.05或P<0.01)低剂量组。表明,***早熟株和强毒株感染均可诱导宿主细胞自噬;同剂量早熟株对宿主细胞自噬的诱导作用明显低于强毒株;同类型***对宿主细胞自噬的诱导作用随感染剂量增高而增强。

关键词： E.tenella 早熟株强毒株自噬宿主细胞

来源：评论

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鲤疱疹病毒2型感染鲫鱼的病理学诊断

鲤疱疹病毒2型感染鲫鱼的病理学诊断

引用

作者：周瑶佳梁天雨杨悦耿毅汪开毓欧阳萍四川农业大学动物医学院基础兽医系

【研究目的】2018年11月,四川自贡某养殖场鲫鱼暴发了传染性疾病,导致大规模的死亡,为探究此次疾病病因以及病原对组织器官的病理学损伤,【材料方法】对自然发病鲫鱼进行剖检、细菌学检查、病理组织观察、病毒分离、PCR鉴定、动物回归... 详细信息

【研究目的】2018年11月,四川自贡某养殖场鲫鱼暴发了传染性疾病,导致大规模的死亡,为探究此次疾病病因以及病原对组织器官的病理学损伤,【材料方法】对自然发病鲫鱼进行剖检、细菌学检查、病理组织观察、病毒分离、PCR鉴定、动物回归试验及系统发育分析。【研究结果】病鱼临床主要表现为食欲不振、离群独游、浮头、全身发黑、体表出血等。剖检显示各组织脏器有不同程度损伤,包括鳃丝出血腐烂,肝、脾、肾器官出血、肿胀,鳔点状出血。制作不同组织的石蜡切片,通过HE染色进行组织病理学观察:鳃及肾脏病变最为严重,鳃丝中呼吸上皮细胞肿胀、坏死及脱落,从而导致鳃小片发生粘连融合,炎性细胞浸润;肾脏表现为局灶性坏死,肾小管上皮细胞坏死,肾小球毛细血管扩张,炎性细胞浸润;脾脏出现大量坏死,核染色质边缘化,血管壁纤维细胞坏死,造血系统崩解;肝脏主要表现为空泡变性;心肌有轻微的炎症反应。对脾和肾进行透射电镜观察:在脾和肾中均观察到处于不同时期的病毒颗粒,成熟的病毒颗粒为具有囊膜的球形病毒,病毒颗粒直径为160-220nm,并且观察到病毒在细胞核内复制、组装,符合鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus2,Cy HV-2)病毒粒子的特征。超微病理主要表现出细胞核萎缩、核染色质边缘化,线粒体肿胀、坏死、嵴断裂,细胞质空泡化等。取病鱼组织匀浆滤菌后接种到鲤上皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprinid cells,EPC)及胖头鲤肌肉细胞(fathead minnow cells,FHM),盲传5代后没有出现细胞病变效应,推测可能与Cy HV-2目前没有特别适合生长的细胞系有关。人工感染试验显示,健康鲫鱼在感染4天后开始出现死亡,8天内死亡率达到峰值,30天内累积死亡率高达80%,并出现与自然患病鲫鱼相同的症状;根据Cy HV-2解旋酶基因片段设计引物进行PCR检测,自然发病鲫鱼以及人工感染鲫鱼均扩增出与预测条带大小366bp相符的阳性条带;将目的片段连接到PMD-19T载体,转化到DH5α感受态细胞中,选取阳性菌落进行测序,对测序结果进行系统发育分析,显示目的序列与Cy HV-2(YZ-01)同源性最高,序列一致性为99%。【结论与讨论】本论文完成了自然感染条件Cy HV-2感染鲫鱼的病理学观察,为Cy HV-2致病机制的研究提供理论和实验依据。

关键词：病理学诊断炎性细胞浸润病毒颗粒疱疹病毒

来源：评论

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PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞先天性免疫信号通路的影响

PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞先天性免疫信号通路的影响

引用

作者：陈洪博段滇宁原钦钰龙岩学院生命科学学院福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室

(目的)探究PAMs感染PCV2后细胞内干扰素表达及其信号通路变化情况。(方法)取35日龄健康仔猪分离肺泡巨噬细胞,随机分为对照组和PCV2组,PCV2组细胞孵育PCV2病毒(MOI=0.5)2h后换成全培养液,分别在接毒后6h,12h,24h,48h,72h收集样品。实时... 详细信息

(目的)探究PAMs感染PCV2后细胞内干扰素表达及其信号通路变化情况。(方法)取35日龄健康仔猪分离肺泡巨噬细胞,随机分为对照组和PCV2组,PCV2组细胞孵育PCV2病毒(MOI=0.5)2h后换成全培养液,分别在接毒后6h,12h,24h,48h,72h收集样品。实时荧光定量PCR方法检测肺泡巨噬细胞中干扰素、模式识别受体(TLR3、TLR9、RIG-1、MDA-5、DAI)、接头蛋白(TRIF、My D88、Sting、MAVS、IRF3)m RNA水平。(结果)PCV2感染PAMs后24h IFN-αm RNA水平显著高于对照组(p<0.05);干扰素IFN-β在48h转录m RNA水平显著高于对照组(p<0.01),在72h显著高于对照组(p<0.05);干扰素IFN-γ在24h转录m RNA水平显著高于对照组(p<0.05),实验组在12h转录水平上升极显著(p<0.01),在24h转录水平下降;结果表明,人工感染PCV2上调IFN-α、IFN-β以及IFN-γ。MAVS m RNA转录水平在感染后24h与对照组相比上升极显著(p<0.01;My D88 m RNA转录水平在感染12h后,与对照组相比上升显著(p<0.05);STING在24h时,m RNA转录水平与对照组相比上升显著(p<0.05),在48h时上升极显著(p<0.01),实验组在24h后转录水平上升极显著(p<0.01);IRF-3在24h时,m RNA转录水平与对照组相比上升显著(p<0.05),在48h时,m RNA转录水平上升极显著(p<0.01);IRF-7在12h时,m RNA转录水平与对照组相比上升极显著(p<0.01),实验组在6h后上升显著(p<0.05)。(结论)人工感染PCV2显著上调接头蛋白MAVS、My D88、IRF3、IRF7和Sting的基因转录。结论:PAMs感染PCV2后,可导致PAMs内的IFN-α、IFN-β以及IFN-γ上调,其上调可能与PCV2激活TLR4/TLR9/My D88信号通路、MDA-5/MAVS/IRF(s)信号通路、RIG-1/MAVS/IRF(s)以及c GAS-STING信号通路有关。

关键词： PCV2 肺泡巨噬细胞先天性免疫信号通路

来源：评论

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2株NDV的遗传进化分析及其致病性研究

2株NDV的遗传进化分析及其致病性研究

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作者：白晓段淇凡丁芳陈立保张诚韩庆安董世山陈立功王学静刘聚祥樊宝良河北农业大学动物医学院/农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站河北省动物疫病预防控制中心河北省畜牧兽医研究所河北农业大学动物科技学院

1.研究目的:为明确鸡源NDV和鸽源NDV的遗传进化特征和对鸡的致病性。2.材料:鸡源NDV HB/2/16/Ck株和鸽源NDV TJ/1/15/Pi株由河北农业大学兽医病理实验室提供。28日龄NDV抗体阴性雏鸡,由河北保定易县永和养鸡场提供。3.方法:根据GenBank... 详细信息

1.研究目的:为明确鸡源NDV和鸽源NDV的遗传进化特征和对鸡的致病性。2.材料:鸡源NDV HB/2/16/Ck株和鸽源NDV TJ/1/15/Pi株由河北农业大学兽医病理实验室提供。28日龄NDV抗体阴性雏鸡,由河北保定易县永和养鸡场提供。3.方法:根据GenBank中发表的NDV全基因组序列设计合成引物,相邻引物扩增片段之间有部分核苷酸序列重叠,引物覆盖整个病毒基因组。用RT-PCR方法获取2株NDV的全基因组序列,对其进行比较分析。将30只雏鸡随机分为3组,每组各10只。第1组、第2组鸡经滴鼻、点眼和口服途径分别接种HB/2/16/Ck株、TJ/1/15/Pi株的含毒尿囊液0.1mL/只(约含105个EID50),第3组为空白对照组,接种灭菌生理盐水,0.1m L/只。接种后3组鸡分别隔离饲养,观察2周,每日记录各组鸡的发病状况及临诊症状。各组鸡(濒死、病死、2周后存活鸡人工处死)及时进行剖检、观察并记录大体病变,采取各组鸡脾脏、法氏囊、腺胃、肠道及肾脏等组织器官,用10%中性福尔马林固定液固定,组织按常规制作石蜡切片,H.E染色,光镜下观察组织学变化;同时采集各组鸡脾脏、肺脏和脑,进行NDV的实时荧光RT-PCR检测。4.研究结果:2株病毒的全基因组序列均由15192个碱基组成;HB/2/16/Ck株与27株参考毒株之间核苷酸同源性为72.3%～98.9%,氨基酸同源性为72.6%～98.7%。TJ/1/15/Pi株与27株参考毒株之间核苷酸同源性为72.4%～98.8%,氨基酸同源性为66.4%～91.3%;F基因蛋白裂解位点均为112RRQKRF117。2株分离毒均属于NDV ClassⅡ类,HB/2/16/Ck株属于基因Ⅶd亚型,TJ/1/15/Pi株属于因Ⅵb亚型。致病性试验结果表明,2株病毒感染鸡均表现典型ND的临床症状、剖检病变及组织病变。实时荧光RT-PCR方法可从2株分离毒接种鸡组织中检测出NDV。5.结论与讨论:2株NDV全基因组长度均为15192nt,均属于ClassⅡ类强毒株,分别属于基因Ⅶd亚型和Ⅵb亚型。2株NDV对非免疫雏鸡均具有较强的致病性。

关键词：新城疫病毒序列分析遗传进化分析致病性

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副猪嗜血杆菌（HPS）发酵工艺研究及其疫苗免疫效果评价

副猪嗜血杆菌（HPS）发酵工艺研究及其疫苗免疫效果评价

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作者：孙晨鲍恩东南京农业大学动物医学院

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是一种共栖菌,它依附于猪的上呼吸道,也是一种机会菌,当机体免疫力下降时侵袭猪机体,感染后主要引起猪的多发性浆膜炎和关节炎。HPS对养猪业是一种潜在的威胁,一旦爆发会产生巨额的经济损失,是... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是一种共栖菌,它依附于猪的上呼吸道,也是一种机会菌,当机体免疫力下降时侵袭猪机体,感染后主要引起猪的多发性浆膜炎和关节炎。HPS对养猪业是一种潜在的威胁,一旦爆发会产生巨额的经济损失,是近年来危害养猪业最严重的细菌病之一,因此HPS也受到密切的关注。对于预防HPS病的爆发,主要通过灭活疫苗进行免疫,且灭活疫苗可产生良好的免疫保护能力。本实验基于已分离到的HPS菌株,通过不同的实验室方法对已分离的菌株进行鉴定和血清分型。利用已鉴定的HPS菌株进行摇瓶和反应器扩大培养菌体抗原的工艺化并对抗原培养条件进行优化。使用优化后的培养条件培养菌体抗原,试制灭活疫苗,并对试制疫苗进行安全性检验和效力检验以评价疫苗。本试验通过菌落及菌体形态学观察、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)依赖性检验、生化鉴定、PCR鉴定等方法对已分离到的菌株RPBS0904-11、RPBS0905-3和RPBS0912-1株进行鉴定,确定该三株菌均为HPS,并利用PCR鉴定和琼脂扩散试验(KRG)对已鉴定的菌株进行血清分型,最终确定菌株RPBS0904-11为HPS 4型、菌株RPBS0905-3为HPS 5型、菌株RPBS0912-1为HPS 12型。利用传统摇瓶培养对已鉴定的HPS培养条件进行探索,确定了优势培养条件下所使用的动物血清种类、辅酶(NAD)添加量以及培养基p H环境等;利用反应器培养已鉴定的HPS并对培养条件进行优化,确定优势培养条件下所需要的补料种类、补料速度及补料方式等。在此基础上,利用反应器优化工艺培养菌体抗原,试制HPS三价(4、5、12)灭活疫苗,使用多倍免疫剂量免疫仔猪进行疫苗安全性检验以评价疫苗的安全性;使用免疫剂量免疫豚鼠进行疫苗效力性检验以评价该疫苗的免疫效果,根据免疫后豚鼠抗体效价远高于有效抗体水平,认为试制疫苗具有良好的免疫效果。对比分析反应器工艺和摇瓶工艺疫苗,二种工艺生产的疫苗在内毒素含量、疫苗菌体蛋白含量以及疫苗的免疫效果方面近乎无差异,反应器工艺疫苗完全可以替代传统摇瓶工艺疫苗,为大规模菌体发酵培养生产提供了重要的理论和实验依据。

关键词：副猪嗜血杆菌菌种鉴定反应器培养发酵安全性与效力性检验

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