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文献类型

211 篇 会议

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211 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

208 篇 农学
- 191 篇 兽医学
- 12 篇 畜牧学
- 3 篇 作物学
- 2 篇 林学
4 篇 工学
- 3 篇 生物工程
- 1 篇 航空宇航科学与技...
3 篇 理学
- 3 篇 生物学
2 篇 医学
- 2 篇 临床医学

主题

10 篇 细胞凋亡
8 篇 布鲁氏菌
7 篇 病理学诊断
6 篇 分离鉴定
6 篇 caspase-3
5 篇 雏鸡
5 篇 小鼠巨噬细胞
5 篇 pcr
5 篇 鼠伤寒沙门菌
4 篇 t-sod
4 篇 病理学观察
4 篇 病理学
4 篇 分离株
4 篇 囊膜蛋白
4 篇 dna
4 篇 elisa
4 篇 prrsv
4 篇 spf
4 篇 肝脏细胞
4 篇 大肠杆菌

机构

25 篇 石河子大学
24 篇 中国农业大学
16 篇 东北农业大学
11 篇 四川农业大学
10 篇 河南科技大学
9 篇 河南省动物疫病与...
9 篇 甘肃农业大学
9 篇 天津农学院
7 篇 西北农林科技大学
7 篇 山东农业大学
7 篇 山西农业大学
6 篇 内蒙古农业大学
6 篇 农业部动物临床诊...
5 篇 南京农业大学
5 篇 河南科技学院
5 篇 北京农业职业学院
4 篇 宁夏大学
4 篇 华中农业大学
3 篇 河北工程大学
3 篇 青岛农业大学

作者

22 篇 陈创夫
18 篇 龙塔
18 篇 程相朝
17 篇 李静
14 篇 张辉
13 篇 赵德明
13 篇 杨利峰
12 篇 廖成水
12 篇 李广兴
12 篇 周向梅
8 篇 郁川
8 篇 黄小丹
7 篇 刘志军
7 篇 童德文
7 篇 佘锐萍
7 篇 盛金良
6 篇 田文静
6 篇 杨贵君
6 篇 郑明学
6 篇 刘淑英

语言

204 篇 中文
7 篇 英文

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排序：

稳定携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌的构建及其特性

稳定携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌的构建及其特性

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：陈桂华程相朝郁川廖成水余祖华李静翟崇凯田文静龙塔河南省动物疫病与公共安全院士工作站河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室

为构建能稳定携带TAT-Apoptin的重组减毒鼠伤寒沙门菌。以p MD-19T-Apoptin为模板,PCR扩增出TAT-Apoptin基因,连接至p YA3493,构建重组载体p YA3493-TAT-Apoptin,然后将其电转至减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344,并对该重组减毒沙门菌... 详细信息

为构建能稳定携带TAT-Apoptin的重组减毒鼠伤寒沙门菌。以p MD-19T-Apoptin为模板,PCR扩增出TAT-Apoptin基因,连接至p YA3493,构建重组载体p YA3493-TAT-Apoptin,然后将其电转至减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344,并对该重组减毒沙门菌生长特性、遗传稳定性和表达特性进行分析。PCR和测序表明,成功构建重组载体p YA3493-TAT-Apoptin,进一步对重组减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344(p YA3493-TAT-Apoptin)研究发现,其生长速度与强毒株SL1344相比明显减慢,与缺失株?crp?asd SL1344及互补菌株?crp?asd SL1344(p YA3493)基本一致,且能够稳定遗传TAT-Apoptin基因,重组菌培养上清经SDS-PAGE能检测到TAT-Apoptin蛋白条带。以上结果证明,能稳定携带TAT-Apoptin的重组减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344(p YA3493-TAT-Apoptin)构建成功,且该重组菌能分泌性表达TAT-Apoptin蛋白,进一步为减毒鼠伤寒沙门菌携带Apoptin的体外协同抗肿瘤作用研究奠定一定的基础。

关键词：减毒鼠伤寒沙门菌凋亡素抗肿瘤

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永生化猪黄体细胞系的建立

永生化猪黄体细胞系的建立

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：张樑黄勇赵晓民童德文西北农林科技大学动物医学院

【目的】本研究旨在建立一株保留猪黄体细胞主要生物学特性和功能的猪黄体细胞系,以期为黄体功能研究提供一个可靠的细胞模型。【方法】采集妊娠6～8周的健康母猪的卵巢,通过胶原酶消化法和不连续密度梯度离心法获得原代猪黄体细胞后,... 详细信息

【目的】本研究旨在建立一株保留猪黄体细胞主要生物学特性和功能的猪黄体细胞系,以期为黄体功能研究提供一个可靠的细胞模型。【方法】采集妊娠6～8周的健康母猪的卵巢,通过胶原酶消化法和不连续密度梯度离心法获得原代猪黄体细胞后,利用脂质体法将p CI-neo-h TERT质粒导入原代猪黄体细胞中,经G418筛选获得阳性克隆细胞;经传代50代后通过化学染色法、RT-PCR法对所获得的黄体细胞的生物学功能进行验证;最后,通过RT-PCR法和ELISA法检测h TERT的表达及活性状态,并通过软琼脂克隆实验和裸鼠致瘤实验验证检测所获得的猪黄体细胞是否具有无恶性转化的特性。【结果】转染后50代的细胞形态正常、并保持较强的生长能力,3β-HSD活性染色和油红O染色鉴定发现其阳性率均达95%以上;且保留了原代猪黄体细胞激素合成中的关键基因和受体,及对LH和PGF2α的应激反应;同时,转染后30和50代的猪黄体细胞均表达h TERT基因且维持较高的生物活性。软琼脂克隆试验和裸鼠致瘤试验显示,转染后第50代黄体细胞不具有悬浮生长能力和裸鼠致瘤性。【结论】本研究通过将h TERT基因导入原代猪黄体细胞,建立了永生化的猪黄体细胞,该细胞系保留了原代猪黄体细胞的形态学特征和主要生物学特性。

关键词：猪黄体细胞人端粒酶永生化

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猪瘟兔化弱毒苗在猪体内动态分布的研究

猪瘟兔化弱毒苗在猪体内动态分布的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：马春霞李军潘艳彭昊禤雄标胡帅谢永平谢宇舟何彩美陈泽祥杨威广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室来宾市动物疫病预防控制中心

研究目的:研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布。方法:在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分... 详细信息

研究目的:研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布。方法:在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分析猪瘟病毒在猪体内的动态分布、存留时间及抗体水平。结果:应用免疫组化方法于免疫后第7-14天在脾脏、第7-21天在腹股沟淋巴结、第14-28天在肾脏组织分别检测到猪瘟病毒。在免疫后第7天检测到猪瘟病毒抗体,随后抗体水平持续上升至免疫后第63天;病毒抗原的分布与RT-PCR检测结果吻合。结论:猪瘟兔化弱毒苗在猪体内主要分布器官为脾、肾和腹股沟淋巴结,免疫后第7天脾和腹股沟淋巴结最早检测到猪瘟病毒,猪瘟病毒在肾停留时间可至免疫后第28天。整个实验过程中未在扁桃体、肺、外周血检测到猪瘟病毒。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗免疫组化动态分布

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PRRSV nsp2形成aggresome的关键区域鉴定

PRRSV nsp2形成aggresome的关键区域鉴定

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：张民霞蔡鑫娜汪晓飞刘思当肖一红山东农业大学动物科技学院

(目的)Nsp2是位于PRRSV ORF1a的一个多结构域蛋白,具有较高的变异性,其氨基端和羧基端高度保守,中间区域富含脯氨酸,是病毒复制的非必须区和遗传变异的主要区域,也是同型病毒不同毒株的主要区别部位。前期研究的基础发现,Nsp2全长蛋白... 详细信息

(目的)Nsp2是位于PRRSV ORF1a的一个多结构域蛋白,具有较高的变异性,其氨基端和羧基端高度保守,中间区域富含脯氨酸,是病毒复制的非必须区和遗传变异的主要区域,也是同型病毒不同毒株的主要区别部位。前期研究的基础发现,Nsp2全长蛋白体外过表达后能发生聚集形成聚合体aggresome。Aggresome作为病毒蛋白聚集场所和形式,为病毒复制和装配提供丰富物质基础,同时能避免免疫系统的识别而不被降解。鉴于聚合体在病毒感染过程中有重要作用,本研究拟寻找与Nsp2形成聚集体有关的区域。(方法)根据本实验室的研究结果及Nsp2的结构特点(一个半胱氨酸酶活性的结构域,一个高变区,跨膜区及羧基端尾巴),分别设计4对引物进行克隆入带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的真核表达载体,经序列测定进行鉴定,同时转染细胞用Western-blot对表达蛋白进行鉴定。将构建的带有GFP标签的重组质粒转染PRRSV易感细胞Marc-145,非易感细胞293T等细胞,用共聚焦显微镜观察表达的NSP2蛋白形成aggresome情况。(结论)目前结果表明跨膜区及羧基端尾巴与aggresome形成有关。该研究结果为疫苗和药物设计提供新的思路和方法。

关键词： PRRSV nsp2 病毒复制 aggresome 聚合体区域鉴定

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Atg5在羊种布鲁氏菌16M诱导的非典型自噬中的研究

Atg5在羊种布鲁氏菌16M诱导的非典型自噬中的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：王浩徐亚芳王震李天森郭飞张辉陈创夫石河子大学动物科技学院

研究目的:探究自噬相关蛋白Atg5对羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7引起的非典型自噬及16M胞内生存繁殖能力的影响。材料与方法:通过分子生物学手段构建了p LEX-MCS-Atg5慢病毒表达载体,并转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,QRT-PCR和We... 详细信息

研究目的:探究自噬相关蛋白Atg5对羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7引起的非典型自噬及16M胞内生存繁殖能力的影响。材料与方法:通过分子生物学手段构建了p LEX-MCS-Atg5慢病毒表达载体,并转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,QRT-PCR和Western blot分别检测Atg5的表达量;布鲁氏菌侵染过表达Atg5的RAW264.7,激光共聚焦技术检测细胞内自噬体与溶酶体融合的情况;CFU检测布鲁氏菌在过表达Atg5的RAW264.7中的生存复制情况。结果:DNA测序及慢病毒包装实验表明Atg5重组慢病毒构建成功;QRT-PCR和Western blot结果表明Atg5的表达明显高于对照组(P<0.05)。激光共聚焦实验显示,布鲁氏菌感染过表达Atg5的RAW264.7后,细胞内自噬体与溶酶体的融合情况明显高于对照组(P<0.05)。细菌CFU实验显示,与对照组相比,布鲁氏菌16M感染过表达Atg5的巨噬细胞后,胞内细菌数明显降低(P<0.05)。小结与讨论:过表达Atg5可促进布鲁氏菌诱导的非典型自噬中自噬体与溶酶体的融合,降低布鲁氏菌的胞内繁殖力。

关键词：羊种布鲁氏菌 RAW 小鼠巨噬细胞非典型

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CD68+Mφ在双峰驼小肠和MLN中的分布特点

CD68+Mφ在双峰驼小肠和MLN中的分布特点

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：李淑娴郭明刚王雯慧甘肃农业大学动物医学院

为了探讨CD68分子标记物标记的巨噬细胞(macrophage,Mφ)在双峰驼小肠和肠系膜淋巴结(mesenteric lymphoid nodes,MLN)中的分布规律和形态特点,采用SABC免疫组织化学技术对10峰成年个体的小肠和MLN不同部位的Mφ进行了定位和观察。结果... 详细信息

为了探讨CD68分子标记物标记的巨噬细胞(macrophage,Mφ)在双峰驼小肠和肠系膜淋巴结(mesenteric lymphoid nodes,MLN)中的分布规律和形态特点,采用SABC免疫组织化学技术对10峰成年个体的小肠和MLN不同部位的Mφ进行了定位和观察。结果显示,免疫组化染色显示CD68+Mφ形态呈椭圆形和圆形,椭圆形CD68+Mφ胞核较小呈椭圆形或肾形,胞浆丰富呈棕黄色阳性表达,主要分布在靠近小肠黏膜肌层的肠腺周围(深层肠腺周围)和黏膜下层,在MLN中少见分布。圆形CD68+Mφ分布在小肠肠绒毛、MLN胸腺依赖区和髓质淋巴窦等处,然而肠绒毛和浅层肠腺周围处分布数量较少。另外,在黏膜下层和MLN胸腺依赖区,CD68+Mφ集中分布在毛细血管周围。结论:CD68+Mφ具有两种不同的形态提示它们可能发挥着不同的免疫功能,而且CD68+Mφ较密集分布在毛细血管周围和淋巴窦中,这种分布现象说明它能更加快速有效地吞噬来自血液和淋巴液内的凋亡细胞和病原微生物,并向T细胞呈递抗原从而刺激活化T细胞。

关键词：双峰驼小肠 MLN CD68+Mφ

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AIR在羊种布鲁氏菌16M诱导的非典型自噬中的研究

AIR在羊种布鲁氏菌16M诱导的非典型自噬中的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：王浩陈创夫车召堂张俊波张辉郭飞石河子大学

研究目的:探讨膜融合相关蛋白Tecpr1对羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7引起的非典型自噬及布鲁氏菌胞内生存繁殖能力的影响。材料方法:根据AIR核苷酸序列,分别设计2条特异性小干扰RNA分子,亚克隆到慢病毒p Lenti Lox3.7载体,... 详细信息

研究目的:探讨膜融合相关蛋白Tecpr1对羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7引起的非典型自噬及布鲁氏菌胞内生存繁殖能力的影响。材料方法:根据AIR核苷酸序列,分别设计2条特异性小干扰RNA分子,亚克隆到慢病毒p Lenti Lox3.7载体,并转染RAW264.7,通过QRT-PCR筛选干扰效果最优的质粒;用布鲁氏菌感染干扰AIR后的RAW264.7,采用QRT-PCR检测细胞自噬相关基因p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的m RNA表达量,采用Western blot检测细胞自噬相关基因p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量;同时检测16M在沉默AIR的RAW264.7细胞中的生存繁殖能力。结果:获得2条对AIR干扰效果达70%以上特异性的si RNA分子,自噬相关基因LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62的m RNA相对表达量分别为66%、77%和63%,差异有统计学意义(P<0.05);LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62蛋白相对表达量分别为45.71%、34.29%和46.13%,差异有统计学意义(P<0.01);24 h后干扰AIR后的RAW264.7中布鲁氏菌数量为8.58×105 CFU,对照组为6.02×106 CFU,差异有统计学意义(P<0.05)。小结与讨论:AIR基因沉默可促进布鲁氏菌诱导的非典型自噬中自噬体与溶酶体的融合,降低布鲁氏菌的胞内繁殖力。

关键词：羊种布鲁氏菌 RAW 相关基因 AIR 非典型

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O型口蹄疫病毒3D基因荧光定量PCR方法的建立及应用

O型口蹄疫病毒3D基因荧光定量PCR方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：曹丽娟倪伟史慧君马世伟乔军陈创夫石河子大学

研究目的:口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性人畜共患传染病。目前,利用RNA干扰法在抗FMD方面取得了较大的成就,新疆石河子大学人畜共患病实验室相继培育出了抗FMDV的转基因猪。为快速检测抗FMD... 详细信息

研究目的:口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性人畜共患传染病。目前,利用RNA干扰法在抗FMD方面取得了较大的成就,新疆石河子大学人畜共患病实验室相继培育出了抗FMDV的转基因猪。为快速检测抗FMDV转基因猪中O型口蹄疫病毒,本文拟建立基于FMDV的3D基因荧光定量PCR检测方法。材料方法:本试验选择FMDV结构蛋白基因3D的核苷酸序列设计特异性引物,经过RNA抽提、反转录成c DNA、PCR扩增,扩增出了大小为180bp的基因片段。将回收的目的片段与p MD18-T克隆载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测序鉴定,证实为FMDV的阳性重组质粒。将验证正确的重组质粒10倍梯度稀释后作模板,进行荧光定量PCR试验,建立FMDV 3D基因的标准曲线及其回归方程,并确定扩增的最佳退火温度。试验结果:标准曲线的回归方程为Y=-3.727X+32.04,回归系数R2=0.980,熔解曲线为单一峰。建立的荧光定量PCR方法的灵敏度为1.2×101拷贝/μL,只与FMDV反应。结果表明,建立的荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏度高等特点,为检测FMDV在动物组织细胞中的含量提供了技术方法。

关键词：口蹄疫病毒 PCR

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PRRSV非结构蛋白4的原核表达及其应用

PRRSV非结构蛋白4的原核表达及其应用

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：蔡鑫娜张民霞汪晓飞刘思当肖一红山东农业大学动物科技学院

PRRSV非结构蛋白Nsp4具有3C样丝氨酸蛋白酶活性(3CLSP),该蛋白的主要功能是裂解病毒编码的前提多聚蛋白生产对病毒复制过程中起着重要作用的结构蛋白。因此nsp4在PRRSV的生命周期中起着决定性作用。为了更近一步研究nsp4的生物学功能,... 详细信息

PRRSV非结构蛋白Nsp4具有3C样丝氨酸蛋白酶活性(3CLSP),该蛋白的主要功能是裂解病毒编码的前提多聚蛋白生产对病毒复制过程中起着重要作用的结构蛋白。因此nsp4在PRRSV的生命周期中起着决定性作用。为了更近一步研究nsp4的生物学功能,本研究根据PRRSV TA-12毒株序列,设计并合成用于扩增TA-12毒株nsp4基因的引物,将扩增产物克隆到原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达载体p ET28a-Nsp4.酶切测序鉴定以后,将p ET28a-Nsp4转化到表达菌株Transetta(DE3)中,诱导表达重组蛋白,Western Blot显示nsp4在大肠杆菌中高效表达,并且具有良好的反应原性,利用镍离子亲和柱纯化获得高纯度的可溶性的重组蛋白,将纯化的nsp4蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。建立了针对于nsp4蛋白的抗体检测ELISA方法。用于检测临床血清样品,结果表明与IDEXX试剂盒的符合率达到96%以上,同时检测到抗nsp4蛋白高滴度血清而IDEXX试剂盒检测为阴性。结果表明以nsp4蛋白为包被蛋白的ELISA可以补充以N蛋白或者其他蛋白为靶标检测方法的特异性和敏感性。

关键词：结构蛋白 PRRSV 原核表达

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双峰驼小肠黏膜免疫主效应分子的确定及免疫衰老的研究

双峰驼小肠黏膜免疫主效应分子的确定及免疫衰老的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：张旺东王雯慧贾帅甘肃农业大学动物医学院

为明确双峰驼SIg A与Ig G在小肠内的含量及随年龄的变化特征。本文将24峰不同年龄的阿拉善双峰驼分为驼羔(1～2岁)、青年驼(3～5岁)、壮龄驼(6～16岁)和老龄驼(17～20岁)4个组,运用免疫组织化学和统计学的方法对其小肠黏膜固有层内SIg A... 详细信息

为明确双峰驼SIg A与Ig G在小肠内的含量及随年龄的变化特征。本文将24峰不同年龄的阿拉善双峰驼分为驼羔(1～2岁)、青年驼(3～5岁)、壮龄驼(6～16岁)和老龄驼(17～20岁)4个组,运用免疫组织化学和统计学的方法对其小肠黏膜固有层内SIg A与Ig G两类分泌细胞进行了详细的观察与分析。结果表明,SIg A与Ig G分泌细胞在小肠固有层内均呈弥散分布,其中在肠隐窝周围分布较多。在每一组内,SIg A和Ig G ASCs的分布密度在空肠最高,十二指肠和回肠次之;同时,SIg A ASCs的密度高于相应部位Ig G ASCs的密度,并且在幼年和青年组内差异显著(P<0.05)。在不同组之间,SIg A和Ig G ASCs的分布密度从幼年期逐渐增加,至青年期时达到顶峰,之后又逐渐降低。结果证明,在双峰驼小肠黏膜免疫中,虽然Ig G分泌细胞数量占较大比例,但SIg A分泌细胞仍占主导地位。因此,SIg A是其主要效应分子而不是Ig G。并且双峰驼SIg A与Ig G分泌细胞的分布密度与其年龄密切相关,呈现先逐渐发育增多,在3～5岁时达到最高,随后随免疫衰老呈下降趋势,至17～20岁时,SIg A与Ig G分泌细胞的分布密度显著降低。

关键词：双峰驼小肠 SIg A分泌细胞 Ig G分泌细胞分布

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