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8 篇 山东农业大学
8 篇 农业部动物临床诊...
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作者

12 篇 王雯慧
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8 篇 张宇飞
7 篇 石蕊寒
7 篇 龙塔
7 篇 李威
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7 篇 朱日宁
7 篇 张辉
7 篇 王晓阳
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6 篇 张旺东
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6 篇 程国富
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绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离与纯化

绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离与纯化

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：王专家张宇飞刘淑英石晶杜方原内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特市 010018 内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特市 010018 农业部动物临床诊疗技术重点实验室呼和浩特市010018

绵羊绒毛膜滋养层细胞是绵羊胎盘细胞的一部分,存在于胎盘合体滋养层,是构成胎盘屏障的主要组织结构,滋养层细胞在胚胎的植入过程中扮演重要角色,其增殖和功能调节的异常与多种胎盘发育相关疾病的发生发展密切相关.体外培养的较高纯度... 详细信息

绵羊绒毛膜滋养层细胞是绵羊胎盘细胞的一部分,存在于胎盘合体滋养层,是构成胎盘屏障的主要组织结构,滋养层细胞在胚胎的植入过程中扮演重要角色,其增殖和功能调节的异常与多种胎盘发育相关疾病的发生发展密切相关.体外培养的较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞可为研究病毒与宿主的互作机制提供细胞学基础.本试验为得到较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞,材料取自妊娠中期的蒙古绵羊胎盘(含子宫)组织,将胎盘子叶组织机械剪碎成糊状,用胰蛋白酶和胶原酶两步消化法将剪碎的组织消化分散成单个细胞,然后用Percoll密度梯度离心法进行纯化培养.绵羊绒毛膜滋养层细胞是单层贴壁细胞，倒置相差显微镜观察下滋养层细胞的形态学特点，待细胞长满培养瓶表面，用胰蛋白酶将细胞从培养瓶壁上分离下来，进行传代培养。应用Percoll通过密度梯度离心法对培养的原代细胞进行纯化，重复试验，得出选用40％和60%两个梯度纯化滋养层细胞，纯化后双核及多核滋养层细胞比例高，纯度达80%以上。纯化后的滋养层细胞及培养后形态较统一，都为不规则的多角或多边形，生长呈铺展状，为典型的上皮样细胞。细胞核质之间分明，细胞界限清晰，双核及多核细胞较多，细胞融合现象明显。经传代后融合现象更加明显，且多核现象多见。细胞在经检测CCK-8标记检测，结果表明细胞生长情况良好，细胞活力强。由此表明，该分离纯化方法能分离培养得到较高纯度的绵羊多核滋养层细胞，可为后续研究人员利用该滋养层细胞进行体外研究奠定基础。

关键词：绵羊多核绒毛膜滋养层细胞纯化培养 Percoll密度梯度离心法

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急性猪瘟感染过程中猪PD-1及其配体表达模式研究

急性猪瘟感染过程中猪PD-1及其配体表达模式研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：王选年岳锋朱艳平张艳芳孙国鹏李鹏银梅新乡学院生物技术研究中心生命科学与技术系河南新乡453003 河南科技学院动物科学学院河南新乡453003 新乡学院生物技术研究中心生命科学与技术系河南新乡453003 四川农业大学动物医学院四川雅安625000 新乡学院生物技术研究中心生命科学与技术系河南新乡453003 河南科技学院动物科学学院河南新乡453003

本研究旨在探讨CSF感染过程中PD-1/PD-Ls通路的表达模式研究,进一步揭示CSFV引起免疫功能损伤的免疫病理学机制。采用CSFV感染45日龄仔猪,在感染后第3天、7天、10天、14天、21天,采集抗凝血,分离PBMC,提取RNA,反转录为cDNA,用已建立的SY... 详细信息

本研究旨在探讨CSF感染过程中PD-1/PD-Ls通路的表达模式研究,进一步揭示CSFV引起免疫功能损伤的免疫病理学机制。采用CSFV感染45日龄仔猪,在感染后第3天、7天、10天、14天、21天,采集抗凝血,分离PBMC,提取RNA,反转录为cDNA,用已建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR 检测PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2以及细胞因子IL-2和IL-10mRNA的相对表达量,CFSE染色法检测T细胞增殖能力,TaqMan实时荧光定量PCR检测感染后第3天、7天、10天、14天、21天血浆中CSFV载量.研究表明，猪瘟病毒(CSFV)能够破坏机体免疫系统并逃避免疫反应，在急性和慢性病毒感染过程中PD-1及其配体表达量升高，引起PD-1/PD-Ls通路活化，导致T淋巴细胞功能衰竭，造成机体免疫抑制。因此，PD-1/PD-LS通路活化是否是CSFV造成免疫功能损伤的原因之一，目前还未见报道。本研究表明，CSF急性感染过程中，PD-1及其配体表达量显著升高，与血浆中CSFV载量和IL-10表达量成正相关，且PD-1/PD-Ls通路活化可能引起了IL-2表达量降低和T细胞增殖能力降低，最终造成T细胞功能衰竭和免疫功能损伤，进一步丰富了CSFV免疫病理学致病机制，为研发阻断PD-1/PD-Ls通路的生物制剂奠定基础。

关键词：急性猪瘟感染程序性死亡受体1 白细胞介素表达模式

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旋毛虫感染小鼠肠道免疫应答研究

旋毛虫感染小鼠肠道免疫应答研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：李静程相朝张春杰李银聚吴庭才陈松彪颜云飞龙塔刘波河南省动物疫病与公共安全院士工作站河南洛阳471003 河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南洛阳471003 吉林大学动物医学学院吉林长春130062 河南省动物疫病与公共安全院士工作站河南洛阳471003 河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南洛阳471003 吉林大学动物医学学院吉林长春130062

为探讨旋毛虫ISS534感染BALB/c小鼠肠道免疫应答机制,本研究对旋毛虫感染BALB/c小鼠肠道内细胞因子、抗菌肽、自噬等相关宿主防御反应进行检测.6-8周龄BALB/c小鼠经口感染300尾旋毛虫ISS534幼虫/只,在感染后7d和14d分别采集小鼠空肠和... 详细信息

为探讨旋毛虫ISS534感染BALB/c小鼠肠道免疫应答机制,本研究对旋毛虫感染BALB/c小鼠肠道内细胞因子、抗菌肽、自噬等相关宿主防御反应进行检测.6-8周龄BALB/c小鼠经口感染300尾旋毛虫ISS534幼虫/只,在感染后7d和14d分别采集小鼠空肠和结肠进行体外培养,通过ELISA方法对IL-1O、IL-12、IL-6、IL-17、IFN-γ,和TNF-α等细胞因子的表达量进行检测,明确旋毛虫感染小鼠后机体的免疫反应是体液免疫和细胞免疫协同作用结果,其中以Th2型免疫反应为主.之后,将采集的小鼠空肠和结肠进行石蜡切片,经HE染色后观察可见感染小鼠空肠中杯状细胞数量增加;Real-time PCR检测结果表明,与对照组相比,Intelectin,Mucin1、溶菌酶和鼠防御素-1表达量增加.此外,利用Western blot方法对自噬体膜标志性蛋白LC3-Ⅱ表达水平进行检测,结果发现旋毛虫感染BALB/c小鼠空肠和结肠中LC3-Ⅱ表达量均增高,尤其是感染后空肠中LC3-Ⅱ表达量与对照组相比显著增加.以上试验结果表明,在发生旋毛虫感染后,以旋毛虫寄生的空肠部位的炎症反应较强,其中Thl/Th2型细胞因子、抗菌肽、自噬等在小鼠肠道免疫防御反应中发挥着重要作用,该研究将为旋毛虫感染小鼠肠道免疫应答机制的研究提供一定的理论基础.

关键词：动物医学旋毛虫感染肠道组织免疫应答

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猪链球菌病菌株分离鉴定及致病性研究

猪链球菌病菌株分离鉴定及致病性研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：王红宝李红丽郭雪丽韩惠英陈泽张国权王毅山西省农科院畜牧兽医研究所山西太原 030032 山西省动物疫病预防控制中心山西太原 030027

目前已有足够流行病学资料证实,猪链球菌病(StreptococcusSuisse,SS)已经对中国乃至全世界养猪业和公共卫生构成了严重威胁.根据荚膜多糖(CPS)抗原性的不同,可将猪链球菌分为35个型,其中SS1、SS2、SSI/2、SS7、SS9和SS14为临床上的主要... 详细信息

目前已有足够流行病学资料证实,猪链球菌病(StreptococcusSuisse,SS)已经对中国乃至全世界养猪业和公共卫生构成了严重威胁.根据荚膜多糖(CPS)抗原性的不同,可将猪链球菌分为35个型,其中SS1、SS2、SSI/2、SS7、SS9和SS14为临床上的主要致病型.引起猪场发病的基因型因地域的不同在数量及种类上不尽相同,给临床的疫苗预防带来较大的困难.尽快准确地弄清存在于山西的猪致病性链球菌的分型及各型分布情况,并对其流行的菌株与市售疫苗菌株进行同源性分析,为养殖户选用预防疫苗提供依据.以GenBank中收录的猪链球菌各型cps基因序列为参考，利用Priner5.0和Oligo6.0设计引物，进行PCR检测，总检出率为80％。64株检为阴性的菌株均为非致病型。80株分属于6种主要致病型。经基因分析发现，87.5%含毒力因子gdh;62.5%含毒力因子mrp;58.75%含毒力因子epf;72.5%含毒力因子sly。对致病菌株的sly,epf,mrp分析结果显示:这三个主要毒力相关基因进行克隆和核苷酸序列分析未发生变异。经与GenBank中己收录序列分析结果:制苗用菌株同源性在96.3~99.9%，其中所测2型与制苗用2型菌株同源性在99.99%，与其它型菌株在96.3~97.6%;其中与7型在97.3%~97.6%;与9型在96.8%~97.0%;与1型在96.3%;与其它型在96.3%。对猪的致病性实验结果显示:接种2天后出现领下淋巴结和腹股沟淋巴结肿胀出血、肺脏、肾脏有出血点。病理组织学观察:可见大脑轻度水肿、肺小血管内有血栓形成、肺泡隔增宽;肾脏间质内有少量淋巴细胞浸润。

关键词：猪链球菌病菌株分离基因鉴定致病机理

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规模场肉鸡马立克氏病病理组织学诊断研究

规模场肉鸡马立克氏病病理组织学诊断研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：张玉玲王晓亮李志红王进香吴亚文杨佳冰李莉娟王磊王雯慧宁夏动物疾病预防控制中心宁夏银川 750002 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070

马立克氏病(MD)对养鸡业构成严重的经济危害,其病原为疱疹病毒,特征是在各器官组织形成淋巴细胞性肿瘤.近年来养鸡业MD 的发生虽然不严重,但仍有一些规模场零星发生本病. 在病理组织形态学诊断中，特别应注意将马立克氏病与禽白血病... 详细信息

马立克氏病(MD)对养鸡业构成严重的经济危害,其病原为疱疹病毒,特征是在各器官组织形成淋巴细胞性肿瘤.近年来养鸡业MD 的发生虽然不严重,但仍有一些规模场零星发生本病. 在病理组织形态学诊断中，特别应注意将马立克氏病与禽白血病和网状内皮细胞增生症区别，这三种疾病同为肿瘤性疾病，但马立克氏病的肿瘤细胞由多形态淋巴细胞(包括成淋巴细胞，大中小淋巴细胞和网状细胞)构成。而禽白血病肿瘤细胞以形态较一致的成淋巴细胞为主，网状内皮细胞增生症的特征变化是网状细胞的弥散性和结节性增生。发生本病后无特效药物治疗，只能通过疫苗免疫预防本病的发生。本次规模肉鸡场发生本病，尽管之前免疫过马立克氏疫苗，但还是发生了本病，很可能是免疫失败造成此次疫情的发生。引起免疫失败的原因有多方面因素，比如遗传因素、营养状况、环境因素、母源抗体的干扰、马立克氏病超强毒和早期野毒的感染、各种免疫抑制性疾病的感染以及疫苗的质量不过关等。要减少本病的发生，降低规模养鸡户的损失，预防是控制本病发生和流行的关键。建议规模养殖场要从正规的质量好、信誉好的厂家购进鸡苗，防止早期感染，规模养鸡场需要采取综合性的防制措施，主要是制定严格的生物安全措施，科学使用疫苗，以此来降低感染本病的风险。总之，采用疫苗接种是控制本病的极重要的措施，但是它们的保护率均不能达到100％，因此鸡群中仍有少量病例发生，故不能完全依赖疫苗接种，加强综合防疫措施是十分必要的。

关键词：鸡马立克氏病病理组织形态学诊断疫苗接种疾病控制

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蓝舌病病毒12型NS1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

蓝舌病病毒12型NS1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：王海秀孙恩成徐青元杨涛吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨 150001

目的:蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起的反刍动物虫媒(如库蠓、伊蚊等)传染病.本研究旨在制备NS1蛋白的MAbs,并对其生物学特性进行鉴定,旨在为蓝舌病病毒诊断与相关基础研究奠定基础. 方法:根据Genb... 详细信息

目的:蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起的反刍动物虫媒(如库蠓、伊蚊等)传染病.本研究旨在制备NS1蛋白的MAbs,并对其生物学特性进行鉴定,旨在为蓝舌病病毒诊断与相关基础研究奠定基础. 方法:根据Genbank中己登录的BTV12-NS1基因序列，利用Primer 5.0软件选取其ORF在5’端和3’端分别设计上下游引物后构建原核重组质粒pET BTV12-NS1和真核重组质粒pFAST BTV12-NS1，分别进行原核表达及真核表达。表达的重组蛋白经纯化鉴定后，利用原核重组BTV12-NS1蛋白免疫BALB/c小鼠，利用真核重组BTV12-NS1蛋白建立间接ELISA方法，确定检测最佳条件后筛选阳性杂交瘤细胞株并进行WB和IFA鉴定。结果:本实验共筛选出26株阳性杂交瘤细胞株，分别对其进行WB和IFA鉴定，发现26株MAbs均与Bac-to-Bac昆虫细胞表达系统表达的重组BTV12-NS1蛋白呈特异性反应，也能与接种BTV12的BHK-21细胞中表达的NS1蛋白发生特异性反应，而与接种野生杆状病毒和未接毒的BHK-21细胞不发生反应;IFA显示:3 E9,3B6,2B7,4B9四株MAbs无生物学活性，其余有22株MAbs均与感染BTV12的BHK-21细胞呈特异性免疫荧光。与感染BTV1-24的BHK-21细胞结果表明:2G5和3F6为型特异性MAbs;2E8,3C2,,3G6,3E7,4B1,4E5为群特异性MAbs;其余MAbs均有不同的反应谱系。结论:本研究所制备的抗NS1蛋白MAbs为下一步蓝舌病病毒相关研究奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒非结构蛋白单克隆抗体制备工艺生物学特性

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BAT3过表达缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的神经元凋亡

BAT3过表达缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的神经元凋亡

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：宋志琦杨利峰王运盛朱婷赵德明中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病实验室北京 100193

目的：检测BAT3蛋白过表达对由PrP106-126毒性多肽引起的神经元凋亡现象的影响. 方法：首先通过免疫荧光,CCK8细胞活性检测试剂盒和免疫印迹检测带FITC标签的PrP106-126-FITC毒性多肽的生物学毒性.分别用PrP106-126-FITC和PrP106-12... 详细信息

目的：检测BAT3蛋白过表达对由PrP106-126毒性多肽引起的神经元凋亡现象的影响. 方法：首先通过免疫荧光,CCK8细胞活性检测试剂盒和免疫印迹检测带FITC标签的PrP106-126-FITC毒性多肽的生物学毒性.分别用PrP106-126-FITC和PrP106-126神经毒性多肽处理原代神经元和Neur02a细胞,通过免疫荧光技术和免疫印迹方法分别检测受刺激后的原代神经元和Neur02a细胞中BAT3表达的变化情况.通过脂质体转染方法将已经构建好的pcDNA-3.1-HA-BAT3质粒转染进入原代神经元,用CCK8检测细胞活性;以同样方式将质粒转染进入小鼠神经瘤细胞系Neuro2a,用TUNEL凋亡检测试剂盒分析经BAT3转染或对照组的N2a细胞的凋亡水平;Western blot检测PrP106-126神经毒性多肽处理前后,胞浆内细胞色素c和Bcl-2的变化,进一步了解BAY3在神经元凋亡中发挥作用的机制. 结果：PrP106-126-FITC和PrP106-126神经毒性多肽具有相似的神经毒性.受到多肽刺激之后,无论在原代神经元还是传代细胞系Neur02a中,BAT3都发生核输出现象,BAT3从细胞核转移进入细胞浆.BAT3的过表达使受到PrP106-126毒性多肽刺激的神经元的细胞活性有所提高,Neuro2a的细胞凋亡现象减轻,同时抑制了由PrP106-126毒性多肽引起的细胞色素c的过渡释放并且维持细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的稳定. 结论：BAT3蛋白的表达缓解PrP106-126毒性多肽对神经细胞造成的凋亡现象,为进一步阐释该蛋白对朊病毒引起的神经元损失的治疗作用机制提供了依据.

关键词：朊病毒病毒性多肽神经元凋亡白细胞抗原B相关转录因子3 过表达机制

来源：评论

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PHEV诱导神经细胞凋亡机制的研究

PHEV诱导神经细胞凋亡机制的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：贺文琦兰云刚赵家宽李姿吕晓玲赵魁陆慧君成军高丰吉林大学动物医学学院吉林长春 130062 吉林大学人兽共患病研究所吉林长春 130062

目的:猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)属于β-冠状病毒属的成员,具有典型的嗜神经性,病毒感染后主要沿外周神经向中枢神经传递,并对神经元造成严重损伤.大量研究表明,脑神经元损伤与凋亡密切相关.PHEV感染是否可诱导宿主神经细胞凋亡还未见... 详细信息

目的:猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)属于β-冠状病毒属的成员,具有典型的嗜神经性,病毒感染后主要沿外周神经向中枢神经传递,并对神经元造成严重损伤.大量研究表明,脑神经元损伤与凋亡密切相关.PHEV感染是否可诱导宿主神经细胞凋亡还未见报道.因此,本研究对PHEV诱导神经元凋亡现象进行检测,进而对其诱导细胞凋亡的机制进行初步的探讨. 方法:以小鼠神经瘤母细胞(N2a细胞)作为脑神经元的细胞模型，将PHEV感染细胞后，观察CPE特点及细胞核的形态变化，应用Annexin V-FITC/PI法、DNA ladder等多种检测凋亡现象的方法进行检测分析。进而应用紫外分光光度法、免疫印迹技术、Real time PCR等方法对PHEV诱导N2a细胞凋亡的信号转导通路进行了初步的探讨。结果:通过PHEV感染N2a细胞凋亡现象的检测发现PHEV能诱导宿主细胞凋亡，并且PHEV在感染N2a细胞的过程中促进了死亡受体蛋白Fas的表达，以及通过调节Bcl-2和Bax的表达促进细胞色素C的释放，并同时激活了caspase-3,-8和-9,表明PHEV诱导N2a细胞凋亡的过程中同时经过死亡受体途径和线粒体途径。其次，将经紫外线灭活的PHEV接种N2a细胞后，进行细胞凋亡检测;发现灭活的PHEV并不能诱导宿主细胞凋亡，表明PHEV诱导细胞凋亡的过程中依赖于病毒的复制增殖。最后，本研究应用caspase抑制剂有效抑制细胞凋亡后接种PHEV与正常接毒组进行比较，发现二者的病毒滴度差异不显著，表明PHEV增殖不依赖于凋亡的发生。结论:本研究证明了PHEV能诱导细胞凋亡并初步探讨了PHEV诱导细胞凋亡过程中的信号通路。该研究结果为深入解析PHEV的分子致病机制提供了重要的研究基础。

关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒神经细胞凋亡诱导机制信号通路

来源：评论

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禽肿瘤性疾病流行病学调查

禽肿瘤性疾病流行病学调查

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：王永波徐晨马晓倩李根成子强山东农业大学动物科技学院山东泰安 271018

当前,由A亚群白血病病毒(ALV-A)、J亚群白血病病毒(ALV-J)、马立克氏病病毒(MDV)、网状组织内皮增生病病毒(REV)四种病毒引起的肿瘤性疾病对养禽业仍然构成很大的威胁,耗费大量的财力物力,造成了极大的经济损失.尤其是ALV-J、ALV-A、REV... 详细信息

当前,由A亚群白血病病毒(ALV-A)、J亚群白血病病毒(ALV-J)、马立克氏病病毒(MDV)、网状组织内皮增生病病毒(REV)四种病毒引起的肿瘤性疾病对养禽业仍然构成很大的威胁,耗费大量的财力物力,造成了极大的经济损失.尤其是ALV-J、ALV-A、REV 三种反转录病毒引起的疾病,目前尚无有效的疫苗防控.马立克氏病(MD)虽有疫苗防控但是其免疫保护并不是很确实.本研究主要致力于调查近两年山东省内各地区的四种肿瘤性疾病的流行情况,为四种疾病的防控提供指导性数据,最大限度的降低四种疾病引起的经济损失. 通过ELISA抗原抗体检测所有样品中ALV-J抗体阳性、抗原阴性即形成有效循环中和抗体鸡个数为113只，比率为12.9％;ALV-J抗体阴性、抗原阳性即呈现病毒血症的个数为51只，比率为5.8%;ALV-J抗体阳性、抗原阳性即双阳性的个数为3，比率为0.03%。RT-PCR检测结果显示活鸡中ALV-J的阳性个体为2只，阳性率为3%;REV的阳性个体为31只，阳性率为53%;MDV的阳性个体为6只，阳性率为10%;ALV-A的阳性个体为:5只，阳性率为9%。其中单重感染的比率为52%;双重感染的比率为7%;三重感染的比率为3%、肿瘤携带鸡的组织切片可观察到有肿瘤病变的组织，其肿瘤细胞主要由淋巴细胞和髓细胞。肿瘤携带鸡的血涂片观察可见主要病变为白细胞异常增多，增多的白细胞以淋巴细胞较为显著，嗜酸性粒细胞相对显著。肿瘤携带鸡的全血分析可以看到变化以白细胞增多的异常现象，其中以淋巴细胞增多最为显著。通过将近两年的采集研究发现，山东省内的四种肿瘤性疾病的感染率相对较高，尤其是AL，说明四种疾病的净化率依然不理想，对养禽业仍然能够造成巨大的威胁，因此，政府及兽医工作者需要加大四种疾病的淘汰净化，从而降低损失。

关键词：禽类肿瘤性疾病流行病学疾病防控

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H9N2禽流感病毒对BALB/c小鼠S1PR1表达和分布的影响

H9N2禽流感病毒对BALB/c小鼠S1PR1表达和分布的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会

作者：童双于梦王衡宁章勇华南农业大学兽医学院广东省广州市 510642

H9N2亚型禽流感作为流感病毒变异的基因储备库备受公共卫生领域的关注.SlPR1是G蛋白偶联受体之一,为探究S1PR1在流感病毒与宿主反应过程中可能发挥的的作用,研究了H9N2亚型禽流感病毒感染BALB/c小鼠后S1PR1的表达模式及变化趋势.本研究... 详细信息

H9N2亚型禽流感作为流感病毒变异的基因储备库备受公共卫生领域的关注.SlPR1是G蛋白偶联受体之一,为探究S1PR1在流感病毒与宿主反应过程中可能发挥的的作用,研究了H9N2亚型禽流感病毒感染BALB/c小鼠后S1PR1的表达模式及变化趋势.本研究采用2株H9N2亚型禽流感病毒chicken/Guangdong/TS/2004(TS)和Guangdong/V/2008(V),分别经鼻腔感染BALB/c小鼠并设空白对照组,记录体重及死亡情况.五天后,处死小鼠取心、肝、脾、肺、肾、脑、胃.利用免疫组织化学技术以及荧光定量PCR 技术对S1PR1蛋白在正常及攻毒小鼠各个组织的表达和分布进行研究.表达和分布进行研究。结果发现，V株病毒对小鼠表现出强致病性，攻毒鼠表现出明显的临床症状，攻毒后小鼠出现死亡。TS株病毒表现为弱致病性，可使攻毒组小鼠临床症状轻微，小鼠无死亡。基因表达分析表明:S1PR1基因在BALB/c小鼠正常组织的表达量依次为肝、脑、肺、心、肾、脾、胃。组内和组间的差异性显著，组内各器官在流感病毒攻毒后具有明显差异，对组间来说除了肺和脑组织内，S1PR1基因表达量普遍趋势是V组＞空白对照组＞TS组。免疫组织化学结果显示在攻弱毒TS毒和攻强毒V毒后，S1PR1蛋白分布未见明显变化，但表达发生变化。该蛋白在正常心肌细胞中呈现强阳性的弥漫性表达，总体表达量C组＞V组＞TS组;该蛋白在正常肝细胞中呈现强阳性的弥漫性表达，总体表达量趋势同心脏类似;该蛋白主要分布于脾脏内皮细胞，总体表达量TS组＞C组＞V组;该蛋白在肺泡上皮细胞，肺泡细胞，细支气管，支气管均大量分布，总体表达量趋势同脾脏类似;该蛋白在攻TS毒和正常对照组肾小管内皮细胞分布，总体表达量C组＞TS组＞V组;该蛋白主要分布于脑组织中神经细胞细胞质，在脑中总体表达量趋势同心脏类似;该蛋白在正常胃上皮细胞壁细胞间呈现阳性表达，蛋白总体表达量趋势同心脏类似。

关键词：禽流感病毒 G蛋白偶联受体表达模式分布规律

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