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文献类型

409 篇 会议

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409 篇 电子文献
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学科分类号

355 篇 农学
- 337 篇 兽医学
- 10 篇 畜牧学
- 6 篇 农业资源与环境
- 2 篇 作物学
- 1 篇 林学
20 篇 经济学
- 20 篇 应用经济学
17 篇 工学
- 7 篇 食品科学与工程（可...
- 4 篇 仪器科学与技术
- 4 篇 农业工程
- 2 篇 化学工程与技术
- 2 篇 环境科学与工程（可...
- 2 篇 生物工程
- 1 篇 水利工程
13 篇 医学
- 6 篇 药学(可授医学、理...
- 4 篇 临床医学
- 2 篇 基础医学(可授医学...
- 2 篇 中西医结合
- 1 篇 公共卫生与预防医...
- 1 篇 中药学(可授医学、...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
12 篇 理学
- 6 篇 生态学
- 4 篇 生物学
- 2 篇 化学
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
1 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理

主题

20 篇 大肠杆菌
15 篇 耐药性
13 篇 氟苯尼考
11 篇 残留
10 篇 猪
8 篇 药动学
7 篇 沙咪珠利
7 篇 氧化应激
7 篇 田七总皂苷
7 篇 多重耐药
6 篇 替米考星
6 篇 黄芩苷
6 篇 nf-κb
6 篇 药代动力学
6 篇 金黄色葡萄球菌
6 篇 耐药基因
6 篇 黏菌素
5 篇 凋亡
5 篇 最小抑菌浓度
5 篇 uplc-ms/ms

机构

63 篇 中国农业大学
48 篇 华南农业大学
24 篇 南京农业大学
19 篇 吉林大学
15 篇 广西大学
14 篇 东北农业大学
14 篇 扬州大学
11 篇 福建农林大学
10 篇 中国农业科学院兰...
9 篇 吉林农业大学
9 篇 河南农业大学
8 篇 新疆农业大学
8 篇 内蒙古农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
6 篇 动物医学学院吉林...
6 篇 西北农林科技大学
6 篇 四川农业大学
5 篇 山东省兽药质量检...
5 篇 北京农学院
4 篇 中国农业科学院兰...

作者

25 篇 邓旭明
20 篇 沈建忠
19 篇 汪洋
15 篇 曾振灵
14 篇 汤树生
14 篇 李剑勇
14 篇 杨亚军
14 篇 肖希龙
13 篇 吴聪明
13 篇 袁宗辉
13 篇 刘希望
12 篇 王丽平
12 篇 刘雅红
12 篇 王战辉
12 篇 卜仕金
12 篇 江善祥
11 篇 孔晓军
11 篇 黄一帆
11 篇 秦哲
11 篇 李世宏

语言

404 篇 中文
5 篇 英文

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UPLC-MS/MS法检测黄鳝中氯霉素类药物残留

UPLC-MS/MS法检测黄鳝中氯霉素类药物残留

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张伟郭大伟彭麟季辉阮祥春高修歌郑亚妮李娇娇仇亚伟江善祥南京农业大学动物医学院

(目的)本研究旨在建立黄鳝中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。（方法）准确称取2.00 g黄鳝肌肉样品,加入无水硫酸钠、氯化钠后加入10 mL碱性乙酸乙酯作为提取溶剂。重复提取一次后合并两... 详细信息

(目的)本研究旨在建立黄鳝中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。（方法）准确称取2.00 g黄鳝肌肉样品,加入无水硫酸钠、氯化钠后加入10 mL碱性乙酸乙酯作为提取溶剂。重复提取一次后合并两次提取液,于45℃水浴中氮吹至干。4 mL5%甲醇溶液复溶,再加4 mL正己烷（5%甲醇溶液饱和）除脂。重复除脂一次,弃去上层有机相,下层水相过0.22μm滤膜,进样检测。其中流动相为乙腈和水,梯度洗脱。药物的监测模式采用负离子多反应监测。氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的监测母离子分子量分别为m/z 321、354和356,m/z 152、257,m/z 185、290和m/z 336、185的子离子分别用于三种药物的定性和定量分析。内标采用d-氯霉素、d-甲砜霉素和d-氟苯尼考。（结果）结果显示,氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考在0.5～50μg·L添加水平内线性良好,检测限为0.1μg·kg,定量限为0.3μg·kg。氯霉素在0.3、0.45和0.6μg·kg添加水平回收率为92.83%11.26%;甲砜霉素在25、50和75μ***-1添加水平回收率为86.76%07.30%;氟苯尼考在50、100和150μg·kg添加水平回收率为96.21%04.14%。本方法对三种药物的平均提取回收率在86.76%11.26%范围内,日内精密度为2.16%3.66%,日间精密度为1.42%.06%。（结论）本方法精密度高,重现性好,操作简单快速。同时该方法有效填补了黄鳝中氯霉素类药物的多残留检测的空白,为黄鳝中残留监测提供可靠方法依据。

关键词： UPLC-MS/MS 氯霉素甲砜霉素氟苯尼考黄鳝

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杆菌肽类耐药基因bcrABDR在鸡源粪肠球菌中的流行性分布以及分子传播机制的研究

杆菌肽类耐药基因bcrABDR在鸡源粪肠球菌中的流行性分布以及分子...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陈慕雅孙坚邓辉方亮星廖晓萍刘雅红华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室广州510642

[目的]本实验研究旨在研究鸡源粪肠球菌中介导杆菌肽类耐药的基因bcrABDR基因簇的流行性分布和分子传播机制.[方法]2014年间在广州市活禽交易市场分离的来自在广东、广西、湖南、海南,浙江,江西等六个省分的鸡源粪肠球菌109株,采用PCR... 详细信息

[目的]本实验研究旨在研究鸡源粪肠球菌中介导杆菌肽类耐药的基因bcrABDR基因簇的流行性分布和分子传播机制.[方法]2014年间在广州市活禽交易市场分离的来自在广东、广西、湖南、海南,浙江,江西等六个省分的鸡源粪肠球菌109株,采用PCR和测序方法筛选产携带bcrABDR基因簇的阳性肠球菌,采用琼脂稀释法测定阳性菌株对抗菌药物的敏感性,采用脉冲产凝胶电泳(PFGE)分析携带bcrABDR基因阳性菌株的亲缘关系.采用接合转移及质粒酶切等方法对携带bcrABDR基因的可接合性质粒特征进行分析.运用S1-PFGE以及Southern杂交对于接合子以及接合转移转移不成功的菌株中bcrB基因进行基因定位,并用PCR-mapping和引物步移法分析bcrABDR基因簇的侧翼序列基因环境.[结果]109株中检测到37株携带bcrABDR的阳性粪肠球菌,检测率为33.9％.药敏试验表明阳性菌株中杆菌肽MIC值均大于256μg/ml,同时PFGE分析表明阳性粪肠球菌株之间亲缘关系较远,基本无克隆传播现象.S1-PFGE以及Southern杂交结果显示在37株阳性菌中,bcrABDR基因簇均位于质粒上.bcrABDR的基因环境分析表明结果显示该基因簇的转移主要是由插入序列ISEnfa1介导,并且在其两侧携带同向的插入序列ISEnfa1时,可形成环状中间体,促进耐药基因的传播.[结论]本研究首次在全国范围内调查鸡源粪肠球菌中bcrABDR基因簇的流行分布情况进行调查,并发现其具有较高的流行率,而且多位于不可接合性质粒上,插入序列ISEnfa1很可能是介导其散播的主要的传播机制.

关键词：粪肠球菌杆菌肽 ISEnfa1 bcrABDR

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猪源肠球菌新型非接合转移质粒携带lsa(E)基因

猪源肠球菌新型非接合转移质粒携带lsa(E)基因

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张万江董志民王秋东华欣刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队吉林农业大学动物科学技术学院

【目的】获得携带lsa(E)基因肠球菌新型接合转移质粒pY13的全核酸序列,并分析lsa(E)基因在其他肠球菌中的遗传背景和传播方式。【方法】2013年从猪场分离到7猪lsa(E)阳性肠球菌菌(粪肠球菌n=5,屎肠球菌n=1,鸡肠球菌n=1),通过S1-PFGE、So... 详细信息

【目的】获得携带lsa(E)基因肠球菌新型接合转移质粒pY13的全核酸序列,并分析lsa(E)基因在其他肠球菌中的遗传背景和传播方式。【方法】2013年从猪场分离到7猪lsa(E)阳性肠球菌菌(粪肠球菌n=5,屎肠球菌n=1,鸡肠球菌n=1),通过S1-PFGE、Southem杂交、电击转化和重叠PCR等方法对lsa(E)基因的定位和基因环境进行分析;同时采用454 GS-FLX测序仪对pY13质粒进行序列全测定。【结果】最终获得了一个来自屎肠球菌全长为28489bp的pY13质粒。序列分析显示,pY13质粒携带一个新型的耐药簇,该耐药簇包含lnu(B)、lsa(E)、spw、aadE、aphA3和两个拷贝的erm(B)基因。含有该耐药基因簇的质粒可介导林克酰胺类、大环内酯类、截断侧耳素、链阳菌素、壮观霉素和卡那霉素/新霉素等药物耐药。序列分析结果显示,在耐药基因簇的形成过程中插入元件ISEfa8和IS1256可能发挥了作用。另外,以pY13质粒为模板设计了9对重叠引物,对其他6株lsa(E)基因阳性菌进行PCR扩增,结果证实这6株菌携带的lsa(E)基因均位于pY13类似质粒上。【结论】首次获得了携带lsa(E)的肠球菌质粒pY13,虽然为非接合转移性质粒,但该类型的质粒仍然在多重耐药基因簇的传播中发挥了重要作用。

关键词：耐药基因肠球菌接合转移 lsa

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氨基丁三醇前列腺素F2α在奶牛体内的药代动力学研究

氨基丁三醇前列腺素F2α在奶牛体内的药代动力学研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：袁富威班赟叶文初许贤会党丽梅张洁董欣李引乾西北农林科技大学动物医学院

将18头健康中国荷斯坦奶牛随机分成高、中、低3组,每组每头分别肌肉注射氨基丁三醇前列腺素F10mg、5mg、2.5mg,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血药浓度,用残数法逐头奶牛拟合药动学曲线方程并计算药动学参数,研究氨基丁三醇前列腺素F... 详细信息

将18头健康中国荷斯坦奶牛随机分成高、中、低3组,每组每头分别肌肉注射氨基丁三醇前列腺素F10mg、5mg、2.5mg,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血药浓度,用残数法逐头奶牛拟合药动学曲线方程并计算药动学参数,研究氨基丁三醇前列腺素F注射液在奶牛体内的药代动力学。结果表明,药时数据符合有吸收一室模型,高、中、低组的主要药动学参数:吸收速率常数Ka分别为18.22±2.17 h、15.30±0.64 h、20.09±5.03 h;吸收半衰期t分别为0.04±0.004 h、0.05±0.002 h、0.04±0.01 h;分布和消除速率常数Ke分别为1.32±0.14 h、1.27±0.12 h、1.40±0.16 h;消除半衰期t分别为0.53±0.06 h、0.55±0.05 h、0.50±06 h;达峰时间t均为0.17 h;达峰浓度C分别为6.34±0.59 ng/mL、5.94±0.27 ng/mL、4.81±0.16 ng/mL;药时曲线下面积AUC分别为14.40±2.19 ng·mL·h、10.14±1.07 ng·mL·h、13.154±4.34 ng·mL·h。本试验运用ELISA双抗体夹心法建立了奶牛血清中PGF浓度的检测方法,该方法简便,灵敏,特异性强,样品稳定性好。使用该方法成功测定了奶牛分别单剂量肌肉注射高、中、低3个剂量的氨基丁三醇PGF注射液后的血药浓度,约10min达到峰值,100 min后恢复注射前水平。根据药时曲线峰浓度,AUC值及相关的临床药效学试验结果,建议临床使用剂量为5mL（25mg）。

关键词：奶牛氨基丁三醇PGF2α注射液 ELISA 药代动力学

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猪源产NDM-1碳青霉烯酶大肠杆菌和不动杆菌的流行病学和分子特征的研究

猪源产NDM-1碳青霉烯酶大肠杆菌和不动杆菌的流行病学和分子特征...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张荣民汪洋刘志海李基云尹文娟雷蕾吴聪明沈建忠中国农业大学动物医学院

【目的】本研究对广东佛山市的一个养殖动物医院进行猪源产NDM-1碳青霉烯酶耐药菌的流行病学调查,旨在揭示bla基因阳性菌的流行状态和分子传播特点,为食品动物源耐药菌耐药基因流行的风险评估提供依据。【方法】通过耐药平板（美罗培南2... 详细信息

【目的】本研究对广东佛山市的一个养殖动物医院进行猪源产NDM-1碳青霉烯酶耐药菌的流行病学调查,旨在揭示bla基因阳性菌的流行状态和分子传播特点,为食品动物源耐药菌耐药基因流行的风险评估提供依据。【方法】通过耐药平板（美罗培南2 mg/L+万古霉素10 mg/L）对病猪体肺部的碳青霉烯耐药菌株进行筛选,之后对其进行16S rRNA菌属鉴定,通过PCR筛选bla基因阳性菌,再测定所有菌株的最小抑菌浓度,之后用SI-PFGE和Southern blot定位其耐药基因,最后通过全基因组测序获得bla基因的遗传环境和该菌株的ST分型。【结果】从病猪的肺部分离出了334株美罗培南耐药菌株（MIC≥4mg/L）,其中包括3株大肠杆菌,2株鲍曼不动杆菌,1株碳酸钙不动杆菌等6株bla基因阳性菌。S1-PFGE和Southern blot显示bla基因定位在一株鲍曼不动杆菌的染色体上和另外五株菌的五个不同大小的质粒上。最小抑菌浓度测定表明这6株菌对所有p-内酰胺类药物耐药。全基因组测序发现所有的猪源bla基因的侧翼序列和人的碳青霉烯耐药菌株有高度的同源性,并且其中一株大肠杆菌的分型为人医临床较常见的ST48。【结论】这些NDM-1基因阳性大肠杆菌很可能由人传播给食品动物,表明了对食品动物耐药监测的重要性,另外,谨慎使用抗生素对减少碳青霉烯耐药基因在食品动物耐药菌的产生同样值得关注。

关键词：碳青霉烯酶 NDM-1 肠杆菌食品安全

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临床分离牛支原体的耐药性分析

临床分离牛支原体的耐药性分析

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王秀梅辛九庆李媛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

【目的】牛支原体（Mycoplasma bovis,***）是一种能引起牛支原体肺炎和乳房炎的病原菌。近年来,该病原菌在世界范围内呈快速传播态。临床上对于牛支原体病的预防主要通过加强饲养管理,提高机体抵抗力:减少长途运输、拥挤、饥渴等应激... 详细信息

【目的】牛支原体（Mycoplasma bovis,***）是一种能引起牛支原体肺炎和乳房炎的病原菌。近年来,该病原菌在世界范围内呈快速传播态。临床上对于牛支原体病的预防主要通过加强饲养管理,提高机体抵抗力:减少长途运输、拥挤、饥渴等应激因素或降低其造成的影响,发病后治疗多采用抗生素,如环丙沙星、四环素和泰妙菌素等。然而随着抗生素的广泛使用,耐药现象也越来越多,本研究开展MIC测定可为临床牛支原体病的治疗提供参考数据。【方法】本研究通过测定临床分离牛支原体的颜色变化单位（colour change unit,CCU）确定MIC测定时***的浓度,采用微量稀释法测定***对临床常用的8种抗菌药的MIC。【结果】滴度测定结果显示牛支原体为108 CCU/ml,按照CLSI规定,MIC测定时牛支原体的终浓度为104 CCU/ml。与国外报道相似,本研究中泰妙菌素MIC90为128ug/ml,泰乐菌素MIC90为64ug/m1,恩诺沙星MIC90为0.6ug/ml,氟苯尼考MIC90为16ug/ml,林可霉素MIC90为8ug/ml。受试的八种抗菌药中,8株牛支原体对大观霉素、恩诺沙星、四环素和多西环素全部敏感,对泰妙菌素全部耐药,对泰乐菌素、氟苯尼考和林可霉素的耐药率分别为88%,38%和50%。【结论】上述结果可为临床合理用药提供参考,临床治疗牛支原体感染时可优先使用敏感性较高的药物,如大观霉素、恩诺沙星、四环素和多西环素等,减少使用或避免使用耐药率高的药物,如泰妙菌素,泰乐菌素和林可霉素等。

关键词：牛支原体耐药性 CCU

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大肠杆菌O157:H7新型液相蛋白芯片检测方法的建立

大肠杆菌O157:H7新型液相蛋白芯片检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：董晓琳夏志平吴永魁樊宏超军事医学科学院军事兽医研究所

【目的】大肠杆菌O157:H7（*** O157:H7）引起的食物中毒是一种常见的动物食源性疾病。液相蛋白芯片技术主要是通过单抗和多抗的夹心ELISA或者竞争ELISA方法以实现对目标分子的检测,实验过程（以夹心ELISA为例）包括单抗偶联微球、捕获... 详细信息

【目的】大肠杆菌O157:H7（*** O157:H7）引起的食物中毒是一种常见的动物食源性疾病。液相蛋白芯片技术主要是通过单抗和多抗的夹心ELISA或者竞争ELISA方法以实现对目标分子的检测,实验过程（以夹心ELISA为例）包括单抗偶联微球、捕获靶分子、加入多抗、以及荧光标记的二抗等多个步骤,除此之外,方法中还涉及了多次重悬、洗涤等过程。本研究建立Ecoli O157:H7新型液相蛋白芯片技术,以实现对*** O157:H7的快速检测。【方法】分离培养*** O157:H7至OD=1.0（约1×10～9 CFU/mL）,甲醛灭活后PI染色,应用流式细胞术对染色细菌进行荧光强度的稳定性评价。同时,将Ecoli O157:H7单克隆抗体通过SMCC共价偶联技术偶联于微球,应用FACS Array对捕获微球的特异性和亲和性进行评价。【结果】细菌甲醛灭活条件:4/‰终浓度,37℃30min。PI染色条件:100μg/mL、4℃下30min。应用流式细胞术对染色后的细菌进行不同时间段的荧光值测定,1.5h内荧光中值未发生显著变化且染色后的阳性细菌百分比始终处于95%以上。90μL 1mg/mL *** O157:H7单克隆抗体与75μL荧光微球（约6×10～6个）进行偶联。在建立的方法中,微球使用量约3×10～4个,菌量在1×106CFU/mL×10～3 CFU/mL时,捕获微球呈现良好的特异性和亲和力。【结论】与常规液相蛋白芯片不同,该方法直接将染色后的菌体荧光作为报告分子,能够较为快速的实现对Ecoli O157:H7的检测。

关键词：大肠杆菌O157:H7 液相蛋白芯片菌体荧光

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一种高灵敏度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备方法研究

一种高灵敏度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备方法研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张西亚温凯王战辉江海洋于雪芝沈建忠中国农业大学

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxyniv1eno1,DON）又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物及其制品中,在全球范围内污染发生率较高,拒报道,我国抽查的样品... 详细信息

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxyniv1eno1,DON）又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物及其制品中,在全球范围内污染发生率较高,拒报道,我国抽查的样品中,DON的检出率为95.8%,超标率达17.7%。因此,建立快速筛选的免疫学分析方法,十分必要,抗原-抗体反应是免疫分析方法的基础,而目前我国关于DON抗体的制备文献报道较少,抗体灵敏度较低,不足以满足快速筛选分析方法检测的要求。因此本研究旨在报道一种高灵敏度的DON单克隆抗体的制备方法,为DON的快速免疫学分析方法的建立提供原料。为此,经过对DON位点的改造,合成了4种免疫原,分别是3-HS-DON-KLH,CDI-DON-KLH,HS.-DON-KLH和8.-CMO-DON.-KLH,每个免疫原免疫6只SPF雌性Ba1b/c小鼠,经-过动物免疫、检测和细胞融合筛选亚克隆,最终在3-HS-DON-KLH-2小鼠获得了一株单克隆抗体,细胞株编号为12E8,该细胞株能分泌针对游离DON特异性的抗体,选取3-t-HS-DON-BSA作为包被原,采用间接竞争ELISA方法建立了标准曲线,它针对DON,3-AC-DON,15-AC-DON的IC值分别是5.73ng/nL,0.25ng/mL,66.32ng/mL,与其它真菌毒素结构类似物,如T-2毒素、玉米赤霉烯酮、雪腐镰刀菌烯醇等几乎没有交叉反应,是目前文献报道较为灵敏的抗体。DON特异性抗体的获得,为DON快速免疫学筛选分析方法的建立打下了基础。

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体间接竞争ELISA

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牛奶中磺胺类药物多残留荧光偏振免疫分析方法的建立

牛奶中磺胺类药物多残留荧光偏振免疫分析方法的建立

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：罗佳迅李永翰李成龙温凯王战辉沈建忠中国农业大学动物医学院

【目的】磺胺类药物（sulfonamides）是一类广泛应用于畜牧业的广谱性抗菌药物,其不合理使用可造成动物源性食品中兽药残留问题,对消费者健康造成威胁,因此有必要建立快速、灵敏、高效的检测方法对其进行残留监控。【方法】将磺胺类药... 详细信息

【目的】磺胺类药物（sulfonamides）是一类广泛应用于畜牧业的广谱性抗菌药物,其不合理使用可造成动物源性食品中兽药残留问题,对消费者健康造成威胁,因此有必要建立快速、灵敏、高效的检测方法对其进行残留监控。【方法】将磺胺类药物半抗原与荧光素（及其衍生物）偶联,制备了BS-4AMF、TS-4AMF、SS-BDF、SA10-BDF和SS-EDF等多种荧光标记物,并采用薄层色谱法进行纯化。将不同标记物磺胺类药物单克隆抗体4D11进行组合,建立荧光偏振免疫分析方法（Fluorescence Polarization Immunoassay,FPIA）,通过比较结合前后荧光强度值的变化和IC值,筛选得到最佳标记物。经过对FPIA理化条件（缓冲溶液pH值、离子强度等）优化后,将牛奶样本5000 rpm 4℃离心,倾倒出上层脂肪后加入等体积1.5%的三氯乙酸,10000 rpm离心,用硼酸盐缓冲液将上清稀释2倍后直接用于检测。【结果】筛选出最佳荧光标记物TS.4AMF。方法对磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺甲基异恶唑和磺胺二甲氧嘧啶的检测限在16.20-96.04μg/L之间,检测时间少于20 min。空白牛奶分别在50、100和200μg/L浓度处添加上述5种药物,平均回收率在75.4-125.3%之间,变异系数在5.8-21.6%之间。【结论】本研究建立了FPIA方法,其灵敏度和稳定性能满足牛奶中磺胺类药物多残留的检测要求。

关键词：磺胺单克隆抗体荧光偏振多残留检测

来源：评论

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大环内酯类耐药对猪链球菌的适应性代价研究

大环内酯类耐药对猪链球菌的适应性代价研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：商可心黄金虎王丽平南京农业大学动物医学院

(目的)研究大环内酯类耐药对猪链球菌的适应性代价。（方法）本试验挑选4株不同来源的大环内酯类敏感猪链球菌作为研究对象,用红霉素、阿奇霉素及泰乐菌素分别对受试敏感菌株进行体外诱导耐药;然后对获得的高水平耐药菌株的耐药表型和... 详细信息

(目的)研究大环内酯类耐药对猪链球菌的适应性代价。（方法）本试验挑选4株不同来源的大环内酯类敏感猪链球菌作为研究对象,用红霉素、阿奇霉素及泰乐菌素分别对受试敏感菌株进行体外诱导耐药;然后对获得的高水平耐药菌株的耐药表型和基因突变型进行检测;最后通过配对竞争试验评价高水平耐药菌相对亲本株的适应性。（结果）结果发现:诱导所得的所有高水平耐药菌的23S rRNA都存在位点突变,主要突变为A2059G、A2058T、G2057A、A2062C和C2611A,部分菌株存在L4(Q67R;R72G、IuS7SQ;A73T、InS8WPQK)及L22的位点突变(G95D、A97V、DelPTL、K87Q)。对所有的亲本株和耐药菌株进行体内及体外适应性分析发现,发生突变的高水平耐药菌的适应性与其亲本株相比大多数出现适应性下降,仅H12、H14、A12三株突变菌株体内适应性显著上升,而这三株菌均在23S rRNA基因的A2059处发生突变,其中ZY05721诱导得到的两株耐药突变菌株体内适应性升高,其余突变菌株体内及体外适应性均显著下降。（结论）上述结果提示在23SrRNA基因的各突变位点中,A2059位点突变未对ZY05721菌株产生适应性代价,且会提高突变菌株的在机体内的适应性;而G2057、A2062位点的突变会对宿主菌产生高适应性代价。

关键词：猪链球菌大环内酯类耐药靶位基因突变适应性代价

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