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- 2 篇 教育学
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6 篇 耐药基因
6 篇 黏菌素
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5 篇 最小抑菌浓度
5 篇 抗菌活性

机构

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19 篇 吉林大学
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14 篇 东北农业大学
14 篇 扬州大学
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10 篇 中国农业科学院兰...
9 篇 吉林农业大学
9 篇 河南农业大学
8 篇 新疆农业大学
8 篇 内蒙古农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
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6 篇 四川农业大学
5 篇 山东省兽药质量检...
5 篇 北京农学院
4 篇 中国农业科学院兰...

作者

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19 篇 汪洋
15 篇 曾振灵
14 篇 汤树生
14 篇 李剑勇
14 篇 杨亚军
14 篇 肖希龙
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13 篇 袁宗辉
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12 篇 刘雅红
12 篇 王战辉
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12 篇 江善祥
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11 篇 黄一帆
11 篇 秦哲
11 篇 李世宏

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390 篇 中文
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替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：闫兆阳刘建业黄晓勇刘源崔一芳刘晓晔丁双阳中国农业大学动物医学院

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、4... 详细信息

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40mg/L。观察并统计120hpf内斑马鱼胚胎的发育情况,其中记录其在48hpf的心率变化、72hpf的孵化情况以及96hpf的致畸和死亡。120hpf时取出相同数目0mg/L、0.625mg/L、2.5mg/L和10mg/L未死亡的斑马鱼检测其体内超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量以及实时荧光定量聚合酶链反应检测与相关靶器官基因和凋亡基因的表达量的情况。结果表明,替米考星和泰乐菌素均表现出心动过速或过缓,替米考星和泰乐菌素都在低浓度使斑马鱼心率加速,高浓度心率减慢;并且替米考星能使斑马鱼出现心包水肿、脊柱弯曲和尾部弯曲,在1.25mg/L以上浓度出现致畸,在1.25mg/L、2.5mg/L和5mg/L几乎只出现心包水肿,在10mg/L、20mg/L和40mg/L以出现脊柱弯曲为主。在96hpf时40mg/L暴露组中的斑马鱼全部死亡,然而40mg/L的泰乐菌素没有使斑马鱼出现死亡现象。通过计算,替米考星的半数致死浓度(LC)为16.26mg/L,其半数效应浓度(EC)为6.424mg/L。120hpf时检测SOD和MDA的含量可知,随着两种大环内酯类类药物的暴露浓度增加,超氧化物歧化酶（SOD）含量减少,而丙二醛（MDA）含量增加。通过荧光定量聚合酶链反应检测出骨形态发生蛋白（BMP-4）、硒蛋白（Sepn-1）和凋亡基因表达量增加,而抗凋亡基因的表达量相对减少。通过以上实验结果可知,相对于泰乐菌素,替米考星会对斑马鱼胚胎导致更强的发育毒性和心脏毒性,应更加谨慎使用。

关键词：斑马鱼胚胎替米考星泰乐菌素毒性效应

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LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张瑜王丽平南京农业大学动物医学院

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作... 详细信息

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作为安全浓度处理。其次选用浓度为10μg/mL的LPS处理细胞不同时间,并用免疫荧光检测细胞膜上P-gp定位和表达的变化。最后,用高、中、低三个浓度的LPS分别处理IPEC-J2细胞1、3、6、12和24 h,并分别用荧光定量和Western blot的方法检测总mRNA及总蛋白表达水平。【结果】免疫荧光的结果表明,细胞膜上P-gp定位并没有发生改变,但荧光强度在处理1h后轻微减弱,3-24b增强。荧光定量结果表明,LPS处理1 h后50μg/mL浓度下Abcb1 mRNA表达显著下降,其他浓度差异不显著;处理3h后,Abcb1 mRNA表达和对照相比均明显增加;6 h和3 h比表达降低,但和对照比差异不显著;12 h后表达和对照比下降,但统计学差异不显著;24 h后mRNA的表达回复至对照水平。Western blot的结果显示,LPS处理1 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的降低;3 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的增加;6 h后,细胞内P-gp总体表达水平和对照相比又呈现抑制状态;12 h后1μg/mL组P-gp水平与对照比略有增加,10μg/mL和50μg/mL LPS仍抑制P-gp的表达,但抑制程度比6 h低;24 h后1μg/mL组P-gp表达量和对照相比又极显著降低,而10μg/mL和50μg/mL组P-gp表达量则逐渐回复接近对照水平。【结论】试验结果表明LPS处理后P-gp在IPEC-J2细胞膜上的表达量变化与猪组织细胞膜上的表达变化一致,均呈增加趋势,但其总RNA和总体蛋白表达水平与体内试验结果相似,均呈下降趋势。

关键词： LPS IPEC-J2 P-gp 免疫荧光荧光定量PCR 免疫印迹

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不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因检测及分析

不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：程伟华夏绪进夏利宁新疆农业大学动物医学学院

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株... 详细信息

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株猪源大肠杆菌进行β-内酰胺酶(bla、bla、bla、bla和bla)和16S rRNA甲基化酶（armA和rmtB）基因检测,并对检出耐药基因的PCR产物进行测序。检测结果表明:克拉玛依春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（142/142,100%）、bla（7/142,4.93%）和bla（1/142,0.70%）;克拉玛依地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（9/9,100%）;昌吉地区春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（78/78,100%）、bla（3/78,3.85%）和rmtB（1/78,1.28%）;昌吉地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（52/52,100%）、bla（3/52,5.77%）和bla（1/52,1.92%）。上述结果表明不同地区不同季节猪源大肠杆菌携带bla检出率均为100%。克拉玛依地区春季猪源大肠杆菌携带的耐药基因bla检出率比昌吉地区春季猪源大肠杆菌检出率高。结论:不同地区由于用药背景不同,各地域大肠杆菌的耐药性存在差异,不同时间及不同动物源性大肠杆菌耐药性也存在较大差异,养殖场应合理使用抗菌药物,加强产β-内酰酶及16S rRNA甲基化酶基因的监控。

关键词：不同地区春秋两季猪源大肠杆菌 β-内酰酶基因 16SrRNA甲基化酶基因

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p21基因慢病毒shRNA载体质粒的构建及鉴定

p21基因慢病毒shRNA载体质粒的构建及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李道稳汤树生周延代重山杨夏云肖希龙中国农业大学动物医学院

【目的】目的构建p21基因慢病毒shRNA载体并进行鉴定,为进一步探讨p21基因在喹乙醇诱导细胞凋亡及其S期阻滞的机理研究提供实验材料。【方法】方法1.构建3条p21基因慢病毒shRNA载体:将目的基因干扰序列连接到pLKO.1干扰慢病毒载体后将... 详细信息

【目的】目的构建p21基因慢病毒shRNA载体并进行鉴定,为进一步探讨p21基因在喹乙醇诱导细胞凋亡及其S期阻滞的机理研究提供实验材料。【方法】方法1.构建3条p21基因慢病毒shRNA载体:将目的基因干扰序列连接到pLKO.1干扰慢病毒载体后将其转进细菌感受态细胞中,等生成克隆菌落后进行PCR测序鉴定,测序比对正确的克隆即为所需的p21基因RNAi慢病毒载体。2.包装慢病毒及测定病毒滴度:抽提高纯度、无内毒素的慢病毒shRNA载体及其辅助包装原件载体质粒,使用HP transgene reagent将两者共转染到293T细胞,通过促转染、换液、培养等处理后,获取细胞上清液,进一步经浓缩后获得高滴度慢病毒浓缩液,在293T细胞中标定其病毒滴度。3.干扰载体对HepG2细胞内p21的沉默评价:用包装好的慢病毒以及慢病毒阴性对照感染靶细胞HepG2,感染成功后通过Western Blot和RT-PCR方法评价干扰载体对靶基因的干扰效果。【结果】1.对构建好的3条慢病毒干扰载体经PCR测序鉴定,DNA序列均无位点突变,证明质粒构建成功。2.将构建好的慢病毒载体质粒阳性克隆菌株转染293T细胞后荧光显微镜下可见绿色荧光;在293T细胞中进行病毒包装,最终纯化出pLKO.1-p21慢病毒颗粒,并测得其滴度为1*10～9TU/ml。3.病毒感染HepG2细胞后,经Western blot及RT-PCR验证,3条shRNA均有一定的沉默,其中以p21-shRNA3最明显。【结论】1.通过RNA干扰技术,成功构建了p21基因慢病毒shRNA载体。2.构建的干扰载体能够顺利的进行慢病毒的包装,并获得较高的病毒滴度。***-PCR及Western blot检测结果表明,p21-shRNA3为p21三个靶点中沉默效果最佳者,由其感染的HepG2细胞株为探讨p21基因在喹乙醇诱导细胞凋亡及其S期阻滞的机理研究提供实验材料JNK/GADD45a信号通路的激活参与喹乙醇诱导的DNA损伤及S期阻滞。

关键词： p21 RNA干扰慢病毒质粒构建

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高效液相色谱-串联质谱法测定动物可食性组织中镰刀菌毒素

高效液相色谱-串联质谱法测定动物可食性组织中镰刀菌毒素

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陈冬梅陶燕飞潘源虎谢书宇黄玲利王玉莲袁宗辉农业部兽药残留检测重点实验室/国家兽药残留基准实验室(HZAU)华中农业大学动物医学院

【目的】镰刀菌毒素类在自然界分布极为广泛,它不但可以引起人畜急、慢性中毒,还具有致癌、致畸、致突变的潜在危害,对人类的健康造成严重危害。因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要。但是现有的检测镰刀菌毒素类的检测方法并不完善... 详细信息

【目的】镰刀菌毒素类在自然界分布极为广泛,它不但可以引起人畜急、慢性中毒,还具有致癌、致畸、致突变的潜在危害,对人类的健康造成严重危害。因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要。但是现有的检测镰刀菌毒素类的检测方法并不完善,还存在一些问题,如检测的毒素种类少,只检测毒素毒素原型,对于代谢物关注极少;检测的样品种类单一,动物可食性组织的检测较少;样品前处理复杂、价格昂贵。针对以上问题,本方法旨在建立简便、快速,测定多种动物可食性组织中多种镰刀菌毒素的多残留方法。【方法】采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立猪牛羊肌肉、肝脏中19种镰刀菌毒素的多残留检测方法。组织样品采用β-葡萄糖醛苷酶水解,乙腈和水提取,正己烷脱脂,Bond Elut Mycotoxin柱净化。采用MRM监测模式,正负离子同时扫描。采用C18色谱柱,乙腈和水溶液为流动相,梯度洗脱方式进行色谱分离。【结果】19种镰刀菌毒素在不同样品中最低定量限为0.37μg/kg.41μg/kg,在添加不同定量限浓度水平上,平均回收率介于64.8%05.0%之间,变异系数≤18.6%。【结论】本方法采用采用乙腈和水萃取提取动物可食性组织中19种镰刀菌毒素,样品前处理简单,方法回收率高,有机试剂用量少。采用Bond Elut Mycotoxin固相萃取柱进行样品净化,操作简单,同文献报道的免疫亲和柱相比,降低了检测成本,避免了样品基质干扰。本方法首次采用高效液相色谱-串联质谱同时测定了19种镰刀菌毒素,检测限低,特异性好,方法性能参数满足兽药残留监控要求。本方法弥补了真菌毒素在动物性食品中定量确证检测方法的空白,为保障人类和动物健康具有十分重要的意义。

关键词：镰刀菌毒素高效液相色谱-串联质谱固相萃取动物可食性组织

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红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：国政陆子音衣美双王剑谢道远陈雪平李继昌东北农业大学动物医学学院

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡... 详细信息

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡率的影响;倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、透射电镜观察对细胞形态、细胞核形态及细胞内超微结构的影响;LDH水平测试检测对细胞膜完整性的影响;ROS含量测定、SOD活性测定、MDA含量检测来探讨对氧化应激的影响;DNA Ladder观察对DNA完整性的影响;Rh123染色流式细胞仪检测对线粒体膜电位的影响。【结果】MTT法检测结果显示,250μg·mL硫酸黏菌素作用于雪旺细胞24 h时,细胞活力为63.78%（对照组为100%）,损伤程度适宜。因此,后续试验选用250μg·mL硫酸黏菌素作用雪旺细胞24 h来构建黏菌素体外损伤雪旺细胞模型。选用12.5、25、50μg·mL浓度作为红景天苷保护硫酸黏菌素致雪旺细胞损伤的工作浓度。Annexin V-FITC/PI双染流式检测结果显示,红景天苷能有效降低硫酸黏菌素诱导雪旺细胞的凋亡率。降低损伤细胞培养液内LDH含量,使细胞内ROS、MDA含量显著降低,SOD活性升高,说明红景天苷能保护硫酸黏菌素损伤细胞膜完整性,稳固黏菌素引起细胞内氧化-抗氧化失衡。倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、电镜超微结构观察发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞胞体变圆,轴突变短,细胞核变小、固缩,染色质凝聚、边缘化,线粒体结构不清、肿胀、空泡化等凋亡特征。DNA Ladder试验结果提示,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞DNA断裂。Rh123染色流式细胞仪检测发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素引起的线粒体膜电位降低。【结论】硫酸黏菌素能引起雪旺细胞凋亡,诱发神经毒性,引起细胞内氧化应激损伤。红景天苷能有效拮抗其损伤。

关键词：黏菌素神经毒性雪旺细胞红景天苷保护作用

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对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对免疫应激仔猪NLRP3炎性小体信号通路的影响

对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对免疫应激仔猪NLRP3炎性小体信号...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：徐俊姚文旭曹芳元李洒丽杨胜杨海兰刘宇邱银生武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

【目的】在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制。... 详细信息

【目的】在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制。【方法】将分离后培养的仔猪外周血单核细胞分别设空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、对乙酰氨基酚组(浓度为0.25、0.5和1 mM)、乙酰半胱氨酸组(浓度为0.25、0.5和1 mM)和用药联合组(浓度均为0.25、0.5和1mM组合),药物预处理1h后,再加入终浓度为1μg/mL的LPS,继续培养10、16和20h后,采用ELISA法测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量;采用Western blot方法测定LPS刺激10h后的单核细胞中Cleaved Casapse-1的含量;采用RT-PCR方法测定LPS刺激3h后的单核细胞中IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量。【结果】LPS刺激后,细胞培养液中IL-1β、IL-18和TNF-α水平均极显著上升(P<0.01),IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量极显著增加(p<0.01)。LPS刺激不影响NLRP3炎性复合体组成部分ASC和Caspase-1的mRNA水平。AAP(0.5-1.0mM)和NAC(0.5-1.0mM)单独使用或联合使用均能下调IL-1β,IL-18,NLRP3及C1eaved Caspase-1的mRNA表达水平。NAC可显著增强AAP的上述抑制作用。AAP和NAC的联合使用对NLRP3炎性小体信号通路有较好的抑制作用。AAP和NAC的联合抗炎效应发生在NLRP3受体和Cleaved Caspase-1的mRNA表达上调。【结论】对乙酰氨基酚与乙酰半胱氨酸能通过抑制炎性小体信号通路的激活,减轻脂多糖诱导的仔猪单核细胞的炎症反应,且两药联用后的效果更佳,AAP和NAC的抗炎活性可能与LPS诱导下的NLRP3炎性小体信号通路的抑制有关。

关键词：对乙酰氨基酚乙酰半胱氨酸脂多糖炎性小体抗炎作用

来源：评论

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猪-鱼复合养殖模式中气单胞菌Ⅰ类整合子的流行情况及其耐药特征

猪-鱼复合养殖模式中气单胞菌Ⅰ类整合子的流行情况及其耐药特征

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：邓玉婷冯永永姜兰谭爱萍张瑞泉罗理中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔用药物创制重点实验室广东省水产动物免疫技术重点实验室上海海洋大学水产与生命学院

为了解广东地区猪-鱼复合养殖模式下气单胞菌整合子流行情况及其耐药特征,从广东省佛山和肇庆市5个不同猪-鱼复合养殖场采集分离猪粪、鱼、池塘水及池塘底泥的气单胞菌（Aeromonas）共3 17株,通过微量二倍稀释法测定其对7类20种药物的... 详细信息

为了解广东地区猪-鱼复合养殖模式下气单胞菌整合子流行情况及其耐药特征,从广东省佛山和肇庆市5个不同猪-鱼复合养殖场采集分离猪粪、鱼、池塘水及池塘底泥的气单胞菌（Aeromonas）共3 17株,通过微量二倍稀释法测定其对7类20种药物的敏感性;PCR扩增Ⅰ类整合子整合酶基因intI1,并分析其基因盒阵列结构。结果表明,317株气单胞菌对20种药物耐药程度不一,氨苄西林、磺胺间甲氧嘧啶、萘啶酸的耐药率相对较高。intI1的检出率为15.77%,鱼源和猪源的整合子检出率高于环境源的。整合子阳性菌对测试的12种药物的耐药率显著高于阴性菌,且表现为多重耐药;50个Ⅰ类整合子共检测到16种耐药基因盒,包括了编码氨基糖苷类耐药基因aadA1、aadA2、aac6-Ⅱ、aacA4,甲氧苄啶耐药基因drfA1、dfrA12、dfrA15、dfrA17、dfrB4,β内酰胺类耐药基因bla、bla,氯霉素耐药基因catB3、catB8,利福平耐药基因arr2、arr3以及质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac（6'）-Ib-cr。携带了不同类耐药基因盒的整合子阳性菌还表现出所对应的对甲氧苄啶、链霉素、氯霉素类等的耐药表型,由此推测整合子的存在与细菌的多重耐药密切相关。研究表明,Ⅰ类整合子分布存在于广东地区猪-鱼复合养殖模式下不同来源气单胞菌,并介导细菌对多种抗菌药物耐药。有必要开展畜禽-鱼复合养殖模式下细菌耐药性的传播机制研究,为水产养殖合理用药提供依据。

关键词：复合养殖模式气单胞菌 I类整合子耐药

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硫酸化川明参多糖抗新城疫病毒活性研究

硫酸化川明参多糖抗新城疫病毒活性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：宋旭赵兴红殷中琼四川农业大学动物医学院天然药物研究中心

[目的]评价硫酸化川明参多糖（sCVPS）体内外抗新城疫病毒（NDV）活性。[方法]在体外仓鼠肾细胞系（BHK-21）和鸡胚成纤维细胞（CEF）上,通过蚀斑减少法测定sCVPS对NDV的半数抑制浓度(IC)和作用方式,以荧光定量PCR检测在大量病毒感染下s... 详细信息

[目的]评价硫酸化川明参多糖（sCVPS）体内外抗新城疫病毒（NDV）活性。[方法]在体外仓鼠肾细胞系（BHK-21）和鸡胚成纤维细胞（CEF）上,通过蚀斑减少法测定sCVPS对NDV的半数抑制浓度(IC)和作用方式,以荧光定量PCR检测在大量病毒感染下sCVPS的抗NDV活性,以免疫荧光法观察病毒在细胞内的表达情况。通过滴鼻、点眼方式造成SPF雏鸡人工感染NDV的模型,肌肉注射给予不同剂量的sCVPS,通过测定存活率、不同组织中的病毒毒力、口腔和泄殖腔分泌物中病毒毒力、雏鸡免疫水平和组织病变评价其体内抗NDV的活性。[结果]体外实验结果显示,sCVPS在BHK-21和CEF上对NDV的IC分别为62.55-76.31μg/mL和101.57-125.90μg/mL,而阳性对照硫酸肝素的IC分别为99.28和118.79μg/mL。不同加药时间实验表明,sCVPS抗NDV活性在于抑制病毒感染细胞的早期阶段;通过对其作用方式研究表明,sCVPS在BHK-21上能抑制病毒的吸附过程,而在CEF上能抑制病毒的吸附和穿入过程。荧光定量PCR结果表明,在病毒感染复数（MOI）为1时,sCVPS能显著抑制病毒对细胞的感染。免疫荧光实验结果表明,在病毒感染量为0.1 MOI时,sCVPS能降低细胞中病毒蛋白的表达量。体外实验结果显示,给予雏鸡8 mg/kg的sCVPS,可提高雏鸡感染NDV后的存活率20%;在CEF上检测不同组织中病毒毒力的实验结果表明:sCVPS能降低脑、肺脏、脾脏、胸腺、雏鸡口腔分泌物以及泄殖腔中的病毒滴度,此结果表明sCVPS可以降低带毒雏鸡传播病毒的能力。通过ELISA试剂盒检测表明sCVPS能提高雏鸡血清中干扰素α和γ的水平,表明其抗NDV机制之一是通过提高机体免疫力而起到抗病毒活性。病理组织学研究结果表明,sCVPS可以减轻NDV感染后的组织病变。[结论]sCVPS在体内外均具有显著的抗新城疫病毒活性。在体外,能抑制病毒早期吸附和穿入过程,并能抑制大量病毒的感染;在体内,能提高病毒感染雏鸡的存活率并降低组织和分泌物中的病毒量,以及雏鸡的免疫力,并减轻NDV感染所引起的组织病变。

关键词：硫酸化川明参多糖抗病毒活性新城疫病毒

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田七总皂苷对PCV2感染猪脾脏淋巴细胞组蛋白乙酰化修饰的调节作用

田七总皂苷对PCV2感染猪脾脏淋巴细胞组蛋白乙酰化修饰的调节作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：尹丹杨剑郝祝兵韦英益陈海兰胡庭俊广西大学动物科学技术学院

【目的】观察PCV2感染对猪脾脏淋巴细胞自由基水平以及乙酰化状态的影响及田七总皂苷的调节作用,初步揭示病毒感染引起氧化应激与乙酰化状态的相互关系。【方法】设细胞对照组、10PCV2病毒感染组、PNS对照组,PCV2+PNS组和PNS+PCV2组,以... 详细信息

【目的】观察PCV2感染对猪脾脏淋巴细胞自由基水平以及乙酰化状态的影响及田七总皂苷的调节作用,初步揭示病毒感染引起氧化应激与乙酰化状态的相互关系。【方法】设细胞对照组、10PCV2病毒感染组、PNS对照组,PCV2+PNS组和PNS+PCV2组,以田七总皂苷溶液（终浓度200μg/mL）作用于正常或PCV2感染的猪脾脏淋巴细胞,分别通过化学发光法、ELISA法、Western bloting法检测12 h田七总皂苷对PCV2病毒感染猪脾脏淋巴细胞抗自由基能力及细胞内过氧化氢水平、组蛋白乙酰化相关酶(组蛋白乙酰化酶（HAT）和组蛋白去乙酰化酶（HDAC）)活性及组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。【结果】预先使用田七总皂苷处理猪脾淋巴细胞不能拮抗PCV2感染引起的细胞抗超氧阴离子活力及抑制羟自由基能力的下降和PCV2感染引起的细胞过氧化氢水平的升高;而田七总皂苷处理PCV2感染细胞能显著提高感染细胞抗超氧阴离子活力,显著上调感染细胞抑制羟自由基的能力,显著下调感染细胞过氧化氢水平。猪脾淋巴细胞感染PCV2后,引起细胞HAT活性和组蛋白H3、H4乙酰化水平的显著升高,对HDAC活性无显著影响;田七总皂苷在PCV2感染细胞前作用于细胞或作用于感染PCV2的细胞,均能抑制PCV2感染引起猪脾淋巴细胞HAT活性的升高,但对HDAC活性没有显著影响。田七总皂苷在PCV2感染细胞前作用于细胞或作用于感染PCV2的细胞,均能显著抑制组蛋白H4乙酰化水平的升高,但对细胞组蛋白H3乙酰化水平没有显著影响。【结论】田七总皂苷主要通过调节猪脾淋巴细胞HAT酶活性及组蛋白H4乙酰化水平的改变从而调节细胞组蛋白乙酰化修饰。

关键词：田七总皂苷猪圆环病毒2型猪脾淋巴细胞组蛋白乙酰化

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