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370 篇 会议

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学科分类号

363 篇 农学
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- 11 篇 农业资源与环境
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- 1 篇 中西医结合
3 篇 教育学
- 3 篇 教育学
2 篇 法学
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主题

9 篇 耐药性
8 篇 耐药基因
8 篇 大肠杆菌
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4 篇 黄芩苷
4 篇 金黄色葡萄球菌
4 篇 氧化应激
4 篇 生物被膜
3 篇 兽医药理学
3 篇 线粒体自噬
3 篇 沙门菌
3 篇 外排泵
3 篇 自噬
3 篇 耐药菌
3 篇 鼠伤寒沙门菌
3 篇 黏菌素
3 篇 鸡毒支原体
2 篇 四环素降解酶
2 篇 细胞焦亡
2 篇 作用机制

机构

58 篇 华南农业大学
29 篇 中国农业大学
26 篇 扬州大学
26 篇 河南农业大学
23 篇 吉林大学
21 篇 东北农业大学
20 篇 兽医公共卫生安全...
15 篇 南京农业大学
14 篇 华中农业大学
13 篇 国家兽药残留基准...
11 篇 新疆农业大学
11 篇 湖南农业大学
10 篇 四川农业大学
9 篇 北京农学院
7 篇 沈阳农业大学
7 篇 内蒙古农业大学
6 篇 国家兽药残留基准...
6 篇 西北农林科技大学
6 篇 中国农业科学院兰...
6 篇 河北农业大学

作者

21 篇 王志强
20 篇 孙坚
19 篇 汪洋
17 篇 曾振灵
16 篇 沈建忠
14 篇 胡功政
13 篇 刘雅红
13 篇 吴聪明
11 篇 刘源
11 篇 苑丽
11 篇 黄玲利
10 篇 任昊
10 篇 杜向党
9 篇 李剑勇
9 篇 刘建华
8 篇 贺丹丹
8 篇 李瑞超
7 篇 刘德俊
7 篇 王丽平
7 篇 王建锋

语言

370 篇 中文

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非核糖体环脂肽brevicidine抗大肠杆菌的作用机制研究

非核糖体环脂肽brevicidine抗大肠杆菌的作用机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：钟欣益赵兴洪殷中琼四川农业大学动物医学院天然药物研究中心

[目的]本试验旨在探究非核糖体环脂肽brevicidine对大肠杆菌的抗菌机制。[方法]首先通过微量肉汤稀释法测定brevicidine对大肠杆菌CVCC3749的最小抑菌浓度,并通过平板计数测定其杀菌曲线;通过扫描电镜观察brevicidine对大肠杆菌形态的影... 详细信息

[目的]本试验旨在探究非核糖体环脂肽brevicidine对大肠杆菌的抗菌机制。[方法]首先通过微量肉汤稀释法测定brevicidine对大肠杆菌CVCC3749的最小抑菌浓度,并通过平板计数测定其杀菌曲线;通过扫描电镜观察brevicidine对大肠杆菌形态的影响;使用荧光探针氮苯基-1-萘胺（N-Phenyl-l-Napthylamine,NPN）、碘化丙啶（propidiumiodide,PI）、DiSC3（5）、刃天青以及增强型ATP检测试剂盒和活性氧检测试剂盒,检测brevicidine对大肠杆菌CVCC3749细胞膜通透性、膜电位、NADH含量、ATP和活性氧水平的影响;最后,测定了brevicidine与不同浓度的革兰氏阴性菌膜脂成分脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）、磷脂酰甘油（Phosphatidylglycerol,PG）、心磷脂（cardiolipin,CL）、磷脂酰乙醇胺（Phosphatidyl ethanolamine,PE）混合后的MIC值,并通过等温量热滴定仪测定其与LPS、PG、CL的结合常数,测定了其靶点亲和力。[结果] Brevicidine对大肠杆菌CVCC3749 MIC为1μM,且1、2、4 MIC brevicidine在4h内,能够快速杀死大肠杆菌CVCC3749;经1 MIC brevicidine处理15 min的大肠杆菌形态不规则且有不同程度的皱缩,处理120 min后,大部分大肠杆菌被裂解;0.5、1、2 MIC brevicidine处理对大肠杆菌CVCC3749细胞膜通透性无影响,值得注意的是处理后细胞膜电位水平升高、NADH含量升高、ATP水平下降、活性氧水平升高,且呈剂量效应关系;brevicidine与0-128μg/mL LPS、PG、CL混合后,MIC呈随化合物浓度呈剂量依赖性增加,而与128μg/mL PE混合后其MIC保持不变;同时,brevicidine与LPS、CL和PG的结合常数kD值分别为1.79*10、1.56*10和1.70*10mol/L。[讨论]抗生素耐药危机日趋严峻,迫切需要开发具有新型作用机制的抗生素用于兽医临床。LPS、PE、PG和CL是革兰氏阴性菌细胞被膜的主要成分,是筛选新抗生素的潜在靶点,其中,brevicidine的作用靶点PG和CL与细胞形状和呼吸链密切相关,本研究结果表明,brevicidine可与LPS、PG、CL结合,具有多个作用靶点的特性,有利于遏制细菌耐药性的产生,对细菌耐药性防控具有重要意义。[结论] Brevicidine通过与革兰氏阴性菌细胞被膜成分LPS、PG、CL相互作用,耗散其质子动力,抑制NADH脱氢和ATP合成,并导致活性氧累积,从而发挥其良好的抗革兰氏阴性菌活性。

关键词： brevicidine 细菌耐药性抗菌机制大肠杆菌

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TLR2抑制剂的虚拟筛选、定量构效关系和生物活性预测

TLR2抑制剂的虚拟筛选、定量构效关系和生物活性预测

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者： Muhammad Ishfaq 李继昌姜国松何中林黄冈师范学院计算机学院东北农业大学动物医学学院

引言/目的Toll样受体-2 （TLR2）在多种炎症性疾病中扮演着重要的作用,如肠道炎症、阿尔茨海默病、神经炎症、心血管疾病以及由病原微生物引起的感染,抑制TLR2可能是防治炎症性疾病的关键靶点。近年来,分子虚拟筛选在开发新药方面取得... 详细信息

引言/目的Toll样受体-2 （TLR2）在多种炎症性疾病中扮演着重要的作用,如肠道炎症、阿尔茨海默病、神经炎症、心血管疾病以及由病原微生物引起的感染,抑制TLR2可能是防治炎症性疾病的关键靶点。近年来,分子虚拟筛选在开发新药方面取得了重大突破,但还受到诸多限制,且成本颇高。机器学习技术有望解决这些问题,它提供了一种快速有效的方法来预测类药物分子的生物活性,目前在制药业中该技术已得到应用并取得重大的研究进展。机器学习技术的不断改进,以及药理学数据的不断累积,正在彻底改变传统的药物设计方法。本研究强调了计算机辅助开发新药的潜力,并利用机器学习技术从天然药物分子中筛选出TLR2抑制剂,为解决TLR2驱动的炎症性疾病,开发新的治疗方法奠定理论基础。材料与方法本研究采用机器学习模型来预测TLR2抑制剂的生物活性。首先利用分子对接技术筛选出抑制TLR2受体的活性化合物,然后利用回归和分类机器学习算法建立定量结构-活性关系（QSAR）模型来预测所筛选的化合物的生物活性。而后专门为TLR2抑制剂建立了一个"随机森林（RF）"的机器学习模型,以进一步对筛选得到的化合物的生物活性进行预测分析。结果与讨论通过分子对接技术从ChEMBL数据库中检索得到了28个小分子化合物,并将其用于QSAR建模。建立的QSAR模型表现出明显的稳定性,化合物训练集的平方相关系数（R2）值为0.85,化合物验证集的R2值为0.84。对机器学习模型进行训练后,通过该模型预测了传统中药化合物数据库中前50个候选化合物的pIC50值（衡量药物效力的一个指标）。同时还研究了分子描述符和指纹图谱作为参与调节抑制活性的结构元素。这些结果提供了一种适用于高通量筛选的QSAR和分类模型的定量分析方法,并深入揭示了TLR2拮抗剂的抑制机制。

关键词： TLR2抑制剂 QSAR 机器学习模型炎症虚拟筛选

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黄芩苷调控脂质代谢干预鸡毒支原体感染的机制研究

黄芩苷调控脂质代谢干预鸡毒支原体感染的机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：包佳鑫宝力格郭玉全王可鑫李继昌东北农业大学动物医学学院

引言/目的鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）是引起禽类慢性呼吸道疾病的重要病原体之一,严重危害着全球养禽业的发展。目前亟需开发有效控制MG感染的治疗药物,由此进一步了解宿主和MG之间的关系至关重要。本课题组已证实黄芩... 详细信息

引言/目的鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）是引起禽类慢性呼吸道疾病的重要病原体之一,严重危害着全球养禽业的发展。目前亟需开发有效控制MG感染的治疗药物,由此进一步了解宿主和MG之间的关系至关重要。本课题组已证实黄芩苷对MG感染具有良好的治疗效果,并可有效改善MG引起的鸡脂质代谢重编程,但具体药效学机制不明。本研究拟以MG的毒力蛋白pvpA为切入点,通过精准干预和靶向调节达到抑制MG感染的作用,为进一步探究黄芩苷抗MG感染的分子药效学机制提供理论依据。材料与方法基于本课题组对MG外泌体进行的蛋白质谱鉴定结果,通过与黄芩苷分子对接筛选出pvpA蛋白进行研究。通过生物信息学方法分析pvpA蛋白的结构功能,构建pGEX-6p-1-pvpA重组质粒并进行表达纯化,将获得的pvpA蛋白接种于鸡HD11细胞,利用激光共聚焦、AO/EB染色等方法验证其功能。通过pull down实验结合质谱分析获得与pvpA蛋白互作的宿主蛋白,从中筛选出宿主GRP78蛋白。进一步构建HD11细胞GRP78敲低模型,通过超微结构检查、RTPCR和Western Blot法综合分析黄芩苷改善MG引起的脂质代谢重编程和炎症损伤的分子机制。结果与讨论生物信息学分析结果显示,pvpA蛋白是MG一种具有黏附功能的兼职蛋白,经激光共聚焦检测证明其对HD11细胞具有黏附功能。ELISA和RTPCR检测结果显示pvpA蛋白可刺激HD11细胞分泌炎性细胞因子,诱导炎症反应,并引起细胞鞘脂代谢紊乱。HD11细胞敲低GRP78后,缓解了pvpA蛋白引起的细胞炎症损伤,显著改善了pvpA导致的细胞异常超微结构变化,并恢复了鞘脂代谢相关基因的表达水平,敲低GRP78后上述结果与黄芩苷干预效果相当。综上所述,MG的pvpA蛋白可黏附于HD11细胞表面,并具有多种兼职功能,如引起HD11细胞发生炎症反应和鞘脂代谢紊乱,其可能的分子机制是通过pvpA蛋白/宿主GRP78蛋白的互作来实现的,而黄芩苷可以通过靶向干预pvpA蛋白释放宿主GRP78蛋白从而发挥抗MG作用。

关键词：鸡毒支原体脂质代谢鞘脂代谢黄芩苷 pvpA蛋白

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血根碱恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素敏感性的作用及机制研究

血根碱恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素敏感性...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：马强陈诗奇王嗣涵王梓乐张帅孙博彦覃麟茜杨柳江海洋中国农业大学动物医学院

[目的]为揭示天然产物血根碱(Sanguinarine,SAN)恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对β-内酰胺类抗生素敏感性的内在机制。[材料与方法]通过药敏试验了解金葡菌分离株的耐药情况;借助计... 详细信息

[目的]为揭示天然产物血根碱(Sanguinarine,SAN)恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对β-内酰胺类抗生素敏感性的内在机制。[材料与方法]通过药敏试验了解金葡菌分离株的耐药情况;借助计算化学手段开展基于β-内酰胺酶BlaZ的分子特征分析及天然产物抑制剂的高通量虚拟筛选,并结合协同抗菌试验进行确证;利用分子模拟、荧光淬灭及等温滴定量热技术(ITC)分析相互作用;结合透射电镜(TEM)进行细菌形态学观察;以荧光定量PCR (qRT-PCR)方法明确SAN所影响的基因及调控通路。[结果与讨论]结果显示:金葡菌分离株对青霉素类药物具有最为突出的耐药率,青霉素(100%),氨苄西林(82.61%)。同时,对菌株携带的β-内酰胺酶BlaZ进行克隆表达及分子特征分析,可知SER70、LYS73及ASN132等催化水解腔中的残基具备高度保守性并参与β-内酰胺类药物的水解。此外,浓度为2～4μg/mL的SAN能使标准株MRSA 33591及分离株对氨苄西林的最小抑菌浓度(MIC)降低约16倍。SAN也可与BlaZ的LYS73和TYR105等残基键合而产生互作,在长达1200 ns的全原子动力学模拟中表现出持续的稳定性。等温滴定量热技术测定可知,SAN与β-内酰胺酶BlaZ存在直接的结合活性。值得注意的是,TEM观察发现SAN可显著影响MRSA细胞壁的组织和交联,即在2～4μg/ml的SAN浓度下,存在PBP2a蛋白的MRSA菌株细胞壁出现明显的粗糙和散乱,呈缺乏交联的形貌,而敏感菌株(MSSA)细胞壁并未发生上述显著变化,且在qRT-PCR试验结果中获得一致性发现,表明SAN可通过影响PBP2a依赖及非依赖途径扰动MRSA细胞壁的稳态。综上,本研究中的天然产物血根碱可通过多重生物学效应恢复MRSA菌株的药物敏感性,包括影响β-内酰胺酶BlaZ和PBP2a的水平及功能,破坏细胞壁合成及代谢稳态等方面,可为MRSA菌株的防控和耐药性的缓解提供有效的策略。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌血根碱 β-内酰胺类抗生素 β-内酰胺酶细胞壁

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3株鸡源大肠杆菌生物被膜态与浮游态的活性及功能差异分析

3株鸡源大肠杆菌生物被膜态与浮游态的活性及功能差异分析

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：陶梦珂赵恒李苗苗张鲁星石晴晴胡功政苑丽刘建华河南农业大学动物医学院

引言/目的大肠杆菌生物被膜引起的感染难以根除,其耐药机制备受关注。本研究旨在探索同一株菌在生物被膜态与浮游态下的活性及功能差异,为进一步探究其耐药性机制奠定基础。材料与方法分别测定强、中、弱成膜能力的鸡源大肠杆菌EL8、EM3... 详细信息

引言/目的大肠杆菌生物被膜引起的感染难以根除,其耐药机制备受关注。本研究旨在探索同一株菌在生物被膜态与浮游态下的活性及功能差异,为进一步探究其耐药性机制奠定基础。材料与方法分别测定强、中、弱成膜能力的鸡源大肠杆菌EL8、EM3、ES10在24h内的生长曲线及其12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、84 h的被膜周期生成量,比较阿米卡星、头孢噻呋、多西环素、氟苯尼考、环丙沙星、庆大霉素、黏菌素7种抗菌药物对以上菌株在生物被膜态和浮游态的最小抑菌质量浓度（MIC）、最小杀菌质量浓度（MBC）,并对两种状态下的菌株进行疏水性、菌体自聚性、内外膜通透性、ATP含量、活性氧水平、外排泵功能测定。结果与讨论3株大肠杆菌的24 h内的生长曲线无明显差别,但被膜周期生成量结果表明在整个时间段内被膜产生量EL8>EM3>ES10,且在72 h达到最高峰,差异显著（P<0.05）。MIC、MBC测定结果显示各抗菌剂对生物被膜态的抑菌浓度、杀菌浓度高于浮游态,分别增大1.25～160倍、1.25～640倍,说明各菌株形成生物被膜后耐药性明显增强。良好的疏水性和较强的自凝集能力都能促进早期生物被膜的形成。本研究的疏水性和自聚合试验结果显示,与浮游态相比,3株菌株生物被膜态的外膜疏水性和菌体自聚合能力均有所增强,且差异极显著（P<0.01）。细胞外膜可以保护细菌细胞免受抗菌药物的影响,为了到达菌体内部,抗菌药物必须克服细菌内外膜屏障。本研究发现,无论成膜能力强弱,3株菌株生物被膜态的内外膜通透性均强于浮游态,但强成膜菌株EL8外膜差异不显著,其余均差异极显著（P<0.01）。ATP作为最重要的能量分子,其水平的改变可以影响细胞功能。外排泵通过将包括抗菌药物在内的细胞内毒素从细胞内泵出,从而使耐药性增加。本研究发现以上菌株生物被膜形成后,ATP及活性氧水平升高,外排泵表达增加。以上结果表明强、中、弱成膜能力菌株在生物被膜形成后,其活性及功能均有所增强。

关键词：大肠杆菌生物被膜生长曲线 MIC 内外膜通透性外排泵

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七叶皂苷可通过Keap1/Nrf2激活抗氧化和自噬作用,从而缓解非酒精性脂肪肝病

七叶皂苷可通过Keap1/Nrf2激活抗氧化和自噬作用,从而缓解非酒精...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：于浩严斯如金美玉冯海华吉林大学动物医学学院

引言/目的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是人和动物中常见的代谢性肝脏疾病。七叶皂苷（Aescin）是一种从七叶皂苷成熟的干果中提取的三萜类皂苷,已被证明具有抗炎以及抗水肿等多种生理活性,本文研究了Aes对NAFLD的缓解作用并且探究了其... 详细信息

引言/目的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是人和动物中常见的代谢性肝脏疾病。七叶皂苷（Aescin）是一种从七叶皂苷成熟的干果中提取的三萜类皂苷,已被证明具有抗炎以及抗水肿等多种生理活性,本文研究了Aes对NAFLD的缓解作用并且探究了其背后的分子机制。材料与方法本研究通过油酸和棕榈酸构建HepG2细胞的脂质积累模型进行体外验证,并且分别使用泰洛沙泊诱导的急性脂质代谢紊乱模型以及高脂饮食引起的小鼠NAFLD模型进行体内实验。本实验使用的实验方法主要有蛋白免疫印迹、组织细胞染色（BODIPY、油红O）、酶联免疫吸附实验、流式细胞术以及计算机软件模拟技术等。结果在体外和体内实验中,我们发现Aes能够有效改善了细胞模型以及动物模型肝脏的脂质蓄积以及甘油三酯（TG）含量,并且能够降低活性氧（ROS）的含量,上调谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化物质的含量,对抗氧化相关蛋白和自噬标志蛋白的检测证明了Aes能够激活核转录因子红系2相关因子2 （Nrf2）及其下游蛋白并且促进细胞自噬。然而,Aes在自噬相关蛋白5（Atg5）敲除的NAFLD小鼠中失去了降脂作用,而在Nrf2敲除小鼠中,Aes在失去了抗氧化功能的同时也丢失了降脂效果。进一步的研究中,我们使用软件模拟对接发现Aes可能与Kelch ECH相关蛋白1 （Keap1）间存在氢键、疏水键等多种作用力,这可能使得Aes促进Nrf2的保留并向细胞核的转移并发挥其功能。除此之外,在Nrf2敲除小鼠中,我们检测了Lc3/p62蛋白,发现它们在Nrf2敲除小鼠中的表达不同于野生型小鼠,Aes对肝脏自噬的促进作用受到阻碍。这表明Aes诱导自噬的作用可能与Nrf2通路有关。结论我们首次发现Aes对NAFLD具有一定的治疗作用,能够在肝脏中发挥促进自噬和抗氧化应激的功能。而Aes的这种治疗效果可能是通过与Keap1结合,通过影响Nrf2的激活来调节肝脏的抗氧化功能和自噬功能发挥的。

关键词：非酒精性脂肪肝病七叶皂苷 Nrf2 自噬脂质积累

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中草药提取物S4抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在牛乳腺炎上皮细胞中的胞内感染及其诱发的炎性反应

中草药提取物S4抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在牛乳腺炎上皮细胞...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：汪艳徐倩倩张卓慧曲诗音谭俊杰李丕顺郑晓峰湖南农业大学动物医学院

乳腺炎是影响世界乳业发展最重要的疾病之一,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的出现使得问题愈加严重。中草药提取物S4具有抗菌、抗炎的生物活性作用,但其对MRSA性乳腺炎的作用仍有待研究。本研究旨在探究MRSA感染对牛乳上皮细胞（BM... 详细信息

乳腺炎是影响世界乳业发展最重要的疾病之一,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的出现使得问题愈加严重。中草药提取物S4具有抗菌、抗炎的生物活性作用,但其对MRSA性乳腺炎的作用仍有待研究。本研究旨在探究MRSA感染对牛乳上皮细胞（BMECs）的影响及S4的保护作用。首先通过MRSA感染的时间梯度和剂量梯度实验,优化MRSA胞内感染最适处理条件,再用不同浓度的S4进行预处理,探究其对MRSA感染的影响。CCK-8结果显示,1×10～5～1×10～9 CFU/mL的MRSA处理对BMECs的活力没有显著影响。菌落计数结果显示,不同感染复数（MOI=1、10、100）的MRSA处理,BMECs胞内菌的数量随着MOI升高而增加,MOI=100组的胞内菌数量最多,用于后续实验。MRSA （MOI=100）感染BMECs不同时间（0、2、4、6、8 h）后,结果显示,相较于对照组,BMECs胞内菌的数量在2h显著增加,在4～8h随时间增加而显著升高,8h胞内菌数量最多。实时荧光定量PCR （qPCR）的结果显示,MRSA感染6h和8h显著升高BMECs中炎性细胞因子IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA相对表达量,诱发BMECs炎性反应。不同浓度（0、0.078、0.156、0.3125、0.625、1.25、1.875、2.5 mg/mL）的S4处理BMECs,CCK-8结果显示,1.875和2.5 mg/mL显著降低BMECs细胞活力,最后选用0.3125、0.625 mg/mL的S4进行后续实验。0.3125和0.625 mg/mL的S4预处理12 h后,MRSA （MOI=100）感染8 h,菌落计数结果显示,S4显著降低BMECs胞内菌的数量,显著下调BMECs中炎性细胞因子IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA相对表达量。综上所述,MRSA胞内感染可以诱发牛乳腺上皮细胞炎性反应,而中草药提取物S4可以抑制MRSA的胞内感染,缓解炎性反应。该研究为进一步探究S4保护MRSA感染引起的乳腺炎的机制奠定了实验基础,也为其用于防治MRSA性乳腺炎提供了科学依据。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌牛乳腺上皮细胞乳腺炎中草药提取物胞内感染

来源：评论

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吉林省不同源大肠杆菌氟喹诺酮耐药传播研究

吉林省不同源大肠杆菌氟喹诺酮耐药传播研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：朱道咪刘悦李雅卓颜亚松孔令聪马红霞吉林省新兽药研发与创制重点实验室吉林农业大学动物科学技术学院动物医学院生物反应器与药物开发教育部工程研究中心吉林农业大学生命科学学院

近些年氟喹诺酮类药物(FQs)耐药率的升高仅次于氨苄西林与哌拉西林,达到了61.5%(2022年),FQs耐药机制为靶位的突变引起的耐药(QRDR),质粒携带FQs耐药基因(PMQR)(低水平耐药),外排泵对FQs的排出,以及细菌细胞膜对药物的渗透性降低。因此,... 详细信息

近些年氟喹诺酮类药物(FQs)耐药率的升高仅次于氨苄西林与哌拉西林,达到了61.5%(2022年),FQs耐药机制为靶位的突变引起的耐药(QRDR),质粒携带FQs耐药基因(PMQR)(低水平耐药),外排泵对FQs的排出,以及细菌细胞膜对药物的渗透性降低。因此,FQs耐药主要由染色体突变引起,水平传播不是引起FQs耐药的主要途径,但相关研究表明FQs耐药质粒对高水平耐药具有选择性,为此探究不同源FQs耐药原因(QRDR与PMDR),了解FQs耐药菌株间是否存在克隆传播,耐药菌株质粒携带情况以及寻找降低FQs靶位突变以减少耐药性形成的方案迫在眉睫。采集食品动物源、伴侣动物源、人源FQs耐药大肠杆菌,检测其对FQs等临床常用抗菌药物的耐药性,针对FQs耐药菌株使用(CCCP、PAβN)外排泵抑制剂检测对FQs的耐药性,使用PFGE探究这些菌株是否存在克隆传播。PCR扩增QRDR(gyrA、gyrB、parC、parE)并测序,检测PMQR的携带情况。我们共分离得到99株大肠杆菌(97株FQs耐药),其中食品动物源32株,伴侣动物源33株,人源34株。分离株对氟苯尼考、多西环素、头孢曲松、庆大霉素出现不同程度的耐药性,最主要的是在食品动物及伴侣动物源出现多粘菌素耐药株,未发现替加环素及美罗培南耐药株。PFGE显示,不同源FQs耐药株出现克隆传播现象。FQs耐药菌株中97株为QRDR,PMQR有53株(2株不耐药),其中qnrS携带最多22株,再者食品动物源未发现qnrC及qepA,伴侣动物源未发现qnrA,人源菌株8种PMQR均携带。QRDR中gyrA、parC突变率最高、其次为parE、gyrB,再者gyrA突变为点主要为Ser83及Asp87位点,ParC主要为Ser80及Ala56位点。靶位突变数量与MIC之间的关系分析发现,靶位突变与MIC之间具有相关性。不同源FQs耐药菌株间存在克隆传播,质粒携带中不存在食品动物qnrC及qepA和伴侣动物qnrA传播至人,FQs耐药主要由QRDR引起,PMQR可促进高水平FQs耐药的出现。研究FQs靶位突变的机制,为寻找抑制靶位突变的靶点重要性提供理论依据。

关键词： FQs 大肠杆菌 PFGE QRDR PMQR

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二氢杨梅素通过抑制STAT3/IL-17A信号通路缓解LPS诱导的鸡肝损伤

二氢杨梅素通过抑制STAT3/IL-17A信号通路缓解LPS诱导的鸡肝损伤

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：韩晓玺王佳琦刘芳萍东北农业大学动物医学学院

目的细菌性疾病的频发制约着养殖业的发展,脂多糖(LPS)可通过介导炎症因子的产生引起机体肝脏损伤。本研究旨在探讨二氢杨梅素(DHM)能否通过抑制STAT3/IL-17A信号通路来缓解LPS诱导的鸡肝损伤,为DHM在畜禽养殖业的应用和保肝药物的开发... 详细信息

目的细菌性疾病的频发制约着养殖业的发展,脂多糖(LPS)可通过介导炎症因子的产生引起机体肝脏损伤。本研究旨在探讨二氢杨梅素(DHM)能否通过抑制STAT3/IL-17A信号通路来缓解LPS诱导的鸡肝损伤,为DHM在畜禽养殖业的应用和保肝药物的开发提供理论依据。材料与方法将7日龄雏鸡随机分为4组:空白对照组、LPS模型组、LPS+DHM组、DHM对照组。采用试剂盒检测血清中ALT、AST和LDH活性和炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α和TGF-β)含量,H&E染色法进行肝脏病理组织学检查,RT-PCR法检测肝脏中炎症因子、STAT3、IL-17A和TRAF6的mRNA相对表达水平,Western Blot法检测STAT3和TRAF6蛋白表达。结果与讨论结果表明,经LPS处理后,雏鸡血清中ALT、AST和LDH的活性极显著高于空白对照组(p<0.01);与LPS模型组相比,给予DHM可以极显著降低血清中ALT、AST和LDH的活性(p<0.01)。病理组织学检查结果显示,空白对照组和DHM对照组中肝细胞索结构完整,细胞形态正常;LPS处理后,肝细胞索结构紊乱,伴有炎性细胞浸润和出血点;与LPS模型组相比,给予DHM可使肝细胞索结构清晰,细胞形态趋于正常。与空白对照组相比,LPS模型组中IL-1β、IL-6、TNF-α和TGF-β的含量及mRNA表达水平极显著升高(p<0.01);给予DHM可极显著降低IL-1β、IL-6、TNF-α和TGF-β含量及mRNA表达水平(p<0.01)。与空白对照组相比,LPS模型组中STAT3、IL-17A和TRAF6的mRNA表达水平极显著升高(p<0.01);给予DHM可极显著降低肝脏中STAT3、IL-17A和TRAF6的mRNA表达水平(p<0.01)。与空白对照组相比,LPS模型组p-STAT3/STAT3比值、IL-17A含量和TRAF6蛋白表达均极显著升高(p<0.01);给予DHM可极显著降低p-STAT3/STAT3比值、IL-17A含量和TRAF6蛋白表达(p<0.01)。综上所述,LPS可激活STAT3/IL-17A信号通路诱导雏鸡肝损伤,DHM可通过抑制STAT3/IL-17A信号通路减轻肝脏炎症反应,从而对肝损伤产生良好的缓解作用。

关键词：二氢杨梅素 STAT3/IL-17A信号通路鸡肝损伤 LPS

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甲霜灵对映体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除规律研究

甲霜灵对映体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除规律研...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：周豪张媚玉单奇黄河清郑光明尹怡中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部水产品质量安全风险评估实验室

[目的]甲霜灵（metalaxyl）是一种手性酰胺类杀菌剂,广泛用于预防和治疗真菌感染引起的各种淡水鱼类疾病。甲霜灵两个对映体（R-甲霜灵和S-甲霜灵）在毒性和生物活性上具有显著差异,但在水产养殖中仍以外消旋体形式使用。本文基于优化... 详细信息

[目的]甲霜灵（metalaxyl）是一种手性酰胺类杀菌剂,广泛用于预防和治疗真菌感染引起的各种淡水鱼类疾病。甲霜灵两个对映体（R-甲霜灵和S-甲霜灵）在毒性和生物活性上具有显著差异,但在水产养殖中仍以外消旋体形式使用。本文基于优化的甲霜灵对映体分离分析方法,分别研究了外消旋体甲霜灵和高活性对映单体R-甲霜灵给药后,两个对映单体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除特征,为该手性兽药在临床上的合理使用提供理论依据。[方法]试验乌鳢共150尾（体重300 g左右）,随机分为两组,分别用外消旋体甲霜灵（9 mg/L）和单一对映体R-甲霜灵（4.5 mg/L）药浴2 h。于给药后不同时间点采集血浆和组织（肌肉、肝脏和肾脏）样品。血浆样品用0.1%甲酸乙腈沉淀蛋白、离心,上清液过膜上机分析。组织样品用0.1%甲酸乙酸乙酯萃取,正己烷除脂,氮气吹干后,残渣用流动相复溶,过膜上机分析。采用EnantioPak?Y1R手性色谱柱（150 mm×4.6 mmi.d.,5μm）进行对映体分离,以乙腈-水-甲酸（75/25/0.1,v/v/v）为流动相进行等度洗脱,甲霜灵-D6为内标,在正离子模式下进行多反应监测分析。采用WinNonlin软件的非房室模型进行拟合,分别计算R-甲霜灵和S-甲霜灵的药代动力学参数。[结果]外消旋体甲霜灵给药时,R-甲霜灵和S-甲霜灵的药代动力学参数如下:达峰浓度(C)分别为4.76μg/mL和5.70μg/mL,药时曲线下面积（AUC）分别为25.4μgh/mL和32.1μgh/mL,消除半衰期(t)分别为20.8 h和25.4h。甲霜灵在组织中的浓度依次为肾脏>肝脏>肌肉,并且在三种组织中S-甲霜灵的浓度都高于R-甲霜灵。R-甲霜灵给药时,在血浆和组织中均未检测到S-甲霜灵,表明甲霜灵在乌鳢体内未发生对映体之间的转化;R-甲霜灵的药代动力学参数C、AUC和t分别为4.21μg/mL、22.0μgh/mL和17.1 h。[结论]甲霜灵在乌鳢体内的消除具有立体选择性,R-甲霜灵消除更快;并且甲霜灵在乌鳢体内不会发生对映体之间的转化。鉴于此,临床上使用高效低毒的R-甲霜灵代替外消旋体甲霜灵可能是更好的选择。

关键词：甲霜灵对映体乌鳢立体选择性药代动力学残留消除规律

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