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370 篇 会议

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363 篇 农学
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- 1 篇 中西医结合
3 篇 教育学
- 3 篇 教育学
2 篇 法学
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主题

9 篇 耐药性
8 篇 耐药基因
8 篇 大肠杆菌
5 篇 二氢杨梅素
4 篇 黄芩苷
4 篇 金黄色葡萄球菌
4 篇 氧化应激
4 篇 生物被膜
3 篇 兽医药理学
3 篇 线粒体自噬
3 篇 沙门菌
3 篇 外排泵
3 篇 自噬
3 篇 耐药菌
3 篇 鼠伤寒沙门菌
3 篇 黏菌素
3 篇 鸡毒支原体
2 篇 四环素降解酶
2 篇 细胞焦亡
2 篇 作用机制

机构

58 篇 华南农业大学
29 篇 中国农业大学
26 篇 扬州大学
26 篇 河南农业大学
23 篇 吉林大学
21 篇 东北农业大学
20 篇 兽医公共卫生安全...
15 篇 南京农业大学
14 篇 华中农业大学
13 篇 国家兽药残留基准...
11 篇 新疆农业大学
11 篇 湖南农业大学
10 篇 四川农业大学
9 篇 北京农学院
7 篇 沈阳农业大学
7 篇 内蒙古农业大学
6 篇 国家兽药残留基准...
6 篇 西北农林科技大学
6 篇 中国农业科学院兰...
6 篇 河北农业大学

作者

21 篇 王志强
20 篇 孙坚
19 篇 汪洋
17 篇 曾振灵
16 篇 沈建忠
14 篇 胡功政
13 篇 刘雅红
13 篇 吴聪明
11 篇 刘源
11 篇 苑丽
11 篇 黄玲利
10 篇 任昊
10 篇 杜向党
9 篇 李剑勇
9 篇 刘建华
8 篇 贺丹丹
8 篇 李瑞超
7 篇 刘德俊
7 篇 王丽平
7 篇 王建锋

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370 篇 中文

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赤芍对MRSA引起细胞焦亡的抑制作用及机制

赤芍对MRSA引起细胞焦亡的抑制作用及机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：高毅玖黄筱琳赵筱蒙薛喜博孙英健北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室

[引言]金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌,可以分泌多种毒素,激活多种细胞并诱导产生大量炎性因子引起细胞焦亡。中药赤芍具有抗炎、抗损伤等多种药理作用,体内实验表明赤芍可以降低金葡菌感染时炎性因子IL-1β的表达,从而降低细胞炎性... 详细信息

[引言]金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌,可以分泌多种毒素,激活多种细胞并诱导产生大量炎性因子引起细胞焦亡。中药赤芍具有抗炎、抗损伤等多种药理作用,体内实验表明赤芍可以降低金葡菌感染时炎性因子IL-1β的表达,从而降低细胞炎性反应。本文探究中药赤芍对金葡菌感染***926细胞诱导细胞焦亡的作用及内在机制。[材料与方法]CCK-8法检测细胞活性;检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Hochest 33324/PI荧光染色;Western blot检测细胞焦亡关键蛋白GSDMD、caspase-1、caspase-4、casepase-5;炎性因子IL-1β、IL-18表达情况。[结果与讨论]以1×10～4 CFU/mL MRSA ST-59感染***926细胞建立血管内皮细胞焦亡模型。结果可见,***926细胞活性显著降低、细胞LDH释放量、PI阳性细胞率、GSDMD-NT表达量显著升高,说明MRSA ST-59感染时细胞活性降低,GSDMD被切割活化,在细胞膜穿孔,诱导细胞焦亡。WB检测结果表明IL-1β、IL-18表达量显著升高,说明MRSA ST-59感染可以诱导内皮细胞释放大量炎性因子,诱导后续炎症反应。检测细胞焦亡相关通路蛋白caspase-1、4、5发现,caspase-1表达量无显著性差异;caspase-4、5表达量较对照组显著增加,说明MRSA ST-59并非通过caspase-1介导的经典通路诱导焦亡,而是通过caspase-4、5非经典通路诱导细胞焦亡。分别以500、1000、2000μg/mL赤芍干预MRSA ST-59感染的***926细胞,结果显示,***926细胞活性、LDH释放量、PI阳性细胞率均随赤芍提取物浓度升高而增加,且存在显著性差异,说明赤芍干预可显著减轻细胞膜损伤,使细胞活性呈剂量依赖性升高。WB检测结果可得GSDMD-NT、IL-1β、IL-18表达量均呈现剂量依赖性下降,说明赤芍提取物可以减轻GSDMD被切割的程度,减少金葡菌诱导的GSDMD-NT活化,抑制细胞膜穿孔程度,进而剂量依赖性减少细胞焦亡的发生,降低金葡菌感染导致的炎症因子释放,减轻炎症反应的发生。细胞焦亡非经典通路蛋白caspase-4、5的表达量降低,说明赤芍通过抑制caspase-4、5的活化,从而通过干预非经典通路抑制细胞焦亡的发生。[结论]赤芍提取物可以抑制GSDMD活化,抑制IL-1β及IL-18的产生,通过抑制非经典细胞焦亡通路,降低MRSA ST-59对*** 926的损伤,维护内皮细胞屏障的结构完整性,从而促进机体对于金葡菌感染的天然免疫,避免产生大规模炎性风暴达到减轻机体炎症反应及损伤的目的。

关键词：赤芍细胞焦亡 MRSA EA.hy926

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中药复方呼宁散安全性毒理学评价

中药复方呼宁散安全性毒理学评价

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：王巍桑锐葛冰洁闫可心刘馨蔓于明弘张雪梅延边大学农学院

本实验室根据"君臣佐使"原则将蒲公英等中草药进行配伍组方,根据疗效将其命名为"呼宁散",主要用于防治鸡呼吸道疾病综合征。本研究旨在明确呼宁散的毒理作用,评价其安全性。在急性毒性试验中,将20只小鼠（雌雄各半... 详细信息

本实验室根据"君臣佐使"原则将蒲公英等中草药进行配伍组方,根据疗效将其命名为"呼宁散",主要用于防治鸡呼吸道疾病综合征。本研究旨在明确呼宁散的毒理作用,评价其安全性。在急性毒性试验中,将20只小鼠（雌雄各半）随机分为空白组和试验组（呼宁散10 g/kg BW）,所有小鼠灌胃给药1次,连续观察7 d,记录小鼠中毒和死亡情况。在最大给药量试验中,将20只小鼠（雌雄各半）在24 h内分4次灌胃给药（呼宁散10 g/kg BW）,于试验第15 d记录小鼠体重并剖检观察病理变化。在亚急性毒性试验中,将40只小鼠（雌雄各半）随机分为对照组和呼宁散低、中、高剂量组（2.5、5和10 g/kg BW）,连续给药28 d,于末次给药12 h后,对小鼠称重、采血、剖检并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏,计算小鼠体重变化、脏器系数,检测血清中细胞因子（TNF-α、 IL-4和IL-6）的含量,并进行组织病理学检查。在骨髓微核试验中,将50只小鼠（雌雄各半）随机分为空白组、呼宁散低、中、高剂量组（2.5、5和10 g/kg BW）和阳性对照组（环磷酰胺40 mg/kg）,各组小鼠灌胃2次（间隔24 h）,末次给药6 h后处死小鼠并制作骨髓涂片,计算微核率（‰）,另外计数200个红细胞中嗜多染红细胞（PCE）和成熟红细胞（NCE）的比值。在精子畸形试验中,将25只雄性小鼠随机分为空白组、呼宁散低、中、高剂量组（2.5、5和10 g/kg BW）和阳性对照组（环磷酰胺40 mg/kg）,每天灌胃1次,连续给药5 d,于首次灌胃后35 d处死小鼠并制作精子涂片,计算精子畸形率（‰）。在急性毒性试验中,各组小鼠全部存活均未见中毒症状,无法测出呼宁散的半数致死量(LD),测得小鼠对呼宁散的最大耐受量大于40 g/kg BW,说明呼宁散对小鼠无急性毒性。在亚急性毒性试验中,呼宁散有促进小鼠体重增长的作用（P<0.05;P<0.01）,且对各组小鼠主要脏器系数、细胞因子含量均无显著影响（P>0.05）,剖检和病理学检查未见明显异常变化,说明呼宁散无亚急性毒性。在骨髓微核和精子畸形试验中,呼宁散不会对小鼠骨髓微核率及精子畸形率造成影响（P>0.05）,且PCE/NCE比值在正常范围内,说明呼宁散无遗传毒性。10 g/kg BW及以下剂量的呼宁散无毒性作用,安全性好。

关键词：呼宁散鸡呼吸道疾病综合征急性毒性亚急性毒性遗传毒性

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复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果及其对菌群结构的影响研究

复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果及其对菌群结构的影响研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：吕珍林张旭财曾振灵熊文广广东省兽药研制与安全评价重点实验室/国家兽药安全评价(环境评估)实验室/国家兽医微生物耐药性风险评估实验室/华南农业大学兽医学院

引言集约化水产养殖模式伴随着更频繁的疾病发生,给水产养殖业造成了重大的经济损失。水产消毒是预防和控制水产动物疾病的重要措施,还能去除一定量的抗生素耐药细菌(ARB)和抗生素耐药基因(ARGs)。本试验评价复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效... 详细信息

引言集约化水产养殖模式伴随着更频繁的疾病发生,给水产养殖业造成了重大的经济损失。水产消毒是预防和控制水产动物疾病的重要措施,还能去除一定量的抗生素耐药细菌(ARB)和抗生素耐药基因(ARGs)。本试验评价复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果,分析其对ARB和ARGs的去除作用和对养殖水体菌群结构的影响,旨在为实际生产用药提供依据。方法按照《水产养殖用消毒剂药效试验技术指导原则》的要求筛选中和剂,并通过悬液定性、定量杀灭细菌试验,探究不同因素对复合亚氯酸钠泡腾片消毒效果的影响,最后研究其在现场消毒的应用效果。结果实验室试验结果表明得出1%硫代硫酸钠溶液可作为复合亚氯酸钠泡腾片溶液中和剂。复合亚氯酸钠泡腾片溶液的杀菌效果随着有效浓度的升高、作用时间的延长而增强;温度(4～40℃)和pH(2～10)对杀菌效果无明显影响,随着有机物浓度的提高,杀菌率也随之下降。模拟现场消毒试验结果显示当有效浓度为3 mg/L时,作用120 min,对爱德华氏菌ATCC15947的杀灭率达99.99%;作用10min,对嗜水气单胞菌ATCC35654的杀灭率达100%。现场消毒试验结果显示用量为200片/亩时,作用30min对自然菌的杀灭率达100%。以携带抗生素耐药基因sul1和tet(A)的大肠杆菌作为指示菌研究复合亚氯酸钠泡腾片溶液对其的去除效果。综合表明,随着投入浓度的增大,ARB的去除数量增大,细菌膜损伤的比例也随之增大,作用1h时,去除ARB数量可达4.2-logio CFU/mL;而随着浓度的增大,ARGs的去除效果并没有显著的变化。将相同来源的养殖水体分装至养殖水箱,随机分成对照组和试验组,试验组加入3mg/L的复合亚氯酸钠泡腾片,消毒1h和3h后采集样本进宏基因组测序。结果显示,与对照组相比,有益菌属Lactobacillus和Cetobacterium相对丰度升高,但Enterococcus和Pseudomonas等带有条件致病菌的菌属相对丰度也随之升高。结论复合亚氯酸钠泡腾片消毒剂消毒效果良好,能够有效去除ARB和ARGs,对养殖水体菌群结构具有一定的改良作用。

关键词：亚氯酸钠消毒效果抗生素耐药菌抗生素耐药基因菌群结构

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产CTX-M且对多黏菌素耐药大肠杆菌在新疆动物上的流行特点

产CTX-M且对多黏菌素耐药大肠杆菌在新疆动物上的流行特点

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：王芋丹王昊蕊王磊队森·木拉力别克苏战强谢金鑫米晓云佟盼盼新疆农业大学动物医学学院新疆畜牧科学院/新疆动物疫病研究重点实验室兽医研究所

在动物上大量使用抗菌药物导致细菌产生耐药性,可通过食物链或与伴侣动物的接触而传递给人类,给临床治疗细菌性感染带来困难,若不加以控制,会给人类带来严重的疾病负担和经济负担。产CTX-M的菌株,不仅会对β-内酰胺类抗生素表现耐药,还... 详细信息

在动物上大量使用抗菌药物导致细菌产生耐药性,可通过食物链或与伴侣动物的接触而传递给人类,给临床治疗细菌性感染带来困难,若不加以控制,会给人类带来严重的疾病负担和经济负担。产CTX-M的菌株,不仅会对β-内酰胺类抗生素表现耐药,还会携带其他耐药表型,近些年,在人和动物上中均有检出携带CTX-M且同时对多黏菌素耐药的菌株。多黏菌素是一种多肽类抗生素,被称为治疗革兰氏阴性菌的"最后一道防线"。为探究产CTX-M且对多黏菌素耐药大肠杆菌（***）在新疆动物上的流行特点。采用PCR方法得到新疆猪、牛、羊、骆驼、马、鸡、鹅、鸽、犬和猫源产CTX-M ***分离株,采用K-B纸片法对产CTX-M ***进行多黏菌素敏感性检测。对产CTX-M且对多黏菌素耐药***进行药物敏感性检测,并利用PCR方法检测相应的耐药基因;通过滤膜接合试验对产CTX-M且对多黏菌素耐药***耐药表型的水平转移进行研究。148株产CTX-M ***中bla,76.4%;bla,20.3%;2.7%同时携带bla和bla;未检出bla。148株产CTX-M ***中有40株对多黏菌素耐药（除牛源）,这些多黏菌素耐药***对氨苄西林、阿莫西林、复方新诺明、头孢曲松、四环素、链霉素、头孢噻肟和庆大霉素的耐药率为82.5%～100%;对氟苯尼考、磷霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、阿奇霉素、阿米卡星和头孢吡肟耐药率为20.0%～67.5%;对哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁和亚胺培南的耐药率为2.5%～10.0%,40株受试菌均为多重耐药,且以八重（13/40,32.5%）耐药居多,九重（8/40,20.0%）和六重（4/40,10.0%）耐药次之。40株受试株中,其他各耐药基因的检出情况,mcr-1,12.5%;bla,60%;floR,70%;tetA,55%;tetG,17.5%;sul2,37.5%;sul1,17.5%;aadA1,35%;strA,32.5%;aac,17.5%;未检出mcr2～10、bla、bla、strB和tetE。40株受试菌均可同时水平转移头孢噻肟和多黏菌素耐药表型至受体菌J53。产CTX-M且对多黏菌素耐药***在新疆动物上均呈现多重耐药表型,携带多种耐药基因,其携带的头孢噻肟和多黏菌素耐药表型可能由未知基因编码定位在未知质粒上且具备水平转移的能力,应当谨慎使用β-内酰胺类和黏菌素药物,以期减缓耐药性的发展。

关键词：产CTX-M大肠杆菌多黏菌素耐药流行特征动物新疆

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辣蓼黄酮正丁醇部位对伪狂犬病毒感染的猪脾淋巴细胞氧化应激调控作用及转录组学分析

辣蓼黄酮正丁醇部位对伪狂犬病毒感染的猪脾淋巴细胞氧化应激调控...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：陈家骥赵怡胡庭俊广西大学动物科学技术学院

[目的]本研究旨在通过RNA-seq技术探究辣蓼黄酮正丁醇部位（N-butanol fraction of Polygonum hydropiper flavonoids,FNB）对伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）体外感染猪脾淋巴细胞氧化应激相关基因的调控作用。[方法] CCK-8法筛... 详细信息

[目的]本研究旨在通过RNA-seq技术探究辣蓼黄酮正丁醇部位（N-butanol fraction of Polygonum hydropiper flavonoids,FNB）对伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）体外感染猪脾淋巴细胞氧化应激相关基因的调控作用。[方法] CCK-8法筛选FNB（0,12.5,25,50,100,200,400μg/mL）安全浓度后,采用荧光探针法测定FNB对PRV感染猪脾淋巴细胞8 h、12 h、24 h、48 h时ROS水平以及ELISA、RT-qPCR法检测Nrf2、HO-1、iNOS转录和表达水平影响,获得药物最佳浓度及作用时间进行测序,对差异基因进行生物信息学功能分析。[结果]结果发现,各FNB处理组在8 h和12 h时与细胞对照组比较活性均无显著变化（P>0.05）,作用24 h时100μg/mL以下FNB处理对细胞活性无显著影响（P>0.05）,故选取25、50、100μg/mL FNB处理组进行后续试验;12-24 h时各FNB处理组与PRV组比较均能极显著降低ROS水平（P<0.01）;ELISA、RT-qPCR结果显示,12h时50μg/mL FNB处理组与PRV组比较能够显著下调iNOS、HO-1酶活性（P <0.05）,显著上调Nrf2酶活性（P <0.05）。选取50μg/mL FNB作用细胞12 h进行测序并进行生物信息学分析,结果表明,与细胞组相比,PRV感染后得到5482条差异基因,有3997个基因表达上调,1485个基因表达下调。GO富集分析显示差异基因（DEGs）主要富集于分子互作以及对病毒的防御反应、免疫应答等过程。KEGG富集分析显示DEGs主要富集于疾病和免疫通路以及程序性死亡通路;与PRV组相比,FNB处理后得到406条差异基因,有168个基因表达上调,238个基因表达下调。GO富集分析显示DEGs主要富集于细胞信号转导功能以及炎症反应、中性粒细胞趋化性等免疫功能。KEGG富集分析显示DEGs主要富集在IL-17信号通路、Toll样受体信号通路等免疫和炎症相关通路。[结论] FNB对病毒感染诱发的猪脾淋巴细胞的氧化应激具有调控作用。FNB处理后能够降低ROS水平,上调Nrf2同时下调iNOS和HO-1的转录和表达水平。FNB处理后引起免疫功能相关基因及信号通路（IL-17、Toll样受体信号通路）差异表达。FNB能干预PRV感染诱发的炎症反应。

关键词：辣蓼黄酮伪狂犬病毒氧化应激差异转录组

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发酵黄芪和生药黄芪中皂苷及黄酮类化合物含量检测

发酵黄芪和生药黄芪中皂苷及黄酮类化合物含量检测

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：秦哲李建喜李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/甘肃省中兽药工程技术研究中心/甘肃省新兽药工程重点实验室/农业农村部兽用药物创制重点实验室

膜荚黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.)经分离自鸡消化道的益生菌M9发酵,冻干制成发酵黄芪。临床研究表明,1%发酵黄芪连续60天添加于黄羽肉鸡日粮,具有促生长和提高饲料利用率的效果。化学成分分析研究表明,黄芪经发酵后多糖...

膜荚黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.)经分离自鸡消化道的益生菌M9发酵,冻干制成发酵黄芪。临床研究表明,1%发酵黄芪连续60天添加于黄羽肉鸡日粮,具有促生长和提高饲料利用率的效果。化学成分分析研究表明,黄芪经发酵后多糖含量及得率分别提高84.92%和59.34%。目的:本研究检测了发酵黄芪和生药黄芪中皂苷及黄酮类化合物含量,为建立发酵黄芪质量标准提供理论依据。材料与方法:称取含等量黄芪的发酵黄芪和生药黄芪粗粉,用20倍量80%乙醇于80℃回流提取2h,醇提液制成浸膏。采用香草醛-硫酸法于544nm处测定吸光度,绘制黄芪甲苷标准曲线,检测发酵黄芪和生药黄芪醇提浸膏中皂苷含量。参照2020版《中国药典》(一部)黄芪有效成分含量测定方法,应用高效液相色谱法分别检测发酵黄芪和生药黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。结果与讨论:实验结果表明,发酵黄芪和生药黄芪浸膏收率分别为40.26%和38.77%,黄芪皂苷提取率分别为5.58%和6.54%。取适量浸膏溶于50倍量纯水,上样于AB-8大孔树脂柱,用4倍柱体积80%乙醇洗脱,测定出生药黄芪皂苷和发酵黄芪皂苷的动态吸附量为32.6171 mg/g和26.2467 mg/g,80%乙醇对AB-8吸附的发酵黄芪皂苷的洗脱率可达81.23%。高效液相色谱法测定发酵黄芪、生药黄芪中黄芪甲苷含量分别为0.049%和0.087%,毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量分别为0.030%和0.040%。含有等量黄芪的发酵黄芪和生药黄芪中黄芪甲苷的含量分别为0.063%和0.087%,毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量分别为0.038%和0.040%。发酵前后毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量差异不显著,而发酵后黄芪甲苷的含量降低了27.6%。结论:综合高效液相色谱法检测黄芪甲苷含量结果与醇提浸膏中黄芪皂苷含量检测结果发现,黄芪经发酵后皂苷类成分含量有所降低,推测微生物在发酵过程中利用皂苷类成分进行生物转化或者部分皂苷类成分在高温或弱酸性发酵环境中发生降解,具体机制有待进一步探究。实验结果可为发酵黄芪产品的质量控制提供参考。

关键词：

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两头尖总皂苷的提取工艺、化学成分和对免疫应激的调节作用研究

两头尖总皂苷的提取工艺、化学成分和对免疫应激的调节作用研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：田春莲靳兆栋李勃峣周澳华王盈予张路遥刘明春沈阳农业大学动物科学与医学学院

[目的]两头尖是毛茛科植物多被银莲花的干燥根茎,富含皂苷、多糖和黄酮类等化合物,现代研究表明两头尖具有抗肿瘤、抗炎和镇痛等药理作用。本试验以两头尖总皂苷为研究对象,从提取工艺、化学成分和对免疫应激的影响等方面开展研究,为研... 详细信息

[目的]两头尖是毛茛科植物多被银莲花的干燥根茎,富含皂苷、多糖和黄酮类等化合物,现代研究表明两头尖具有抗肿瘤、抗炎和镇痛等药理作用。本试验以两头尖总皂苷为研究对象,从提取工艺、化学成分和对免疫应激的影响等方面开展研究,为研发预防和治疗免疫应激中兽药提供参考依据。[材料与方法]通过单因素试验和响应面优化法考察两头尖总皂苷的最优提取工艺;采用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术初步分析两头尖总皂苷的主要化学成分;采用脂多糖诱导的RAW264.7细胞模型,利用Griess法和中性红试剂法分别检测细胞上清液中信使分子NO含量和细胞吞噬活性;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中免疫相关细胞因子白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-10 (IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度;采用免疫印迹法(Western Blot)检测TLR4-MyD88-NF-κB信号通路中TLR4、MyD88、p-p65和p65蛋白相对表达量,揭示两头尖总皂苷对免疫应激的调节作用机制。[结果与讨论]本研究确定了两头尖总皂苷最优超声提取工艺为:乙醇浓度:50%,液料比:43 (mL/g),提取时间:70 min;初步分析了两头尖总皂苷中的43种化合物,包括34种皂苷、6种有机酸、2种黄酮和1种不饱和脂肪酰胺;体外试验结果表明,两头尖总皂苷能够减少体外信使分子NO含量、抑制细胞吞噬活性、降低体外IL-6、IL-10和TNF-α浓度、下调TLR4-MyD88-NF-κB信号通路中TLR4、MyD88、p-p65和p65蛋白相对表达量,揭示两头尖总皂苷能够通过调控TLR4-MyD88-NF-κB信号通路缓解免疫应激。[结论]本研究明确了两头尖总皂苷的提取工艺、化学成分和对免疫应激的调控作用,并进一步揭示了其可能通过调控TLR4-MyD88-NF-κB信号通路影响免疫应激进程,该研究为抗免疫应激中兽药的研发提供了重要的理论依据。

关键词：两头尖总皂苷提取工艺成分分析免疫应激 TLR4-MyD88-NF-κB信号通路

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基于分子对接虚拟筛选方式筛选猪TLR7的潜在激动剂

基于分子对接虚拟筛选方式筛选猪TLR7的潜在激动剂

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：刘畅李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

[目的]Toll样受体7 （Toll-like receptor 7,TLR7）要参与单链RNA的识别,在胞内病原体感染中发挥作用。TLR7激动剂能够促进免疫细胞成熟,刺激宿主免疫应答,间接发挥抗病毒作用,还表现出一定的抗菌和抗肿瘤活性。因此,本研究目的在于通... 详细信息

[目的]Toll样受体7 （Toll-like receptor 7,TLR7）要参与单链RNA的识别,在胞内病原体感染中发挥作用。TLR7激动剂能够促进免疫细胞成熟,刺激宿主免疫应答,间接发挥抗病毒作用,还表现出一定的抗菌和抗肿瘤活性。因此,本研究目的在于通过计算机虚拟筛选的方式筛选猪TLR7的潜在激动剂,以期为畜禽免疫增强剂的开发提供研究基础,为动物免疫抑制性疾病的预防或治疗提供新的思路,同时为物种特异性TLR7激动剂的筛选、设计提供依据。材料与方法由于PDB数据库中没有可用的猪TLR7结构,因此通过Swiss-model在线平台进行同源建模,预测其三维结构。配体库选择MCE活性库Specs HTS Compounds Library（包含208 518个化合物）,对受体和配体进行前期处理后,在Schr?dinger软件中进行分子对接,分子对接委托MCE公司完成。根据分子对接的打分排名,保留Top200化合物进行进一步筛选。根据Lipinski规则和配体与受体之间的结合能对Top200化合物进行筛选,保留符合Lipinski规则且结合能为负值的化合物并进行聚类分析,对获得的分子簇进行ADMET性质预测,选择口服吸收率高、毒性小的化合物,分析与受体之间的相互作用,初步获得潜在的猪TLR7激动剂。上述操作在Discovery Studio软件中完成。结果与讨论根据分子对接的打分及排名,保留了Top 200的化合物,其中符合Lipinski规则且结合能<0的化合物共有107个。对上述107个化合物进行聚类,得到10个小分子。对这10个化合物进ADMET性质预测,发现这些化合物的吸收率均在95%以上,其中3个化合物的血脑屏障通透性较好,3个化合物可能具有细胞色素CYP26D酶抑制作用,4个化合物可能具有肝毒性。选择吸收率高、毒性低的6个化合物,分析其与受体之间的相互作用方式。受体的GLN 354、VAL 355、PHE 408、LEU 558*、THR 587*、IEL 586、HIS 559*、LYS 432、PHE 408、LEU 558*、TYR 356、TYR351等氨基酸残基参与相互作用（*表示TLR7同源二聚体的B链）,与配体之间主要通过氢键、范德华力以及疏水相互作用等非键相互作用结合。结论基于分子对接虚拟筛选技术,对化合物进行筛选和ADMET性质预测,初步获得6个口服吸收率高、毒性小的化合物,可能是潜在的猪TLR7激动剂。

关键词：虚拟筛选分子对接猪TLR7 激动剂免疫增强剂

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玉米赤霉烯酮诱导小鼠肝脏铁死亡的机制研究

玉米赤霉烯酮诱导小鼠肝脏铁死亡的机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：宝力格黄永泽王坤李继昌东北农业大学动物医学学院

引言/目的玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）,又称为F-2毒素,它是饲料中常见的三大霉菌毒素之一,在所有的饲料样品中检出率高达45%。2012年,Dixon发现并报道了铁死亡,其成为了一种新型细胞死亡方式。铁死亡是一种Fe依赖性细胞死亡,主要... 详细信息

引言/目的玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）,又称为F-2毒素,它是饲料中常见的三大霉菌毒素之一,在所有的饲料样品中检出率高达45%。2012年,Dixon发现并报道了铁死亡,其成为了一种新型细胞死亡方式。铁死亡是一种Fe依赖性细胞死亡,主要表现为细胞内的Fe积累、脂质过氧化及线粒体损伤。目前对ZEA的研究主要在生殖毒性方面,但对肝损伤研究仍不够充分,故本研究旨在探究ZEA是否会引起肝脏铁死亡及相关信号通路的变化,为深入探索ZEA对肝脏致病机理和铁死亡之间的关系提供理论基础。材料与方法将75只Balb/C小鼠随机分为空白对照组和溶剂对照组（Con和Vcon）以及低、中、高三个剂量的ZEA攻毒组,ZEA攻毒剂量分别为20、40、80 mg/kg/d （ZEA20、ZEA40、ZEA80）,ZEA灌胃攻毒30天后分离肝脏组织,通过石蜡切片染色观察组织病理学变化,采用生化试剂盒检测肝脏组织CAT,SOD及MDA,利用Western Blot法检测铁死亡关键蛋白表达量（GPX4,Fth1和Slc7a11）。结果与讨论HE结果显示,与对照组（Con及Vcon）比较,ZEA攻毒组出现明显的肝损伤,伴有脂肪变性,可见脂滴及肝细胞空泡。生化结果显示,与Vcon组比较,ZEA80攻毒组CAT及SOD均显著下降（p<0.05）,三个攻毒组的MDA极显著增高（p<0.01）。Western Blot结果显示,与Vcon组比较,ZEA40和ZEA80攻毒组小鼠肝脏中的Fth1及GPX4的蛋白表达量均显著/极显著下降（p<0.05,p<0.01）,三个攻毒组的Slc7a11的蛋白表达量均极显著下降（p<0.01）。综上所述,ZEA可导致Balb/C小鼠肝损伤并发生铁死亡。一方面,Slc7a11和Slc3a2组合形成了胱氨酸/谷氨酸反向转运体（System Xc-）。Slc7a11的表达减少抑制了Xc系统对胱氨酸的吸收,继而导致了GPX4活性的降低。GPX4作为Xc系统中介导脂质过氧化的酶,在信号通路中起到关键抗氧化调节作用。而另一方面,Fth1是重要的储铁蛋白,通过储存细胞中多余的游离铁离子,维持细胞内外铁离子稳态。故此,ZEA攻毒后GPX4、Fth1和Slc7a11的蛋白表达均显著下调,从而证实ZEA可以通过拮抗Xc系统及储铁蛋白从而诱导肝脏发生铁死亡。

关键词：玉米赤霉烯酮 GPX4 Fth1 Slc7a11 铁死亡

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线粒体自噬在钩吻素子调控骨关节炎中的作用机制研究

线粒体自噬在钩吻素子调控骨关节炎中的作用机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：孔祥祎李媛媛吴傲傲王思琪孙志良袁志航湖南农业大学动物医学院畜禽保健湖南省工程研究中心湖南省兽药工程技术研究中心

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种关节退行性疾病,主要病理改变为关节软骨完整性破坏,研究表明线粒体自噬缺陷会导致软骨降解。钩吻是一种马钱科植物,生物碱是钩吻的主要活性成分,钩吻素子(koumine)作为钩吻生物碱中含量最丰富的单体... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种关节退行性疾病,主要病理改变为关节软骨完整性破坏,研究表明线粒体自噬缺陷会导致软骨降解。钩吻是一种马钱科植物,生物碱是钩吻的主要活性成分,钩吻素子(koumine)作为钩吻生物碱中含量最丰富的单体成分,有研究表明钩吻素子具有抗应激和抗炎活性。本研究旨在研究钩吻素子通过线粒体自噬对骨关节炎的调控作用。选取48只180-220g雄性SD大鼠,随机分为4组。即假手术组,OA模型组,钩吻素子治疗组,美洛昔康治疗组。通过向大鼠膝关节腔内注射2%木瓜蛋白酶构建骨关节炎模型,造模14天后,连续两周灌胃1 mg/kg钩吻素子及1 mg/kg美洛昔康,收集大鼠全血、血清、膝关节及软骨进行后续检测。通过血常规、X射线、H&E、番红O固绿、染色、ROS的生成评价骨关节炎损伤;ELISA检测血清中炎症因子的表达;免疫组化和透射电镜检测大鼠关节软骨中自噬及线粒体自噬的变化。细胞试验选取大鼠关节软骨细胞系,通过添加大鼠重组蛋白IL-1β诱导软骨细胞炎症模型,并添加50μg/ml钩吻素子及线粒体自噬抑制剂Mdivi-1,提取细胞RNA及蛋白进行后续检测。用MTT法检测细胞活力,评价IL-1β及钩吻素子对软骨细胞活力的影响;JC-1法检测细胞线粒体膜电位的变化:QPCR和Western blot法检测炎症因子、基质金属蛋白酶、自噬和线粒体自噬相关mRNA和蛋白表达水平。与假手术组相比,OA模型组的大鼠膝关节软骨出现明显损伤,软骨表面不光滑、软骨细胞分布紊乱,ROS生成显著增多,血清中炎症因子表达量显著升高。经钩吻素子及美洛昔康治疗后炎症损伤得到改善,ROS生成减少,血清中炎症因子被抑制。与OA模型组相比,软骨组织中自噬体明显增多,自噬与线粒体自噬相关的阳性细胞量表达显著增多。钩吻素子增加了被IL-1β所抑制的细胞活力;与对照组相比,IL-1β降低了软骨细胞中的线粒体膜电位,炎症因子和基质金属蛋白酶的mRNA和蛋白表达显著升高;与钩吻素子处理组相比,自噬和线粒体自噬相关mRNA和蛋白表达显著升高,Mdivid-1处理后抑制了线粒体自噬的发生,加剧了炎症现象。钩吻素子能够通过促进线粒体自噬改善软骨损伤,抑制ROS生成和炎症因子表达,从而缓解骨关节炎的进展。

关键词：骨关节炎钩吻素子自噬线粒体自噬

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