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744 篇 会议

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624 篇 农学
- 596 篇 兽医学
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- 2 篇 作物学
- 1 篇 林学
66 篇 医学
- 23 篇 药学(可授医学、理...
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- 16 篇 中药学(可授医学、...
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49 篇 工学
- 19 篇 化学工程与技术
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- 1 篇 软件工程
30 篇 理学
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- 4 篇 生物学
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- 10 篇 应用经济学
4 篇 管理学
- 2 篇 公共管理
- 1 篇 管理科学与工程(可...
- 1 篇 农林经济管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

45 篇 耐药性
37 篇 大肠杆菌
23 篇 氟苯尼考
19 篇 氧化应激
18 篇 耐药基因
18 篇 猪
16 篇 残留
15 篇 药代动力学
12 篇 药动学
12 篇 残留检测
11 篇 金黄色葡萄球菌
11 篇 黏菌素
11 篇 多重耐药
10 篇 mic
10 篇 生物被膜
9 篇 nf-κb
9 篇 副猪嗜血杆菌
9 篇 hplc
9 篇 肠球菌
9 篇 头孢喹肟

机构

108 篇 中国农业大学
96 篇 华南农业大学
57 篇 南京农业大学
43 篇 吉林大学
39 篇 扬州大学
36 篇 东北农业大学
29 篇 新疆农业大学
23 篇 四川农业大学
18 篇 广西大学
17 篇 青岛农业大学
17 篇 福建农林大学
17 篇 中国农业科学院兰...
14 篇 湖南农业大学
13 篇 沈阳农业大学
13 篇 华中农业大学
12 篇 内蒙古农业大学
10 篇 北京食品营养与人...
10 篇 西北农林科技大学
10 篇 河南农业大学
10 篇 中国农业科学院兰...

作者

49 篇 邓旭明
29 篇 刘雅红
29 篇 袁宗辉
28 篇 李剑勇
27 篇 杨亚军
27 篇 沈建忠
27 篇 江善祥
26 篇 廖晓萍
26 篇 孙坚
26 篇 卜仕金
25 篇 刘希望
23 篇 王丽平
22 篇 汤树生
22 篇 秦哲
22 篇 曾振灵
22 篇 李世宏
21 篇 汪洋
19 篇 季辉
18 篇 肖希龙
17 篇 王战辉

语言

739 篇 中文
5 篇 英文

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抑制自噬促进黏菌素诱导的神经元N2a细胞凋亡依赖于caspase激活

抑制自噬促进黏菌素诱导的神经元N2a细胞凋亡依赖于caspase激活

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：代重山汤树生李继昌周延李道稳肖希龙中国农业大学动物医学院东北农业大学动物医学院

【目的】多黏菌素已成为治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,神经毒性是其主要副作用之一,但其机制尚不清楚。【方法】以小鼠神经元N2a细胞建立体外黏菌素毒性模型,不同剂量黏菌素(0-200μM)处理24h后,细胞活力(MTT... 详细信息

【目的】多黏菌素已成为治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,神经毒性是其主要副作用之一,但其机制尚不清楚。【方法】以小鼠神经元N2a细胞建立体外黏菌素毒性模型,不同剂量黏菌素(0-200μM)处理24h后,细胞活力(MTT法)、细胞膜损伤程度(LDH活力)、细胞死亡方式(Hoccest33342及AV/PI法)、氧化应激标志物(ROS、SOD、GSH、CAI)、线粒体功能(线粒体膜电位、Bcl-2/Bax)、自噬标志物(LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62)及caspase-3、8及9活力被分别检测;并进一步通过自噬抑制剂(氯喹,CQ)及凋亡抑制剂(caspase泛抑制剂,Z-VAD-FMK)联合探究细胞自噬及凋亡的cross-talk机制。【结果】与对照组相比,黏菌素处理的N2a发生凋亡性细胞死亡并伴随明显的剂量依赖性(黏菌素200μM,细胞凋亡率达49%);进一步研究发现,黏菌素可显著增加细胞内ROS水平、同时抑制细胞内抗氧化酶SOD、CAT活力及抗氧化物质GSH活力(all p<0.05 or 0.01);此外,黏菌素处理可导致线粒体膜电位及Bcl/Bax比值显著降低,并伴随caspase-3、8及9活力的显著升高(all p<0.05 or 0.01);MDC法荧光观察及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62检测发现,黏菌素可剂量依赖性激活N2a细胞内自噬水平,进一步通过LC3及activated-caspase-3免疫荧光共染证实黏菌素诱导的自噬及凋亡发生于同一细胞。与黏菌素模型组相比,晚期自噬抑制剂CQ可明显激活黏菌素(200μM)诱导的细胞凋亡(凋亡率增至85%),caspase--3酶活力也被进一步激活。CQ+Z-VAD-FMK+colistin联合处理后可明显抑制CQ+colistin诱导的细胞凋亡及caspaSe-3活力及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62的激活。【结论】黏菌素介导神经元细胞凋亡涉及ROS介导的氧化应激及线粒体功能失调,从而导致caspase依赖性的凋亡和自噬;自噬可能扮演者保护性角色。

关键词：黏菌素神经毒性 N2a细胞凋亡自噬 caspase激活

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物源食品中氟喹诺酮类残留检测的生物发光微生物传感器技术研究

物源食品中氟喹诺酮类残留检测的生物发光微生物传感器技术研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王玉莲程古月黄明威董小冰袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)

氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQNs）在畜牧生产中应用广泛,然而大量使用会导致氟喹诺酮类药物在动物源食品中残留和细菌耐药性的产生,这不仅危害消费者健康,还影响我国动物源产品出口,制约我国养殖业可持续发展,是严重威胁食品安... 详细信息

氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQNs）在畜牧生产中应用广泛,然而大量使用会导致氟喹诺酮类药物在动物源食品中残留和细菌耐药性的产生,这不仅危害消费者健康,还影响我国动物源产品出口,制约我国养殖业可持续发展,是严重威胁食品安全和社会稳定的重大问题。因此,加强动物源食品中氟喹诺酮类的残留监控十分必要。本研究利用氟喹诺酮类药物对大肠杆菌作用的分子机理,选择对氟喹诺酮类药物敏感和特异的启动子RecA,构建携带荧光素酶基因的质粒pRecAlux3,经转化、筛选获得一株敏感、特异和稳定的生物发光细菌E coli pK12,建立基于E coli pK12的氟喹诺酮类药物残留检测的生物发光微生物传感器方法,并对方法的灵敏度、准确度、精密度、交叉反应率等指标进行考察。该法能够识别恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、麻保沙星和奥比沙星等11种氟喹诺酮类药物,对猪、鸡、牛的肌肉、肝脏、肾脏、鱼肉和牛奶等11种动物可食性组织中11种氟喹诺酮类药物的最低检测限为12.5μg/kg00μg/kg,添加回收率在60～125%,批内和批间变异系数均小于25%;对β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、大环内酯类等药物的最低检测限均在3×MRL以上。经动物试验和仪器方法比对试验结果表明该法与仪器方法符合良好,适用于动物源食品中氟喹诺酮类残留的快速筛选。本方法是一种新型的快速检测氟喹诺酮类残留的微生物学筛选方法,较传统微生物学法灵敏度更高、特异性强,为兽药残留检测方法研究提供了新的思路。

关键词：氟喹诺酮类生物发光微生物传感器大肠杆菌残留动物源食品

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盐酸头孢噻呋在奶牛血浆中UPLC-MS/MS检测方法的建立与确证

盐酸头孢噻呋在奶牛血浆中UPLC-MS/MS检测方法的建立与确证

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王建中孙菲菲张素霞龚晓会曹兴元中国农业大学动物医学院

【目的】头孢噻呋属于广谱半合成的第三代头孢菌素类抗生素,具有抗菌谱广、耐青霉素酶、临床疗效高、毒性低等优点,广泛应用于奶牛疾病的治疗。本实验通过将盐酸头孢噻呋在牛血浆中的主要代谢产物DFC衍生化为稳定DCA,并建立高效灵敏的UP... 详细信息

【目的】头孢噻呋属于广谱半合成的第三代头孢菌素类抗生素,具有抗菌谱广、耐青霉素酶、临床疗效高、毒性低等优点,广泛应用于奶牛疾病的治疗。本实验通过将盐酸头孢噻呋在牛血浆中的主要代谢产物DFC衍生化为稳定DCA,并建立高效灵敏的UPLC-MS/MS检测方法,为研究盐酸头孢噻呋在牛体内的药代动力学特征提供支持。【方法】提取与衍生化:取样品血浆500μL,加标50μL,涡动10s,加0.4%二硫赤藓糖醇溶液5.5mL,涡动2min,50℃水浴振荡15min,取出放置室温,加14%碘乙酰胺溶液1.5mL,避光室温下静置衍生30 min,用25%的磷酸溶液调节pH至2.5-2.6,离心15min（4℃,6000r/min）;净化:依次用10 mL甲醇、10 mL水活化HLB萃取柱,取上清液过柱,用3 mL水淋洗小柱之后,用2.5 mL90%乙腈溶液洗脱,洗脱液于氮吹仪吹干,残余物用500μL0.2%的甲酸溶液复溶,过0.22μm滤膜,取5μL进仪器分析。色谱条件:C色谱柱（50×2.1 mm,2.6μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液:0.1%甲酸乙腈溶液（95:5,V/V）,流速:0.4mL·min,柱温30℃。质谱条件:ESI+,多反应监测,离子源温度150℃,脱溶剂温度450℃,毛细管电压3kV,脱溶剂气流速800L/h。在200μg/L,1000μg/L,2000μg/L三个浓度进行添加回收实验。【结果】血浆中DCA在100-5000μg/L的浓度范围内,方法线性关系良好,相关系数r为0.9936。定量限（LOQ）和检测限（LOD）分别为10050μg/L和50μg/L。三个添加浓度的回收率在96.62%-106.06%;日内变异系数均小于6.45%,日间变异系数小于1.41%。待测物在冻融、室温、前处理后、在血浆中的稳定性试验检测的变异系数均低于15%。【结论】建立的UPLC-MS/MS方法满足分析检测要求。

关键词：盐酸头孢噻呋 DCA 奶牛 UPLC-MS/MS

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iTRAQ联合LC-MS/MS技术分析痢疾杆菌耐酸性研究

iTRAQ联合LC-MS/MS技术分析痢疾杆菌耐酸性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：魏小娟张继瑜周绪正李冰程富胜牛建荣王娟娟中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

【目的】应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术检测痢疾杆菌168株在不同处理条件下(普通培养与酸处理组)蛋白的差异情况,从而筛选出与痢疾杆菌耐酸性相关的潜在菌体蛋白。【方法】以痢疾杆菌301标准... 详细信息

【目的】应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术检测痢疾杆菌168株在不同处理条件下(普通培养与酸处理组)蛋白的差异情况,从而筛选出与痢疾杆菌耐酸性相关的潜在菌体蛋白。【方法】以痢疾杆菌301标准株为对照,通过模拟建立耐酸性菌株,采用iTRAQ技术和生物信息学鉴定并相对定量各菌株菌体蛋白。质谱数据经DataAnalysis4.0软件分析,用Mascot 2.3.02蛋白质鉴定软件对SwissProt下载的痢疾杆菌数据库进行搜索,软件依据同位素报告基团的相对含量进行蛋白质定量,以报告基团113为参照,选择差异性显著(P<0.05)的结果进行报告。当差异倍数大于2.0倍以上,且经统计检验其P<0.05时,视为差异蛋白。鉴定得到的蛋白进行基因功能聚类分析(GO)及基因路径分析。【结果】质谱共鉴定到1632个蛋白,其中差异表达蛋白有646种,其理论相对分子质量分布较为泛,相对分子质量的范围为5.26～345.82,其中分子质量在20～30 kDa的蛋白所占的比例最高为20.2%,分子质量在80～100 kDa之间的蛋白所占比例最少,为4%。酸处理组和正常组相比,上调的蛋白有212种,下调的蛋白434种。其生物进程主要参与中间代谢、细胞作用和生物调节,分子功能主要为催化活性功能、结合功能及转运活性功能。通过GO分析及pathway分析发现,这些差异蛋白分别参与了19个生物学过程,有21种分子功能,共涉及到109个生物代谢通路。排名前3位的生物学过程分别为新陈代谢过程(28.79%)、细胞代谢过程(26.66%)、有机物质的代谢过程(9.40%);分子功能分别为催化活性(81.9%)、离子结合功能(43.9%)、杂环化化合物的结合(42.8%);生物代谢通路为代谢通路(34.13%)、次级代谢产物的生物合成途径(19.57%)、不同环境中的微生物代谢途径(11.74%)。【结论】筛选出多种与耐酸性相关的差异蛋白,从而为进一步探讨痢疾杆菌致病机理奠定了基础。

关键词：分子功能耐酸性 iTRAQ 痢疾杆菌 LC-MS/MS 代谢通路

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不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因检测及分析

不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：程伟华夏绪进夏利宁新疆农业大学动物医学学院

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株... 详细信息

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株猪源大肠杆菌进行β-内酰胺酶(bla、bla、bla、bla和bla)和16S rRNA甲基化酶（armA和rmtB）基因检测,并对检出耐药基因的PCR产物进行测序。检测结果表明:克拉玛依春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（142/142,100%）、bla（7/142,4.93%）和bla（1/142,0.70%）;克拉玛依地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（9/9,100%）;昌吉地区春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（78/78,100%）、bla（3/78,3.85%）和rmtB（1/78,1.28%）;昌吉地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（52/52,100%）、bla（3/52,5.77%）和bla（1/52,1.92%）。上述结果表明不同地区不同季节猪源大肠杆菌携带bla检出率均为100%。克拉玛依地区春季猪源大肠杆菌携带的耐药基因bla检出率比昌吉地区春季猪源大肠杆菌检出率高。结论:不同地区由于用药背景不同,各地域大肠杆菌的耐药性存在差异,不同时间及不同动物源性大肠杆菌耐药性也存在较大差异,养殖场应合理使用抗菌药物,加强产β-内酰酶及16S rRNA甲基化酶基因的监控。

关键词：不同地区春秋两季猪源大肠杆菌 β-内酰酶基因 16SrRNA甲基化酶基因

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头孢喹肟在犬体内药动-药效同步模型研究

头孢喹肟在犬体内药动-药效同步模型研究

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：张炳旭丁焕中华南农业大学兽医学院药理教研室 510642

目的：本文建立了头孢喹肟在犬血清中的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,研究了头孢喹肟在犬体内药动学规律,结合药效学参数,建立了头孢喹肟在犬血清半体内(Ex-vivo)PK-PD同步模型,系统地考察了头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌(Kle... 详细信息

目的：本文建立了头孢喹肟在犬血清中的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,研究了头孢喹肟在犬体内药动学规律,结合药效学参数,建立了头孢喹肟在犬血清半体内(Ex-vivo)PK-PD同步模型,系统地考察了头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌(KlebsiellapneumoniaATCCA352)的抗菌作用特征,为制定合理的给药方案提供理论依据.方法：7只健康犬随机交叉,以2mg/kg b.w.单剂量静脉及肌肉注射给药,采集到的血清样品用乙腈沉淀蛋白,离心后过滤膜上机检测,用WinNonlin5.2中的统计矩理论研究药物在犬血浆中的药动学规律.PK-PD同步模型采用Inhibitory Effect Sigmoid Emax模型.结果：头孢喹肟在犬血清中的回收率为86.01±0.03％～113.14±0.02％,检测限为1ng/mL,定量限为5ng/mL.血清中头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌的MIC与MBC分别为0.032、0.064μg/mL,达到抑菌、杀菌和除菌效果的AUC24/MIC值分别为16.83h、29.64h、39.40h.结论：本文建立的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法简单快速、灵敏度高,适用于头孢喹肟在犬血清中的检测.通过计算可知,每天1次,静脉和肌肉注射2mg/kg b.w.,对由肺炎克雷伯氏菌引起的犬呼吸道感染可达到很好的治疗效果.

关键词：犬呼吸道感染头孢喹肟药动学药效学同步模型高效液相色谱技术串联质谱检测技术

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槲皮苷通过抑制Sortase A发挥对金黄色葡萄球菌感染的抑制作用

槲皮苷通过抑制Sortase A发挥对金黄色葡萄球菌感染的抑制作用

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王琳邓旭明王大成吉林大学人兽共患病研究所/吉林大学动物医学学院吉林大学动物科学学院

金黄色葡萄球菌的多重耐药性的出现和广泛传播促使了与传统抗生素作用机制不同的新型药物的发展。抗毒力策略在这方面极具潜力。近年来,Sortase A(SrtA)作为治疗金黄色葡萄球菌感染潜在药物靶点已经引起广泛关注,由SrtA锚定的表面蛋白... 详细信息

金黄色葡萄球菌的多重耐药性的出现和广泛传播促使了与传统抗生素作用机制不同的新型药物的发展。抗毒力策略在这方面极具潜力。近年来,Sortase A(SrtA)作为治疗金黄色葡萄球菌感染潜在药物靶点已经引起广泛关注,由SrtA锚定的表面蛋白是负责细菌黏附到特定器官组织、入侵宿主细胞和逃避宿主免疫反应的关键毒力因子。据报道SrtA的抑制剂可能成为治疗或预防金黄色葡萄球菌感染药物的有力候选。本实验采用荧光共振能量转移法,从常用的清热解毒的中药单体中筛选SrtA的抑制剂,并从发现几种酚酸类和黄酮类化合物具有显著抑制作用,黄酮类以槲皮苷效果最好(32.18±5.36μg/m1)。在本研究通过绘制槲皮苷抑制金葡菌生长曲线实验指出,槲皮苷是一种没有明显的抗金黄色葡萄球菌活性的天然化合物。随后,我们用酶标仪测定OD570,考察金葡菌NewmanD2C与纤连蛋白和纤维蛋白原的黏附,来判断槲皮苷对金葡菌黏附功能的影响。结果显示,金葡菌SrtA缺失菌株的黏附率最低,仅为11.17%和9.86%,与野生菌株组相比具有极显著差异(P<0.01)。并且随着槲皮苷浓度的上升,金葡菌黏附率也随之下降,说明槲皮苷的抑制活性呈剂量依赖关系。可以看到,在槲皮苷浓度为64μg/ml时,它们的黏附率只有51.90%(A)和49.60%(B),证明了槲皮苷可以通过抑制SrtA的活性来有效的削弱金葡菌的黏附功能。体内研究表明,CHA可以明显预防由金黄色葡萄球菌感染引起的小鼠肾脓肿并表现出显著的生存优势。最后,通过分子对接和动力学模拟实验证明,槲皮苷与SrtA蛋白的活性结合位点是Gly167和Va1193。综上所述,槲皮苷可以作为一个以抗毒力策略治疗细菌感染的先导化合物,为进一步开展新型药物的设计和研发提供了重要的实验数据和理论依据。

关键词：金黄色葡萄球菌,Sortase A 槲皮苷黏附肾脓肿结合位点

来源：评论

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LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张瑜王丽平南京农业大学动物医学院

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作... 详细信息

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作为安全浓度处理。其次选用浓度为10μg/mL的LPS处理细胞不同时间,并用免疫荧光检测细胞膜上P-gp定位和表达的变化。最后,用高、中、低三个浓度的LPS分别处理IPEC-J2细胞1、3、6、12和24 h,并分别用荧光定量和Western blot的方法检测总mRNA及总蛋白表达水平。【结果】免疫荧光的结果表明,细胞膜上P-gp定位并没有发生改变,但荧光强度在处理1h后轻微减弱,3-24b增强。荧光定量结果表明,LPS处理1 h后50μg/mL浓度下Abcb1 mRNA表达显著下降,其他浓度差异不显著;处理3h后,Abcb1 mRNA表达和对照相比均明显增加;6 h和3 h比表达降低,但和对照比差异不显著;12 h后表达和对照比下降,但统计学差异不显著;24 h后mRNA的表达回复至对照水平。Western blot的结果显示,LPS处理1 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的降低;3 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的增加;6 h后,细胞内P-gp总体表达水平和对照相比又呈现抑制状态;12 h后1μg/mL组P-gp水平与对照比略有增加,10μg/mL和50μg/mL LPS仍抑制P-gp的表达,但抑制程度比6 h低;24 h后1μg/mL组P-gp表达量和对照相比又极显著降低,而10μg/mL和50μg/mL组P-gp表达量则逐渐回复接近对照水平。【结论】试验结果表明LPS处理后P-gp在IPEC-J2细胞膜上的表达量变化与猪组织细胞膜上的表达变化一致,均呈增加趋势,但其总RNA和总体蛋白表达水平与体内试验结果相似,均呈下降趋势。

关键词： LPS IPEC-J2 P-gp 免疫荧光荧光定量PCR 免疫印迹

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红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：国政陆子音衣美双王剑谢道远陈雪平李继昌东北农业大学动物医学学院

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡... 详细信息

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡率的影响;倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、透射电镜观察对细胞形态、细胞核形态及细胞内超微结构的影响;LDH水平测试检测对细胞膜完整性的影响;ROS含量测定、SOD活性测定、MDA含量检测来探讨对氧化应激的影响;DNA Ladder观察对DNA完整性的影响;Rh123染色流式细胞仪检测对线粒体膜电位的影响。【结果】MTT法检测结果显示,250μg·mL硫酸黏菌素作用于雪旺细胞24 h时,细胞活力为63.78%（对照组为100%）,损伤程度适宜。因此,后续试验选用250μg·mL硫酸黏菌素作用雪旺细胞24 h来构建黏菌素体外损伤雪旺细胞模型。选用12.5、25、50μg·mL浓度作为红景天苷保护硫酸黏菌素致雪旺细胞损伤的工作浓度。Annexin V-FITC/PI双染流式检测结果显示,红景天苷能有效降低硫酸黏菌素诱导雪旺细胞的凋亡率。降低损伤细胞培养液内LDH含量,使细胞内ROS、MDA含量显著降低,SOD活性升高,说明红景天苷能保护硫酸黏菌素损伤细胞膜完整性,稳固黏菌素引起细胞内氧化-抗氧化失衡。倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、电镜超微结构观察发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞胞体变圆,轴突变短,细胞核变小、固缩,染色质凝聚、边缘化,线粒体结构不清、肿胀、空泡化等凋亡特征。DNA Ladder试验结果提示,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞DNA断裂。Rh123染色流式细胞仪检测发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素引起的线粒体膜电位降低。【结论】硫酸黏菌素能引起雪旺细胞凋亡,诱发神经毒性,引起细胞内氧化应激损伤。红景天苷能有效拮抗其损伤。

关键词：黏菌素神经毒性雪旺细胞红景天苷保护作用

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替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：闫兆阳刘建业黄晓勇刘源崔一芳刘晓晔丁双阳中国农业大学动物医学院

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、4... 详细信息

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40mg/L。观察并统计120hpf内斑马鱼胚胎的发育情况,其中记录其在48hpf的心率变化、72hpf的孵化情况以及96hpf的致畸和死亡。120hpf时取出相同数目0mg/L、0.625mg/L、2.5mg/L和10mg/L未死亡的斑马鱼检测其体内超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量以及实时荧光定量聚合酶链反应检测与相关靶器官基因和凋亡基因的表达量的情况。结果表明,替米考星和泰乐菌素均表现出心动过速或过缓,替米考星和泰乐菌素都在低浓度使斑马鱼心率加速,高浓度心率减慢;并且替米考星能使斑马鱼出现心包水肿、脊柱弯曲和尾部弯曲,在1.25mg/L以上浓度出现致畸,在1.25mg/L、2.5mg/L和5mg/L几乎只出现心包水肿,在10mg/L、20mg/L和40mg/L以出现脊柱弯曲为主。在96hpf时40mg/L暴露组中的斑马鱼全部死亡,然而40mg/L的泰乐菌素没有使斑马鱼出现死亡现象。通过计算,替米考星的半数致死浓度(LC)为16.26mg/L,其半数效应浓度(EC)为6.424mg/L。120hpf时检测SOD和MDA的含量可知,随着两种大环内酯类类药物的暴露浓度增加,超氧化物歧化酶（SOD）含量减少,而丙二醛（MDA）含量增加。通过荧光定量聚合酶链反应检测出骨形态发生蛋白（BMP-4）、硒蛋白（Sepn-1）和凋亡基因表达量增加,而抗凋亡基因的表达量相对减少。通过以上实验结果可知,相对于泰乐菌素,替米考星会对斑马鱼胚胎导致更强的发育毒性和心脏毒性,应更加谨慎使用。

关键词：斑马鱼胚胎替米考星泰乐菌素毒性效应

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