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- 2 篇 教育学

主题

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机构

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17 篇 青岛农业大学
17 篇 福建农林大学
17 篇 中国农业科学院兰...
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13 篇 沈阳农业大学
13 篇 华中农业大学
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10 篇 西北农林科技大学
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10 篇 中国农业科学院兰...

作者

49 篇 邓旭明
29 篇 刘雅红
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27 篇 杨亚军
27 篇 沈建忠
27 篇 江善祥
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26 篇 孙坚
26 篇 卜仕金
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22 篇 秦哲
22 篇 曾振灵
22 篇 李世宏
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19 篇 季辉
18 篇 肖希龙
17 篇 王战辉

语言

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苦豆子碱等药物诱导细菌ROS产生的生物学活性研究

苦豆子碱等药物诱导细菌ROS产生的生物学活性研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：马维武周学章宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750000

目的：试验通过比较苦参碱、苦豆子碱与环丙沙星诱导产膜表皮葡萄球菌ROS产生以及对抗氧化系统的调控作用,为深入了解中药的抗菌机制及研制新的抗菌药物奠定基础. 方法：本试验以产膜表皮葡萄球菌标准株(ATCC35984)和临床分离的S3为... 详细信息

目的：试验通过比较苦参碱、苦豆子碱与环丙沙星诱导产膜表皮葡萄球菌ROS产生以及对抗氧化系统的调控作用,为深入了解中药的抗菌机制及研制新的抗菌药物奠定基础. 方法：本试验以产膜表皮葡萄球菌标准株(ATCC35984)和临床分离的S3为研究对象.用荧光光分光光度计法检测苦豆子碱、苦参碱、环丙沙星作用后菌体内活性氧水平的变化.用亚抑菌浓度药物作用表皮葡萄球菌不同代次下的ROS产生和MIC变化规律,并总结药物作用细菌ROS产生与耐药性的相关性. 结果：结果表明,苦豆子碱、苦参碱能够提高菌体内ROS水平,降低抗氧化能力;抗生素和中药在亚抑菌浓度下都能刺激菌体ROS生成,亚抑菌浓度抗生素作用下的ROS产量随代次增加而减少,而MIC随代次增加而增加,亚抑菌浓度中药在不同代次中的MIC和ROS含量均无明显变化,同时,亚抑菌浓度中药作用第一代后再用抗生素作用第二代,发现抗生素对细菌的MIC降低了2-4倍. 结论：中药苦豆子碱、苦参碱和抗生素环丙沙星都能够通过提高产膜表皮葡萄球菌ROS水平及降低抗氧化能力来达到抑菌效果,抗生素诱导的ROS在高浓度下有利于杀菌,在低浓度下则有利于细菌产生耐药性,而中药则不易产生耐药性,并且能够提高抗生素对细菌的敏感性.

关键词：苦豆子碱苦参碱活性氧中药药理

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动物组织中氟苯尼考及氟苯尼考胺残留的HPLC-MS/MS检测法研究

动物组织中氟苯尼考及氟苯尼考胺残留的HPLC-MS/MS检测法研究

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：田文豪李建成中国农业大学动物医学院北京100193

[目的]氟苯尼考作为一种新型的氯霉素类抗生素,已广泛应用于动物养殖业,而氟苯尼考在动物体内的残留会严重影响人体的身体健康。本研究旨在建立同时测定动物组织中氟苯尼考(Florfenicol)及其代谢产物氟苯尼考胺(Florfenicol Amine)残留... 详细信息

[目的]氟苯尼考作为一种新型的氯霉素类抗生素,已广泛应用于动物养殖业,而氟苯尼考在动物体内的残留会严重影响人体的身体健康。本研究旨在建立同时测定动物组织中氟苯尼考(Florfenicol)及其代谢产物氟苯尼考胺(Florfenicol Amine)残留量的HPLC-MS/MS法。[方法]用碱化的乙酸乙酯分三次重复提取动物组织中的氟苯尼考和氟苯尼考胺,合并三次提取液。将提取液中的药物通过液-液萃取转移至5％乙酸水相中,旋转蒸发浓缩有机相,脱脂,固相萃取柱净化,洗脱液在氮气下吹干,复溶、滤膜过滤。以氘代氯霉素(d5-CAP)为内标物定量,高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析。以乙腈-水溶液为流动相,梯度洗脱,离子源为电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)方式检测。[结果]用该方法检测氟苯尼考及氟苯尼考胺的定量限(LOQ)为10μg·kg-1,在LOQ、1/2MRL及MRL三个添加浓度水平上两种药物的回收率在70％～120％范围内,批间和批内标准偏差小于15％。[结论]本研究建立了动物组织中氟苯尼考及氟苯尼考胺残留的HPLC-MS/MS检测法,该方法能够满足动物组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留分析的要求。

关键词：动物组织氟苯尼考氟苯尼考胺残留检测

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苦豆草提取物的抗炎及抑菌作用研究

苦豆草提取物的抗炎及抑菌作用研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：叶文初袁富威班赟刘宇郭文柱杨珍李引乾西北农林科技大学动物医学院中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

目的:探讨苦豆草提取物在小鼠体内的抗炎作用及其体外抑菌作用。方法:通过二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀模型、新鲜鸡蛋清致小鼠足趾肿胀模型及小鼠棉球所致肉芽肿模型观察苦豆草提取物的抗炎作用。分别采用牛津杯法和试管二倍稀释法测定停... 详细信息

目的:探讨苦豆草提取物在小鼠体内的抗炎作用及其体外抑菌作用。方法:通过二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀模型、新鲜鸡蛋清致小鼠足趾肿胀模型及小鼠棉球所致肉芽肿模型观察苦豆草提取物的抗炎作用。分别采用牛津杯法和试管二倍稀释法测定停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大肠杆菌4种细菌的抗菌活性。结果:二甲苯致小鼠耳廓肿胀1h后,地塞米松组和苦豆草提取物高、中、低剂量组的小鼠耳廓肿胀率明显降低,其中耳廓肿胀率分别为77.65%、82.61%、65.22%、42.83%。与空白对照组相比,苦豆草提取物组能显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01,P<0.05);蛋清致小鼠足趾肿胀后,苦豆草提取物高、中、低剂量组和地塞米松组与生理盐水组比较,小鼠足趾肿胀均明显降低。苦豆草提取物对蛋清所致的炎症具有明显的抑制的作用;苦豆草提取物高、中、低剂量组和地塞米松组均可抑制棉球所致小鼠肉芽组织的增生,增生抑制率依次为49.86%、39.76%、35.45%及54.18%。与阴性对照组相比,苦豆草提取物组和地塞米松组对棉球所致的肉芽肿增生具有差异极显著性(P<0.01)。苦豆草提取物对棉球所致的肉芽肿具有明显的抑制作用。苦豆草提取物对4种致病菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为2.340、0.585、2.340、4.687mg/L;最低杀菌浓度(MBC)均为9.375 mg/L,表现为良好的抑菌或杀菌效果。苦豆草提取物药液浓度(37.5 mg/L)对表皮葡萄球菌、停乳链球菌、大肠杆菌的抑菌圈均大于15mm,而金黄色葡萄球菌为14.82接近于15 mm,各致病菌对苦豆草提取物具有高度敏感性。苦豆草提取物药液浓度在1 8.75 mg/kg时,苦豆草提取物对葡萄球菌、大肠杆菌抑菌圈在10～15 mm之间,为中度敏感;停乳链球菌的抑菌圈高于15mm,为高度敏感。结论:苦豆草提取物具有明显的抗炎作用并有明显的抑菌作用。

关键词：苦豆草提取物抗炎作用体外抑菌作用最小抑菌浓度最小杀菌浓度

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恩诺沙星联合内毒素致鸡复合式肝损伤机理及复方甘草酸单胺粉的修复

恩诺沙星联合内毒素致鸡复合式肝损伤机理及复方甘草酸单胺粉的修...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：郭凡溪刘腾飞耿智霞蒋凡余祖功南京农业大学动物医学院江苏南京210095

[目的]恩诺沙星、内毒素均为肝损伤诱因,恩诺沙星防治阴性菌感染时促进内毒素释放.本文首先建立二者联合致鸡肝损伤模型,并藉此研究二者联合致肝损伤的病理机理及复方甘草酸单胺粉(compound ammonium glycyrrhizin powder,CAG)的修复作... 详细信息

[目的]恩诺沙星、内毒素均为肝损伤诱因,恩诺沙星防治阴性菌感染时促进内毒素释放.本文首先建立二者联合致鸡肝损伤模型,并藉此研究二者联合致肝损伤的病理机理及复方甘草酸单胺粉(compound ammonium glycyrrhizin powder,CAG)的修复作用.[方法]104羽成年海蓝蛋鸡分：空白组(Ⅰ),模型组(Ⅱ),CAG预防及治疗高、低剂量(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)组,除Ⅰ组外,各组灌服恩诺沙星,100 mg· kg-1,1次/d连续3d,第3天以4 ml·kg-1腹腔注射LPS1次建模.Ⅲ组建模前3d混饮CAG(40 mg·L-1)至建模结束;Ⅳ、Ⅴ组腹注LPS后以22.5、7.5 mg·kg-1灌服CAG,2次/d连续3d.建模后6、24、48 h采样.[结果]模型组较空白组鸡血清ALT、AST、γ-GT、TBIL、MDA、NO、TNF-α、IL-1、IL-6水平在6、24、48 h升高,TP、ALB、SOD和GSH降低均显著,外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞含量6、24 h降低,48 h升高显著,肝组织病变明显;与模型组比,预防组各指标在6、24 h改善显著;治疗高剂量组则24、48 h改善显著,低剂量组多不显著.[结论]恩诺沙星联合内毒素引发肝细胞损伤、功能障碍、氧化应激、炎症和T淋巴亚群失衡;CAG有一定修复作用,但作用与剂量和时机相关.

关键词：恩诺沙星 LPS 鸡复合式肝损伤作用机理复方甘草酸单胺粉

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新型绿色饲料添加剂-素花党参多糖粉的研制及应用

新型绿色饲料添加剂-素花党参多糖粉的研制及应用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：付羽萍邹元锋朱忠铠殷中琼四川农业大学动物医学院成都温江611130

目的：旨在优化素花党参多糖提取条件,并验证其调节肠道菌群以及免疫调节活性,为畜牧生产中饲料添加剂提供新的选择. 方法：1)以单因素实验结合响应面法优化素花党参多糖提取工艺,筛选得到最佳提取时间、温度和料液比;2)将素花党参... 详细信息

目的：旨在优化素花党参多糖提取条件,并验证其调节肠道菌群以及免疫调节活性,为畜牧生产中饲料添加剂提供新的选择. 方法：1)以单因素实验结合响应面法优化素花党参多糖提取工艺,筛选得到最佳提取时间、温度和料液比;2)将素花党参多糖溶液灌胃于氟苯尼考导致肠道菌群失调的雏鸡,检测其生长性能、免疫器官指数、血常规变化以及肠道菌群变化,以检测其对肠道菌群调节以及免疫调节的功能. 结果：1)传统热水提取素花党参多糖的最佳提取工艺为:提取温度100℃、液料比40mL/g提取2次,每次2.4h,预测提取率为20.6077％;2)以100mg/kg素花党参多糖灌胃菌群失调雏鸡后,其生长性能有升高的趋势(P＞0.05),脾脏和法氏囊指数增大(P＞0.05),白细胞总数、淋巴细胞数、中性粒细胞比率、血红蛋白含量、红细胞总数、红细胞压积和血小板总数均有上升趋势(P＞0.05);且200mg/kg素花党参多糖能显著提高肠道双歧杆菌数量(P＜0.05),有升高乳酸杆菌趋势(P＞0.05),100mg/kg能显著降低沙门氏菌数量(P＜0.05),有降低大肠杆菌、升高双歧杆菌数量趋势(P＞0.05). 结论：素花党参多糖对雏鸡具有一定促进生长、调节肠道微生态平衡及提高免疫等作用,其最佳提取工艺为提取温度100℃、液料比40mL/g、提取2次,每次2.4h.

关键词：雏鸡饲料添加剂素花党参多糖免疫功能肠道菌群

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谷甾醇葡萄糖苷抗肺炎链球菌感染分子机制的研究

谷甾醇葡萄糖苷抗肺炎链球菌感染分子机制的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李洪恩邓旭明吉林大学动物医学学院

肺炎链球菌是一种重要的全球性的上呼吸道传染性病原菌,是人体的常在革兰氏阳性病原菌,机会性致病,可以引起例如肺炎,中耳炎,关节炎,脑膜炎等一系列疾病,同时也是引发社区获得性肺炎的重要诱因。目前针对肺炎链球菌感染,多用青霉素类抗... 详细信息

肺炎链球菌是一种重要的全球性的上呼吸道传染性病原菌,是人体的常在革兰氏阳性病原菌,机会性致病,可以引起例如肺炎,中耳炎,关节炎,脑膜炎等一系列疾病,同时也是引发社区获得性肺炎的重要诱因。目前针对肺炎链球菌感染,多用青霉素类抗生素进行治疗,然而,人类早在1985年就已经在非洲分离到了5株能够对青霉素产生耐药的肺炎链球菌,更为严重的是,能够耐受人类抗感染最后的一道防线一万古霉素的肺炎链球菌也开始在全世界各地陆续被分离发现。肺炎链球菌溶血素(PLY)能够对淋巴细胞产生伤害,避免其被免疫系统识别以及清除,导致急性致死性肺炎,同时与肺链的定殖与迁移关系密切。至于肺链神经氨酸酶A(NanA)可以为肺链提供重要的定殖信号分子-唾液酸,而且NanA的两个重要功能域均与肺链入脑导致脑膜炎有着密切的关系,有意思的是,上述的两种重要肺链毒力蛋白在所有临床分离到的肺链链球菌中均存在,而且保守程度非常高。我们的研究发现,一种主要存在于贝母茎中的天然小分子—谷甾醇葡萄糖苷,对这两种以上两种蛋白有着直接或者间接的抑制作用,而其本身对肺炎练球并没有抑菌或者杀菌活性。谷甾醇葡萄糖苷的β-谷甾醇集团能够与PLY特异性受体—胆固醇竞争结合PLY,阻断PLY的细胞毒性。而谷甾醇葡萄糖苷的葡萄糖苷集团也能够抑制肺炎链球菌sortaseA的活性。由于NanA在其C段有一段保守的LPETG序列,因此可以被肺炎链球菌sortaseA特异性的识别加工后锚定到肺链的细胞壁上,而葡萄糖苷集团由于可以抑制sortaseA活性从而使得NanA无法被正确的锚定到细菌细胞壁上,无法充分发挥其生物学功能。动物实验表明,谷甾醇葡萄糖苷能够显著提高肺炎链球菌感染小鼠模型的存活时间,显著降低肺炎链球菌在小鼠鼻腔以及肺部的定殖。综上所述,我们认为谷甾醇葡萄糖苷能够成为一种抗肺炎链球感染的全新化合物,而且,其双靶点的特性,可以使其相比其他单一靶点化合物寿命更长。

关键词：肺炎链球菌谷甾醇葡萄糖苷抗毒力

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六种脂肪酸对Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响

六种脂肪酸对Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张金铭张秀荚郝丽红齐悦李广亮孙晓琦东北农业大学大学动物医学学院哈尔滨150030

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变.Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒精... 详细信息

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变.Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、急性肝损伤以及肝癌等.细胞色素P4507A1酶是CYP450家族成员之一,在维持机体的糖、脂及能量代谢方面具有重要作用.CYP7A1是胆汁酸经典合成途径的限速酶,其表达量和活性对胆汁酸的合成起制约作用.本实验旨在研究脂肪酸对核转录因子Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1的mRNA和蛋白质表达的影响.实验分别用1mM软脂酸(PA)、硬脂酸(SA)、油酸(OA)、亚油酸(LA)、亚麻酸(ALA)、花生四烯酸(AA)诱导人肝癌细胞系(HepG2) 24h之后,采用Real time PCR法、Western blot法检测HepG2细胞内Nrf2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量.研究结果表明,六种脂肪酸作用24h后均能显著提高HepG2细胞中Nrf2 mRNA和蛋白的表达量(P＜0.05或P＜0.01),同时,除ALA组CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组外,其他脂肪酸诱导后CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量则显著或极显著地低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).综上所述,处理组的HepG2细胞Nrf2和CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平相一致,结果呈正相关或负相关.

关键词：脂肪酸 CYP7A1 Nrf2 HepG2

来源：评论

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抑制自噬促进黏菌素诱导的神经元N2a细胞凋亡依赖于caspase激活

抑制自噬促进黏菌素诱导的神经元N2a细胞凋亡依赖于caspase激活

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：代重山汤树生李继昌周延李道稳肖希龙中国农业大学动物医学院东北农业大学动物医学院

【目的】多黏菌素已成为治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,神经毒性是其主要副作用之一,但其机制尚不清楚。【方法】以小鼠神经元N2a细胞建立体外黏菌素毒性模型,不同剂量黏菌素(0-200μM)处理24h后,细胞活力(MTT... 详细信息

【目的】多黏菌素已成为治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,神经毒性是其主要副作用之一,但其机制尚不清楚。【方法】以小鼠神经元N2a细胞建立体外黏菌素毒性模型,不同剂量黏菌素(0-200μM)处理24h后,细胞活力(MTT法)、细胞膜损伤程度(LDH活力)、细胞死亡方式(Hoccest33342及AV/PI法)、氧化应激标志物(ROS、SOD、GSH、CAI)、线粒体功能(线粒体膜电位、Bcl-2/Bax)、自噬标志物(LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62)及caspase-3、8及9活力被分别检测;并进一步通过自噬抑制剂(氯喹,CQ)及凋亡抑制剂(caspase泛抑制剂,Z-VAD-FMK)联合探究细胞自噬及凋亡的cross-talk机制。【结果】与对照组相比,黏菌素处理的N2a发生凋亡性细胞死亡并伴随明显的剂量依赖性(黏菌素200μM,细胞凋亡率达49%);进一步研究发现,黏菌素可显著增加细胞内ROS水平、同时抑制细胞内抗氧化酶SOD、CAT活力及抗氧化物质GSH活力(all p<0.05 or 0.01);此外,黏菌素处理可导致线粒体膜电位及Bcl/Bax比值显著降低,并伴随caspase-3、8及9活力的显著升高(all p<0.05 or 0.01);MDC法荧光观察及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62检测发现,黏菌素可剂量依赖性激活N2a细胞内自噬水平,进一步通过LC3及activated-caspase-3免疫荧光共染证实黏菌素诱导的自噬及凋亡发生于同一细胞。与黏菌素模型组相比,晚期自噬抑制剂CQ可明显激活黏菌素(200μM)诱导的细胞凋亡(凋亡率增至85%),caspase--3酶活力也被进一步激活。CQ+Z-VAD-FMK+colistin联合处理后可明显抑制CQ+colistin诱导的细胞凋亡及caspaSe-3活力及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、p62的激活。【结论】黏菌素介导神经元细胞凋亡涉及ROS介导的氧化应激及线粒体功能失调,从而导致caspase依赖性的凋亡和自噬;自噬可能扮演者保护性角色。

关键词：黏菌素神经毒性 N2a细胞凋亡自噬 caspase激活

来源：评论

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物源食品中氟喹诺酮类残留检测的生物发光微生物传感器技术研究

物源食品中氟喹诺酮类残留检测的生物发光微生物传感器技术研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王玉莲程古月黄明威董小冰袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)

氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQNs）在畜牧生产中应用广泛,然而大量使用会导致氟喹诺酮类药物在动物源食品中残留和细菌耐药性的产生,这不仅危害消费者健康,还影响我国动物源产品出口,制约我国养殖业可持续发展,是严重威胁食品安... 详细信息

氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQNs）在畜牧生产中应用广泛,然而大量使用会导致氟喹诺酮类药物在动物源食品中残留和细菌耐药性的产生,这不仅危害消费者健康,还影响我国动物源产品出口,制约我国养殖业可持续发展,是严重威胁食品安全和社会稳定的重大问题。因此,加强动物源食品中氟喹诺酮类的残留监控十分必要。本研究利用氟喹诺酮类药物对大肠杆菌作用的分子机理,选择对氟喹诺酮类药物敏感和特异的启动子RecA,构建携带荧光素酶基因的质粒pRecAlux3,经转化、筛选获得一株敏感、特异和稳定的生物发光细菌E coli pK12,建立基于E coli pK12的氟喹诺酮类药物残留检测的生物发光微生物传感器方法,并对方法的灵敏度、准确度、精密度、交叉反应率等指标进行考察。该法能够识别恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、麻保沙星和奥比沙星等11种氟喹诺酮类药物,对猪、鸡、牛的肌肉、肝脏、肾脏、鱼肉和牛奶等11种动物可食性组织中11种氟喹诺酮类药物的最低检测限为12.5μg/kg00μg/kg,添加回收率在60～125%,批内和批间变异系数均小于25%;对β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、大环内酯类等药物的最低检测限均在3×MRL以上。经动物试验和仪器方法比对试验结果表明该法与仪器方法符合良好,适用于动物源食品中氟喹诺酮类残留的快速筛选。本方法是一种新型的快速检测氟喹诺酮类残留的微生物学筛选方法,较传统微生物学法灵敏度更高、特异性强,为兽药残留检测方法研究提供了新的思路。

关键词：氟喹诺酮类生物发光微生物传感器大肠杆菌残留动物源食品

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iTRAQ联合LC-MS/MS技术分析痢疾杆菌耐酸性研究

iTRAQ联合LC-MS/MS技术分析痢疾杆菌耐酸性研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：魏小娟张继瑜周绪正李冰程富胜牛建荣王娟娟中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

【目的】应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术检测痢疾杆菌168株在不同处理条件下(普通培养与酸处理组)蛋白的差异情况,从而筛选出与痢疾杆菌耐酸性相关的潜在菌体蛋白。【方法】以痢疾杆菌301标准... 详细信息

【目的】应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术检测痢疾杆菌168株在不同处理条件下(普通培养与酸处理组)蛋白的差异情况,从而筛选出与痢疾杆菌耐酸性相关的潜在菌体蛋白。【方法】以痢疾杆菌301标准株为对照,通过模拟建立耐酸性菌株,采用iTRAQ技术和生物信息学鉴定并相对定量各菌株菌体蛋白。质谱数据经DataAnalysis4.0软件分析,用Mascot 2.3.02蛋白质鉴定软件对SwissProt下载的痢疾杆菌数据库进行搜索,软件依据同位素报告基团的相对含量进行蛋白质定量,以报告基团113为参照,选择差异性显著(P<0.05)的结果进行报告。当差异倍数大于2.0倍以上,且经统计检验其P<0.05时,视为差异蛋白。鉴定得到的蛋白进行基因功能聚类分析(GO)及基因路径分析。【结果】质谱共鉴定到1632个蛋白,其中差异表达蛋白有646种,其理论相对分子质量分布较为泛,相对分子质量的范围为5.26～345.82,其中分子质量在20～30 kDa的蛋白所占的比例最高为20.2%,分子质量在80～100 kDa之间的蛋白所占比例最少,为4%。酸处理组和正常组相比,上调的蛋白有212种,下调的蛋白434种。其生物进程主要参与中间代谢、细胞作用和生物调节,分子功能主要为催化活性功能、结合功能及转运活性功能。通过GO分析及pathway分析发现,这些差异蛋白分别参与了19个生物学过程,有21种分子功能,共涉及到109个生物代谢通路。排名前3位的生物学过程分别为新陈代谢过程(28.79%)、细胞代谢过程(26.66%)、有机物质的代谢过程(9.40%);分子功能分别为催化活性(81.9%)、离子结合功能(43.9%)、杂环化化合物的结合(42.8%);生物代谢通路为代谢通路(34.13%)、次级代谢产物的生物合成途径(19.57%)、不同环境中的微生物代谢途径(11.74%)。【结论】筛选出多种与耐酸性相关的差异蛋白,从而为进一步探讨痢疾杆菌致病机理奠定了基础。

关键词：分子功能耐酸性 iTRAQ 痢疾杆菌 LC-MS/MS 代谢通路

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