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- 1 篇 管理科学与工程(可...
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- 2 篇 教育学

主题

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机构

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36 篇 东北农业大学
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17 篇 青岛农业大学
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13 篇 沈阳农业大学
13 篇 华中农业大学
12 篇 内蒙古农业大学
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10 篇 西北农林科技大学
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10 篇 中国农业科学院兰...

作者

49 篇 邓旭明
29 篇 刘雅红
29 篇 袁宗辉
28 篇 李剑勇
27 篇 杨亚军
27 篇 沈建忠
27 篇 江善祥
26 篇 廖晓萍
26 篇 孙坚
26 篇 卜仕金
25 篇 刘希望
23 篇 王丽平
22 篇 汤树生
22 篇 秦哲
22 篇 曾振灵
22 篇 李世宏
21 篇 汪洋
19 篇 季辉
18 篇 肖希龙
17 篇 王战辉

语言

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头孢喹肟在犬体内药动-药效同步模型研究

头孢喹肟在犬体内药动-药效同步模型研究

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：张炳旭丁焕中华南农业大学兽医学院药理教研室 510642

目的：本文建立了头孢喹肟在犬血清中的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,研究了头孢喹肟在犬体内药动学规律,结合药效学参数,建立了头孢喹肟在犬血清半体内(Ex-vivo)PK-PD同步模型,系统地考察了头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌(Kle... 详细信息

目的：本文建立了头孢喹肟在犬血清中的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,研究了头孢喹肟在犬体内药动学规律,结合药效学参数,建立了头孢喹肟在犬血清半体内(Ex-vivo)PK-PD同步模型,系统地考察了头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌(KlebsiellapneumoniaATCCA352)的抗菌作用特征,为制定合理的给药方案提供理论依据.方法：7只健康犬随机交叉,以2mg/kg b.w.单剂量静脉及肌肉注射给药,采集到的血清样品用乙腈沉淀蛋白,离心后过滤膜上机检测,用WinNonlin5.2中的统计矩理论研究药物在犬血浆中的药动学规律.PK-PD同步模型采用Inhibitory Effect Sigmoid Emax模型.结果：头孢喹肟在犬血清中的回收率为86.01±0.03％～113.14±0.02％,检测限为1ng/mL,定量限为5ng/mL.血清中头孢喹肟对肺炎克雷伯氏菌的MIC与MBC分别为0.032、0.064μg/mL,达到抑菌、杀菌和除菌效果的AUC24/MIC值分别为16.83h、29.64h、39.40h.结论：本文建立的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法简单快速、灵敏度高,适用于头孢喹肟在犬血清中的检测.通过计算可知,每天1次,静脉和肌肉注射2mg/kg b.w.,对由肺炎克雷伯氏菌引起的犬呼吸道感染可达到很好的治疗效果.

关键词：犬呼吸道感染头孢喹肟药动学药效学同步模型高效液相色谱技术串联质谱检测技术

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不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因检测及分析

不同地区春秋两季猪源大肠杆菌β-内酰胺酶及16SrRNA甲基化酶基因...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：程伟华夏绪进夏利宁新疆农业大学动物医学学院

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株... 详细信息

研究目的:为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况。方法:通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉玛依地区秋季样9株、昌吉地区春季样78株和昌吉地区秋季样52株猪源大肠杆菌进行β-内酰胺酶(bla、bla、bla、bla和bla)和16S rRNA甲基化酶（armA和rmtB）基因检测,并对检出耐药基因的PCR产物进行测序。检测结果表明:克拉玛依春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（142/142,100%）、bla（7/142,4.93%）和bla（1/142,0.70%）;克拉玛依地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（9/9,100%）;昌吉地区春季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（78/78,100%）、bla（3/78,3.85%）和rmtB（1/78,1.28%）;昌吉地区秋季猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶和16S rRNA甲基化酶基因有bla（52/52,100%）、bla（3/52,5.77%）和bla（1/52,1.92%）。上述结果表明不同地区不同季节猪源大肠杆菌携带bla检出率均为100%。克拉玛依地区春季猪源大肠杆菌携带的耐药基因bla检出率比昌吉地区春季猪源大肠杆菌检出率高。结论:不同地区由于用药背景不同,各地域大肠杆菌的耐药性存在差异,不同时间及不同动物源性大肠杆菌耐药性也存在较大差异,养殖场应合理使用抗菌药物,加强产β-内酰酶及16S rRNA甲基化酶基因的监控。

关键词：不同地区春秋两季猪源大肠杆菌 β-内酰酶基因 16SrRNA甲基化酶基因

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查尔酮噻唑酰胺类化合物的合成及其抑菌研究

查尔酮噻唑酰胺类化合物的合成及其抑菌研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：刘希望郭沂涛杨亚军孔晓军李世宏秦哲杜文斌李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室

【目的】查尔酮是一类广泛存在于天然产物中黄酮类化合物,具有广泛的生物学活性,包括抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗寄生虫等。艰难梭菌是一种专性厌氧菌,普遍存在与马、牛、猪及人的肠道中,可引起腹泻等疾病。本研究通过羟醛缩合及酰胺两步反... 详细信息

【目的】查尔酮是一类广泛存在于天然产物中黄酮类化合物,具有广泛的生物学活性,包括抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗寄生虫等。艰难梭菌是一种专性厌氧菌,普遍存在与马、牛、猪及人的肠道中,可引起腹泻等疾病。本研究通过羟醛缩合及酰胺两步反应,合成了一系列新化合物并考察其抑菌活性,以期发现新的对艰难梭菌有抑制作用的活性小分子。【方法】选择系列取代苯甲醛,与4-乙酰基苯甲酸发生克莱森-斯密特缩合反应,得到具有查尔酮结构的苯甲酸类中间体。中间体进而与2-氨基-5-硝基噻唑反应生成酰胺类化合物。利用核磁共振氢谱、碳谱、高分辨质谱对合成的目标化合物结构予以确证。通过琼脂稀释法和液体稀释法测定了目标产物对艰难梭菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。同时,考察了部分化合物对结人肠癌细胞(Caco2)和人正常肝细胞(HL7702)的细胞毒活性。【结果】结果显示,目标化合物结构正确,部分化合物对艰难梭菌显示出一定的抑菌活性,MIC值在1-8μg/mL之间。其中化合物1b,12b的MIC值分别为2和1μg/mL,与对照药物甲硝唑和硝唑尼特相当。部分目标产物对产气荚膜梭菌显示出中等的抑制作用,几乎全部目标产物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌无明显抑制作用,MIC值均大于64μg/mL。同时细胞毒研究显示活性目标产物对两种人细胞株无明显抑制作用。【结论】以上研究表明,合成的目标产物查尔酮噻唑酰胺类化合物对艰难梭菌显示出较强的抑菌活性,无明显细胞毒活性,可用于治疗由艰难梭菌引起的相关疾病,值得进一步研究和探索。

关键词：查尔酮噻唑酰胺合成抑菌艰难梭菌

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抗球虫新药沙咪珠利90天亚慢性毒性研究

抗球虫新药沙咪珠利90天亚慢性毒性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张可煜肖文龙吴昊王霄旸费陈忠赵娟张丽芳王米郑文丽肖隧薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

为研究三嗪类抗球虫新药沙咪珠利的亚慢性毒性,采用SD大鼠分别以0、5、20、65、130mg/kg含药饲料连续饲喂大鼠90天,观察沙咪珠利对大鼠外观体征、体重、饮食、血常规、血生化、脏器系数及脏器组织的影响。结果表明:沙咪珠利130mg/kg剂... 详细信息

为研究三嗪类抗球虫新药沙咪珠利的亚慢性毒性,采用SD大鼠分别以0、5、20、65、130mg/kg含药饲料连续饲喂大鼠90天,观察沙咪珠利对大鼠外观体征、体重、饮食、血常规、血生化、脏器系数及脏器组织的影响。结果表明:沙咪珠利130mg/kg剂量组饲喂后在第3周大鼠开始出现脱毛现象,随后65mg/k g组也相继出现此现象,且雄性早于雌性出现;从第4周开始,20、65mg/kg剂量组体重均高于对照组并有显著性,而雄性130mg/kg剂量组则低于对照组;雄性20、65mg/kg剂量组在饲料利用率和增重显著增加,雌性65、130mg/kg剂量组在饲料利用率和增重显著增加,而雄性130mg/kg剂量组在恢复期中饲料利用率和增重均极显著增加;在脏体比方面,130mg/kg剂量组心、肝、脾、肾等脏器均极显著高于对照组,而雄性肺脏也极显著高于对照组,而恢复期后其显著性均降低;雄性单核细胞绝对值及其百分比,雌性平均红细胞体积、血小板等血液常规检查有剂量相关性增加并在高剂量呈显著性差异外,其它指标无异常。雄性总蛋白(130mg/kg组)、甘油三酯(65、130mg/kg组)、总胆固醇(65、130mg/kg组)、葡萄糖(65、130mg/kg组)等血液生化指标均呈显著性下降,雌性白/球蛋白比(130mg/kg组)等血液生化指标均呈显著性下降,雌性总胆固醇(65、130mg/kg组)呈上升,而这些变化在恢复期后其差异均降低。病理组织学检查发现65、120mg/kg组肾脏有小管损伤萎缩、蛋白管型、小管再生等现象,130mg/kg组肝脏有灶性炎症。这些结果提示长期大剂量使用沙咪珠利可能存在肝、肾等损伤的风险。

关键词：沙咪珠利亚慢性毒性抗球虫

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盐酸头孢噻呋在奶牛血浆中UPLC-MS/MS检测方法的建立与确证

盐酸头孢噻呋在奶牛血浆中UPLC-MS/MS检测方法的建立与确证

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王建中孙菲菲张素霞龚晓会曹兴元中国农业大学动物医学院

【目的】头孢噻呋属于广谱半合成的第三代头孢菌素类抗生素,具有抗菌谱广、耐青霉素酶、临床疗效高、毒性低等优点,广泛应用于奶牛疾病的治疗。本实验通过将盐酸头孢噻呋在牛血浆中的主要代谢产物DFC衍生化为稳定DCA,并建立高效灵敏的UP... 详细信息

【目的】头孢噻呋属于广谱半合成的第三代头孢菌素类抗生素,具有抗菌谱广、耐青霉素酶、临床疗效高、毒性低等优点,广泛应用于奶牛疾病的治疗。本实验通过将盐酸头孢噻呋在牛血浆中的主要代谢产物DFC衍生化为稳定DCA,并建立高效灵敏的UPLC-MS/MS检测方法,为研究盐酸头孢噻呋在牛体内的药代动力学特征提供支持。【方法】提取与衍生化:取样品血浆500μL,加标50μL,涡动10s,加0.4%二硫赤藓糖醇溶液5.5mL,涡动2min,50℃水浴振荡15min,取出放置室温,加14%碘乙酰胺溶液1.5mL,避光室温下静置衍生30 min,用25%的磷酸溶液调节pH至2.5-2.6,离心15min（4℃,6000r/min）;净化:依次用10 mL甲醇、10 mL水活化HLB萃取柱,取上清液过柱,用3 mL水淋洗小柱之后,用2.5 mL90%乙腈溶液洗脱,洗脱液于氮吹仪吹干,残余物用500μL0.2%的甲酸溶液复溶,过0.22μm滤膜,取5μL进仪器分析。色谱条件:C色谱柱（50×2.1 mm,2.6μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液:0.1%甲酸乙腈溶液（95:5,V/V）,流速:0.4mL·min,柱温30℃。质谱条件:ESI+,多反应监测,离子源温度150℃,脱溶剂温度450℃,毛细管电压3kV,脱溶剂气流速800L/h。在200μg/L,1000μg/L,2000μg/L三个浓度进行添加回收实验。【结果】血浆中DCA在100-5000μg/L的浓度范围内,方法线性关系良好,相关系数r为0.9936。定量限（LOQ）和检测限（LOD）分别为10050μg/L和50μg/L。三个添加浓度的回收率在96.62%-106.06%;日内变异系数均小于6.45%,日间变异系数小于1.41%。待测物在冻融、室温、前处理后、在血浆中的稳定性试验检测的变异系数均低于15%。【结论】建立的UPLC-MS/MS方法满足分析检测要求。

关键词：盐酸头孢噻呋 DCA 奶牛 UPLC-MS/MS

来源：评论

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没食子酸对温和气单胞菌及嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制研究

没食子酸对温和气单胞菌及嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：卢静王振宁任梦柔黄国任房宝晨卜秀娟关爽邓旭明动物医学学院吉林大学

【目的】嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)及温和气单胞菌(Aeromonas sobria)是常见的兼性厌氧型食源性致病菌,是造成食品腐败的微生物之一。没食子酸是一种具有良好抗氧化活性和抑菌活性的天然活性物质,经常用于食品贮藏保鲜,但是... 详细信息

【目的】嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)及温和气单胞菌(Aeromonas sobria)是常见的兼性厌氧型食源性致病菌,是造成食品腐败的微生物之一。没食子酸是一种具有良好抗氧化活性和抑菌活性的天然活性物质,经常用于食品贮藏保鲜,但是没食子酸能否抑制气单胞菌进行贮藏保鲜的相关研究尚未见报道。因此,本文以嗜水气单胞菌及温和气单胞菌为研究对象,考察没食子酸的抑菌活性及其作用机制,以期为没食子酸在食品贮藏保鲜方面的应用奠定理论基础。方法本研究首先通过抑菌圈试验、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验,考察了没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌活性。然后通过以下实验进一步探讨了没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌机制:没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌杀菌曲线、没食子酸对OD260和OD280值的影响、没食子酸对电导率的影响、扫描电镜观察没食子酸对细菌外观结构形态的影响以及SDS-PAGE凝胶电泳。【结果】没食子酸(12 mM)对嗜水气单胞菌和温和气单胞菌的抑菌圈直径分别为26.3±0.44mm和24.06±0.04mm,没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的MIC和MBC均为0.15 mM。没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌机制研究结果如下,随着没食子酸浓度增大,杀菌能力增强,杀菌时间缩短;OD260和OD280值呈剂量-依赖性增大;在一定时间内电导率呈剂量-依赖性增大;扫描电镜结果显示,没食子酸浓度越大,菌体内膜凹陷越严重,形态越不规则,数量越少;电泳结果显示,相较空白组,没食子酸组随着浓度增大,更多的蛋白条带减弱甚至消失。结论没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌均有显著抑制作用,其可能的抑菌机制是通过破坏细胞膜完整性,使得核酸、蛋白质类物质、离子等细胞内容物溶出,导致细胞死亡,从而起到抑菌作用,SDS-PAGE凝胶电泳结果进一步证实了没食子酸能够影响细胞蛋白。本研究为没食子酸在贮藏保鲜中的运用,抑制食品中食源性致病菌,保障食品安全提供理论依据。

关键词：没食子酸嗜水气单胞菌温和气单胞菌抑菌机制细胞膜

来源：评论

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槲皮苷通过抑制Sortase A发挥对金黄色葡萄球菌感染的抑制作用

槲皮苷通过抑制Sortase A发挥对金黄色葡萄球菌感染的抑制作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王琳邓旭明王大成吉林大学人兽共患病研究所/吉林大学动物医学学院吉林大学动物科学学院

金黄色葡萄球菌的多重耐药性的出现和广泛传播促使了与传统抗生素作用机制不同的新型药物的发展。抗毒力策略在这方面极具潜力。近年来,Sortase A(SrtA)作为治疗金黄色葡萄球菌感染潜在药物靶点已经引起广泛关注,由SrtA锚定的表面蛋白... 详细信息

金黄色葡萄球菌的多重耐药性的出现和广泛传播促使了与传统抗生素作用机制不同的新型药物的发展。抗毒力策略在这方面极具潜力。近年来,Sortase A(SrtA)作为治疗金黄色葡萄球菌感染潜在药物靶点已经引起广泛关注,由SrtA锚定的表面蛋白是负责细菌黏附到特定器官组织、入侵宿主细胞和逃避宿主免疫反应的关键毒力因子。据报道SrtA的抑制剂可能成为治疗或预防金黄色葡萄球菌感染药物的有力候选。本实验采用荧光共振能量转移法,从常用的清热解毒的中药单体中筛选SrtA的抑制剂,并从发现几种酚酸类和黄酮类化合物具有显著抑制作用,黄酮类以槲皮苷效果最好(32.18±5.36μg/m1)。在本研究通过绘制槲皮苷抑制金葡菌生长曲线实验指出,槲皮苷是一种没有明显的抗金黄色葡萄球菌活性的天然化合物。随后,我们用酶标仪测定OD570,考察金葡菌NewmanD2C与纤连蛋白和纤维蛋白原的黏附,来判断槲皮苷对金葡菌黏附功能的影响。结果显示,金葡菌SrtA缺失菌株的黏附率最低,仅为11.17%和9.86%,与野生菌株组相比具有极显著差异(P<0.01)。并且随着槲皮苷浓度的上升,金葡菌黏附率也随之下降,说明槲皮苷的抑制活性呈剂量依赖关系。可以看到,在槲皮苷浓度为64μg/ml时,它们的黏附率只有51.90%(A)和49.60%(B),证明了槲皮苷可以通过抑制SrtA的活性来有效的削弱金葡菌的黏附功能。体内研究表明,CHA可以明显预防由金黄色葡萄球菌感染引起的小鼠肾脓肿并表现出显著的生存优势。最后,通过分子对接和动力学模拟实验证明,槲皮苷与SrtA蛋白的活性结合位点是Gly167和Va1193。综上所述,槲皮苷可以作为一个以抗毒力策略治疗细菌感染的先导化合物,为进一步开展新型药物的设计和研发提供了重要的实验数据和理论依据。

关键词：金黄色葡萄球菌,Sortase A 槲皮苷黏附肾脓肿结合位点

来源：评论

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LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

LPS对IPEC-J2细胞内P-gP表达的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张瑜王丽平南京农业大学动物医学院

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作... 详细信息

【目的】本试验拟以IPEC-J2细胞作为研究对象,检测LPS处理后细胞膜表面P-gp定位、总mRNA和总蛋白水平的变化情况,进一步探究LPS对猪组织细胞内P-gp表达的影响。【方法】试验首先用MTT法检测LPS对细胞的毒效应,并选用1、10和50μg/mL作为安全浓度处理。其次选用浓度为10μg/mL的LPS处理细胞不同时间,并用免疫荧光检测细胞膜上P-gp定位和表达的变化。最后,用高、中、低三个浓度的LPS分别处理IPEC-J2细胞1、3、6、12和24 h,并分别用荧光定量和Western blot的方法检测总mRNA及总蛋白表达水平。【结果】免疫荧光的结果表明,细胞膜上P-gp定位并没有发生改变,但荧光强度在处理1h后轻微减弱,3-24b增强。荧光定量结果表明,LPS处理1 h后50μg/mL浓度下Abcb1 mRNA表达显著下降,其他浓度差异不显著;处理3h后,Abcb1 mRNA表达和对照相比均明显增加;6 h和3 h比表达降低,但和对照比差异不显著;12 h后表达和对照比下降,但统计学差异不显著;24 h后mRNA的表达回复至对照水平。Western blot的结果显示,LPS处理1 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的降低;3 h后细胞内P-gp总体表达水平呈浓度依赖性的增加;6 h后,细胞内P-gp总体表达水平和对照相比又呈现抑制状态;12 h后1μg/mL组P-gp水平与对照比略有增加,10μg/mL和50μg/mL LPS仍抑制P-gp的表达,但抑制程度比6 h低;24 h后1μg/mL组P-gp表达量和对照相比又极显著降低,而10μg/mL和50μg/mL组P-gp表达量则逐渐回复接近对照水平。【结论】试验结果表明LPS处理后P-gp在IPEC-J2细胞膜上的表达量变化与猪组织细胞膜上的表达变化一致,均呈增加趋势,但其总RNA和总体蛋白表达水平与体内试验结果相似,均呈下降趋势。

关键词： LPS IPEC-J2 P-gp 免疫荧光荧光定量PCR 免疫印迹

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替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

替米考星和泰乐菌素对斑马鱼胚胎的发育毒性和心脏毒性效应

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：闫兆阳刘建业黄晓勇刘源崔一芳刘晓晔丁双阳中国农业大学动物医学院

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、4... 详细信息

本研究旨在观察和检测替米考星（tilmicosin,TMS）和泰乐菌素（tylosin,TYL）对斑马鱼的发育毒性和心脏毒性效应。选用6hpf之内的斑马鱼胚胎分别暴露在替米考星和泰乐菌素的溶液中,染毒液的浓度配制为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40mg/L。观察并统计120hpf内斑马鱼胚胎的发育情况,其中记录其在48hpf的心率变化、72hpf的孵化情况以及96hpf的致畸和死亡。120hpf时取出相同数目0mg/L、0.625mg/L、2.5mg/L和10mg/L未死亡的斑马鱼检测其体内超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量以及实时荧光定量聚合酶链反应检测与相关靶器官基因和凋亡基因的表达量的情况。结果表明,替米考星和泰乐菌素均表现出心动过速或过缓,替米考星和泰乐菌素都在低浓度使斑马鱼心率加速,高浓度心率减慢;并且替米考星能使斑马鱼出现心包水肿、脊柱弯曲和尾部弯曲,在1.25mg/L以上浓度出现致畸,在1.25mg/L、2.5mg/L和5mg/L几乎只出现心包水肿,在10mg/L、20mg/L和40mg/L以出现脊柱弯曲为主。在96hpf时40mg/L暴露组中的斑马鱼全部死亡,然而40mg/L的泰乐菌素没有使斑马鱼出现死亡现象。通过计算,替米考星的半数致死浓度(LC)为16.26mg/L,其半数效应浓度(EC)为6.424mg/L。120hpf时检测SOD和MDA的含量可知,随着两种大环内酯类类药物的暴露浓度增加,超氧化物歧化酶（SOD）含量减少,而丙二醛（MDA）含量增加。通过荧光定量聚合酶链反应检测出骨形态发生蛋白（BMP-4）、硒蛋白（Sepn-1）和凋亡基因表达量增加,而抗凋亡基因的表达量相对减少。通过以上实验结果可知,相对于泰乐菌素,替米考星会对斑马鱼胚胎导致更强的发育毒性和心脏毒性,应更加谨慎使用。

关键词：斑马鱼胚胎替米考星泰乐菌素毒性效应

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红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

红景天苷对黏菌素致雪旺细胞损伤的保护作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：国政陆子音衣美双王剑谢道远陈雪平李继昌东北农业大学动物医学学院

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡... 详细信息

【目的】探讨红景天苷对黏菌素所致神经毒性的拮抗作用。【方法】采用MTT法构建黏菌素体外损伤雪旺细胞的模型,在此基础上筛选能有效拮抗黏菌素致雪旺细胞毒性的红景天苷浓度。采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测观察对细胞凋亡率的影响;倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、透射电镜观察对细胞形态、细胞核形态及细胞内超微结构的影响;LDH水平测试检测对细胞膜完整性的影响;ROS含量测定、SOD活性测定、MDA含量检测来探讨对氧化应激的影响;DNA Ladder观察对DNA完整性的影响;Rh123染色流式细胞仪检测对线粒体膜电位的影响。【结果】MTT法检测结果显示,250μg·mL硫酸黏菌素作用于雪旺细胞24 h时,细胞活力为63.78%（对照组为100%）,损伤程度适宜。因此,后续试验选用250μg·mL硫酸黏菌素作用雪旺细胞24 h来构建黏菌素体外损伤雪旺细胞模型。选用12.5、25、50μg·mL浓度作为红景天苷保护硫酸黏菌素致雪旺细胞损伤的工作浓度。Annexin V-FITC/PI双染流式检测结果显示,红景天苷能有效降低硫酸黏菌素诱导雪旺细胞的凋亡率。降低损伤细胞培养液内LDH含量,使细胞内ROS、MDA含量显著降低,SOD活性升高,说明红景天苷能保护硫酸黏菌素损伤细胞膜完整性,稳固黏菌素引起细胞内氧化-抗氧化失衡。倒置显微镜、Hoechst33258荧光染色、电镜超微结构观察发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞胞体变圆,轴突变短,细胞核变小、固缩,染色质凝聚、边缘化,线粒体结构不清、肿胀、空泡化等凋亡特征。DNA Ladder试验结果提示,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素诱导的雪旺细胞DNA断裂。Rh123染色流式细胞仪检测发现,红景天苷能有效缓解硫酸黏菌素引起的线粒体膜电位降低。【结论】硫酸黏菌素能引起雪旺细胞凋亡,诱发神经毒性,引起细胞内氧化应激损伤。红景天苷能有效拮抗其损伤。

关键词：黏菌素神经毒性雪旺细胞红景天苷保护作用

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