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767 篇 会议

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学科分类号

628 篇 农学
- 599 篇 兽医学
- 16 篇 畜牧学
- 13 篇 农业资源与环境
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68 篇 医学
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- 18 篇 中药学(可授医学、...
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- 1 篇 电子科学与技术（可...
- 1 篇 计算机科学与技术...
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- 20 篇 应用经济学
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- 2 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

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37 篇 大肠杆菌
23 篇 氟苯尼考
20 篇 氧化应激
18 篇 耐药基因
18 篇 猪
17 篇 残留
15 篇 药代动力学
13 篇 药动学
12 篇 残留检测
11 篇 金黄色葡萄球菌
11 篇 黏菌素
11 篇 多重耐药
10 篇 mic
10 篇 生物被膜
9 篇 nf-κb
9 篇 副猪嗜血杆菌
9 篇 hplc
9 篇 肠球菌
9 篇 头孢喹肟

机构

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97 篇 华南农业大学
57 篇 南京农业大学
43 篇 吉林大学
39 篇 扬州大学
36 篇 东北农业大学
29 篇 新疆农业大学
23 篇 四川农业大学
19 篇 青岛农业大学
19 篇 广西大学
17 篇 福建农林大学
17 篇 中国农业科学院兰...
14 篇 湖南农业大学
13 篇 沈阳农业大学
13 篇 华中农业大学
12 篇 内蒙古农业大学
10 篇 北京食品营养与人...
10 篇 西北农林科技大学
10 篇 河南农业大学
10 篇 中国农业科学院兰...

作者

49 篇 邓旭明
29 篇 刘雅红
29 篇 袁宗辉
28 篇 李剑勇
27 篇 杨亚军
27 篇 沈建忠
27 篇 江善祥
26 篇 廖晓萍
26 篇 孙坚
26 篇 卜仕金
25 篇 刘希望
23 篇 王丽平
22 篇 汤树生
22 篇 秦哲
22 篇 曾振灵
22 篇 李世宏
21 篇 汪洋
19 篇 季辉
18 篇 肖希龙
17 篇 郝智慧

语言

762 篇 中文
5 篇 英文

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猪细胞色素P450氧化酶3A29对黄曲霉毒素B1的生物激活和区域选择性

猪细胞色素P450氧化酶3A29对黄曲霉毒素B1的生物激活和区域选择性

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：吴骏陈若虹张财辉李康柏徐慰盈王利娟陈庆梅母培强蒋珺文继开邓诣群广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室华南农业大学生命科学学院

黄曲霉毒素作为一种极强的肝致癌物严重威胁动物和人体的健康,日益引起更多的食品安全关注。由于不可避免的饲料污染,猪极其遭受黄曲霉毒素的危害,其有毒有害产品潜在威胁人类健康。然而,到目前为止,人们对黄曲霉毒素B（AFB）在猪体内... 详细信息

黄曲霉毒素作为一种极强的肝致癌物严重威胁动物和人体的健康,日益引起更多的食品安全关注。由于不可避免的饲料污染,猪极其遭受黄曲霉毒素的危害,其有毒有害产品潜在威胁人类健康。然而,到目前为止,人们对黄曲霉毒素B（AFB）在猪体内的代谢过程,特别是对AFB活化的关键细胞色素P450氧化酶仍缺乏了解。在这项研究中,我们首先在大肠杆菌中表达纯化了来源于猪肝脏的细胞色素P450氧化酶3A29（CYP3A29）,通过CO还原光谱和尼福地平氧化证实了其具有代谢活性。膜重构孵育实验证实该重组CYP3A29能在体外氧化AFB形成其活化产物AFB-8,9-外环氧化物。这一结果表明该酶可能在猪体内发挥活化AFB的功能。我们进一步探讨了3A29对AFB区域选择性激活的结构基础。T309A对AFB的激活显著降低,而F304A则表现出对AFB增强的激活。与突变研究结果一致的是,分子对接模拟表明Thr309通过形成氢键稳定AFE的结合。此外,Phe304侧链大的苯环对AFB形成了潜在的空间位阻,并非以前人3A4研究所认为的π-π相互作用。这项研究首次证明了猪体内CYP3A29对AFB的生物活化作用,对于理解3A29对AFB的区域选择性提供了参考。

关键词： P450 3A29 AFB1 生物激活区域选择性

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氟苯尼考-β-环糊精包合物的研制

氟苯尼考-β-环糊精包合物的研制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：马可张平龚琪邓桦蒲文珺杨鸿佛山科学技术学院生命科学学院广东养宝生物制药有限公司

(目的)氟苯尼考是酰胺醇类动物专用广谱抗生素,广泛应用于敏感菌所致的畜禽及鱼的细菌性疾病的治疗。为提高氟苯尼考的溶解度、溶出速度和生物利用度,方便给药,采用β-环糊精包含技术制备氟苯尼考水溶性粉。（方法）采用正交设计法对影... 详细信息

(目的)氟苯尼考是酰胺醇类动物专用广谱抗生素,广泛应用于敏感菌所致的畜禽及鱼的细菌性疾病的治疗。为提高氟苯尼考的溶解度、溶出速度和生物利用度,方便给药,采用β-环糊精包含技术制备氟苯尼考水溶性粉。（方法）采用正交设计法对影响包合率的主要因素投料比、包合温度、包合时间等进行正交试验,以包合率和包合物产率为评价指标,筛选最佳包合处方工艺,以β-环糊精为包合材料,取氟苯尼考25 g,β-环糊精50 g,包合温度100℃,包合时间30min,采用饱和水溶液法制备氟苯尼考-β-环糊精包合物;以红外分光光度法对包合物进行确证,用高效液相色谱法,紫外分光光度法测定溶解度和溶出度,并计算包合率和包合物产率。结果显示:包合物中氟苯尼考和β-环糊精的特征峰消失,在3430 cm处出现新的特征峰,证明形成了氟苯尼考-β-环糊精包合物;紫外分光光度法测得包合物产率为95.32%,包合率为84.90%;高效液相色谱法测得氟苯尼考-β-环糊精包合物30 min最大溶解度为0.45～0.5g/100mL,15 min溶出率为94.7%,30 min溶出率为100%。（结论）氟苯尼考-β-环糊精包合物制备方法简单,可显著提高氟苯尼考水溶性,便于临床饮水给药。

关键词：氟苯尼考 β-环糊精包合物研制

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10%磷酸替米考星可溶性粉在鸡体内残留消除研究

10%磷酸替米考星可溶性粉在鸡体内残留消除研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：吴天兴施景灏冯全利陆小松刘芳卜仕金扬州大学兽医学院中国农业科学院家禽研究所

【目的】通过对10%磷酸替米考星可溶性粉在鸡体内残留消除研究,了解替米考星在鸡体内组织分布规律,为制定休药期提供依据。【方法】鸡可食性组织中替米考星残留采用乙腈提取,C18固相萃取小柱净化,HPLC紫外检测器检测,外标法定量。流动... 详细信息

【目的】通过对10%磷酸替米考星可溶性粉在鸡体内残留消除研究,了解替米考星在鸡体内组织分布规律,为制定休药期提供依据。【方法】鸡可食性组织中替米考星残留采用乙腈提取,C18固相萃取小柱净化,HPLC紫外检测器检测,外标法定量。流动相为乙腈-四氢呋喃-二丁胺磷酸盐缓冲液-水溶液。替米考星在0.05～50μg/ml浓度范围内具有良好的线性关系,鸡各可食性组织中替米考星在0.05、0.5和5μg/g添加浓度时,回收率在80%00%之间,检测限为0.025μg/g,定量限为0.050μg/g。磷酸替米考星可溶性粉以75mg/L,（以替米考星计）剂量混饮,连用3天,分别于停药后第1d、4d、7d、10 d和13d各屠宰6只鸡采集其可食性组织,采用经验证的鸡可食性组织中替米考星残留量检测方法测定用药后鸡各可食性组织中替米考星的残留量。将替米考星在鸡各组织中残留量检测的实测数据采用WT1.4计算软件拟合计算休药期。【结果】替米考星在肝脏中残留最高,其次是肾脏,而肌肉和皮脂中残留较低。将替米考星在鸡各组织中残留量检测的实测数据采用WT1.4计算软件拟合,得到替米考星在肝脏、肾脏、皮脂和肌肉组织的休药期分别为13.10、13.54、7.32和8.59 d。按双单侧95%置信区间计算替米考星按推荐方案混饮给药建议在鸡的休药期可暂定为14d。【结论】10%磷酸替米考星可溶性粉按推荐方案给鸡混饮,连用3天,建议休药期为14d。

关键词：替米考星高效液相色谱残留消除鸡休药期

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Drug delivery system based on single-wall metal-organic nanotubes

Drug delivery system based on single-wall metal-organic nano...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者： Linyan Yang Cun Li Jifei Ma Tianming Jin College of Animal Science and Veterinary Medicine Tianjin Agricultural University

Cancer continues to increase with increasing age of the *** a number of situations,the malignancy of tumors is detected only at advanced stages when administration of chemotherapeutic drugs is toxic to healthy *** nanotubes(CNTs) comprised of thin sheets of benzene rings rolled up into the shape of seamless cylinders has recently attracted significant attention for use in biomedical applications[1-6].A limited number of single-wall metal-organic nanotubes(SWMONTs) have been synthesized,while a majority of reports have focused solely on structural details,SWMONTs have already shown promise in highly selective adsorptions[7].Both single-walled nanotubes(SWNT) and multi-walled nanotubes(MWNT) are being considered as a drug delivery nanocarrier[8],because they were observed to cross cell membranes[9-11]and exhibit blood circulation half-lives of the order of hours[12].The possible mechanisms proposed for CNT-drug interaction are:(a) the absorption of active components of drug within the CNT mesh,(b)non-covalent or covalent linkage of drug molecules,peptides,and nucleic acids to the exterior walls of the CNTs,and(c) the use of CNT channels as ***,we used the reported self-assembled functionalized SWMONTs to realize drug delivery of 5-Fluorouracil(5-FU),which could be assigned to the first CNT-drug interaction[13].The characterization of the material indicated the presence of drug associated with SWMONTs(5FU@SWMONTs) in a proportion of 0.33 g 5-FU per 1.0 g of *** drug demonstrated a slow release profile where 79.6%of the drug was released in PBS buffer(pH7.4) in 24 hours,while 75%in PBS buffer(pH5.7) in 24 *** cytotoxic tests were carried out against two cell lines:4T1 and *** highest lethality of cancer cells occurred at the highest concentration of 5FU@SWMONTs for the longest period of *** results demonstrate that the cytotoxicity of 5FU@SWMONTs to cancer cells was improved by the SWMONTs component.

关键词： single-wall metal-organic nanotubes drug delivery cell proliferation

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一种使用UPLC-MS/MS检测牛奶中19种β-内酰胺类药物残留的前处理方法

一种使用UPLC-MS/MS检测牛奶中19种β-内酰胺类药物残留的前处理...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

以青霉素类和头孢菌素类为代表的β-内酰胺抗生素是历史悠久的抗微生物药物,同时也是最大和最重要的一类抗生素.其具有杀菌活性强、毒副作用小等特点,在动物饲养管理过程中应用非常普遍.由于过敏反应和细菌产生耐药性等原因,许多国家对... 详细信息

以青霉素类和头孢菌素类为代表的β-内酰胺抗生素是历史悠久的抗微生物药物,同时也是最大和最重要的一类抗生素.其具有杀菌活性强、毒副作用小等特点,在动物饲养管理过程中应用非常普遍.由于过敏反应和细菌产生耐药性等原因,许多国家对动物使用β-内酰胺类药物和食品残留进行了严格的监控.目的：本研究对比用超滤离心浓缩管和HLB-SPE柱两种检测牛奶中19种β-内酰胺类药物(包括青霉素-V、青霉素-G、氯唑西林、双氯西林、氟氯西林、萘夫西林、美西林、苯唑西林等13种青霉素类及其代谢物和头孢哌酮、头孢地尼、头孢噻吩等4种头孢类及美罗培南、多尼培南2种碳青霉烯类)残留的前处理方法,确立一种简单、快捷,回收效果好的前处理方法.方法：使用19种药物的混合标准溶液为外标,样品经沉淀蛋白,离心后同时用HLB-SPE柱和超滤离心浓缩管净化、富集处理,在Waters Acquity UPLCTM BEH C18柱(100 mm× 2.1 mm,1.7 μm)中分离,以0.1％甲酸水溶液/乙腈为流动相,经梯度洗脱将19种β-内酰胺类抗生素完全分离：采用正离子扫描方式确定丰度比最高的两对离子作为监测离子,进行MRM模式定性定量分析.结果：用超滤离心浓缩管对牛奶进行净化浓缩处理比HLB柱的回收效果好,回收率均在60％-100％,相关系数r2均大于0.99.结论：超滤离心浓缩管的前处理方法简单,试剂消耗少,测定时间短,结果准确可靠,可成功应用于牛奶中β-内酰胺类药物的残留检测.

关键词： UPLC-MS/MS 牛奶 β-内酰胺类残留前处理

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养猪场废水及周边土壤中氟苯尼考耐药菌的初步研究

养猪场废水及周边土壤中氟苯尼考耐药菌的初步研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：赵琴汪洋吴聪明沈建忠

为调查养猪场周边环境中氟苯尼考耐药菌的流行情况,我们采集了北京市某猪场的养殖的废水及周边土壤等样品,利用传统的可培养的方法分离纯化得到86株耐氟苯尼考(MIC≥16mg/L)的抗性菌株。通过16S RNA测序进行菌株鉴定,结果显示含有假单... 详细信息

为调查养猪场周边环境中氟苯尼考耐药菌的流行情况,我们采集了北京市某猪场的养殖的废水及周边土壤等样品,利用传统的可培养的方法分离纯化得到86株耐氟苯尼考(MIC≥16mg/L)的抗性菌株。通过16S RNA测序进行菌株鉴定,结果显示含有假单胞菌属46株,气单胞菌属18株,不动杆菌属6株,芽孢杆菌菌属6株,肠杆菌科5株,栖冷克吕沃尔菌2株,粪肠球菌2株以及肺炎杆菌1株。采用常规PCR检测已知氟苯尼考耐药基因在抗性菌中的存有情况,发现fexA的分离率为7.0%(6/86),cfr为3.5%(3/86),有趣的是含有cfr的菌株均含有fexA,而floR阳性菌的分离率高达39.5%(34/86),但是fexB的阳性率较低,仅有1株分离自猪场周边土壤中的烘肠球菌中有检出,然而还有44株未检测到任何已知的氟苯尼考特异性耐药基因。这是首次在土壤中发现含有fexB的阳性菌株,而目通过全基因组测序及序列比对结果发现,该菌中含有的fexB片段(约4kb)与之前本实验室刘河冰等人所报道的序列致(相似性为99%),也是定位于质粒上,但是否为同一个质粒还不得而知。对于其他的阳性菌株我们尚未进行下一步研究,在这些菌株中可能存在的氟苯尼考耐药基因,由此可见,随着养猪业发展,氟苯尼考耐药基因不仅在动物体内被不断发现,而且在猪场周边环境中的传播也是愈发严重,目各个氟苯尼考耐药基因的分布情况越来越呈现多样化,甚至可能会通过一定途径由环境传播至人人类,影响人类公众健康康。

关键词：猪场环境氟苯尼考 fexB 耐药基因

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动物源沙门菌中CTX-M型ESBLs酶的流行传播机制研究

动物源沙门菌中CTX-M型ESBLs酶的流行传播机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张文慧任思琪林香燕曾振灵蒋红霞华南农业大学兽医学院

【目的】研究动物源沙门菌中CTX-M型ESBLs酶的流行及传播分子特征。【方法】2014年2-9月,从河南,山东,湖北,广东四省共采集3850份猪和鸡直肠拭子和粪便拭子,共分离鉴定得到159株沙门氏菌,其中包括猪源90株,鸡源69株。采用泰国沙门菌菌... 详细信息

【目的】研究动物源沙门菌中CTX-M型ESBLs酶的流行及传播分子特征。【方法】2014年2-9月,从河南,山东,湖北,广东四省共采集3850份猪和鸡直肠拭子和粪便拭子,共分离鉴定得到159株沙门氏菌,其中包括猪源90株,鸡源69株。采用泰国沙门菌菌属诊断血清对分离到的沙门菌进行血清型鉴定,采用琼脂稀释法测定菌株对抗生素的敏感性,用PCR扩增ESBIs耐药基因。脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株克隆关系。接合转移/转化、质粒复制子分型、S1..PFGE和Southern杂交对bla基因的质粒进行分析。【结果】159株沙门菌的血清型鉴定表明主要的血清型是鼠伤寒（91株）和印第安纳（57株）,检测到肠炎沙门菌1株,剩余10株没有鉴定出血清型。药物敏感性试验表明沙门菌多重耐药现象比较严重,对头孢类的耐药率由头孢曲松的86.5%到头孢他定的31%不等。成功分型150株菌的PFGE得到47种不同的谱型,同一地区或不同地区的同一血清型的沙门菌图谱相似度很高,存在克隆传播。产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶沙门氏菌共有45株,包括bla3个亚型,其中以bla最为流行（35,77.8%）;其次是blacrx.1M-27（8,17.7%）,检测到产CMY--2沙门菌3株,其中有一株同时产CTX-27和CMY-2酶。没有检测到bla,bla,bla等基因。45株产CTX-M沙门菌,有36株发生了bla基因的转移,质粒分析表明,产CTX沙门菌质粒复制子类型主要为P型,N型和H12型,质粒大小有50kb到220kb不等,以135kb为主。【结论】产CTX-M沙门菌株的克隆传播和质粒介导的水平传播导致沙门菌中CTX-M型ESBLs酶的广泛传播,同时使沙门菌的多重耐药日益严重,应引起广泛关注。

关键词： ESBLs 沙门菌 CTX-M

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替米考星肠溶颗粒预混剂在猪体内残留消除研究

替米考星肠溶颗粒预混剂在猪体内残留消除研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：韩孝欣吴兴天刘芳张明珠卜仕金扬州大学兽医学院

【目的】通过对替米考星肠溶颗粒预混剂在猪体内残留消除研究,了解替米考星在猪体内组织分布规律,为制定休药期提供依据。【方法】猪可食性组织中替米考星残留采用乙腈提取液提取,C18柱净化。流动相为乙腈-四氢呋喃-二丁胺盐缓冲液-水（... 详细信息

【目的】通过对替米考星肠溶颗粒预混剂在猪体内残留消除研究,了解替米考星在猪体内组织分布规律,为制定休药期提供依据。【方法】猪可食性组织中替米考星残留采用乙腈提取液提取,C18柱净化。流动相为乙腈-四氢呋喃-二丁胺盐缓冲液-水（12:5:5:78）。脂肪、肌肉、肝脏和肾脏中替米考星的检测限为0.025μg/g,定量限均为0.050μg/g。空白肌肉和脂肪组织制得添加替米考星浓度为050μg/g0.05、0.1和1μg/g时,空白肝脏和肾脏组织制得添加替米考星浓度为0.05、0.5和5rtg/g时,平均回收率均为80%00%;批间和批内变异系数均5%。替米考星肠溶颗粒按推荐浓度（0.4g/kg饲料,以替米考星计）添加在饲料中让猪自由采食,连用15天。停药后分别于第1d、4d、7d、12 d和16d时各随机选取5头猪宰杀并采集其可食性组织。猪可食性组织中替米考星的残留量采用经验证的猪可食性组织中替米考星残留量的高效液相色谱检测方法测定,将替米考星在猪各组织中残留量检测的实测数据采用WT1.4计算软件拟合计算休药期。【结果】残留消除研究表明,替米考星在肾中的残留最高,其次是肝脏,而肌肉和脂肪组织中较低。替米考星肠溶颗粒预混剂按推荐给药药方案混饲给药后,替米考星在猪肝脏、脂肪、肌肉和肾脏的休药期分别为为8.73天、2.79天、8.31天和7.13天。【结论】替米考星肠溶颗粒预混剂按推荐给药方案使用建议休药期可暂定为9天。

关键词：猪替米考星残留消除休药期

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在2008-2014年间中国食品动物源大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的流行趋势

在2008-2014年间中国食品动物源大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的流...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王爽吴聪明汪洋何涛林居纯四川农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院

产超广谱β-内酰胺酶的大肠杆菌是对普通的β-内酰胺类抗生素(像氨苄西林,头孢唑林,头孢噻呋等)耐药的大肠杆菌,不但对兽医临床用药的有效性产生直接的影响,而且对食品安全性,人类用药有效性也存在巨大的隐患。(目的)本次研究着重调查国... 详细信息

产超广谱β-内酰胺酶的大肠杆菌是对普通的β-内酰胺类抗生素(像氨苄西林,头孢唑林,头孢噻呋等)耐药的大肠杆菌,不但对兽医临床用药的有效性产生直接的影响,而且对食品安全性,人类用药有效性也存在巨大的隐患。(目的)本次研究着重调查国内10个省份(广州,上海,四川,山东,内蒙,河南,安徽,重庆,湖南,山西)猪源和鸡源大肠杆菌在2008年-2014年间产超广谱β-内酰胺酶的流行趋势。(方法)用16种抗生素(氨苄西林,阿莫西林,阿莫西林+克拉维酸,头孢唑林,多西环素,氟苯尼考,庆大霉素,环丙沙星,复方磺胺,多粘菌素E,萘啶酸,头孢噻呋,头孢噻肟,头孢他啶,头孢喹肟,美罗培南)测定产超广谱β-内酰胺酶的阳性菌株的耐药情况,PCR测定其携带的基因型,PFGE及肉汤结合法判定其传播特性。(结果)在1084株大肠杆菌中有397株确定为产超广谱β-内酰胺酶的大肠杆菌,在年份中呈升高趋势。在16种抗生素测试中,6种呈现高度耐药(氨苄西林,多西环素,阿莫西林,萘啶酸,头孢噻呋和复方新诺明),2012年后耐药率均达到100%,除美罗培南在外,对其他抗生素也呈现出不同程度的耐药。在本次调查中,BlaCTX-M基因型为最流行的基因型,共检测出12种BlaCTX-M基因型,其中BlaCTX-M-55占41.55%,BlaCTX-M-65占22.44%,BlaCTX-M14占18.56%,9.32%的阳性菌株检测出含有AMPc基因,对于产超广谱β-内酰胺酶的阳性菌株,同源性不明显,但有46.67%的含多重耐药基因的阳性菌株成功的将耐药基因转移给受体,且受体耐药性有明显增强。(结论)国内产超广谱β-内酰胺酶的大肠杆菌比例在不断升高,其耐各种抗生素情况也愈发严重,多重耐药性及传播特点不容小觑,整顿兽药市场,规范兽医临床用药,实时监测耐药趋势势在必行。

关键词：产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌动物源流行趋势

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Identification of Campylobacter jejuni and determination of point mutations associated with macrolide resistance using a multiplex TaqMan MGB real-time PCR

Identification of Campylobacter jejuni and determination of ...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：郝海红刘杰 KUANG Xiuhua DAI Menghong CHENG Guyue WANG Xu PENG Dapeng HUANG Lingli AHMAD Ijaz REN Ni LIU Zhenli WANG Yulian 袁宗辉 National Reference Laboratory of Veterinary Drug Residues(HZAU) and MAO Key Laboratory for Detection of Veterinary Drug Residues Huazhong Agricultural University MOA Laboratory for Risk Assessment of Quality and Safety of Livestock and Poultry Products Huazhong Agricultural University

The aim of the study was to develop a multiplex real-time PCR method to identify Campylobacter jejuni containing mutations commonly associated with macrolide resistance.A multiplex fluorescence real-time PCR assay was developed based on TaqMan minor groove binder(MGB) *** VS1-MGB probe was designed based on the VS1 gene and was used to identify Campylobacter *** 23 S rDNA-MGB probe was designed to distinguish macrolide resistance mutations in 23 S rDNA,while 57D-MGB and 74D-MGB were designed to detect resistance mutations in ribosomal protein *** specificity and accuracy of our method were identical to the conventional biochemical tests,mapA PCR,minimum inhibitory concentration(MIC) determination and DNA *** linear detection limit of the method was 003 ng genomic DNA and three colony formation unit(CFU) per *** 6 of 18 cases,the nature of Erythromycin resistance could be correctly determined from natural isolates;absence of the tested mutations was demonstrated in the remaining four resistant ***,a multiplex TaqMan MGB real-time PCR assay with high specificity and accuracy was developed to simultaneously identify *** and detect the gene mutations associated with macrolide *** multiplex method can potentially simplify the identification of Camp,jejuni and determine macrolide resistance due to mutations in 23 S rDNA or ribosomal protein *** method has a potential for application in different research areas and molecular surveillance.

关键词： C.jejuni macrolide resistance MGB point mutation real-time PCR.

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