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306 篇 农学
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2 篇 工学
- 1 篇 环境科学与工程（可...
- 1 篇 生物工程
1 篇 理学
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主题

17 篇 猪瘟病毒
15 篇 prrsv
13 篇 猪细小病毒
12 篇 胸膜肺炎放线杆菌
12 篇 鉴定
11 篇 混合感染
11 篇 高致病性猪蓝耳病
11 篇 猪
11 篇 猪繁殖与呼吸综合...
9 篇 猪圆环病毒2型
9 篇 原核表达
9 篇 pcr
8 篇 分离
8 篇 副猪嗜血杆菌
8 篇 猪圆环病毒
8 篇 猪链球菌
8 篇 序列分析
8 篇 表达
7 篇 疫苗
7 篇 猪肺炎支原体

机构

24 篇 军事医学科学院军...
16 篇 华中农业大学
11 篇 吉林大学
10 篇 华南农业大学
10 篇 青岛农业大学
10 篇 四川农业大学
9 篇 南京农业大学
9 篇 河南省动物疫病预...
8 篇 辽宁益康生物制品...
8 篇 江苏省农业科学院...
7 篇 广西大学
7 篇 中国农业大学
6 篇 中国农业科学院哈...
6 篇 东北农业大学
5 篇 黑龙江八一农垦大...
5 篇 中国畜牧兽医学会...
5 篇 广西兽医研究所
5 篇 湖南省兽医总站
5 篇 四川大学生命科学...
5 篇 中国农业科学院哈...

作者

11 篇 金宁一
11 篇 崔尚金
10 篇 张超范
10 篇 万遂如
9 篇 陈焕春
8 篇 冯书章
8 篇 邵国青
7 篇 赵雪丽
7 篇 戚亭
7 篇 刘军
7 篇 文心田
7 篇 祝令伟
7 篇 刘茂军
7 篇 廖明
7 篇 刘长明
7 篇 刘光辉
7 篇 闫若潜
7 篇 亓文宝
7 篇 涂长春
7 篇 黄小波

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310 篇 中文
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猪α干扰素的原核表达及抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定

猪α干扰素的原核表达及抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：张志凌闫若潜赵明军刘光辉赵雪丽盛敏吴志明河南省动物疫病预防控制中心

为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究设计引物自猪肝脏总DNA扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS... 详细信息

为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究设计引物自猪肝脏总DNA扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用细胞病变抑制法分别测定rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗水泡性口炎病毒(VSV)增殖活性及在Marc-145细胞上抑制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的增殖活性以分别评价rPoIFN-α的活性单位及其体外抑制高致病性PRRSV增殖所需的最低浓度。结果表明,成功克隆了PoIFN-α成熟肽基因,基因全长501bp,编码166个氨基酸;表达的rPoIFN-α蛋白分子量大小20.7 Ku左右,与预期大小相一致;经纯化后的蛋白纯度在95%以上;纯化的rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗VSV病毒活性单位为1.4482×104 IU/mL(5.2×106 IU/mR),在Marc-145细胞上能完全抑制高致病性PRRSV增殖所需的rPoIFN-α蛋白最低有效量为640 U/mL(2.3×104 U/mg)。本研究成功表达了具有抗病毒活性的PoIFN-α蛋白,这些研究为新型基因工程抗病毒制剂的开发以及高致病性猪繁殖与呼吸综合征等病毒性疾病的预防和治疗奠定了基础。

关键词：猪α干扰素表达纯化高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性

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共表达H1和H3亚型SIV HA蛋白重组腺病毒的构建及鉴定

共表达H1和H3亚型SIV HA蛋白重组腺病毒的构建及鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：张文炎叶贺佳欧阳坤容罗开健亓文宝廖明华南农业大学兽医学院广州华南农大生物制品有限公司

本研究构建了包含H1和H3亚型猪流感病毒HA蛋白的重组腺病毒,该腺病毒为载体的疫苗可以产生针对H1和H3亚型SIV的抗体,符合"一针防两病"的疫苗开发思路,具有重要的研究价值和应用前景.首先将H1和H3亚型SIV HA基因分别连接到pMD1... 详细信息

本研究构建了包含H1和H3亚型猪流感病毒HA蛋白的重组腺病毒,该腺病毒为载体的疫苗可以产生针对H1和H3亚型SIV的抗体,符合"一针防两病"的疫苗开发思路,具有重要的研究价值和应用前景.首先将H1和H3亚型SIV HA基因分别连接到pMD18-T载体上,定点突变H1亚型SIVHA基因内部的NheⅠ和Bst BⅠ酶切住点,同样方式定点突变H3亚型SIV HA基因内部的BglⅡ酶切位点,利用NheⅠ和Bst BⅠ酶切位点将测序正确的突变质粒上的H1亚型SIV HA基因替换穿梭载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中的GFP基因,利用BglⅡ酶切位点将测序正确的突变质粒上的H3亚型SIV HA基因插入到穿梭载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中的启动子下游,经酶切、PCR鉴定和序列测定正确的穿梭质粒命名为***-H1,将该穿梭质粒与腺病毒基因组质粒oAdenoVatorAE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组后产生重组腺病毒质粒pAd-H3-H1,该质粒经PacⅠ酶切后转染AD293细胞,收获有细胞病变的细胞,PCR鉴定及Western-blot分析结果表明,所获得了重组腺病毒rAd-H3-H1能正确表达H1和H3亚型SIV HA蛋白。

关键词：重组腺病毒 SIV HA

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猪源大肠杆菌及沙门菌对β-内酰胺类药物耐药表型和耐药基因的检测

猪源大肠杆菌及沙门菌对β-内酰胺类药物耐药表型和耐药基因的检测

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：叶满玉王红宁田国宝赵应望张安云四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心四川大学“985工程”西南资源环境与灾害控制科技创新平台四川农业大学

本研究从12个规模化猪场分离64株大肠杆菌和36猪沙门氏菌,用β-内酰胺类药物(氨苄青霉素、头孢噻吩、头孢西丁、头孢他啶、孢曲松、头孢噻肟、亚胺培南、氨曲南、头孢噻夫、头孢吡肟、头孢泊肟)进行药敏实验,并对采集的菌株采用本实验... 详细信息

本研究从12个规模化猪场分离64株大肠杆菌和36猪沙门氏菌,用β-内酰胺类药物(氨苄青霉素、头孢噻吩、头孢西丁、头孢他啶、孢曲松、头孢噻肟、亚胺培南、氨曲南、头孢噻夫、头孢吡肟、头孢泊肟)进行药敏实验,并对采集的菌株采用本实验室建立的多重PCR检测方法,进行β-内酰胺类药物耐药基因CTX-M、SHV和TEM的PCR检测,结果大肠杆菌及沙门氏菌对β-内酰胺类耐药率为氨苄青霉素86%、头孢噻吩29%、头孢他啶8%.头孢泊肟6%、头孢噻夫4%、头孢噻肟4%、氨曲南3%、头孢西丁3%、头孢曲松3%、亚胺培南0、头孢吡肟0,在这100株菌中TEM的检出率最高为T EM82%(82/100),SHV的检出率34%(34/100)、CTX-M23%检出率(23/100),与药敏实验结果的符合率为90.8%

关键词： β-内酰胺类药物耐药性检测

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猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合基因真核表达载体的构建、表达及在动物体内的免疫效果研究

猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合基因真核表达载体的构建、表达...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：吴志明闫若潜贾松涛赵雪丽张志凌张健河南省动物疫病预防控制中心

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗,本研究采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)(G4S)3将PCV2的ORF2全长基因和猪白介素2成熟肽基因(PoIL-2)构建成PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因并克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中;筛选阳性重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)转染COS-7细胞,分别采用PCV2抗原间接免疫荧光试验和PoIL-2蛋白ELISA试验方法检测COS-7细胞中表达的重组融合蛋白(rCap-linker-PoIL-2)生物学活性;提取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2和只含PCV2 ORF2基因的重组表达质粒pcDNA3.1/OFR2(rocDNA3.1/OFR2)免疫Balb/c小鼠和猪并检测其免疫效果.结果表明:成功构建了PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因及其pcDNA3.1(+)重组表达质粒;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2在COS-7细胞浆内进行了表达,表达的rCap-linker-PoIL-2可分别与抗PCV2和抗POIL-2蛋白抗血清发生特异性免疫反应,表明rCap-linker-PoIL-2蛋白具有Cap蛋白和PoIL-2蛋白的双重生物学活性;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒免疫小鼠后可诱导小鼠和猪体产生明显的抗PCV2抗体,且其诱导的抗体水平明显高于rpcDNA3.1/OFR2.

关键词：猪圆环病毒2型猪白介素2 嵌合基因核酸疫苗免疫效果

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共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及免疫效力

共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：郑其升邓碧华曹瑞兵王继春候继波陈溥言江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将PRRSV修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ***)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导,将构建好的重组转移载体转染感染亲... 详细信息

将PRRSV修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ***)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导,将构建好的重组转移载体转染感染亲本MVA 2h的BHK-21细胞单层,用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化,得到带有筛选标记的重组病毒。将rMVAgpt-MGP5/M感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre),获得删除筛选标记的重组病毒。PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中;Western-blot与IFA证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白;重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致。用rMVA-MGP5/M免疫6周龄Babl/C小鼠,首免后3周可检测到特异性PRRSV中和抗体,8周后中和抗体效价可达25,并能继续维持4周;细胞因子检测结果表明,重组病毒免疫小鼠产生强烈的Th1型细胞免疫反应。结论:rMVA-MGP5/M具有良好的免疫原性,可作为预防PRRS的候选疫苗进一步研究。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒改良型痘苗病毒安卡拉株修饰的GP5与M蛋白共表达免疫原性

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PRRSV-PCV重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究

PRRSV-PCV重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：郑海红孙志朱兴全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室华南农业大学兽医学院

为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为外源基因表达载体的可行性以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行分析。以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,在pAPRRs的ORF1和ORF2间插入猪圆环病毒(PCV2)... 详细信息

为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为外源基因表达载体的可行性以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行分析。以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,在pAPRRs的ORF1和ORF2间插入猪圆环病毒(PCV2)的主要免疫原开放阅读框架(ORF),构建了全长嵌合cDNA免隆pCPV,随后进行了病毒拯救及对拯救病毒vCPV复制转录分析。结果发现:vCPV的sgmRNA2.1盗用了PRRSV sgmRNA2的转录调控序列(TRS),形成由PRRSV GP2和PCV2衣壳蛋白组成的sgmRNA2.1。令人吃惊的是,外源基因的插入同时也导致重组病毒启用新的TRS而产生三条新亚基因组,其中sgmRNA2.2、sgmRNA2.3和sgmRNA2.4采用PCV中序列作为启动子;另一条sgmRNA2.5则为非经典型亚基因组,其TRS与PRRSV ORF2的起始密码子(AUG)间隔19,37、97个碱基,在AUG下游.本研究结果表明:1两株重组PRRSV-PCV2病毒可以稳定传代,为进一步研发PRRSV遗传标识疫苗奠定了基础;2)插入片断上一些TRS样序列引入及插入过长片断(718bp)导致PRRSV本身TRS的RNA结构变化是引起重组病毒遗传不稳定性最主要原因;3)PRRSV可以利用TRS样外源序列作为转录启动子,为进一步解剖PRRSV复制转录过程奠定了基础。

关键词： PRRSV 转录调控序列(TRS) 猪圆环病毒表达载体

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高致病性猪蓝耳病的防治措施及其效果

高致病性猪蓝耳病的防治措施及其效果

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：唐耀平杨和民周双海吴求生皮绍娣刘若愚湖南省邵阳市动物防疫站湖南省邵阳市畜牧水产局北京农学院动物科学技术系湖南省邵阳市双清区畜牧兽医站

通过对湖南省邵阳市实施的高致病性猪蓝耳病各项防治措施效果进行调查和量化分析。结果表明,实施了全封闭式管理、自繁自养、彻底消毒等3种预防措施的养殖场(户)疫病侵入率均极显著低于未实施相应措施的养殖场(户);实施了全封闭式管理... 详细信息

通过对湖南省邵阳市实施的高致病性猪蓝耳病各项防治措施效果进行调查和量化分析。结果表明,实施了全封闭式管理、自繁自养、彻底消毒等3种预防措施的养殖场(户)疫病侵入率均极显著低于未实施相应措施的养殖场(户);实施了全封闭式管理、自繁自养、彻底消毒与良好饲养管理等4种预防措施的养殖场(户)均极显著降低了生猪发病率。实施了设卡堵疫措施的村,疫病侵入率极显著低于未实施该项措施的养殖村,而全面封存、禁止仔猪调运、公共环境消毒灭源3种区域性防控措施对防止疫病侵入的效果均不显著。设卡堵疫、全面封存、禁止仔猪调运、公共环境消毒灭源、积极救治或扑杀5种区域性防控措施均能够极显著降低生猪发病率,尤以积极救治和扑杀对降低生猪发病率最为有效。中西药救治与精心护理均能够极显著提高病猪的治愈率。调查结果还表明,设卡堵疫是阻止高致病性猪蓝耳病侵入最有效的措施,其次是全封闭式管理、自繁自养与彻底消毒;良好饲养管理对降低高致病性猪蓝耳病发病率有效,但对防止疫病侵入养殖场(户)效果不显著。发生高致病性猪蓝耳病后,积极救治和扑杀对降低发病率最为有效,而中西药救治与精心护理都是减少病猪死亡的有效手段。

关键词：高致病性猪蓝耳病防治措施效果

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JX143株感染性克隆的构建

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JX143株感染性克隆的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：吕健孙志张建武刘维全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室中国农业大学生物学院

目的确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机理、以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法根据PRRSV基因组序列设计特异... 详细信息

目的确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机理、以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到pBlueScriptⅡSK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记MluⅠ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143-M。结果全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒。通过比较亲本毒与拯救病毒的病毒滴度、多步生长曲线和利用拯救病毒vJX143进行动物回归试验,结果发现病毒学及生物学特性没有显著差异。结论PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆高致病性猪蓝耳病动物回归试验

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猪源新城疫病毒JL01株分离鉴定及遗传进化分析

猪源新城疫病毒JL01株分离鉴定及遗传进化分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：鲁会军金扩世李旭王瑞琳韩松金宁一中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验吉林长春 130062

2000年,在吉林省某猪场发生具有较高发病率和死亡率的急性传染病,发病率达到40-50％,病死牟15％,取其脾、肺、肾等组织进行电镜观察,可见副粘病毒样颗粒,表明其病原可能为某种猪源副粘病毒,命名为JL01株.在对该病毒的的血凝、血凝抑制... 详细信息

2000年,在吉林省某猪场发生具有较高发病率和死亡率的急性传染病,发病率达到40-50％,病死牟15％,取其脾、肺、肾等组织进行电镜观察,可见副粘病毒样颗粒,表明其病原可能为某种猪源副粘病毒,命名为JL01株.在对该病毒的的血凝、血凝抑制等生物学特性进行鉴定后,初步确定该种猪副粘病毒为猪源新城疫病毒.该病毒对鸡胚平均致死时间(MDT)和半数致死量(EID50)分别为55.2h和10-7.5/0.1mL,表明该毒株属于新城疫病毒强毒株.在此基础上,采用RT-PCR方法克隆了猪源新城疫病毒F基因,与其它10株NDV毒株进行序列比较分析,结果表明,JL01株与B1、LaSota,Clone30等经典的新域疫病毒弱毒株同源性较高(91.5％～98.5％),与ZJ1,Mukteswar等强毒株的同源性较低.F基因氧基酸裂解位点的序列为 112G-KQ-G.R-L117,与弱毒株序列完全相同.基因分型结果表明JL01株属于基因Ⅰ型.因此,本研究所分离到感染猪的新城疫病毒属于基因变异的新城疫病毒弱毒株,但其致病力与强毒株相当.

关键词：猪源新城疫病毒分离鉴定 F基因遗传进化分析

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农村散养生猪高致病性猪蓝耳病猪瘟和口蹄疫免疫程序研究

农村散养生猪高致病性猪蓝耳病猪瘟和口蹄疫免疫程序研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：冉智光杨泽林肖仁荣蒋含菊曾政陈家杰黄诚陶剑铭李庆川丁平苏亮苏承忠郭利敏熊仲良米自由重庆市动物疫病预防控制中心重庆市南川区动物疫病预防控制中心

猪瘟、口蹄疫和高致病性猪蓝耳病是国家规定的免费强制免疫病种。为探索既能保证农村散养生猪强制免疫密度和质量,又能减轻基层兽医工作量的免疫程序,以断奶仔猪进行免疫程序1(35日龄阉割,同时经双侧颈部肌肉和后腿内侧肌肉分别注射高... 详细信息

猪瘟、口蹄疫和高致病性猪蓝耳病是国家规定的免费强制免疫病种。为探索既能保证农村散养生猪强制免疫密度和质量,又能减轻基层兽医工作量的免疫程序,以断奶仔猪进行免疫程序1(35日龄阉割,同时经双侧颈部肌肉和后腿内侧肌肉分别注射高致病性猪蓝耳病、口蹄疫和猪瘟疫苗)和免疫程序2(28日龄颈部肌肉注射高致病性猪蓝耳病疫苗,35日龄阉割,同时经双侧颈部肌肉注射口蹄疫和猪瘟疫苗)的免疫试验。免疫程序1或免疫程序2分别与猪瘟免疫对照、口蹄疫免疫对照和高致病性猪蓝耳病免疫对照相比,在77天的试验期内,猪瘟抗体、口蹄疫抗体和蓝耳病抗体及其峰值都无显著差异(P>0.05):两种免疫程序之间的猪瘟抗体、口蹄疫抗体和蓝耳病抗体及其峰值也都无显著差异(P>0.05);增加高致病性猪蓝耳病疫苗注射未见免疫副反应加重。结果表明两种免疫程序都可作为三种疫病的首免程序,但程序1更省时、省力、省钱,可以在我市农村推行仔猪35日龄左右阉割时,分点注射高致病性猪蓝耳病、猪瘟和口蹄疫疫苗。

关键词：高致病性猪蓝耳病猪瘟口蹄疫免疫程序

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