猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本文诣在研究SsnA基因做为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。本实验中以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通...
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猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本文诣在研究SsnA基因做为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。本实验中以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增SsnA基因片段,将该片段克隆到表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为46 KD的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,重组蛋白质具有抗原反应活性。以纯化的融合蛋白作为包被抗原,建立了SsnA-ELISA鉴别诊断方法,对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测,比较感染血清和免疫血清的检测结果。发现两者具有显著的差异(P<0.05),表明建立的SsnA-ELISA方法具有良好的检测效果。利用该方法对采集自8个省份的1446份血清进行检测,显示SS2的阳性率为0%～14.77%,平均阳性率为5.39%。本研究结果表明:猪链球菌2型分泌核酸酶(SsnA)可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识;对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系。
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