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机构

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8 篇 上海市畜牧兽医站
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作者

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39 篇 丁壮
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20 篇 程安春
20 篇 陈陆
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18 篇 陈焕春
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15 篇 刘红英
15 篇 金梅林
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14 篇 徐明
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14 篇 王红宁
14 篇 夏咸柱
14 篇 黄小波
13 篇 杨松涛
13 篇 李昌

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629 篇 中文
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伪狂犬病毒转移载体pIE-RG的构建以及双基因共表达的初步研究

伪狂犬病毒转移载体pIE-RG的构建以及双基因共表达的初步研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：闫瑾刘琥金梅林华中农业大学国家微生物重点实验室动物病毒室武汉湖北430070

伪狂犬病毒通用载体pIE-CMV是一种优良的转移载体。其上含有一个人巨细胞病毒启动子CMV,多克隆位点。(MCS),终止子BGH Poly(A)。两端同源臂的大小分别为0.8kb和2.5kb,完全满足同源重组的要求。构建多价伪狂犬病毒基因工程疫苗的候选毒... 详细信息

伪狂犬病毒通用载体pIE-CMV是一种优良的转移载体。其上含有一个人巨细胞病毒启动子CMV,多克隆位点。(MCS),终止子BGH Poly(A)。两端同源臂的大小分别为0.8kb和2.5kb,完全满足同源重组的要求。构建多价伪狂犬病毒基因工程疫苗的候选毒株需要构建双基因或多基因共表达的转移载体。为了验证以pIE-CMV基础构建双基因表达转移载体的可行性和研究上下游基因表达量之间的关系,本研究利用两种报告基因EGFP(增强绿色荧光蛋白基因)和Ds Red(红色荧光蛋白基因)分别构建由单CMV启动子并由IRES(内部核糖体进入位点。)连接的和双CMV启动子所驱动的双基因共表达载体pIE-GIR和pIE-RG..通过pIE-GIR和pIE-RG分别转染IBRS-2(猪肾传代细胞)来验证载体构建方式是否正确以及初步判断上下游基因表达量之间的关系。

关键词：伪狂犬病伪狂犬病毒转移载体双基因共表达基因工程疫苗单CMV启动子

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大肠杆菌Ee株SLT-ⅡeB与FedF基因在大肠杆菌中融合表达\及抗血清的中和特性

大肠杆菌Ee株SLT-ⅡeB与FedF基因在大肠杆菌中融合表达\及抗血清...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：刘国平吴斌林艺远胡长敏郭爱珍金梅林陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 长江大学动物科学学院荆州434025 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

根据猪水肿病大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技术克隆目的片段,并将SLT-IIeB和FedF基因依序串联于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统的GST下游,在大肠杆菌中成功获得了大小约为63ku融合蛋白GST-SF,Western... 详细信息

根据猪水肿病大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技术克隆目的片段,并将SLT-IIeB和FedF基因依序串联于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统的GST下游,在大肠杆菌中成功获得了大小约为63ku融合蛋白GST-SF,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原免疫新西兰兔制备血清,体外活性试验表明,所制备的抗血清能中和Ee株水肿毒素对Vero细胞的病变效应;黏附抑制试验证实抗血清能抑制E2株对猪小肠刷状缘细胞的黏附.研究表明GST-SF融合蛋白具有SLT-IIeB及FedF的中和表位。

关键词：融合表达中和特性大肠杆菌生物学活性免疫原性猪水肿病

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抗体选择性压力下甲型H1N1流感病毒变异特点研究

抗体选择性压力下甲型H1N1流感病毒变异特点研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：于志君程凯慧忻悦岳秀芳黄靖王铮张坤桑晓宇丁洁许微微高玉伟杨松涛黄耕王承宇王铁成王化磊赵永坤夏咸柱军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室石河子大学动物科技学院

随着病毒的不断流行和疫苗接种,人群体抗体覆盖率会不断增加,而该压力是否会促进2009大流行流感病毒流感的抗原性变异以逃避机体免疫系统清除尚有待研究;另外,临床中发现部分感染患者呈现重症表现,序列分析结果提示部份变异病毒可能具... 详细信息

随着病毒的不断流行和疫苗接种,人群体抗体覆盖率会不断增加,而该压力是否会促进2009大流行流感病毒流感的抗原性变异以逃避机体免疫系统清除尚有待研究;另外,临床中发现部分感染患者呈现重症表现,序列分析结果提示部份变异病毒可能具有更高的致病性。本研究在对实验室分离的甲型H1N1流感病毒野毒株XD株的全基因组序列分析的基础上检测了病毒对BALB/c小鼠的致病性,并将XD野毒株在灭活甲型H1N1流感病毒免疫小鼠体内连续传代,制备变异毒株。同时以经未免疫小鼠传代后的病毒作为对照病毒株。以抗原相关系数、小鼠半数致死量、体重变化率和生存率作为评价指标来评价该病毒变异情况。结果发现,XD野毒株通过鼠肺连续传代,其致病性和抗原性会发生变异,在抗体选择性压力下,该病毒的抗原性会发生较大变化,抗原相关系数变为0.35,致病性提高18倍,而在无抗体压力下,该病毒的致病性可提高1000倍。本研究以小鼠作为哺乳动物模型,重点探讨了2009大流行流感病毒的抗原性与致病性变异特点,将有助于我们从分子水平上探究该病毒的抗原性和致病性变异机制及趋势,为该病毒的防控工作提供指导和借鉴。

关键词：抗体压力甲型H1N1流感病毒变异致病性抗原性

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2016年我国部分地区猪伪狂犬病毒gE和gC基因的分子流行病学分析

2016年我国部分地区猪伪狂犬病毒gE和gC基因的分子流行病学分析

引用

中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：刘春晓彭金美李真张晶王倩张洪亮蔡雪辉田志军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测学与流行病学研究团队

伪狂犬病(Pseudoraies)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的猪、牛、羊等多种家畜及野生动物的一种以发热、奇痒(除猪外)、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。猪伪狂犬病可引起母猪繁殖障碍、仔猪死亡并破坏猪的免疫系统,严重危害养猪业的发展... 详细信息

伪狂犬病(Pseudoraies)是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的猪、牛、羊等多种家畜及野生动物的一种以发热、奇痒(除猪外)、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。猪伪狂犬病可引起母猪繁殖障碍、仔猪死亡并破坏猪的免疫系统,严重危害养猪业的发展。本研究对2016年我国部分地区的PRV进行分子流行病学分析,为我国防

关键词：猪伪狂犬病毒变异株分子流行病学

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马属动物SAMHD1抗逆转录病毒活性研究

马属动物SAMHD1抗逆转录病毒活性研究

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：郭苗苗尹鑫王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/马传染病和慢病毒病研究创新团队

SAMHD1是哺乳动物髓系细胞的一种天然免疫限制因子,其本质是一种脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)水解酶。SAMHD1通过水解易感细胞内dNTPs,使细胞内dNTPs水平低于病毒反转录所需要的水平,从而抑制逆转录病毒(如HIV-1)的复制。人类免疫缺陷病毒... 详细信息

SAMHD1是哺乳动物髓系细胞的一种天然免疫限制因子,其本质是一种脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)水解酶。SAMHD1通过水解易感细胞内dNTPs,使细胞内dNTPs水平低于病毒反转录所需要的水平,从而抑制逆转录病毒(如HIV-1)的复制。人类免疫缺陷病毒2型(HIV-2)和某些猴免疫缺陷病毒(SIVs)编码的辅助蛋白Vpx和Vpr可以通过蛋白酶体途径降解SAMHD1中和其抗病毒作用。SAMHD1可以在多种细胞中表达,但只在分

关键词：马属动物抗病毒作用 SAMHD1 活性研究

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重组鸡β-防御素在毕赤氏酵母细胞中的表达及其抑菌活性研究

重组鸡β-防御素在毕赤氏酵母细胞中的表达及其抑菌活性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：万雪赵建增高英杰宁官宝邢海云乔彦良李朝阳山东信得药业集团公司青岛山东266071 北京大北农集团动物医学研究中心北京100080 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 山西农业大学动物科技学院太谷山西030801

鸡β-防御素(Gal-3)是鸡体内最重要的抗菌肽之一,除了具有直接杀菌、抗病毒作用外,它还参与机体免疫反应。本研究将Gal-3基因片段插入到酵母表达载体pPIC9k,在毕赤氏酵母GS115中进行表达,并研究了重组Gal-3的诱导、表达规律和抗菌谱.结... 详细信息

鸡β-防御素(Gal-3)是鸡体内最重要的抗菌肽之一,除了具有直接杀菌、抗病毒作用外,它还参与机体免疫反应。本研究将Gal-3基因片段插入到酵母表达载体pPIC9k,在毕赤氏酵母GS115中进行表达,并研究了重组Gal-3的诱导、表达规律和抗菌谱.结果发现,重组菌株在接受诱导培养24h后开始有明显的Gal-3表达,诱导72h时迭到表达高峰,至少持续表达96h以上。Tricine-SDS PAGE电泳发现在约6.0kD位置出现预期的蛋白质条带,约占分泌总蛋白的12.6％。重组Gal-3能完全抑制金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、志贺氏痢疾杆菌、普通变形杆菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、肠炎沙门菌等细菌的生长,其中大肠杆菌和肠炎沙门菌是对重组Gal-3最敏感的菌株.

关键词：鸡防御素毕赤氏酵母细胞抑菌活性抗菌肽

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规模化猪场猪感染肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性调查

规模化猪场猪感染肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性调查

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：管中斌王红宁曾博周英顺高荣徐昌文张安云四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室 “985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台生物资源与生态环境教育部重点实验室

改进肺炎克雷伯氏菌分离鉴定方法,研究西南地区规模化猪场肺炎克雷伯氏菌感染情况及其耐药性。2008～2011年中国西南地区(四川、重庆、云南省)送检至动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室的病死猪及组织样品。通过西蒙氏柠檬酸盐肌醇... 详细信息

改进肺炎克雷伯氏菌分离鉴定方法,研究西南地区规模化猪场肺炎克雷伯氏菌感染情况及其耐药性。2008～2011年中国西南地区(四川、重庆、云南省)送检至动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室的病死猪及组织样品。通过西蒙氏柠檬酸盐肌醇(SCAI)培养基初筛,结合肺炎克雷伯氏菌16S rDNA特异性的127bp片段扩增检测确证,改进肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定方法,并对鉴定出的肺炎克雷伯氏菌进行小鼠致病性试验。参照CLSI(2009)推荐的琼脂稀释法,对分离鉴定出的肺炎克雷伯氏菌进行9种氨基糖苷类药物和9种β-内酰胺类药物的MIC值测定。从26个猪场送检病料中鉴定出猪肺炎克雷伯菌69株,占11.22%,仅次于大肠杆菌(31.87%)和葡萄球菌(20.81%),其中18株对小鼠具有致死性,占26.09%。表明在该地区猪感染肺炎克雷伯菌已成为规模化猪场主要病原菌之一。测定了69株菌对18种常用抗菌药物的MIC值,结果表明:阿莫西林、苯唑西林、氨苄西林、头孢氨苄、头孢羟氨苄耐药率均为100%,卡那霉素、妥布霉素、庆大霉素耐药率分别为85.51%、81.16%和78.26%,对头孢噻呋、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸和阿米卡星较为敏感,耐药率分别为14.8%、17.2%、17.2%和30.43%。本文为猪感染肺炎克雷伯菌的诊断防治提供科学依据。

关键词：规模化猪场猪肺炎克雷伯菌药敏试验

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C型副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定

C型副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：王宏俊安烨龚玉梅陈小玲张培君北京市农林科学院畜牧兽医研究所首都师范大学生命科学院

血凝素是副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序列(AF491827),设计合成了1对特异扩增Apg血凝素基因的引... 详细信息

血凝素是副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序列(AF491827),设计合成了1对特异扩增Apg血凝素基因的引物。以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增出了1026bp的血凝素基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建了pET-HA原核表达质粒并在BL21大肠杆菌中过量表达。通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体,表达并纯化了Apg重组血凝素蛋白,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。为进一步研究副鸡禽杆菌血凝素的免疫功能奠定基础。

关键词：副鸡禽杆菌血凝素原核表达

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长链非编码RNA在JEV感染小鼠脑组织中的表达谱分析

长链非编码RNA在JEV感染小鼠脑组织中的表达谱分析

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：李运川朱碧波张灏 Usama Ashraf 陈焕春曹胜波华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院/动物病毒学实验室华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心

乙型脑炎(JE)是由乙型脑炎病毒(JEV)感染引起的一种危害严重、虫媒性、人兽共患传染病。该病毒属于自然疫源性疾病,主要流行于东亚和东南亚各国。长链非编码RNA(lneRNA)是一类长度大于200nt的非编码RNA,因其在生命活动中发挥着重要作用... 详细信息

乙型脑炎(JE)是由乙型脑炎病毒(JEV)感染引起的一种危害严重、虫媒性、人兽共患传染病。该病毒属于自然疫源性疾病,主要流行于东亚和东南亚各国。长链非编码RNA(lneRNA)是一类长度大于200nt的非编码RNA,因其在生命活动中发挥着重要作用,而倍受世界关注,但是lncRNA在JEV感染过程中所起到的角色尚

关键词： JEV 小鼠脑组织差异表达长链非编码 RNA

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不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗基因枪轰击诱导小鼠细胞免疫的研究

不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗基因枪轰击诱导小鼠细胞免疫的研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：卢菲程安春汪铭书韩新锋黎敏车茜刘晓东陈孝跃四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室

本文将小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只1、3、6μg基因枪轰击免疫BALB/c小鼠,以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照,于免疫后3、7、14、21、28、35、49、63、77、105d采血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小... 详细信息

本文将小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只1、3、6μg基因枪轰击免疫BALB/c小鼠,以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照,于免疫后3、7、14、21、28、35、49、63、77、105d采血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化。结果表明pcDNA-GPV-VP3以基因枪轰击途径免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答,且pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后除诱导的CD8+T淋巴细胞免疫功能各组间无显著性差异外,外周血T淋巴细胞对ConA刺激的反应,诱导CD4+T淋巴细胞免疫功能,6μg组最强,3μg组次之,1μg组较差,且三个组之间存在一定的剂量相关性。

关键词：小鹅瘟病毒VP3基因疫苗基因枪轰击小鼠细胞免疫

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