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358 篇 会议
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8 篇 山东农业大学
7 篇 中国畜牧兽医学会...
7 篇 河南省动物疫病预...
7 篇 广西大学

作者

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13 篇 丁壮
12 篇 周恩民
11 篇 熊祺琰
11 篇 冯志新
11 篇 余祖华
11 篇 程相朝
11 篇 邵国青
10 篇 何雷
10 篇 赵雪丽
10 篇 吴志明
10 篇 刘茂军
10 篇 闫若潜
9 篇 王淑娟
9 篇 张春杰
9 篇 谢彩华
9 篇 李一权
9 篇 郁川
8 篇 刘光清

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鸭坦布苏病毒与鸭圆环病毒二重RT-PCR方法的建立

鸭坦布苏病毒与鸭圆环病毒二重RT-PCR方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：张艳芳谢芝勋谢丽基刘加波范晴庞耀珊邓显文谢志勤罗思思广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室

引言鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu Viru,DTMUV)又名鸭黄病毒,主要引起种鸭和蛋鸭食欲急剧减退、产蛋急剧下降,卵泡变性,卵泡膜出血为主要特征。感染DuCV后的病鸭主要临床表现为发育不良、体重下降及羽毛凌乱等,病理组织表现为法氏囊出现... 详细信息

引言鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu Viru,DTMUV)又名鸭黄病毒,主要引起种鸭和蛋鸭食欲急剧减退、产蛋急剧下降,卵泡变性,卵泡膜出血为主要特征。感染DuCV后的病鸭主要临床表现为发育不良、体重下降及羽毛凌乱等,病理组织表现为法氏囊出现坏死淋巴细胞减少和组织细胞增多,导致感染鸭免疫功能下降或免疫反应抑制,因此DuCV与其它病原菌或病毒的混合感染情形非常复杂,常可引起二重或多重感染。由于DTMUV与DuCV均为严重危害养鸭业的传染病,特别是有混合感染时,迫切需要建立一种快速鉴别诊断两种病毒的方法。本研究设计了2对特异性引物,建立了DTMUV与DuCV的二重RT-PCR的检测方法。材料与方法应用本实验室分离到的鸭坦布苏病毒及鸭圆环病毒的核酸为模板,建立同时检测鸭坦布苏病毒与鸭圆环病毒的二重PCR方法。本实验针对GenBank中坦布苏病毒(DTMUV)E基因和鸭圆环病毒(DuCV)REP基因的保守序列,设计合成了两对引物。通过优化反应体系条件及特异性、敏感性评价,建立了鸭坦布苏病毒和鸭圆环病毒的二重RT-PCR方法。结果与讨论同时使用该方法对新城疫病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、番鸭细小病毒、番鸭呼肠孤病毒、H9亚型禽流感病毒和减蛋综合症病毒的进行检测,结果全为阴性,特异性良好。该方法对鸭坦布苏病毒和鸭圆环病毒,同时体系能检出100FGDTMUV和DuCV,具有很高的敏感性,完全能够满足这两种疫病检测的要求。用本研究建立的DTMUV和DuCV的二重RT-PCR检测技术,对从2012年10月至2013年4月的采集的40份鸭病料进行检测,与病毒分离鉴定方法得出的结果一致。因此,本研究建立的二重RT-PCR检测方法可用于快速检测的DTVUV和DuCV的混合感染,既可节约时间和成本,又能减少污染,具有很高的使用价值和实践意义。

关键词：鸭圆环病毒鸭坦布苏病毒 DTMUV RT-PCR

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猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：刘春国刘永相刘大飞郭东春田进李志杰刘家森曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状。FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失... 详细信息

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯状病毒科、水疱疹病毒属成员之一,也是感染猫的重要病原之一,能够导致猫发生一系列严重的临床症状。FCV基因组包含一个单股正链RNA,极易产生遗传和抗原变异,这也是导致FCV毒力差异和疫苗免疫失败的基础。因此,对FCV基因组进行分析具有重要意义。为了解FCV的生物学特性,本研究对患有严重结膜炎的猫体内分离到的一株FCV HRB SS株进行了分离鉴定和遗传分析。结果表明HRB SS株全长基因组除了poly(A)共由7705 nt组成。编码两个大的ORF:ORF1(nt20-5311)和ORF2(nt 5312-7318),以及一个小的ORF3(nt7315-7638)。HRB SS株5'和3'非编码区分别由19nt和67nt组成。此外,HRB SS株在基因组3'端有24nt插入,与韩国分离株12Q087-1和12Q087-5相似,而中国分离株GD与F9疫苗株则保持相同的基因组形式。该片段的插入对病毒的意义如何将有待于进一步研究。基因组核苷酸序列分析结果表明FCVHRB SS株与1874株同源性最高,为80.3%,而与中国分离株GD的同源性最低,仅为76.6%。VP1超变区核苷酸序列分析发现,HRB SS株与疫苗株CVXPOLYCAP的同源性最高,为78.2%,而与中国分离株CH-JL和GD的同源性最低,仅为67.9%和68.8%。推导的超变区氨基酸序列分析结果显示,HB SS与12Q087-5、UTCVM-NH12和FCLF4的同源性最高,为86.7%,而与中国分离株的同源性仅为73.9%。系统发育树分析结果表明FCV HRB SS株基因组核苷酸序列与FCV/DD/2006/GE(德国)和UTCVM-H2(美国)的亲缘关系最近,并与美国分离株Urbana、1874和5789处于同一进化分支。而与疫苗株F9处于不同的进化分支。本研究结果表明,FCV HRB SS分离株为一株新型变异株,并与我国FCV具有不同的遗传起源。

关键词：猫杯状病毒变异株遗传特征超变区

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牛流行热病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

牛流行热病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：侯佩莉王洪梅何洪彬山东省农业科学院奶牛研究中心

引言/目的牛流行热是由牛流行热病毒（BEFV）引起的牛的急性、热性传染病,在我国多个省市爆发流行,给养牛业造成巨大的经济损失,被农业部2014年印发的《牛羊常见疫病防控技术指导意见》列为牛重点防控的疫病。目前对该病的防治尚无特效... 详细信息

引言/目的牛流行热是由牛流行热病毒（BEFV）引起的牛的急性、热性传染病,在我国多个省市爆发流行,给养牛业造成巨大的经济损失,被农业部2014年印发的《牛羊常见疫病防控技术指导意见》列为牛重点防控的疫病。目前对该病的防治尚无特效药,只能对病牛采取对症治疗以缓解症状。因此,建立准确、灵敏、特异的检测方法是防治本病的前提条件。材料与方法根据GeneBank中牛流行热病毒G基因（GenBank:JX234571.1,）保守序列,应用PrimerPremier5.0软件设计并合成引物对RT1和RT1-R。应用病毒RNA提取试剂盒提取BEFV的RNA,并进行RT-PCR反应合成cDNA。以合成的BEFVcDNA为模板,优化反应条件,建立SYBR-GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和溶解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。应用该方法对临床采集的10份疑似牛流行热病毒感染的牛全血进行检测。结果与讨论以合成的BEFV cDNA(10TCID/mL)为模板,优化反应条件,确定最佳引物终浓度均为0.25μmol/L,最佳退火温度为65℃,扩增片段大小为163bp。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异。以建立的该方法对BVDV等病毒进行特异性试验,均未见其他病毒的扩增,具有较好的特异性。取不同稀释度病毒的cDNA为模板进行荧光定量RT-PCR扩增,可检测到1TCID。同时进行3次批内重复试验和批间重复试验,同一浓度的S型曲线相似,Ct值基本相同,重复性好。应用该方法对临床采集的10份疑似BEFV感染的牛全血进行检测,检测阳性4份,高于普通RT-PCR方法的检出率（检出阳性3份）。实时荧光定量RT-PCR技术巧妙地利用了PCR技术的DNA高效扩增、荧光技术高特异性和光谱技术的敏感性及实时定量分析的优点,极大地提高了检测的敏感性和特异性。在BEFV所有基因组中,G基因高度保守,故选用G基因保守区为参考。本实验分离获得了BEFV流行毒株,通过测定病毒的TCID,对病毒直接定量,用于对临床上牛感染流行热病毒早期病毒含量较低时的诊断。结论本研究成功建立了BEFV SYBR-GreenI荧光定量RT-PCR检测方法。具有较好的灵敏度、特异性和重复性,可用于牛流行热病毒临床血液、组织等样本的检测,对牛流行热病毒的流行与传播进行实时监测,为相关的基础研究提供技术支持。

关键词：牛流行热病毒特异性初步应用溶解曲线检测方法 RT-PCR

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禽白细胞介素-2(IL-2)单克隆抗体的制备与鉴定

禽白细胞介素-2(IL-2)单克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：付梦姣王永强李晓齐曹红郑世军中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室

引言白细胞介素-2（IL-2）主要是由T细胞产生的具有重要免疫调节作用的细胞因子。1997年,Sundick等首次获得了鸡IL-2基因。Hilton等的研究表明,鸡IL-2表现了与哺乳动物相似的生物学活性。然而,由于鸡IL-2与哺乳动物的IL-2差异较大,且具... 详细信息

引言白细胞介素-2（IL-2）主要是由T细胞产生的具有重要免疫调节作用的细胞因子。1997年,Sundick等首次获得了鸡IL-2基因。Hilton等的研究表明,鸡IL-2表现了与哺乳动物相似的生物学活性。然而,由于鸡IL-2与哺乳动物的IL-2差异较大,且具有很强的种属特异性,使许多可在哺乳动物中成功应用的技术和方法都无法有效地应用于鸡IL-2的研究,本研究通过制备鸡IL-2单克隆抗体,为深入研究鸡IL-2的生物学功能奠定基础。材料与方法菌株、空载质粒为本实验室保存,标签蛋白His-IL-10、His-IFN-β、His-IFN-β为本实验室保存。从感染球虫的鸡的脾淋巴细胞中克隆到鸡IL-2基因,构建了原核表达载体并诱导表达目的蛋白。以His-chIL-2蛋白免疫小鼠,细胞融合、阳性杂交瘤细胞的亚克隆与筛选过程均参照文献Current Protocol in Immunology进行。将阳性杂交瘤细胞注射BALB/c小鼠腹腔获得腹水,用饱和硫酸铵法进行纯化,以间接ELISA、Western Blot等方法对所获得的单克隆抗体进行抗体型别分析、亲和力测定、抗体识别区域分析等特性鉴定。结果与讨论经过三次亚克和扩繁,最终获得三株可稳定分泌禽IL-2抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C2,2F2,4B5。三株单抗的亚型均为IgG1。腹水的效价分别为:1C2:5.12×10～72F2:6.4×10～6,4B5:1.28×10～7。亲和力解离常数（K）分别为1C2:4.81×10,2F2:1.36×10,4B5:4.15×10,均为高亲和力抗体。单抗1C2识别鸡IL-2的1-40位氨基酸,2F2识别鸡IL-2的81-121位氨基酸,4B5识别鸡IL-2的41-80位氨基酸。即共获得三株识别不同位点的单抗。结论本研究成功获得三株高亲和力、高特异性的杂交瘤细胞株,三株单抗亚型均为IgG1,且识别不同的抗原表位区域。

关键词：杂交瘤细胞哺乳动物制备与鉴定单克隆抗体

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双向电泳技术分析猪肺炎支原体168强弱毒株差异蛋白

双向电泳技术分析猪肺炎支原体168强弱毒株差异蛋白

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：刘茂军邱明君张映冯志新白方方熊祺琰武昱孜姜俊兵李桂兰邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心山西农业大学动物科技学院

目的猪肺炎支原体(Mhp)是引起猪支原体肺炎的主要病原,该病是危害世界养猪业的重要疾病之一。目前已发现了Mhp的一些与毒力相关蛋白,但对Mhp强弱毒株中差异蛋白的报道甚少。本试验以Mhp168强弱毒株为材料,利用蛋白组学技术,旨在构建Mhp... 详细信息

目的猪肺炎支原体(Mhp)是引起猪支原体肺炎的主要病原,该病是危害世界养猪业的重要疾病之一。目前已发现了Mhp的一些与毒力相关蛋白,但对Mhp强弱毒株中差异蛋白的报道甚少。本试验以Mhp168强弱毒株为材料,利用蛋白组学技术,旨在构建Mhp168株双向电泳图谱,筛选强弱毒株的差异蛋白,为该病的防控提供理论依据。材料与方法 Mhp168强弱毒株由江苏省农业科学院兽医研究所提供。取Mhp168株强弱毒株新鲜培养物,离心收集菌体,抽提菌体全蛋白,用试剂盒处理样品,测定蛋白质浓度,进行双向电泳(2-DE)。蛋白点进行比对和表达量分析(T检验法,差异>2倍),找出差异蛋白点进行切胶,MALDI-TOF质谱分析。对差异点进行Western-blot验证。结果与讨论采用2-DE技术对来源于同一母本株的猪肺炎支原体168强弱毒株的全菌蛋白进行分离,强毒株凝胶上共检出207±6个蛋白点,弱毒株共检出153±4个蛋白点。强弱毒株的蛋白点进行比对和表达量分析,发现差异点共62个,其中52个仅出现在Mhp168强毒株的图谱上,3个仅出现在Mhp168弱毒株的图谱上;7个蛋白点为强弱毒株图谱所共有,其中3个蛋白点表达上调,4个蛋白点表达下调。在对24个蛋白点进行质谱分析中,成功鉴定比对找到11个,其中4个是血清蛋白,4个为酶类,1个是蛋白前体,1个是假想蛋白,1个是未知蛋白产物(可能未收录于蛋白数据库中)。经Western-blot验证,发现其中的P36蛋白具有较好的免疫原性。结论首次用2-DE技术对同一来源的猪肺炎支原体168强弱毒株的差异蛋白组分析,构建了差异表达图谱,成功鉴定11个差异蛋白,为该病的致病机理和防制奠定了基础。

关键词：强弱毒株强毒株猪肺炎支原体差异蛋白双向电泳技术

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鼠伤寒沙门菌SL1344株△crp△sipB缺失株生物学特性的检测

鼠伤寒沙门菌SL1344株△crp△sipB缺失株生物学特性的检测

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：陈松彪张春杰程相朝余祖华何雷郁川廖成水河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室

引言鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)是一群最常见的引起食物和水源性污染病原菌,具有广泛的宿主,能够引起哺乳动物和人类发生系统性感染,具有重要的公共卫生意义。材料与方法在前期对鼠伤寒沙门菌SL1344株crp/sipB双缺失株研究... 详细信息

引言鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)是一群最常见的引起食物和水源性污染病原菌,具有广泛的宿主,能够引起哺乳动物和人类发生系统性感染,具有重要的公共卫生意义。材料与方法在前期对鼠伤寒沙门菌SL1344株crp/sipB双缺失株研究发现对小鼠的毒力较亲本菌株约下降10～3倍,并且免疫机体后对野毒的攻击具有较好的免疫保护效力,有潜力作为鼠伤寒菌弱毒疫苗的候选菌株,所笔者在此对双缺失株的生物学特性从其运动性、生物被膜的形成能力、以及糖酵解的影响等方面进一步进行研究,以期研究出减毒背景清楚的沙门菌疫苗候选菌株。结果和讨论SL1344△crp△sipB双缺失株的运动性结果显示双缺失株较亲本菌株相比失去了运动性的能力,这可能是由于双基因缺失后影响调控细菌鞭毛相关基因的表达,是否是由此引起的需要进一步的验证,而此也是影响其毒力发生降低的一个途径;生物被膜的主要成分测定试验结果也发现基因缺失后影响菌毛和纤维素的表达,所以缺失菌株在刚果红平板上呈现白色光滑的菌落形态,从而有可能影响其生物被膜的形成,从而影响其毒力,这与Javier等报道爱德华氏菌J100株crp基因缺失株结果相一致。丙酮酸和乳酸的含量测定结果表明缺失株的乳酸和丙酮酸含量较亲本菌株相比上升,说明缺失株的糖酵解途径增强,即更多的进行无氧呼吸,我们推测缺失株的糖酵解途径增强会导致能量生威减少,而肿瘤细胞的一个很重要的特点即其糖酵解效率特强,能否使用缺失株的这一特性去抑制肿瘤细胞的糖酵解效率,从而达到治疗或者缓解肿瘤的目的,这个问题值得探讨。缺失株对上皮细胞的细胞增殖和毒性结果也同样表明该基因缺失株对上皮细胞的毒性作用同样发生了下降。上皮细胞的黏附和侵入试验表明缺失株的黏附和侵入能力较亲本菌株相比发生了显著的降低,笔者猜测可能是由于缺失株调控鞭毛形成的相关基因表达受到抑制。

关键词：缺失株上皮细胞 crp SL1344 生物学特性鼠伤寒沙门菌

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鸡传染性贫血病毒凋亡素基因的克隆与原核表达

鸡传染性贫血病毒凋亡素基因的克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：陈桂华程相朝郁川张春杰余祖华何雷贾艳艳廖成水翟崇凯田文静河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室

引言鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)的病原,该病毒于1979年由Yuasa等在日本首次分离得到,是一种较小的无囊膜的禽DNA病毒,直径约23 nm,属圆环病毒科。CAV基因组由环状单股负链DNA... 详细信息

引言鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)的病原,该病毒于1979年由Yuasa等在日本首次分离得到,是一种较小的无囊膜的禽DNA病毒,直径约23 nm,属圆环病毒科。CAV基因组由环状单股负链DNA组成,能编码3个蛋白质,即VP1、VP2和VP3,其中VP3蛋白是CAV的凋亡功能蛋白,且VP3能诱导雏鸡造血母细胞和T淋巴细胞前体细胞凋亡,导致雏鸡出现严重的贫血及免疫机能低下,因此VP3被命名为(凋亡素)。被认为是第一个真正意义上可选择性诱导肿瘤细胞凋亡而不损伤正常细胞的凋亡蛋白。本实验成功构建了原核表达载体pET-32a-Apoptin,并进行了蛋白表达条件的优化。为下一步制备Apoptin抗体奠定了基础,并为进一步探索Apoptin的抗肿瘤机制研究提供了一定材料。材料与方法 CAV基因组、大肠杆菌Rosetta、原核表达载体PET-32a由本实验室保存。本实验以CAV的全基因组为模板,PCR扩增出Apoptin全长片段,并将其连接到pET-32a,经PCR、酶切及测序进行鉴定,利用IPTG对含Apoptin原核表达载体的宿主菌Rosetta进行诱导表达,SDS-PAGE初步观察Apoptin在Rosetta中的表达情况,并采用不同温度、IPTG浓度、诱导时间等对Apoptin的原核表达条件进行优化,确立最佳表达条件。结果与讨论运用PCR技术成功扩增出全长366bp的Apoptin基因,并将其克隆到原核表达载体PET-32a,用1 mmolIPTG诱导PET-32a-Apoptin(Rosetta)后表达出约34KD的Apoptin融合蛋白,且该蛋白大量存在于上清中呈可溶性表达,最佳表达条件为IPTG终浓度为1 mM,28℃诱导8h。以上结果表明,本研究成功克隆并构建了能高效表达Apoptin蛋白的原核表达载体PET-32a-Apoptin,可为进一步探索Apoptin的抗肿瘤机制提供一定材料。

关键词：鸡传染性贫血病毒 CAV 基因组 PET 凋亡素基因 Rosetta 原核表达

来源：评论

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鸡场土壤中大肠杆菌的检测与化学消毒剂的筛选

鸡场土壤中大肠杆菌的检测与化学消毒剂的筛选

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：赵月毕丁仁李自力王振豹崔惠娟高小聪于洋周祖涛刘梅金卉王香萍华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

前言近年来,畜禽舍气源性传染病的爆发流行以及畜禽粪便随意排泄导致的土壤污染问题日益严重,不仅给养殖业造成严重经济损失,而且威胁公民的健康和公共安全。虽然国内外已有许多学者从不同方面对病原菌的控制等进行了一些研究,且用于病... 详细信息

前言近年来,畜禽舍气源性传染病的爆发流行以及畜禽粪便随意排泄导致的土壤污染问题日益严重,不仅给养殖业造成严重经济损失,而且威胁公民的健康和公共安全。虽然国内外已有许多学者从不同方面对病原菌的控制等进行了一些研究,且用于病原微生物的化学消毒剂种类较多,但针对被污染土壤的可大规模推广利用、对环境友好的消毒剂相关研究还很少,养殖造成的土壤病原菌污染治理仍成为当前面临的一大难题。本研究通过对湖北省地区鸡场污染土壤进行调查分析,了解土壤污染随季节变化情况,同时应用戊二醛和二氧化氯消毒剂对鸡场大肠杆菌进行消毒试验,为今后用于土壤治理的可推广使用的化学消毒剂的选择使用提供依据。

关键词：土壤污染化学消毒剂大肠杆菌杀灭效果

来源：评论

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鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株减毒机制的初步研究

鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株减毒机制的初步研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：张春杰陈松彪程相朝余祖华何雷郁川廖成水贾艳艳河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室

引言鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhmurium)是具有广泛的宿主,是目前世界各国分离率最高的菌型之一。该菌能引起各种哺乳动物以及人类发生全身性感染,具有重要的公共卫生意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株为研究对象进行... 详细信息

引言鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhmurium)是具有广泛的宿主,是目前世界各国分离率最高的菌型之一。该菌能引起各种哺乳动物以及人类发生全身性感染,具有重要的公共卫生意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344株cya基因缺失株为研究对象进行生物学特性的检测,进一步对cya基因缺失株的减毒机制进行初步研究。材料与方法本研究以鼠伤寒沙门菌亲本菌株SL1344以及cya基因缺失株为研究对象,对亲本菌株和cya缺失株进行耐酸碱性、耐盐性、运动性、生物生物被膜主要成分以及黏附和入侵等生物学特性的测定。结果与讨论耐酸碱性以及耐盐性结果表明:cya基因缺失后其对酸碱性以及盐的耐受性较亲本菌株相比均发生了下降,有研究表明鼠伤寒沙门菌sipB基因缺失后会影响其细胞膜的耐高渗能力,由此笔者猜测cya基因可能与sipB基因存在调控关系,所以该基因缺失后会影响sipB基因的表达。cya基因缺失株的运动型试验结果表明该基因缺失后细菌失去了运动能力,这与Javie等构建的爱德华菌的crp基因缺失株的结果相一致,说明crp和cya基因缺失后可能会影响细菌的鞭毛的形成,一旦鞭毛的形成受阻势必会影响细菌的运动。生物被膜的主要成分为卷曲菌毛和纤维素,在本试验中cya缺失菌株的生物被膜主要成份测定表明:该基因缺失后影响菌毛和纤维素的表达,故缺失菌株在刚果红平板上呈现白色光滑的菌落形态,从而有可能影响其生物被膜的形成,从而影响其的毒力,这与本实验室的前期出现的结果相一致,即cya基因缺失株可能是通过影响生物被膜的形成从而达到减毒的目的,紧接着我们又进行了该基因缺失株对上皮细胞的黏附和侵入试验,发现cya基因缺失后会影响其对上皮细胞的黏附和入侵能力,从而达到减毒的目的。

关键词：基因缺失株 SL1344 cya 减毒机制鼠伤寒沙门菌初步研究

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日龄因素对育成鸭坦布苏病毒易感性影响

日龄因素对育成鸭坦布苏病毒易感性影响

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：路云建刁有祥窦砚国张璐李川川山东农业大学动物科技学院禽病研究室

引言坦布苏病一般造成雏鸭和产蛋鸭大量发病,而育成鸭感染后,临床症状轻微。研究显示日龄因素可能会影响TMUV感染的严重程度。目的研究不同周龄育成鸭对TMUV的易感性,为生产免疫提供依据。材料与方法将560只育成鸭随机分为7个周龄组,每... 详细信息

引言坦布苏病一般造成雏鸭和产蛋鸭大量发病,而育成鸭感染后,临床症状轻微。研究显示日龄因素可能会影响TMUV感染的严重程度。目的研究不同周龄育成鸭对TMUV的易感性,为生产免疫提供依据。材料与方法将560只育成鸭随机分为7个周龄组,每个周龄组分为静脉组25只、鼻内组25只和对照组25只,每组隔离饲养。每只攻毒组鸭接种4.2mL病毒尿囊液(1.265x10～5ELD/只),对照组接种相同剂量的PBS,攻毒后连续观察20d,记录发病情况。定期剖杀攻毒组和对照组鸭,记录剖检变化。采集各器官、血清样品及泄殖腔和喉拭子。组织匀浆以备定量各组织病毒载量,组织固定后进行病理组织学检查和免疫组化研究。结果与讨论7和21周龄鸭出现精神沉郁、缩颈、嗜睡和食欲减退等症状,而其它周龄组鸭没有出现明显的临床症状。感染鸭突出的剖检变化主要包括肝脏肿大,脑膜充血,心肌水肿软化,十二指肠出血,肺脏水肿淤血。但是在12、14和16周龄鸭仅出现脑膜充血,肠道出血,其它器官无明显病变。感染鸭显微病变主要出现在脑部、心脏、肾脏、卵泡、肝脏和脾脏等,包括出血、坏死以及单核细胞浸润,但14和16周龄鸭组织显微结构完整,出血轻微。免疫组化结果显示:阳性着色点主要存在于心脏颗粒变性区,肾小管上皮细胞胞浆,小胶质细胞和神经细胞,脾脏肿胀淋巴细胞,但14和16周龄鸭组织中阳性着色点着色浅、分布窄。组织病毒载量先减少在14或16周龄达到最小值然后再增加;血清中和抗体效价先增加在14周龄有最大值然后再减少;16周龄和18周龄对照组和试验组血清中细胞因子无统计学差异。结论 TMUV感染后多器官的炎性损伤可能是育成鸭发病的原因,病毒在组织内广泛分布,病毒可引起体液免疫和细胞免疫。综合病理组织学变化、病毒载量和免疫反应各方面,14和16周龄育成鸭对TMUV的抵抗力较强。

关键词：鸭坦布苏病毒易感性

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