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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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358 篇 会议
2 篇 期刊文献

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360 篇 电子文献
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日期分布

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354 篇 农学
- 351 篇 兽医学
- 3 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
8 篇 医学
- 4 篇 公共卫生与预防医...
- 3 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理

主题

21 篇 prrsv
17 篇 分离鉴定
13 篇 elisa
13 篇 检测方法
10 篇 单克隆抗体
10 篇 禽流感病毒
9 篇 新城疫病毒
9 篇 猪瘟病毒
9 篇 变异分析
9 篇 特异性
8 篇 猪流行性腹泻病毒
8 篇 宿主细胞
8 篇 猪肺炎支原体
8 篇 rt-pcr
8 篇 同源性
8 篇 序列分析
7 篇 初步应用
7 篇 副猪嗜血杆菌
7 篇 分离株
7 篇 pcr

机构

32 篇 吉林大学
20 篇 中国农业科学院上...
19 篇 江苏省农业科学院...
19 篇 军事医学科学院军...
18 篇 河南科技大学
17 篇 河南农业大学
16 篇 中国农业大学
13 篇 西北农林科技大学
13 篇 吉林农业大学
10 篇 福建省农业科学院...
9 篇 安徽农业大学
9 篇 华南农业大学
9 篇 贵州大学
8 篇 军事医学科学院军...
8 篇 四川农业大学
8 篇 扬州大学
8 篇 山东农业大学
7 篇 中国畜牧兽医学会...
7 篇 河南省动物疫病预...
7 篇 广西大学

作者

17 篇 金宁一
14 篇 涂长春
13 篇 丁壮
12 篇 周恩民
11 篇 熊祺琰
11 篇 冯志新
11 篇 余祖华
11 篇 程相朝
11 篇 邵国青
10 篇 何雷
10 篇 赵雪丽
10 篇 吴志明
10 篇 刘茂军
10 篇 闫若潜
9 篇 王淑娟
9 篇 张春杰
9 篇 谢彩华
9 篇 李一权
9 篇 郁川
8 篇 刘光清

语言

355 篇 中文
5 篇 英文

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排序：

母猪乳汁中猪伪狂犬病病毒的分离与鉴定

母猪乳汁中猪伪狂犬病病毒的分离与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：蒋智勇蔡汝健李艳李春玲广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医卫生公共实验室

2015年2月从广东某免疫接种过猪伪狂犬病疫苗（Bartha-K61）的规模化猪场哺乳母猪乳汁中分离出1株猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）,分离株经细胞培养、空斑纯化、PCR鉴定、动物感染试验等方法进行鉴定后命名为PRV-JM株。分离... 详细信息

2015年2月从广东某免疫接种过猪伪狂犬病疫苗（Bartha-K61）的规模化猪场哺乳母猪乳汁中分离出1株猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）,分离株经细胞培养、空斑纯化、PCR鉴定、动物感染试验等方法进行鉴定后命名为PRV-JM株。分离株经幼仓鼠肾传代细胞系（BHK-21）接种、病毒生长良好,毒价稳定,用Reed-Muench法测定分离株病毒的组织细胞半数感染量(TCID)为10/mL;同时对该株病毒的gB、gC、gD和gE基因进行PCR扩增和测序,与国内外其他分离株和疫苗株进行了核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分析,并分别构建了遗传进化关系图,结果表明PR-V-JM株与2011年之前分离毒株的亲缘关系较远。用不同剂量的病毒培养物接种Balb/C小鼠,低剂量(10 TCID/mL)的PRV-JM即可引起典型的伪狂犬病症状,继而死亡;最初在其脑组织中检测到PRV病原,随后在肾、肺、心等器官中检出,试验初步证实了PRV的脑组织嗜性。PRV-JM株的分离与鉴定为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗与诊断研究奠定了基础。

关键词：猪伪狂犬病病毒分离鉴定

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猪呼吸道病相关的几种病毒PCR/RT-PCR检测方法的建立

猪呼吸道病相关的几种病毒PCR/RT-PCR检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：韦冠东王洪光马萍汤德元张元鑫曾智勇刘霞唐宇李达贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病预防控制中心

为建立猪呼吸道病相关几种的病毒PCR/RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒（PRV,gB,AF257079）、猪圆环2型病毒（PCV2,ORF2,NC 005148）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV,ORF6,NC01961）、猪瘟病毒（CSFV,C,AY805221）、猪细小病毒（PPV,NS1,NC 001718）和猪流感病毒（SIV,M,GU086140）6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物,通过对其条件的优化,建立了检测以上6种病毒的PCR/RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192 bp（PRV）、255 bp（PCV2）、364bp（PRRSV）、530bp（CSFV）、759bp（PPV）和981 bp（SIV）。通过实验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性,对该6种病毒的核酸检测最低浓度依次为2.5×10ng、2.2×10ng、3.2×10ng、8.3×10ng、3.7×10ng和3.7×10ng。该方法的建立为检测以上6种病毒提供了有参考价值的方法。

关键词： PRV PCV2 PRRSV CSFV PPV SIV PCR/RT-PCR方法

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山羊痘病毒基因组的提取、酶切及其TK基因克隆分析

山羊痘病毒基因组的提取、酶切及其TK基因克隆分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：文明周碧君王开功罗阿东贵州大学动物科学学院

山羊痘是危害养羊业健康发展的重要传染病之一,本实验开展了以下几个方面的研究:山羊痘病毒SYBR GreenⅠ荧光PCR检测方法的建立:根据山羊痘病毒基因组反向末端重复序列(InvertedTerminal Repeat,ITR)设计引物,对山羊痘皮肤痘疹提取的DN... 详细信息

山羊痘是危害养羊业健康发展的重要传染病之一,本实验开展了以下几个方面的研究:山羊痘病毒SYBR GreenⅠ荧光PCR检测方法的建立:根据山羊痘病毒基因组反向末端重复序列(InvertedTerminal Repeat,ITR)设计引物,对山羊痘皮肤痘疹提取的DNA进行PCR检测,同时优化SYBR GreenⅠ模式荧光PCR反应条件,结果表明建立的SYBR GreenⅠ模式荧光PCR方法能检测出7×10～2拷贝数的DNA模板,比普通PCR检测方法更敏感、准确、快速。

关键词：山羊痘实时定量荧光PCR 增殖规律酶切分析 TK基因序列分析

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鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5的原核表达及特性分析

鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5的原核表达及特性分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：韩凯凯李银黄欣梅赵冬敏刘宇卓刘青涛谢星星安凤娇江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

本试验通过在大肠杆菌中表达鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5,对其纯化并进行特性分析。根据鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS5基因序列,设计1对特异性引物,利用PCR技术扩增得到全长NS5基因序列,并将其定向克隆至原核表达载体pET32a中,获得... 详细信息

本试验通过在大肠杆菌中表达鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5,对其纯化并进行特性分析。根据鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS5基因序列,设计1对特异性引物,利用PCR技术扩增得到全长NS5基因序列,并将其定向克隆至原核表达载体pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-NS5,经双酶切鉴定及测序正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得NS5蛋白大肠杆菌表达株。经IPTG诱导表达,表达的重组融合蛋白最终经SDS-PAGE及westem-blotting鉴定。结果显示,NS5融合蛋白分子质量约为120kDa,在诱导后5 h达到表达量高峰,融合蛋白以包涵体形式存在,wester-blotting显示原核表达的蛋白可被鹅坦布苏病毒抗兔血清特异性识别,以NS5蛋白为抗原制备的多克隆抗体具有较高的敏感性与特异性。这些都为进一步开展关于鹅坦布苏病毒NS5蛋白的研究奠定了基础。

关键词：鹅坦布苏病毒 NS5蛋白原核表达

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2014年云南省禽流感H5N1亚型病毒进化分析

2014年云南省禽流感H5N1亚型病毒进化分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：孔强曾伟赵焕云段博芳胡挺松范泉水张应国宋建领张文东张富强云南农业大学云南省动物疫病预防控制中心成都军区疾病预防控制中心云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

2014年1-3月云南省发生H5N1亚型禽流感疫情。为了解病毒全基因变异特征及遗传进化关系,在云南通海、安宁采集死亡家禽喉气管20份,经禽流感H5N1亚型病毒特异性多重RT-PCR检测,对阳性样品进行病毒全基因扩增、克隆和测序,并与已知参考毒... 详细信息

2014年1-3月云南省发生H5N1亚型禽流感疫情。为了解病毒全基因变异特征及遗传进化关系,在云南通海、安宁采集死亡家禽喉气管20份,经禽流感H5N1亚型病毒特异性多重RT-PCR检测,对阳性样品进行病毒全基因扩增、克隆和测序,并与已知参考毒株序列进行序列比对及系统发育分析。结果从阳性样品病毒获得全基因序列4个,均属于2.3.4.4进化小分支。HA基因与其他基因呈现不同进化关系,HA基因受体结合位点和表位关键性氨基酸位点存在变异,新增加2个糖基化位点;NA基因缺失4个糖基化位点;PB2基因aa627为谷氨酸(E);NS基因在aa80-aa84发生缺失;PB1、PA、NP、M关键性氨基酸位点均存在部分替代或突变。禽流感H5N1亚型间具有遗传差异,进化小分支2.3.4.4已成为当地流行的优势毒株。

关键词：禽流感病毒 H5N1亚型全基因分子特征序列分析

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一株H3N2亚型犬流感病毒的分离及其分子变异性分析

一株H3N2亚型犬流感病毒的分离及其分子变异性分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅董晨红江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

为了解近期犬流感病毒的病原学特性及分子变异情况,2012年从南京地区宠物医院采集的20份犬鼻拭子中分离到1株犬流感病毒,命名为A/Canine/Nanjing/11/2012（H3N2）。该病毒分离株的血凝（HA）效价为2～8,鸡胚半数感染量(EID)和最小致死... 详细信息

为了解近期犬流感病毒的病原学特性及分子变异情况,2012年从南京地区宠物医院采集的20份犬鼻拭子中分离到1株犬流感病毒,命名为A/Canine/Nanjing/11/2012（H3N2）。该病毒分离株的血凝（HA）效价为2～8,鸡胚半数感染量(EID)和最小致死量平均死亡时间（MDT）分别为10/0.1mL和69.6 h/10。血凝素（HA）基因、神经氨酸酶（NA）基因和核蛋白基因（NP）的系统发育进化树均显示该病毒分离株位于禽流感病毒亚群中,并与H3N2亚型犬流感病毒辽宁分离株和黑龙江分离株位于同一分支上,具有最近的亲缘关系（HA基因的同源性为99.5%9.6%,NA基因的同源性为99.0%9.2%,NP基因的同源性为99.1%9.3%）。氨基酸序列分析显示,该病毒分离株与其他犬流感病毒分离株在HA基因、NA基因和NP基因氨基酸序列存在个别位点的突变。

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型分离变异系统发育进化树

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奶牛狂犬病的诊断

奶牛狂犬病的诊断

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：尹晓敏余琦张旭赵德明中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京市海淀区 100193

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病，病死率100[％]。狂犬病呈世界性分布，严重威胁着人畜健康，在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病，病死率100[％]。狂犬病呈世界性分布，严重威胁着人畜健康，在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数呈快速上升趋势。因此，加强对狂犬病的监测和确诊意义重大。本实验综合采用了快速反转录PCR技术，结合经典的病理组织学观察结果，对奶牛疑似狂犬病病例进行了确诊。

关键词：奶牛狂犬病烈性传染病病理组织学

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gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响

gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山杜希宁刘华洁张海彬江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心南京师范大学生命科学学院

为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒（IBDV）复制的影响,本研究用化学合成的方法合成gga-miR-9*的模拟物gga-miR-9*mimics,转染DF-1-细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的滴度和IFN含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR... 详细信息

为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒（IBDV）复制的影响,本研究用化学合成的方法合成gga-miR-9*的模拟物gga-miR-9*mimics,转染DF-1-细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的滴度和IFN含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR-9*的靶基因,并用双荧光素酶报告系统、western blot、qRT-PCR和RNA干扰对其靶基因进行验证。结果显示,gga-miR-9*mimics能够促进IBDV的复制,抑制干扰素（IFN）的产生;gga-miR-9*可靶向降解IRF2 mRNA和抑制IRF2蛋白的翻译;IRF2被敲除的DF-1细胞,IBDV复制滴度(10TCID/0.1mL)高于miRNA阴性对照组(10TCID/0.1mL)。综上表明细胞gga-miR-9*促进IBDV复制的分子作用机理是在IRF2基因转录后水平上抑制细胞天然免疫功能而发生的。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) miRNA gga-miR-9* siRNA

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一株血清2型鸭疫里默氏杆菌培养特性的研究

一株血清2型鸭疫里默氏杆菌培养特性的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：区德庆陈瑞爱王林川唐秀英黄文科谢永福广东大华农动物保健品股份有限公司华南农业大学兽医学院

前言鸭疫里默氏杆菌（RA）病是目前危害养鸭业的主要传染病之一,该类细菌营养需求较高,不易培养,影响着该菌的分离鉴定、传代培养和疫苗的生产。本文将对一株易于培养且可产生较多细菌抗原量的血清2型RA在改良液体培养基中的培养特性(... 详细信息

前言鸭疫里默氏杆菌（RA）病是目前危害养鸭业的主要传染病之一,该类细菌营养需求较高,不易培养,影响着该菌的分离鉴定、传代培养和疫苗的生产。本文将对一株易于培养且可产生较多细菌抗原量的血清2型RA在改良液体培养基中的培养特性(测定不同培养时间的活菌数和OD值)进行研究总结。

关键词：鸭疫里默氏杆菌培养特性活菌数

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H1/H5亚型流感重组腺病毒疫苗的制备工艺研究

H1/H5亚型流感重组腺病毒疫苗的制备工艺研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：靖杰柴中华韩继成肖朋朋郭海宁马海彬鲁会军吉林大学动物医学院军事医学科学院军事兽医研究所长春中医药大学延边大学

目的建立针对H1、H5亚型流感病毒的多表位重组腺病毒候选疫苗pacAd5-H5HA-EHA-H1HA1new的纯化工艺。方法阴离子介质Source 30Q和分子筛介质Sepharose4FF,建立两步纯化方法,对实验室现有的重组腺病毒进行纯化实验,并对纯化后腺病毒的纯... 详细信息

目的建立针对H1、H5亚型流感病毒的多表位重组腺病毒候选疫苗pacAd5-H5HA-EHA-H1HA1new的纯化工艺。方法阴离子介质Source 30Q和分子筛介质Sepharose4FF,建立两步纯化方法,对实验室现有的重组腺病毒进行纯化实验,并对纯化后腺病毒的纯度和滴度进行鉴定。结果运用阴离子Source 30Q层析介质、分子筛Sepharose4FF层析介质两步法对pacAd5-H5HA-EHA-H1HA1new和pacAd5-H5HA2种重组腺病毒分别进行病毒纯化,并对完成纯化的腺病毒进行一一鉴定。经过Source30Q阴离子层析及Sepharose 4FF分子筛层析法,两步层析纯化后的H1、H5亚型流感多表位重组腺病毒pacAd5-H5HA-EHA-H1HA1new总体回收率达到41%。经PCR鉴定后,结果显示H5HA、H1HA1等目的基因片段仍稳定存在,重组腺病毒内的目的基因片段未丢失。结论本研究建立了重组腺病毒疫苗的两步纯化法,经纯化后的重组腺病毒,其目的片段为丢失。

关键词：重组腺病毒疫苗 H1/H5 多表位制备工艺研究

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