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349 篇 会议
1 篇 期刊文献

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349 篇 农学
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- 2 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
2 篇 医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...

主题

24 篇 猪圆环病毒2型
19 篇 猪瘟病毒
17 篇 副猪嗜血杆菌
16 篇 prrsv
15 篇 克隆
14 篇 原核表达
13 篇 猪
12 篇 单克隆抗体
11 篇 猪病
10 篇 猪瘟
10 篇 elisa
10 篇 分离鉴定
10 篇 序列分析
9 篇 口蹄疫
9 篇 猪繁殖与呼吸综合...
9 篇 多重pcr
8 篇 混合感染
8 篇 基因克隆
8 篇 转录时相
8 篇 细胞因子

机构

46 篇 河南农业大学
33 篇 军事医学科学院军...
24 篇 河南省动物疫病预...
21 篇 吉林大学
17 篇 河南科技大学
15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 南京农业大学
12 篇 华南农业大学
10 篇 河北农业大学
10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 河南省动物性食品...
9 篇 四川农业大学
9 篇 吉林农业大学
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 青岛农业大学
8 篇 中国农业大学
7 篇 华中农业大学
6 篇 郑州牧业高等专科...
6 篇 山东省动物疫病预...

作者

26 篇 金宁一
24 篇 崔保安
16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 王臣
15 篇 陈红英
15 篇 刘长明
15 篇 程相朝
14 篇 赵战勤
14 篇 张春杰
14 篇 丁轲
13 篇 危艳武
13 篇 王川庆
13 篇 魏战勇
13 篇 黄立平
12 篇 李霄
12 篇 杨霞
12 篇 冯志新
12 篇 张健
12 篇 袁世山

语言

346 篇 中文
4 篇 英文

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8株芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

8株芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：王晓丽朱小翠王永山诸玉梅刘小娟周宇王冉江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室南京农业大学动物医学院江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所

从土壤和健康猪体内分离到8株芽孢杆菌,结合细菌形态学、生理生化特性和16SrRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其生物学特性进行了研究。结果表明KF、KH、K2X、KY1菌株为枯草芽孢杆菌,LB1、LB2、LY3菌株为蜡样芽孢杆菌,DY菌株为地衣芽孢... 详细信息

从土壤和健康猪体内分离到8株芽孢杆菌,结合细菌形态学、生理生化特性和16SrRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其生物学特性进行了研究。结果表明KF、KH、K2X、KY1菌株为枯草芽孢杆菌,LB1、LB2、LY3菌株为蜡样芽孢杆菌,DY菌株为地衣芽孢杆菌。除K2X菌株对温度处理较敏感,其余7菌株45℃0℃处理30min,对其生长繁殖无影响;DY菌株的耐酸性强,具有较强的胃液耐受力;其次是KY1菌株,并且对胆盐、肠液的耐受力也较强。对共培养的沙门氏菌的抑制率,KF、KH、LB2菌株分别为28.6%、27%、24.6%,其它菌株效果不明显;8菌株对共培养的大肠杆菌O157都没有抑制效果。

关键词：芽孢杆菌分离鉴定生物学特性

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松鼠葡萄球菌脱皮毒素C单克隆抗体的制备与识别区域分析

松鼠葡萄球菌脱皮毒素C单克隆抗体的制备与识别区域分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：丁琳李海花郑世军中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室

为了深入研究松鼠葡萄球菌脱皮毒素C(ExhC)的致病机理,以纯化的重组蛋白ExhC免疫小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗ExhC单克隆抗体的细胞株,分别命名为1D2、1C7、1F9、1F11、2D5、3E4、4F6和4G6,经鉴定其抗体亚类包括IgG1、... 详细信息

为了深入研究松鼠葡萄球菌脱皮毒素C(ExhC)的致病机理,以纯化的重组蛋白ExhC免疫小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗ExhC单克隆抗体的细胞株,分别命名为1D2、1C7、1F9、1F11、2D5、3E4、4F6和4G6,经鉴定其抗体亚类包括IgG1、IgG2b和IgM。经Western blot证实这些单抗均能特异性识别天然ExhC。1C7、1F9和3E4的亲和力解离常数(Kd)分别为6.65×10-10、4.46×10-10、1.53×10-9。单抗识别抗原表位分析结果显示1D2、1C7和1F9识别的抗原表位位于ExhC第179-228aa之间,而3E4的则位于第79-128aa之间。

关键词：松鼠葡萄球菌脱皮毒素C 单克隆抗体

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副猪嗜血杆菌hhdA基因的克隆与分子特征

副猪嗜血杆菌hhdA基因的克隆与分子特征

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：宋帅李春玲李淼杨冬霞广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生实验室

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdA的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从分离的副猪嗜血杆菌中扩增其目的基因,将扩增产物纯化与pMD18-T载体连接并转化DH5α菌株,用凝胶电泳、PCR和BamHⅠ、HindⅢ双酶切法鉴定为阳性的质粒进行测... 详细信息

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdA的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从分离的副猪嗜血杆菌中扩增其目的基因,将扩增产物纯化与pMD18-T载体连接并转化DH5α菌株,用凝胶电泳、PCR和BamHⅠ、HindⅢ双酶切法鉴定为阳性的质粒进行测序和分析。结果表明副猪嗜血杆菌hhdA完整阅读框为1710bp,根据编码序列推导出相应570个氨基酸。与已发表的副猪嗜血杆菌SH0165、HPS59的hhdA基因同源性为99%,与已发表的副猪嗜血杆菌29755的hhdA氨基酸同源性为99%。生物学预测分析结果显示,HPS hhdA是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲;在此基础上,综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测了hhdA蛋白可能的B细胞抗原表位。该结果将为进一步深入研究hhdA在副猪嗜血杆菌感染过程中所扮演的角色奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌 hhdA基因分子特征

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猪圆环病毒2型分离株优势基因型分析与检测

猪圆环病毒2型分离株优势基因型分析与检测

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：郭抗抗张彦明张红刘华科宁蓬勃王晶钰西北农林科技大学动物医学院

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)分离株基因型的变化,对1999—2009年NCBI中收录的556个PCV2分离株全基因序列进行了分析。结果表明,1999—2002年PCV2的优势流行毒株为基因A型(PCV2A);从2003年开始基因B型(PCV2B)逐渐为优势流行毒株,在PCV2分... 详细信息

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)分离株基因型的变化,对1999—2009年NCBI中收录的556个PCV2分离株全基因序列进行了分析。结果表明,1999—2002年PCV2的优势流行毒株为基因A型(PCV2A);从2003年开始基因B型(PCV2B)逐渐为优势流行毒株,在PCV2分离株中所占比例,2004年为95.4%,2007—2009年均超过76.0%。2003—2009年国内的PCV2分离株有287个,其中250个为PCV2B,37个为PCV2A,表明PCV2B是国内猪群中主要优势毒株。建立了PCV2A和PCV2BPCR检测方法,对70份临床病料的检测发现,PCV2检出率为34.29%(24/70),基因型均为PCV2B,无PCV2A的检出,提示PCV2B为检测猪群中的主要优势毒株。

关键词：猪圆环病毒2型基因分析基因型 PCR 病毒检测

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郑海红孙志朱兴全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 华南农业大学兽医学院广东广州 510642 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 华南农业大学兽医学院广东广州 510642

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行，对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行，对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body结合位置，结果发现PRRSV mRNA分子的转录可使用经典(canonical)及非经典(noncanonical)TRS-B进行。通过对PRRSV感染性克隆pAPRRS进行定点基因突变及其所致拯救病毒的鉴定，以此确定TRS-L和TRS-B突变对亚基因组转录及病毒感染性的影响。结果表明：(1)同时突变TRS-L最后两个CC的全长突变体pLgaglerD对MARC-145细胞无感染性，且未产生sgmRNA7转录本;而只突变最后一个C的pLeaderR能拯救出突变病毒，但突变位点在突变病毒系列传代中发生回复突变，由此证明TRS-L 3’的一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有一定修复功能。(2)突变TRS123 3’最后两个碱基的pM7Da或突变TRS93’最后两个碱基的pM7Db均能拯救出病毒，而共同含有TRS9和TRS123 3’最后两个碱基突变的pM7DabR不能拯救出病毒，对拯救的突变病毒进行鉴定发现，TRS123突变的拯救病毒在一系列传代中突变碱基回复，而TRS9突变的拯救病毒传代过程中稳定遗传;突变体pM7S3(含有TRS123的三个碱基突变)和pM7Db虽能拯救出活病毒，但突变都使相应的sgmRNA7转录量至零，且vM7S3滴度偏低。由此证明了TRS9和TRS123都可单独承担PRRSVsgmRNA7的转录调控及其3’一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有修复功能;PRRSV的N蛋白主要来源于sgmRNA7.1的翻译。(3)所有突变病毒的亚基因组中leader-body结合位点础基均来源于TRS-B，为负链RNA不连续转录模型理论提供直接证据。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列 TRS鉴定功能解析

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猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群分析

猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：王惟付明山郑海英李芳萍涂长春吉林大学畜牧兽医学院军事医学科学院军事兽医研究所通辽市畜牧兽医站通辽市畜牧兽医科研所

分析猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群分布。将接种过猪瘟疫苗的种母猪经ELISA和血清中和试验检测筛选出38头猪瘟病毒(CSFV)抗体阴性猪。从中挑选15头作为研究对象,以15头抗体阳性猪作为对照。用流式细胞术对30... 详细信息

分析猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群分布。将接种过猪瘟疫苗的种母猪经ELISA和血清中和试验检测筛选出38头猪瘟病毒(CSFV)抗体阴性猪。从中挑选15头作为研究对象,以15头抗体阳性猪作为对照。用流式细胞术对30头猪外周血淋巴细胞(PBL)中CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群进行检测。15头CSFV抗体阴性猪PBL中CD3+CD4+细胞所占比例(24.09%±1.29%)明显低于15头CSFV抗体阳性猪(37.49%±1.60%);15头CSFV抗体阴性猪PBL中CD4+CD25+细胞所占比例(2.34%±0.20%)明显高于15头CSFV抗体阳性猪(1.64%±0.13%)。PBL中CD3+CD4+淋巴细胞亚群的减少及CD4+CD25+淋巴细胞亚群的增加可能是导致猪瘟疫苗免疫反应低下的重要原因。

关键词：猪瘟病毒外周血淋巴细胞 CD3+CD4+亚群 CD4+CD25+亚群

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猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立

猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：郭焕成席进涂长春军事医学科学院军事兽医研究所

根据猪瘟病毒(CSFV)E2基因序列,设计了41条针对CSFV3个基因群共10个基因亚群各亚群特异性寡核苷酸探针。利用欧盟猪瘟诊断手册中推荐的CSFVE2基因套式RT-PCR方法,在内套PCR过程中进行Cy3-dCTP掺入荧光标记,制备芯片杂交样品。用标记的PC... 详细信息

根据猪瘟病毒(CSFV)E2基因序列,设计了41条针对CSFV3个基因群共10个基因亚群各亚群特异性寡核苷酸探针。利用欧盟猪瘟诊断手册中推荐的CSFVE2基因套式RT-PCR方法,在内套PCR过程中进行Cy3-dCTP掺入荧光标记,制备芯片杂交样品。用标记的PCR产物与寡核苷酸探针阵列杂交,置于GenePix 4100A扫描仪中扫描,利用GenePix Pro6.0软件对杂交图像进行分析。特异性和灵敏度实验显示,芯片方法与本室发表的CSFVReal-time PCR方法的灵敏度相近,芯片探针与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪2型圆环病毒(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)样品无非特异性杂交。以包括1.1、2.1、2.2、2.3亚群的8份CSF阳性样品进行芯片的检测验证,研究结果表明,通过特异性的杂交图谱或杂交信号分析可准确判定样品所属的基因亚群,寡核苷酸芯片的检测结果与测序的分型结果全部符合。本研究为将寡核苷酸芯片技术用于猪瘟病毒的基因分型和分子流行病学研究奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒寡核苷酸芯片基因分型

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达系统的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒JL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：高磊李国江丁壮张立春吉林农业大学动物科技学院预防兽医学系吉林农业科技学院吉林大学畜牧兽医学院动物医学系

目的利用pEGFP-N1载体构建了含有PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达载体pEGFP-IL18-GP5。方法采用RT-PCR方法扩增了JL/07/SW毒株GP5基因和猪IL-18基因。将该基因与真核表达载体pEGFP-N1连接,克隆获得重组质粒pEGFP... 详细信息

目的利用pEGFP-N1载体构建了含有PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达载体pEGFP-IL18-GP5。方法采用RT-PCR方法扩增了JL/07/SW毒株GP5基因和猪IL-18基因。将该基因与真核表达载体pEGFP-N1连接,克隆获得重组质粒pEGFP-IL18-GP5。将获得重组质粒转染MACR-145细胞,检测目的蛋白的表达情况。结果 RT-PCR分别扩增出GP5基因和IL-18基因,大小与预期一致;通过荧光显微镜观察、SDS-PAGE和Westernblot试验证明GP5基因和IL-18基因在MACR-145细胞中成功表达。结论成功构建含有PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因及猪IL-18基因融合蛋白真核表达载体pEGFP-IL18-GP5,为研究基于以EGFP为报告基因的IL18-GP5为靶蛋白的核酸疫苗以及细胞因子对PRRS核酸疫苗免疫效果的影响奠定了实验基础。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征 GP5基因 IL-18基因真核表达

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表达T+Pm保护性抗原的重组猪霍乱沙门氏菌C500株的构建及其生物学特性

表达T+Pm保护性抗原的重组猪霍乱沙门氏菌C500株的构建及其生物学...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：赵战勤王臣丁轲张春杰李银聚刘一尘吴庭才程相朝河南科技大学动物科技学院动物病原微生物学实验室洛阳 471003

粘膜免疫与多价疫苗是未来免疫预防传染病的重要方向，以细菌为载体的重组活疫苗是其最有发展前景的研究领域之一。本研究利用Asd+平衡致死系统构建表达巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin，PMT)的重组猪霍乱沙门氏菌株，并对重... 详细信息

粘膜免疫与多价疫苗是未来免疫预防传染病的重要方向，以细菌为载体的重组活疫苗是其最有发展前景的研究领域之一。本研究利用Asd+平衡致死系统构建表达巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin，PMT)的重组猪霍乱沙门氏菌株，并对重组菌株的生物学特性进行比较研究。通过基因克隆的方法构建表达PMT的重组质粒pYA-PmtC，再将其电转化减毒猪霍乱沙门氏菌C500的asd基因缺失株C501，构建口服活疫苗菌株C501(pYA-PmtC)。生化鉴定结果表明，重组菌株C501(pYA-PmtC)与载体菌株C501(pYA3493)不能利用乳糖、蔗糖、阿拉伯糖、半乳糖醇和尿素作为唯一碳源，但能利用一些其他糖类作为唯一碳源，这些生化指标与亲本菌株C500相同。同时发现重组菌株C501(pYA-PmtC)的血清型和生长速度与亲本菌株C500-致;在没有选择压力的条件下，C501(pYA-PmtC)能够稳定遗传重组质粒及其外源基因片段，并能稳定，高效、分泌性表达30.5 kDa的外源保护性抗原rPmtC。通过生物学软件Bio-Rad Quantity One对SDS—PAGE结果进行分析，发现重组蛋白rPmtC的总表达量约占菌体总蛋白的3.3％。其中，在菌体中的表达量约占总表达量的69.6％，分泌到上清液中的表达量(分泌性表达)占31.4％。C501(pYA-PmtC)腹腔感染BALB/c小鼠的LD50为8.5×106 CFU，毒力稍低于C500(LD50为4.4×106 CFU);口服接种C501(pYA-PmtC)和C500的所有仔猪未见任何发病症状，两者没有显著差别。本研究利用Asd+平衡致死系统的原理构建表达T+Pm保护性抗原重组猪霍乱沙门氏菌弱毒菌株c501(pYA-PmtC)，为进一步开发猪萎缩性鼻炎-副伤寒的双价基因工程疫苗奠定基础。

关键词：猪霍乱沙门氏菌C500株产毒巴氏杆菌 Asd+平衡致死系统重组疫苗

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猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：张志远徐红运刘肖萍卢晓艳段二珍刘玉松夏平安崔保安河南农业大学牧医工程学院

【目的】克隆猪Fc受体γ亚单位基因,构建原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备多克隆抗体。【方法】研究中应用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞总RNA中克隆出猪Fcγ亚单位的cDNA序列,测序结果表明得到了与预期相符的长为299bp基因序列片段并将... 详细信息

【目的】克隆猪Fc受体γ亚单位基因,构建原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备多克隆抗体。【方法】研究中应用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞总RNA中克隆出猪Fcγ亚单位的cDNA序列,测序结果表明得到了与预期相符的长为299bp基因序列片段并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-FcRγ,成功表达了分子量大小约为29KDa的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白FcRγ-His免疫小白鼠,制备鼠抗FcRγ-His重组蛋白的多克隆抗体,用间接ELISA和Westernblotting检测获得的多克隆抗体,ELISA测定多克隆抗体的效价为1:8000。Westernblotting结果显示制备的多克隆抗体可以与重组蛋白特异性结合,表明重组蛋白具有较好的免疫原性【结果】成功构建猪Fc受体γ亚单位原核表达载体,纯化到融合蛋白FcRγ-His,用纯化的融合蛋白免疫小鼠制备了多克隆抗体,Westernblotting、ELISA法证实多克隆抗体制备成功。【结论】成功克隆猪Fc受体γ亚单位基因,成功获得了猪Fc受体γ亚单位表达受体,为其结构与功能的进一步研究奠定了基础。

关键词：猪FcRγ 克隆原核表达多克隆抗体

来源：评论

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