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2 篇 医学
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主题

24 篇 猪圆环病毒2型
19 篇 猪瘟病毒
17 篇 副猪嗜血杆菌
16 篇 prrsv
15 篇 克隆
14 篇 原核表达
13 篇 猪
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10 篇 猪瘟
10 篇 elisa
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机构

46 篇 河南农业大学
33 篇 军事医学科学院军...
24 篇 河南省动物疫病预...
21 篇 吉林大学
17 篇 河南科技大学
15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 南京农业大学
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10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 河南省动物性食品...
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9 篇 吉林农业大学
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8 篇 青岛农业大学
8 篇 中国农业大学
7 篇 华中农业大学
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6 篇 山东省动物疫病预...

作者

26 篇 金宁一
24 篇 崔保安
16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 王臣
15 篇 陈红英
15 篇 刘长明
15 篇 程相朝
14 篇 赵战勤
14 篇 张春杰
14 篇 丁轲
13 篇 危艳武
13 篇 王川庆
13 篇 魏战勇
13 篇 黄立平
12 篇 李霄
12 篇 杨霞
12 篇 冯志新
12 篇 张健
12 篇 袁世山

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迁移性树突状细胞与淋巴结内树突状细胞在抗***免疫应答中的作用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：董炳梅何媛娜付景丽 Nico Van Rooijen 王家鑫河北农业大学动物科技学院免疫学实验室

目的:研究迁移性树突状细胞与淋巴结内树突状细胞在抗猪布鲁氏菌免疫应答中的作用。方法:48只BALB/c小鼠随机分为3组:Ⅰ组为正常对照组,阴道滴注PBS。Ⅱ组为巨噬细胞(MΦ)清除组,每只小鼠阴道滴入清除剂,Ⅲ组为未清除MΦ组,每只小鼠阴... 详细信息

目的:研究迁移性树突状细胞与淋巴结内树突状细胞在抗猪布鲁氏菌免疫应答中的作用。方法:48只BALB/c小鼠随机分为3组:Ⅰ组为正常对照组,阴道滴注PBS。Ⅱ组为巨噬细胞(MΦ)清除组,每只小鼠阴道滴入清除剂,Ⅲ组为未清除MΦ组,每只小鼠阴道滴注同体积的liposome-PBS。48h后Ⅱ组、Ⅲ组均阴道接种猪布鲁氏菌,对照组阴道滴注PBS。各组小鼠分别在12h,24h,48h和72h采集血液和髂内淋巴结,采用免疫组织化学染色法观察淋巴结内树突状细胞(DC)的分布,用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量。结果:未清除MΦ组小鼠接种布鲁氏菌后髂内淋巴结内有大量DC迁移,至12h血清IFN-γ水平显著增高,与对照组相比差异显著(p<0.05),48h达到高峰,显著高于对照组(p<0.01)。清除MΦ组小鼠接种布鲁氏菌后,髂内淋巴结内没有明显的DC迁移,各时间点血清IFN-γ水平明显高于PBS对照组(p<0.05),但明显低于未清除MΦ组(p<0.05)。各组IL-4水平的差异无统计学意义(p>0.05)。结论:迁移性DC和淋巴结内DC在启动抗布鲁氏菌细胞免疫应答中均发挥重要作用,并具有协同作用的特点。

关键词：猪布鲁氏菌巨噬细胞树突状细胞淋巴结免疫应答

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PCV2与PPV共感染对猪肺泡巨噬细胞吞噬功能及其表达干扰素水平的影响

PCV2与PPV共感染对猪肺泡巨噬细胞吞噬功能及其表达干扰素水平的...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：刘祥义宋勤叶陈立功李艳琴左玉柱焦健达王秀萍河北农业大学动物科技学院

将48头5w健康仔猪随机分为4组,即PCV2感染组、PPV感染组、PCV2/PPV共感染组和对照组,每组12头。PCV2和PPV单独感染组分别通过口鼻途径接种PCV2或PPV,PCV2/PPV共感染组通过相同途径同时接种PCV2和PPV,对照组接种细胞营养液。感染后3、7... 详细信息

将48头5w健康仔猪随机分为4组,即PCV2感染组、PPV感染组、PCV2/PPV共感染组和对照组,每组12头。PCV2和PPV单独感染组分别通过口鼻途径接种PCV2或PPV,PCV2/PPV共感染组通过相同途径同时接种PCV2和PPV,对照组接种细胞营养液。感染后3、7、14和35d(dpi)每组随机剖杀3头,收获猪肺泡巨噬细胞(PAM),检测PAM的存活率、吞噬活性及其表达α1型干扰素(IFN-α1)、干扰素(IFN-)的mRNA水平。PCV2感染组和PCV2/PPV共感染组PAM的存活率于3、7、14dpi均低于对照组,35dpi时基本接近对照组,但PCV2/PPV共感染组与PCV2感染组之间差异不显著(P>0.05),实验期间PPV感染组PAM的存活率持续低下;3个感染组PAM的吞噬能力显著低于对照组(P<0.01),其中共感染组的吞噬能力低于两个单独感染组;共感染组PAM中IFN-α1和IFN-mRNA的水平持续显著低于两个单独感染组和对照组的水平(P<0.01)。上述结果表明,PCV2与PPV共感染导致PAM的吞噬功能和IFN-α1和IFN-mRNA表达水平持续严重下降,为PMWS病程的进一步发展创造了前提条件。

关键词： PCV2和PPV 共感染猪肺泡巨噬细胞吞噬功能干扰素猪

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猪IgGIIB类Fc受体剪接异构体的分子特征

猪IgGIIB类Fc受体剪接异构体的分子特征

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：刘玉松刘肖萍张志远范旭赵琳张凤华徐红运段二珍卢晓艳夏平安崔保安河南农业大学牧医工程学院

根据GenBank中猪IgGIIB类Fc受体(swFcγRⅡB)cDNA基因序列(DQ026064),从猪外周血白细胞cDNA中扩增swFcγRⅡB基因剪接异构体(FJ608551),测定其序列并进行序列分析,将swFcγRⅡB剪接异构体亚克隆至真核表达载体pcDNA3.0,利用脂质体瞬时转... 详细信息

根据GenBank中猪IgGIIB类Fc受体(swFcγRⅡB)cDNA基因序列(DQ026064),从猪外周血白细胞cDNA中扩增swFcγRⅡB基因剪接异构体(FJ608551),测定其序列并进行序列分析,将swFcγRⅡB剪接异构体亚克隆至真核表达载体pcDNA3.0,利用脂质体瞬时转染COS-7细胞,经流式细胞术检测swFcγRⅡB剪接异构体在细胞表面表达;并用红细胞吸附试验检测其与IgG免疫复合物结合的生物学活性。序列分析表明克隆的swFcγRⅡB剪接异构体编码区长度为951bp,编码316个氨基酸,包括45个氨基酸的N-端信号肽序列、179个氨基酸的胞外区序列、23个氨基酸组成的疏水跨膜区序列和69个氨基酸的胞质尾区序列;克隆的swFcγRⅡB剪接异构体(FJ608551)与swFcγRⅡB(DQ026064)的核苷酸与氨基酸序列同源性分别为99.3%和98.3%,其胞内区多出19个氨基酸的插入,类似于人类FcγRⅡb1剪接异构体;流式细胞术检测swFcγRⅡB剪接异构体能在COS-7细胞表面表达,瞬时表达细胞株的红细胞吸附试验,证明了其结合IgG免疫复合物的活性。克隆基因是swFcγRⅡB基因的一种RNA剪接异构体,本试验将为进一步研究swFcγRⅡB剪接异构体功能作用奠定基础。

关键词：猪 IgGIIB类Fc受体剪接异构体抑制性受体基因克隆

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猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外生物学特性研究

猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c三个基因型,还有PCV2d基因型新报道,这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c三个基因型,还有PCV2d基因型新报道,这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不同基因型代表性毒株,对拯救的毒株进行体外生物学特性试验。本研究构建了4个不同基因型的PCV2感染性分子克隆,经转化细胞后拯救4个克隆毒株,经核酸序列分析、病毒形态学观察、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)等证实属于不同基因型的PCV2毒株;拯救的毒株均通过细胞连续传10代,病毒增殖能力稳定,毒价均可达到105.0TCID50/ml;用具有中和病毒活性的单克隆抗体(1D2株)进行抗原捕获ELISA检测,拯救的PCV2a/rCL毒株与该单抗产生特异性反应,另3个克隆毒株(PCV2b/rYJ、rJF和PCV2d/rBDH)与该单抗均无反应,表明它们属于不同基因型代表毒株。这表明我国猪群中PCV2流行毒株存在不同基因型,其病毒抗原特性各异,构建和拯救了4个代表不同基因型PCV2克隆毒株,为进一步研究其致病性差异奠定了基础。

关键词： PCV2 不同基因型感染性克隆病毒拯救生物学特性

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猪白细胞介素2/6嵌合基因的融合表达及活性研究

猪白细胞介素2/6嵌合基因的融合表达及活性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：闫若潜马文涛吴志明李桂喜张志凌张健盛敏刘梅芬河南省动物疫病预防控制中心商丘市动物疫病预防控制中心

为了研究高效猪基因工程免疫增强剂,探讨IL-2/IL-6融合蛋白用作疫苗佐剂的免疫增强效果,本研究采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2(PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因并克隆入... 详细信息

为了研究高效猪基因工程免疫增强剂,探讨IL-2/IL-6融合蛋白用作疫苗佐剂的免疫增强效果,本研究采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2(PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因并克隆入pQE-30原核表达载体中进行融合表达;通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤对表达的重组融合蛋白(rPoIL-2-linker-PoIL-6)进行纯化。分别采用MTS法检测rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白促猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖活性;分别采用PoIL-2和PoIL-6ELISA试验方法检测rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白与抗PoIL-2和PoIL-6单抗发生特异性免疫反应的活性。结果表明:成功构建了PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因及其重组原核表达质粒(rpQE-30/PoIL-2-linker-PoIL-6)。表达的rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白分子量大小约28ku,蛋白经纯化后纯度在96%以上。rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白分别具有与单一重组PoIL-2、PoIL-6蛋白(rPoIL-2、rPoIL-6)对照相近的生物学活性,可显著促进猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖,并可与抗PoIL-2、PoIL-6单抗发生特异性免疫反应。本研究初步证明了rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白在体外具有单rPoIL-2和rPoIL-6蛋白的双重生物学活性,为下一步进行rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白在动物体内活性研究奠定了基础。

关键词：猪白介素2 猪白介素6 嵌合基因融合表达活性

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副猪嗜血杆菌的耐药性研究

副猪嗜血杆菌的耐药性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：周学利蔡旭旺陈焕春徐晓娟赵雅欣陈品张璇华中农业大学动物传染病实验室安徽省农科院畜牧兽医研究所

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)病表现为猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎,该病已成为影响世界养猪业的最重要的细菌性疾病之一。本研究用琼脂稀释法检测了本室2007-2008年分离自我国13个省市的110株副猪嗜血杆菌临床分离株... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)病表现为猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎,该病已成为影响世界养猪业的最重要的细菌性疾病之一。本研究用琼脂稀释法检测了本室2007-2008年分离自我国13个省市的110株副猪嗜血杆菌临床分离株对22种药物的敏感性,为副猪嗜血杆菌病的基础研究及我国对于该病的预防与控制提供了依据。所有试验菌株对头孢噻肟、头孢噻呋、阿奇霉素、氯霉素、氟苯尼考和替米考星均100%敏感,敏感率较高的有泰妙灵(99.1%)、红霉素(98.2%)、四环素(96.4%)、青霉素(93.6%)、氨苄青霉素(90.9%)、头孢克洛(91.8%)、左氧氟沙星(93.6%)、庆大霉素(93.6%)和壮观霉素(90.0%),环丙沙星的敏感率是82.7%;恩诺沙星和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑的耐药率分别高达70.9%和44.5%。该结果为副猪嗜血杆菌病的治疗提供了用药依据。110株副猪嗜血杆菌临床分离株表现有32种抗菌谱,仅有8.2%的副猪嗜血杆菌对本试验的22种药品100%敏感,68.2%的菌株能耐受1-2种药物,23.6%的菌株至少对3种或3种以上的药物不敏感,4.5%的菌株至少对5种药物不敏感,有1株(0.9%)可以耐受7种药物。我国当前的优势血清型是血清5型、4型、13型和12型,分离率分别是26.4%、14.6%、10.9%和9.1%,其耐药率分别为31.8%、16.2%、8.8%和7.8%;而其它血清型的分离率从0.9%到3.6%不等,耐药率从0.5%到2%不等。虽然不同血清型间的分离率及耐药率均相差较大,但统计学分析表明,副猪嗜血杆菌的耐药性与其血清型及毒力之间无明显相关性。

关键词：副猪嗜血杆菌耐药性血清型毒力

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应用化学合成siRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究

应用化学合成siRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：李江南郭换成涂长春军事医学科学院军事兽医研究所

本研究针对猪瘟病毒三个基因,设计6个RNA干扰靶点,2个针对Npro基因、1个针对NS2基因和3个针对NS3基因。首先由公司合成以上干扰靶点的siRNA分子,将化学合成的siRNA分子转染PK-15细胞单层6h,转染完成后接种猪瘟病毒石门株(96孔板200TCID... 详细信息

本研究针对猪瘟病毒三个基因,设计6个RNA干扰靶点,2个针对Npro基因、1个针对NS2基因和3个针对NS3基因。首先由公司合成以上干扰靶点的siRNA分子,将化学合成的siRNA分子转染PK-15细胞单层6h,转染完成后接种猪瘟病毒石门株(96孔板200TCID50/孔,12孔板2000TCID50/孔),培养48h和72h,采用间接免疫荧光、荧光定量PCR和病毒感染滴度测定三种方法对siRNA分子抑制猪瘟病毒增殖水平进行了研究。间接免疫荧光结果显示转染siRNA分子的细胞荧光比例显著低于对照,72h荧光比例略高于48h,其中NS3-1、NS3-2和NS3-3的荧光比例最少。转染各个siRNA分子(N8、N9、NS2-1、NS3-1、NS3-2和NS3-3)的细胞感染猪瘟病毒48h后对猪瘟病毒基因组的抑制率分别为68.0%、71.1%、78.3%、85.5%、95.1%、84.7%;感染病毒72h后抑制率分别为19.4%、61.3%、42.4%、77.3%、74.2%、60.1%,其中NS3-1和NS3-2高效抑制猪瘟病毒基因组的复制。转染组病毒感染滴度低于对照组,72h病毒感染滴度高于48h,其中NS3-1、NS3-2和NS3-3干扰组病毒滴度低于对照1-2个数量级。结果表明本研究筛选出的NS3-1和NS3-2靶点能高效抑制病毒增殖,为应用RNAi技术进行抗猪瘟病毒研究提供有效的候选靶点,为猪瘟病毒的防治进行基础性研究。

关键词：猪瘟病毒 RNAi 化学合成siRNA 抑制

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2型链球菌强毒株、无毒株胞壁相关蛋白的蛋白质组学分析

2型链球菌强毒株、无毒株胞壁相关蛋白的蛋白质组学分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：王英超党源王兴龙李晓艳军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学畜牧兽医学院

2型猪链球菌(Streptococcus suis,***)是一种全球流行的人畜共患病病原体,能够导致猪和人的脑膜炎、败血病、关节炎及突发性死亡等,给人的生命和财产构成极大威胁。目前对2型猪链球菌(Streptococcus suis type2,SS2)的研究还不能清楚的... 详细信息

2型猪链球菌(Streptococcus suis,***)是一种全球流行的人畜共患病病原体,能够导致猪和人的脑膜炎、败血病、关节炎及突发性死亡等,给人的生命和财产构成极大威胁。目前对2型猪链球菌(Streptococcus suis type2,SS2)的研究还不能清楚的解释其致病机理,并且缺少有效的诊断和疫苗靶位,促使2型猪链球菌病的预防、诊断和治疗存在一定的困难。本研究以2型链球菌的无毒株胞壁相关蛋白为参照,应用比较、免疫蛋白质组学的方法来筛选在强毒株胞壁蛋白中差异表达的蛋白,并对其进行鉴定和分析。通过应用双向电泳和质谱技术的结合,我们共找到155个差异蛋白点,并鉴定出其中的102个蛋白点,它们分别属于40种蛋白。通过应用双向电泳与West-blot技术结合发现,这40种蛋白中有25个同时具有免疫活性,此外还筛选出了另外5种只具有免疫活性的蛋白。在鉴定出的结果中,既有已知的毒力因子如:溶菌酶释放蛋白;又有以纤溶酶原为代表的潜在毒力因子如:烯醇酶、磷酸甘油酸酯激酶、磷酸甘油酸酯变位酶、磷酸丙糖异构酶等;还有部分蛋白如:塔盖糖1,6-二磷酸醛缩酶、谷胱甘肽还原酶等,它们除了具有免疫功能外,还具有毒力因子的调节、序列加工、运输活动、碳水化合物代谢、脂肪酸代谢、能量代谢、应激蛋白和细胞骨架等功能。本实验结果为进一步研究2型链球菌的致病机理、诊断试剂以及有效的疫苗的研制奠定了基础。

关键词：胞壁相关蛋白比较蛋白质组学免疫蛋白质组学 2型猪链球菌

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2a... 详细信息

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMκ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、2E7、B8、D3和H7细胞培养上清液的效价为1×101～2×102,腹水效价均为4×102～2.5×106。相加ELISA结果显示,D3和H7mAbs对应相同的抗原表位,而其它五株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,2E7、H7和D3为抗EHEC-O157:H7特异性单克隆抗体,其它四株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,2E7、D3和H7三株mAbs在蛋白分子量35kD处有特异性条带,而mAbsB8则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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Construction, expression and characterization of a chimeric multi-domain protein mediating specific DNA transfer

Construction, expression and characterization of a chimeric ...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：李霄 Chang Li Huijun Lu Mingyao Tian Kuoshi Jin Ningyi Jin Genetic Engineering Laboratory of PLA Academy of Military Medical Sciences of PLA

The basic objective of gene therapy is to treat human diseases by the transfer of therapeutically relevant genes, and the specific delivery and expression of these genes to defined target cells is a major goal of gene... 详细信息

关键词： Construction expression and characterization of a chimeric multi-domain protein mediating specific DNA transfer GAL domain DNA

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