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403 篇 会议
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403 篇 农学
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- 3 篇 生物学
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- 2 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
2 篇 医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...

主题

28 篇 猪圆环病毒2型
22 篇 猪瘟病毒
19 篇 副猪嗜血杆菌
18 篇 基因克隆
18 篇 原核表达
18 篇 prrsv
17 篇 克隆
17 篇 猪
15 篇 猪瘟
14 篇 序列分析
12 篇 单克隆抗体
11 篇 猪病
11 篇 elisa
11 篇 多重pcr
10 篇 混合感染
10 篇 分离鉴定
10 篇 猪链球菌
9 篇 口蹄疫
9 篇 pcr
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机构

68 篇 河南农业大学
33 篇 军事医学科学院军...
24 篇 河南省动物疫病预...
21 篇 吉林大学
17 篇 河南科技大学
15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
14 篇 南京农业大学
13 篇 华南农业大学
11 篇 郑州牧业高等专科...
10 篇 河北农业大学
10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 河南省动物性食品...
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
9 篇 四川农业大学
9 篇 山东绿都生物科技...
9 篇 吉林农业大学
8 篇 湖北省农业科学院...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 青岛农业大学

作者

34 篇 崔保安
26 篇 金宁一
24 篇 王川庆
22 篇 杨霞
20 篇 陈红英
18 篇 陈陆
16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 王臣
15 篇 刘长明
15 篇 程相朝
14 篇 赵战勤
14 篇 张春杰
14 篇 丁轲
14 篇 王新娟
14 篇 刘春生
14 篇 魏战勇
14 篇 徐耀辉
13 篇 危艳武
13 篇 黄立平

语言

400 篇 中文
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PRRSV经典与高致病性毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立

PRRSV经典与高致病性毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：肖跃强管宇唐娜魏凤杨慧曲光刚沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州 256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州 256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州 256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州 256600

目的: 建立能区分美洲型PRRSV经典与高致病毒株的RT-PCR检测方法。方法:根据GenBank登录的经典与高致病性PRRSVNsp2序列，设计了1对引物，所扩增的序列包含高致病毒株缺失部分，对应DL2000分子标准区分经典与高致病毒株，并对扩增条件... 详细信息

目的: 建立能区分美洲型PRRSV经典与高致病毒株的RT-PCR检测方法。方法:根据GenBank登录的经典与高致病性PRRSVNsp2序列，设计了1对引物，所扩增的序列包含高致病毒株缺失部分，对应DL2000分子标准区分经典与高致病毒株，并对扩增条件进行了优化。结果:应用该方法，从经典与高致病性PRRSV基因组中分别能扩增出573和483bp的特异性片段，病毒基因组混合后能够同时扩增;并可以检测出1.8TCID50/100μl经典毒株及0.6TCID50/100μl高致病毒株的病毒RNA;对CSFV、***、TGEV、RV、PPV、PRV，PCV-2等常见猪病毒病病原的鉴别诊断均为阴性;对分离的8株PRRSV进行检测，3株为经典毒株，5株为高致病毒株;对采集的59份确诊病料进行了检测，21份为经典毒株感染，38份为高致病毒株感染。结论: 本研究建立的RT-PCR诊断方法，具有特异、灵敏、快速等特点，通过DL2000分子标准即可区分PRRSV经典与高致病毒株。

关键词： PRRSV 美洲型 RT-PCR

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猪圆环病毒2型分离株优势基因型分析与检测

猪圆环病毒2型分离株优势基因型分析与检测

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郭抗抗张彦明张红刘华科宁蓬勃王晶钰西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌 712100

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)分离株基因型的变化，时1999-2009年NCBI中收录的556个PCV2分离株全基因序列进行了分析。结果表明，1999-2002年PCV2的优势流行毒株为基因A型(PCV2A);从2003年开始基因B型(PCV2B)逐渐为优势流行毒株，在PCV2... 详细信息

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)分离株基因型的变化，时1999-2009年NCBI中收录的556个PCV2分离株全基因序列进行了分析。结果表明，1999-2002年PCV2的优势流行毒株为基因A型(PCV2A);从2003年开始基因B型(PCV2B)逐渐为优势流行毒株，在PCV2分离株中所占比例，2004年为95.4％，2007-2009年均超过76.0％。2003-2009年国内的PCV2分离株有287个，其中250个为PCV2B，37个为PCV2A，表明PCV2B是国内猪群中主要优势毒株。建立了PCV2A和PCV2B PCR检测方法，对70份临床病料的检测发现，PCV2检出率为34.29％(24/70)，基因型均为PCV2B，无PCV2A的检出，提示PCV2B为检测猪群中的主要优势毒株.

关键词：猪圆环病毒2型基因分析基因型 PCR 病毒检测

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表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郝根喜张华伟杨应立赵俊娜曹齐树李祥敏钱平华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫... 详细信息

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫原性位点，并能在3C蛋白酶的作用下进行切割，加工，形成空衣壳。这种没有感染性核酸的空衣壳具有与全病毒相同的免疫效果，是今后口蹄疫基因工程疫苗发展的方向。本研究以伪狂犬病毒TK-/gE-/LacZ+为载体，构建了表达O型口蹄疫病毒衣壳前体蛋白(P1-2A)，3C蛋白酶基因的重组伪狂犬病毒，为研制口蹄疫基因工程疫苗候选株，最终为有效预防和控制口蹄疫流行奠定基础。

关键词： FMDV P12A3C基因重组病毒

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猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立

猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郭焕成席进涂长春军事医学科学院军事兽医研究所长春 130062

根据猪瘟病毒(CSFV)E2基因序列，设计了41条针对CSFV 3个基因群共10个基因亚群各亚群特异性寡核苷酸探针。利用欧盟猪瘟诊断手册中推荐的CSFVE2基因套式RT-PCR方法，在内套PCR过程中进行Cy3-dCTP掺入荧光标记，制备芯片杂交样品。用标记... 详细信息

根据猪瘟病毒(CSFV)E2基因序列，设计了41条针对CSFV 3个基因群共10个基因亚群各亚群特异性寡核苷酸探针。利用欧盟猪瘟诊断手册中推荐的CSFVE2基因套式RT-PCR方法，在内套PCR过程中进行Cy3-dCTP掺入荧光标记，制备芯片杂交样品。用标记的PCR产物与寡核苷酸探针阵列杂交，置于GenePix 4100A扫描仪中扫描，利用GenePix Pro 6.0软件对杂交图像进行分析。特异性和灵敏度实验显示，芯片方法与本室发表的CSFVReal-time PCR方法的灵敏度相近，芯片探针与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪2型圆环病毒(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)样品无非特异性杂交。以包括1.1、2.1、2.2，2.3亚群的8份CSF阳性样品进行芯片的检测验证，研究结果表明，通过特异性的杂交图谱或杂交信号分析可准确判定样品所属的基因亚群，寡核苷酸芯片的检测结果与测序的分型结果全部符合.本研究为将寡核苷酸芯片技术用于猪瘟病毒的基因分型和分子流行病学研究奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒寡核苷酸芯片基因分型

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副猪嗜血杆菌hhdA基因的克隆与分子特征

副猪嗜血杆菌hhdA基因的克隆与分子特征

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：宋帅李春玲李淼杨冬霞广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生实验室广东广州 510640

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdA的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物，从分离的副猪嗜血杆菌中扩增其目的基因，将扩增产物纯化与pMD18-T载体连接并转化DH5α菌株，用凝胶电泳、PCR和BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切法鉴定为阳性的质粒... 详细信息

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdA的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物，从分离的副猪嗜血杆菌中扩增其目的基因，将扩增产物纯化与pMD18-T载体连接并转化DH5α菌株，用凝胶电泳、PCR和BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切法鉴定为阳性的质粒进行测序和分析。结果表明副猪嗜血杆菌hhdA完整阅读框为1710bp，根据编码序列推导出相应570个氨基酸。与已发表的副猪嗜血杆菌SH0165，HPS59的hhdA基因同源性为99％，与已发表的副猪嗜血杆菌29755的hhdA氨基酸同源性为99％。生物学预测分析结果显示，HPS hhdA是一种混合型结构蛋白，含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲;在此基础上，综合亲水性、可塑性，抗原指数以及表面可能性等参数预测了hhdA蛋白可能的B细胞抗原表位。该结果将为进一步深入研究hhdA在副猪嗜血杆菌感染过程中所扮演的角色奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌 hhdA基因分子特征

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猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定

猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郭龙军陆月华黄立平危艳武刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白，起保护性抗原作用，对其进行抗原表位鉴定十分必要。本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白，起保护性抗原作用，对其进行抗原表位鉴定十分必要。本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体，通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达，先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位，然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。5株单抗中有4株针对同一抗原表位，坐落在Cap蛋白N末端核定位信号区，经多肽扫描证实，核心序列为26RPWLVHPRHRY36：另1株单抗(1D2)仅与重组Cap蛋白产生免疫活性反应，对4个分段截短表达的Cap蛋白无免疫活性反应，鉴于该单抗具有中和病毒活性，针对的可能是构象表位。本研究首次鉴定出位于Cap蛋白核定位信号区的一个抗原表位，为以后Cap蛋白功能及核定位机理的研究奠定基础。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白抗原表位多肽扫描核定位信号

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H1、H3亚型猪流感病毒核酸疫苗构建及鉴定

H1、H3亚型猪流感病毒核酸疫苗构建及鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：谭磊张丹鲁会军田明尧田宇飞金扩世金宁一军事医学科学院军事兽医研究所长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春 130062

构建双亚型(H1/H3)流感病毒血凝素真核表达质粒，并采用HeLa细胞进行表达。通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段，在融合片段间引入(G4S)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分... 详细信息

构建双亚型(H1/H3)流感病毒血凝素真核表达质粒，并采用HeLa细胞进行表达。通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段，在融合片段间引入(G4S)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂质体法转染HeLa细胞，进行RT-PCR与间接免疫荧光检测。结果表明，成功构建了表达双亚型(H1/H3)流感病毒血凝素真核表达载体pVAX1-H3HA-H1HA1，RT-RCR表明重组质粒在转染HeLa细胞后出现了目的基因的转录，IFA证实目的基因在HeLa细胞上可有效表达，该研究为抗H3、H1亚型流感病毒双价核酸疫苗的研究奠定了基础。

关键词：流感真核表达 HeLa细胞血凝素

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河南省猪源链球菌流行菌株的药物敏感性试验

河南省猪源链球菌流行菌株的药物敏感性试验

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王新娟刘春生徐耀辉杨霞陈陆张金来张九州王川庆河南农业大学牧医工程学院河南郑州 450002 郑州牧业高等专科学校河南郑州 450002

应用纸片琼脂扩散法分析了108株猪源链球菌临床流行菌株对13种临床常用药物的耐药性，结果表明：绝大部分菌株对头孢三嗪、氨苄西林、青霉素、万古霉素、新生霉素高度敏感;对阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星中度敏感;对红霉素、四环素、... 详细信息

应用纸片琼脂扩散法分析了108株猪源链球菌临床流行菌株对13种临床常用药物的耐药性，结果表明：绝大部分菌株对头孢三嗪、氨苄西林、青霉素、万古霉素、新生霉素高度敏感;对阿米卡星、氧氟沙星、环丙沙星中度敏感;对红霉素、四环素、林可霉素，克林霉素链霉素耐药。多数菌株表现为多重耐药，三重，四重和十重耐药的猪源链球菌各有6株，各占分离株的5.6％(6/108)：五重和九重耐药的猪源链球菌各有16株，各占分离株的14.8％(16/108);六重耐药的猪源链球菌有17株，占分离株的15.7％(17/108);七重和八重耐药的猪源链球菌各有18株，各占分离株的16.7％(18/108);十一重耐药的猪源链球菌有3株，占分离株的2.7％(3/108);对所有检测药物均敏感的的菌株不存在。

关键词：猪源链球菌药敏试验耐药性

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应用SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR鉴别TTV1、TTV2方法的建立

应用SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR鉴别TTV1、TTV2方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：陈欣符芳王伟李雪松李海忠宋淑萍李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001 哈尔滨师范大学黑龙江哈尔滨 150001

为建立能够检测输血性传播病毒基因1型和基因2型(TTV1和TTV2)的方法，本研究根据TTV1与TTV2基因的非编码区域(UTR)序列差异，设计了2对特异引物，建立了鉴别TTV1、TTV2的SYBR-Gree Ⅰ实时荧光PCR方法。对该方法分别进行了特异性、敏感... 详细信息

为建立能够检测输血性传播病毒基因1型和基因2型(TTV1和TTV2)的方法，本研究根据TTV1与TTV2基因的非编码区域(UTR)序列差异，设计了2对特异引物，建立了鉴别TTV1、TTV2的SYBR-Gree Ⅰ实时荧光PCR方法。对该方法分别进行了特异性、敏感性及重复性的检验。结果表明：本方法以其重组质粒建立的标准曲线相关系数为99％;可以同时鉴别***2，而且在检测PCV2、PRRSV阳性样品时，均呈阴性，表明该方法具有良好的特异性;应用该方法的最低检出量为10拷贝数/μL;重复试验结果显示，TTV1组内、组间变异系数分别为0.14％、0.74％;TTV2组内、组间变异系数均为0.13％。应用该方法检测现地采集的189份样品，其中，TTV1阳性率32.3％，TTV2阳性率6.3％，TTV1、TTV2混合感染的阳性率为28.6％。TTV检测方法的建立为猪群TTV的流行病学调查提供了有效的手段。

关键词：输血性传播病毒基因实时荧光PCR鉴别序列分析

来源：评论

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利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建基因缺失天坛株痘苗病毒载体

利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建基因缺失天坛株痘苗...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：阚式绂李霄王宇航王卓越齐延新贾鹏杜寿文金宁一军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春 130062 吉林大学长春 130062 军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春 130062 深圳出入境检验检疫动植物检验检疫技术中心广东深圳 518001

研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源重组获得重组病毒，并利用Brdu和... 详细信息

研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源重组获得重组病毒，并利用Brdu和荧光标记对其进行筛选。所获得重组病毒与表达Cre酶的重组表达质粒pvAX-Cre共转(感)染BHK细胞，敲除外源荧光标记基因(EGFP)，从而获得无外源筛选标记的天坛株痘苗病毒基因缺失载体，并通过PCR方法对所构建基因缺失载体鉴定。实验结果表明，利用Cre-loxp系统去除重组病毒中筛选基因具有潜在研究价值，为痘苗病毒载体的研究提供了一条解决问题的新途径。

关键词： Cre-loxp系统双筛选标记天坛株痘苗病毒 TK基因

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