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403 篇 会议
1 篇 期刊文献

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学科分类号

403 篇 农学
- 398 篇 兽医学
- 10 篇 畜牧学
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3 篇 理学
- 3 篇 生物学
2 篇 工学
- 2 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
2 篇 医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...

主题

28 篇 猪圆环病毒2型
22 篇 猪瘟病毒
19 篇 副猪嗜血杆菌
18 篇 基因克隆
18 篇 原核表达
18 篇 prrsv
17 篇 克隆
17 篇 猪
15 篇 猪瘟
14 篇 序列分析
12 篇 单克隆抗体
11 篇 猪病
11 篇 elisa
11 篇 多重pcr
10 篇 混合感染
10 篇 分离鉴定
10 篇 猪链球菌
9 篇 口蹄疫
9 篇 pcr
9 篇 猪繁殖与呼吸综合...

机构

68 篇 河南农业大学
33 篇 军事医学科学院军...
24 篇 河南省动物疫病预...
21 篇 吉林大学
17 篇 河南科技大学
15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
14 篇 南京农业大学
13 篇 华南农业大学
11 篇 郑州牧业高等专科...
10 篇 河北农业大学
10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 河南省动物性食品...
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
9 篇 四川农业大学
9 篇 山东绿都生物科技...
9 篇 吉林农业大学
8 篇 湖北省农业科学院...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 青岛农业大学

作者

34 篇 崔保安
26 篇 金宁一
24 篇 王川庆
22 篇 杨霞
20 篇 陈红英
18 篇 陈陆
16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 王臣
15 篇 刘长明
15 篇 程相朝
14 篇 赵战勤
14 篇 张春杰
14 篇 丁轲
14 篇 王新娟
14 篇 刘春生
14 篇 魏战勇
14 篇 徐耀辉
13 篇 危艳武
13 篇 黄立平

语言

400 篇 中文
4 篇 英文

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排序：

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白翻译起始位点的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白翻译起始位点的研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：谭菲菲张荣韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病防治研究室上海 200241

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Poreine Reproductive andRespiratory Syndrome Virus，PRRSV)核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein，N蛋白)的表达是通过非连续性转录合成的亚基因组(subgenomic，sg)mRNA翻译而来。但位于亚基因组前导序列中的2个AUG均不能作为N蛋白翻译的起始位点，其翻译使用的是N开放阅读框(ORF)中的首个AUG，因此，本研究旨在感染性克隆的基础上研究N蛋白的翻译起始位点。我们实验室已有在ORF6和ORF7之间插入酶切位点的感染性克隆pORF673，该突变克隆中含有3个潜在的AUG，分别构建了pORF673中N蛋白的其中2个潜在的起始密码子AUG突变的全长克隆，转染MARC-145细胞。这些突变体都能够拯救出子代病毒，其中2个突变病毒的N蛋白的前11个氨基酸完全改变，这些突变病毒都能够在MARC-145细胞上稳定传代。经RT-PCR分析子代病毒的N基因序列及其亚基因组序列，结果表明N蛋白的翻译偏向于使用其前导序列后的第1个潜在的AUG。如果后者移码，则病毒可以自身修复，这是首次发现病毒有矫正ORF的功能。本研究为N蛋白N端插入标签作为标记疫苗以及进一步研究N蛋白结构与功能奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白起始位点

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实时定量PCR对猪细小病毒自然感染猪体内病毒分布情况的探讨

实时定量PCR对猪细小病毒自然感染猪体内病毒分布情况的探讨

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：李金磊魏战勇韩志涛耿静微陈红英崔保安河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州 450002 河南农业大学牧医工程学院河南郑州 450002

目的：探讨猪自然感染猪细小病毒(Porcine Parvovirus，PPV)后病毒在体内的分布情况，分析病毒对猪器官组织的嗜性，揭示猪细小病毒致病机制。方法：利用已建立的猪细小病毒SYBR Green I实时定量PCR检测方法，定量检测自然感染仔猪、母... 详细信息

目的：探讨猪自然感染猪细小病毒(Porcine Parvovirus，PPV)后病毒在体内的分布情况，分析病毒对猪器官组织的嗜性，揭示猪细小病毒致病机制。方法：利用已建立的猪细小病毒SYBR Green I实时定量PCR检测方法，定量检测自然感染仔猪、母猪和同时混合感染有猪圆环病毒的仔猪器官组织中PPV DNA的相对含量，分析猪细小病毒的组织嗜性及其与圆环病毒混合感染时的相互作用机制。结果：在多种器官组织中均可检测到PPV，在感染仔猪的肾脏、脾脏、髂下淋巴结中病毒含量较高(为1.39×105～1.8l×106μL-1)，在感染母猪的肾脏、脾脏、肺脏、子宫内膜中病毒含量为4.56×105～5.82×106μL-1，混合感染PPV和猪圆环病毒2型(PCV2)仔猪肺脏中的PPV DNA的相对含量增加显著，从2.69×104μL-1增加到5.04×105μL-1。结论： PPV对猪肾脏、脾脏、淋巴结、妊娠母猪子宫的嗜性最强，对肝脏的嗜性较弱。PCV2的混合感染可促进PPV在肺脏的复制增殖，增强了PPV对感染器官组织的亲嗜能力。

关键词：猪细小病毒猪圆环病毒2型实时定量PCR 体内分布规律

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七株猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其序列分析

七株猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：吕素芳王文秀郭广君魏凤唐娜管宇沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州 256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州 256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州 256600

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计一对引物，通过PCR方法从采自不同地区的七份疑似断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出PCV2的ORF2基因。将获得的ORF2基因片段分别克隆入pMD18-T载体，通过筛... 详细信息

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计一对引物，通过PCR方法从采自不同地区的七份疑似断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出PCV2的ORF2基因。将获得的ORF2基因片段分别克隆入pMD18-T载体，通过筛选获得重组质粒，分别命名为pMD-PCV2-HN01、pMD-PCV2-DY01、pMD-PCV2-HM01、pMD-PCV2-SDqd01、pMD-PCV2-SDqd02、pMD—PCV2-SDqd03、pMD-PCV2-PD01，并进行测序及序列分析。结果表明：HN01株ORF2基因全长为705bp，另六株ORF2基因全长均为702bp。七株分离株的ORF2基因核苷酸序列同源性较高，为94.0％～99.9％，氨基酸序列同源性达93.6％以上。七株与GenBank中登录的德国株和台湾株的核苷酸序列同源性较低，分别为91.7％～93.2％和89.0％～90.5％，而与丹麦、法国、中国株的核苷酸序列同源性较高，达94.0％以上，氨基酸序列同源性均达89.3％以上.

关键词：猪2型圆环病毒 ORF2基因基因克隆序列分析

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：郑海红孙志朱兴全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室华南农业大学兽医学院

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body结合位置,结果发现PRRSV mRNA分子的转录可使用经典(canonical)及非经典(noncanonical)TRS-B进行。通过对PRRSV感染性克隆pAPRRS进行定点基因突变及其所致拯救病毒的鉴定,以此确定TRS-L和TRS-B突变对亚基因组转录及病毒感染性的影响。结果表明:(1)同时突变TRS-L最后两个CC的全长突变体pLeaderD对MARC-145细胞无感染性,且未产生sgmRNA7转录本;而只突变最后一个C的pLeaderR能拯救出突变病毒,但突变位点在突变病毒系列传代中发生回复突变,由此证明TRS-L3’的一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有一定修复功能(。2)突变TRS1233’最后两个碱基的pM7Da或突变TRS93’最后两个碱基的pM7Db均能拯救出病毒,而共同含有TRS9和TRS1233’最后两个碱基突变的pM7DabR不能拯救出病毒,对拯救的突变病毒进行鉴定发现,TRS123突变的拯救病毒在一系列传代中突变碱基回复,而TRS9突变的拯救病毒传代过程中稳定遗传;突变体pM7S3(含有TRS123的三个碱基突变)和pM7Db虽能拯救出活病毒,但突变都使相应的sgmRNA7转录量至零,且vM7S3滴度偏低。由此证明了TRS9和TRS123都可单独承担PRRSVsgmRNA7的转录调控及其3’一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有修复功能;PRRSV的N蛋白主要来源于sgmRNA7.1的翻译。(3)所有突变病毒的亚基因组中leader–body结合位点碱基均来源于TRS-B,为负链RNA不连续转录模型理论提供直接证据。

关键词： TRS 亚基因组猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 PRRSV 感染性克隆功能解析

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应用猪瘟抗原/血清ELISA测定猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量

应用猪瘟抗原/血清ELISA测定猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：唐红慧王金虎周勇歧冯志新张道华刘茂军邵国青甘源刘冬阳刘冬霞刘大伟江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014 扬州大学兽医学院江苏扬州 225009 南京天邦生物科技有限公司江苏南京 211102 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheckCo.)，对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定，结果24份H... 详细信息

简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheckCo.)，对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定，结果24份HCLV半成品细胞苗95.83％与兔体定型热反应结果相符，检测敏感性可达20头份/瓶(或109个病毒拷贝教/瓶)。但该方法无法区分猪瘟病毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。试验结果证明，IDEXX猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒能够稳定、快速、简单地用于HCLV细胞苗的半成品与成品的病毒含量测定，为疫苗生产的质量控制提供了一种可靠和稳定的方法。

关键词： HCLV ELISA HCLV半成品细胞苗 HCLV成品疫苗

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猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：张志远徐红运刘肖萍卢晓艳段二珍刘玉松夏平安崔保安河南农业大学牧医工程学院，郑州，450002

目的: 克隆猪Fc受体γ亚单位基因，构建原核表达载体，诱导表达重组蛋白，制备多克隆抗体。方法:研究中应用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞总RNA中克隆出猪Fc γ亚单位的cDNA序列，测序结果表明得到了与预期相符的长为299bp基因序列片段并将... 详细信息

目的: 克隆猪Fc受体γ亚单位基因，构建原核表达载体，诱导表达重组蛋白，制备多克隆抗体。方法:研究中应用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞总RNA中克隆出猪Fc γ亚单位的cDNA序列，测序结果表明得到了与预期相符的长为299bp基因序列片段并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中，构建重组表达质粒pET-FcRγ，成功表达了分子量大小约为29KDa的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白FcRγ-His免疫小白鼠，制备鼠抗FcRγ-His重组蛋白的多克隆抗体，用间接ELISA和Westem blotting检测获得的多克隆抗体，ELISA测定多克隆抗体的效价为1：8000。Westem blotting。结果：显示制备的多克隆抗体可以与重组蛋白特异性结合，表明重组蛋白具有较好的免疫原性结果成功构建猪Fc受体γ亚单位原核表达载体，纯化到融合蛋白FcRγ-His，用纯化的融合蛋白免疫小鼠制备了多克隆抗体，Western blotting、ELISA法证实多克隆抗体制备成功。结论: 成功克隆猪Fc受体γ亚单位基因，成功获得了猪Fc受体γ亚单位表达受体，为其结构与功能的进一步研究奠定了基础。

关键词：猪FcRγ 基因克隆原核表达多克隆抗体

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猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建

猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王淑娟崔保安陈红英刘金朋王亚丹朱前磊王子馨河南农业大学牧医工程学院，河南郑州 450002

目的: 为研究猪IL-2生物学功能及其应用前景。方法: 本实验采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2)基因，RT-PCR产物进行T-A克隆、测序，获得了猪IL-2基因序列。将BamH I酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamH I酶切并... 详细信息

目的: 为研究猪IL-2生物学功能及其应用前景。方法: 本实验采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2)基因，RT-PCR产物进行T-A克隆、测序，获得了猪IL-2基因序列。将BamH I酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamH I酶切并去磷酸化的pSY538载体上，通过PCR、酶切和测序鉴定，筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2。Not I酶切pSY538/pIL-2后，得到含有双启动子LP2和EP2的猪IL-2基因片段，将其亚克隆到含有LacZ基因的pSY681载体上，筛选正向插入的重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2。结果: 测序结果表明，克隆的豫南黑猪IL-2基因为482bp，包含1个完整读码框(465bp)，与GenBank中其它5条猪IL-2基因核苷酸同源性为99.9％。重组质粒pSY681/pIL-2经酶切、测序鉴定，证实含有目的片段，且连接、构建正确。结论:本研究成功构建了重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2，为猪IL-2生物学功能的进一步研究和开发奠定基础。

关键词：猪白细胞介素-2 基因克隆重组禽痘病毒

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4株猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析

4株猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王亚丹崔保安陈红英王淑娟刘金朋朱前磊王子馨河南农业大学牧医工程学院河南郑州 450002

将从郑州、南阳、武陟、临颍等地采集疑似PCV2感染的病料研磨、过滤除菌后，接种无PCV 1和PCV 2污染的PK-15细胞，盲传6代后，分离出4株PCV2(***、ZZ、WZ)。根据已发表的猪圆环病毒2型基因序列设计1对PCR引物.用PCR朗读显示对应的拉丁... 详细信息

将从郑州、南阳、武陟、临颍等地采集疑似PCV2感染的病料研磨、过滤除菌后，接种无PCV 1和PCV 2污染的PK-15细胞，盲传6代后，分离出4株PCV2(***、ZZ、WZ)。根据已发表的猪圆环病毒2型基因序列设计1对PCR引物.用PCR朗读显示对应的拉丁字符的拼音字典.查看字典详细内容方法从4株PCV2河南分离株中扩增出相应的全基因组DNA片段。将扩增产物连接到pGEM-T Easy上并转化到大肠杆菌DH5α中，得到阳性克隆。应用序列分析软件DNAstar，对所测PCV-2序列与GenBank中的国内外PCV2毒株进行同源性比较，并绘制系统进化发生树。结果表明，4个PCV2河南株全基因组皆为1767 bp，4个毒株间全基因序列核苷酸同源性在95.7％-99.7％之间。NY PCV 2分离株同周口分离株存在较近的亲缘关系，WZ PCV 2分离株同ZZPCV 2分离株存在较近的亲缘关系，NY与LY的亲缘关系也比较近。

关键词：猪圆环病毒2型全基因序列克隆序列分析

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大肠杆菌O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所／农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014 南京农业大学动物医学院南京 210095 江苏省农业科学院兽医研究所／农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG，制备金标探针，喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线，组装成鼠血清O157∶H7抗体胶体金免疫层析检... 详细信息

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG，制备金标探针，喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线，组装成鼠血清O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果：该试纸条仅与O157∶H7阳性鼠血清发生特异性反应;用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157∶H7免疫鼠血清，抗体效价分别为106和105，两者的敏感度相当。该试纸条操作简便，10 min可出结果，适用于调查与追溯鼠O157∶H7感染状况时的现场检测。

关键词：肠出血性大肠杆菌 O157∶H7 胶体金免疫层析试纸条动物模型

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猪链球菌9型荚膜多糖cps9G基因的克隆及原核表达

猪链球菌9型荚膜多糖cps9G基因的克隆及原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：刘春生王川庆徐耀辉王新娟陈陆杨霞刘扬科李昆明李乔晶吕文强河南农业大学牧医工程学院，河南郑州，450002 郑州牧业高等专科学校，河南郑州，450002

目的: 克隆表达猪链球菌9型英膜多糖部分抗原表位。方法: 设计1对引物，采用PCR方法以猪链球菌9型河南分离株PY-2的基因组DNA为模板扩增出cps9G全基因序列。用限制性核酸内切酶BamHI、Xhol进行双酶切后，将其定向克隆到pET32a(+)中，构... 详细信息

目的: 克隆表达猪链球菌9型英膜多糖部分抗原表位。方法: 设计1对引物，采用PCR方法以猪链球菌9型河南分离株PY-2的基因组DNA为模板扩增出cps9G全基因序列。用限制性核酸内切酶BamHI、Xhol进行双酶切后，将其定向克隆到pET32a(+)中，构建重组表达质粒pET32a-cps9G，并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达，并优化表达条件。结果: 经1.2mmol/L IPTG诱导4h后SDS-PAGE分析表明，重组菌株表达出了约50.7KDa的融合蛋白条带，与预期一致。Westernblotting分析表明，该融合蛋白具有特异的生物学活性。结论: 这为以后建立快速简便特异的免疫学检测方法及制备单克隆抗体提供了较好的抗原，同时为研制猪链球菌亚单位疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。

关键词：猪链球菌血清9型 cps9G基因基因克隆原核表达

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