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机构

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59 篇 华南农业大学
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36 篇 山东农业大学
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28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
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19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
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作者

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34 篇 梁家幸
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32 篇 蒋玉雯
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32 篇 姚瑞英
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29 篇 鲁会军
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24 篇 黄伟坚
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22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
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20 篇 杨霞
20 篇 母连志

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不同来源大肠杆菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)调查研究

不同来源大肠杆菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)调查研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张云飞王红宁张安云高荣王霆邹立扣曾博四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室” 四川农业大学动物医学院雅安 625014

本试验旨在研究异源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)的耐药表型和质柱介导FQs耐药基因(PMQR)的特征。2006-2008年从四川、河南等地的规模化猪场、医院及野生动物园分离的141异源大肠杆菌,采用K-B纸片法检测其对奈啶酸(... 详细信息

本试验旨在研究异源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)的耐药表型和质柱介导FQs耐药基因(PMQR)的特征。2006-2008年从四川、河南等地的规模化猪场、医院及野生动物园分离的141异源大肠杆菌,采用K-B纸片法检测其对奈啶酸(NA)等六种FQs的耐药表型,并运用PCR方法检测PMQR基因:qnrA、qnrB、qnrS、aac(6′)-Ib-cr、qepA和qnrD.结果表明:试验菌株对各药物的耐药率分别为:萘啶酸(58.93%)、诺氟沙星(56.25%)、氧氟沙星(54.46%)、恩诺沙星(53.57%)、左旋氧氟沙星(51.79%)和环丙沙星(51.77%).其中,猪源及野生动物源菌株以对萘啶酸耐药为主,耐药率分别为72.22%和12.50%;人源菌株以对诺氟沙星耐药为主,耐药率为74.29%。PCR检测结果表明,PMQR基因的检出率由高到低依次为aac(6′)-Ib-cr(49.65%)、qnrD(23.40%)、qnrS(22.70%)、qnrB(21.28%)、qnrA(14.89%)及qepA(8.51%).猪源菌株中aac(6′)-Ib-cr和qnrD检出率高,分别为69.57%和43.47%.aac(6′)-Ib-cr和qnrS在人源菌株中分布较普遍,检出率分别为54.29%和37.14%.qnrA,qnrB和qepA在野生动物源菌株中均有一定检出率,分别为4.17%、8.33%和4.17%。本研究首次对不同来源大肠杆菌中六种PMQR基因进行调查研究,为大肠杆菌耐药性的防控提供参考依据.

关键词：大肠杆菌 FQs PMQR 耐药基因耐药表型

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规模化猪场猪繁殖呼吸综合症与细菌混合感染的诊断防治

规模化猪场猪繁殖呼吸综合症与细菌混合感染的诊断防治

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：周英顺王红宁杨鑫曾博邹立扣张安云徐昌文管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”成都 6100164

某规模化猪场养猪5000余头2009年4-5月,爆发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,其中发病率为40-50％,死亡率20％。对采集死猪肺脏病料、血清6份用RT-PCR方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因进行扩增,结果表明3份为NSP2基因阳... 详细信息

某规模化猪场养猪5000余头2009年4-5月,爆发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,其中发病率为40-50％,死亡率20％。对采集死猪肺脏病料、血清6份用RT-PCR方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因进行扩增,结果表明3份为NSP2基因阳性,将其编号为SNC01,SNC02,SNC03。对SNC01进行测序,结果与genbank中登录得PRRSV毒株进行比较,发现在2930-3020共有90个碱基连续缺失,在3316,3395,3425有分别有6个,3个,6个碱.基的缺失。对采集的病死猪肺脏、淋巴、肾脏、心脏等病料分离了2株细菌编号分别为SNC0901和SNC0902对所分离菌进行致病性实验,发现均能够使被攻毒小鼠死亡。应用16SrDNA方法鉴定所分离菌分别为副猪嗜血杆菌和大肠杆菌,对所分离细菌进行17种抗生素的药敏实验,结果表明细菌对头孢噻呋,头孢噻吩,替卡西林,棒酸,头孢氨苄,氨苄西林,舒巴坦敏感,对替卡西林,克林霉素,阿莫西林/棒酸中度敏感,对庆大霉素,林可霉素,丁胺卡那霉素,红霉素,阿莫西林,氨苄西林,土霉素耐药。该猪场为高致病性蓝耳病病毒混合感染副猪嗜血杆菌、大肠杆菌从而导致猪大量死亡。根据诊断结果采取了一系列防治措施,得到了防控经验。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征副猪嗜血杆菌大肠杆菌混合感染防治对策

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猪轮状病毒广东分离株VP6基因的克隆及序列分析

猪轮状病毒广东分离株VP6基因的克隆及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：田小艳邓雨修孙华苏润环王东东招丽婵宋延华广东省温氏集团研究院

参考GenBank中发表的猪轮状病毒PRV OSU毒株VP6基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,分别以本实验室分离保存的6株RV反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1.4 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定.测序结... 详细信息

参考GenBank中发表的猪轮状病毒PRV OSU毒株VP6基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,分别以本实验室分离保存的6株RV反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1.4 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定.测序结果表明:VP6基因全长1320bp,含有一个1194bp的开放阅读框,编码397个氨基酸。序列分析表明,6株GD分离毒株与已发表的10株国内外毒株序列进行核苷酸同源性在80.1%—95.6%之间,其中与中国JL94株的同源性最高为95.6%,与日本代表毒株R-13株的同源性最低为80.1%;氨基酸的同源性在90.7%—99.2%之间,其中与中国JL94株的同源性最高为99.2%,与R-13株的同源性最低为90.7%.6株GDRV分离株间的VP6基因核苷酸同源性为89.0%—100.0%之间,氨基酸同源性在97.5%—99.7%之间.通过核苷酸和氨基酸序列分析比较可知,轮状病毒VP6基因核苷酸同源性差异较大,但氨基酸同源性却很高,说明VP6基因存在较为普遍碱基的突变、插入和缺失现象,但大多数都为无意义突变。核苷酸系统发育进化树结果表明,GD1、GD4、GD5和GD6毒株与轮状病毒JL94毒株亲缘关系较近,GD2和GD3与美国代表毒株BRV033毒株亲缘关系较近,6个毒株同为一个进化群,且同属于A群轮状病毒中的第Ⅰ亚型。

关键词：氨基酸同源性 VP6 分离株克隆及序列分析猪轮状病毒

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不同来源大肠杆菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)调查研究

不同来源大肠杆菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)调查研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张云飞王红宁张安云高荣王霆邹立扣曾博四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”四川成都望江路29号 610064 四川农业大学动物医学院雅安 625014 四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”四川成都望江路29号 610064

本试验旨在研究异源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones，FQs)的耐药表型和质粒介导FQs耐药基因(PMQR)的特征。2006-2008年从四川、河南等地的规模化猪场、医院及野生动物园分离的141异源大肠杆菌，采用K-B纸片法检测其对奈啶酸... 详细信息

本试验旨在研究异源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones，FQs)的耐药表型和质粒介导FQs耐药基因(PMQR)的特征。2006-2008年从四川、河南等地的规模化猪场、医院及野生动物园分离的141异源大肠杆菌，采用K-B纸片法检测其对奈啶酸(NA)等六种FQs的耐药表型，并运用PCR方法检测PMQR基因：qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ib-cr、qepA和qnrD。结果表明：试验菌株对各药物的耐药率分别为：萘啶酸(58.93％)、诺氟沙星(56.25％)、氧氟沙星(54.46％)、恩诺沙星(53.57％)、左旋氧氟沙星(51.79％)和环丙沙星(51.77％)。其中，猪源及野生动物源菌株以对萘啶酸耐药为主，耐药率分别为72.22％和12.50％;人源菌株以对诺氟沙星耐药为主，耐药率为74.29％。PCR检测结果表明，PMQR基因的检出率由高到低依次为aac(6')-Ib-cr(49.65％)、qnrD(23.40％)、qnrS(22.70％)、qnrB(21.28％)、qrtrA(14.89％)及qepA(8.51％)。猪源菌株中aac(6’)-Ib-cr和qnrD检出率高，分别为69.57％和43.47％。aac(6')-Ib-cr和qnrS在人源菌株中分布较普遍，检出率分别为54.29％和37.14％。qnrA、qnrB和qepA在野生动物源菌株中均有一定检出率，分别为4.17％、8.33％和4.17％。本研究首次对不同来源大肠杆菌中六种PMQR基因进行调查研究，为大肠杆菌耐药性的防控提供参考依据。

关键词：大肠杆菌耐药基因耐药表型氟喹诺酮类药物 PCR检测

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小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王暖成鲁承杜鑫王中光杜秋明延边大学农学院

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性。高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害.该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术... 详细信息

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性。高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害.该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术。病原学检查和血清学方法均存在不够敏感、检测所需时间长等不足,不能满足临床快速诊断小鹅瘟的需要.而PCR技术具有敏感性高、特异性强等优点,能够较好满足临床快速准确诊断疾病的需要.本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列,针对VP3基因保守区,设计了两对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物,对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,建立了小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法,扩增出了与预期片段大小相符的长度为406bp的基因片段.特异性试验表明,只有小鹅瘟病毒模板能扩增出特异性条带.敏感性试验表明,当病料中小鹅瘟病毒核酸含量为0.02175fg/μL时,仍可以检测到,出现清晰的特异性片段.应用小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法对延边地区疑似小鹅瘟病死雏鹅80只进行了检测,有典型病理变化的20只病死雏鹅,阳性检出率均为100%(20/20),无典型病理变化的60只病死雏鹅,阳性检出率为93.3%(56/60).由此可见。本实验建立的小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法具有极高的敏感性和特异性且检出率极高,可作为一种有效的临床诊断方法。

关键词：小鹅瘟 GenBank 小鹅瘟病毒 PCR 初步应用

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单抗介导的HI试验对不同H9N2亚型禽流感病毒HA表面抗原变异的研究

单抗介导的HI试验对不同H9N2亚型禽流感病毒HA表面抗原变异的研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王泽霖刘守川陈少渠陈恩林河南农业大学禽病研究所郑州 450002

利用本实验已建立的4株抗H9亚型AⅣ血凝素单克隆抗体(2A4、F6、H、B4)与1998～2005年间河南农大禽病研究所分离到的25株H9N2亚型毒株进行HI反应。结果显示，25个毒株可以分为二类，第一类23个毒株与H6单抗的HI结果为17～18 log2;与F6单... 详细信息

利用本实验已建立的4株抗H9亚型AⅣ血凝素单克隆抗体(2A4、F6、H、B4)与1998～2005年间河南农大禽病研究所分离到的25株H9N2亚型毒株进行HI反应。结果显示，25个毒株可以分为二类，第一类23个毒株与H6单抗的HI结果为17～18 log2;与F6单抗的HI结果为15～18log2;与A4单抗的结果为16～18 log2;与B4单抗的HI结果在7-11 log2;另一类2个毒株即 A/鸡/河南/A3/98(H9N2)(3＃株)和A/鸡/河南/C4/O2(H9N2)(18＃株)与所有4株单抗都不发生反应。说明在H9N2亚型AⅣ表面抗原上的具有血凝活性的抗体结合位点不止一个，4株单抗可能均作用于血凝素表面同一抗原位点。3＃和18＃毒株的致病性较其它毒株强，可能与该位点的变异或缺失有关。4株单抗分别和5株H9N2做病毒中和试验，发现均无中和活性，说明表面抗原上的血凝活性位点并非就是中和活性位点。本试验的研究结果进一步证实了H9N2亚型AIV血凝素抗原的变异特性和可用HA单克隆抗体来鉴别某些变异毒株，为H9N2亚型AIV血凝素表面抗原结构与功能及变异规律的深入研究以及我国的禽流感H9亚型的疫苗毒株的选择提供了依据。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 HA蛋白抗原变异单克隆抗体

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小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王暖成鲁承杜鑫王中光杜秋明延边大学农学院吉林龙井 133400

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性、高度接触性和败血性传染病，给养鹅业造成了严重危害。该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断，但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技... 详细信息

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性、高度接触性和败血性传染病，给养鹅业造成了严重危害。该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断，但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术。病原学检查和血清学方法均存在不够敏感、检测所需时间长等不足，不能满足临床快速诊断小鹅瘟的需要。而PCR技术具有敏感性高、特异性强等优点，能够较好满足临床快速准确诊断疾病的需要。本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列，针对VP3基因保守区，设计了两对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物，对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增，建立了小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法，扩增出了与预期片段大小相符的长度为406bp的基因片段。特异性试验表明，只有小鹅瘟病毒模板能扩增出特异性条带。敏感性试验表明，当病料中小鹅瘟病毒核酸含量为0.02175fg/μL时，仍可以检测到，出现清晰的特异性片段。应用小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法对延边地区疑似小鹅瘟病死雏鹅80只进行了检测，有典型病理变化的20只病死雏鹅，阳性检出率均为100％(20/20)，无典型病理变化的60只病死雏鹅，阳性检出率为93.3％(56/60)，由此可见，本实验建立的小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法具有极高的敏感性和特异性且检出率极高，可作为一种有效的临床诊断方法。

关键词：小鹅瘟 PCR检测 VP3基因临床诊断

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不同细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD调查及原核表达研究

不同细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD调查及原核表达研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王霆王红宁张安云高荣张云飞邹立扣四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”四川成都望江路29号 610064 四川农业大学动物医学院雅安 625014 四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”四川成都望江路29号 610064

本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种，对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况，并对qnrD基因进行克隆，原核表达。2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株)，沙门氏菌(31... 详细信息

本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种，对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况，并对qnrD基因进行克隆，原核表达。2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株)，沙门氏菌(31株)，肺炎克雷伯氏菌(46株)，肠球菌(50株)，奇异变形杆菌(20株)，共288株，采用微量稀释法测定试验菌株对环丙沙星(CIP)等四种喹诺酮类药物的MIC值;运用PCR方法调查qnrD基因的流行、分布情况;将qnrD基因定向克隆到表达载体pET-30b(+)中，转化大肠杆菌感受态BL21(DE3)，经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测qnrD基因的表达。试验菌株的总耐药率分别为：沙门氏菌(88.41％)，奇异变形杆菌(82.65％)，肺炎克雷伯氏菌(78.36％)，肠球菌(72.81％)，大肠杆菌(60.25％);qnrD基因的检出率分别为沙门氏菌(64.51％)，肠球菌(38.00％)，大肠杆菌(23.40％)，肺炎克雷伯氏菌(6.52％)，奇异变形杆菌(0％);SDS-PAGE分析表明，重组载体pET-qnrD可成功的在大肠杆菌中表达qnrD蛋白。本研究首次报道了qnrD基因在不同细菌中的流行情况，首次在肠球菌，大肠杆菌，肺炎克雷伯氏菌中发现了qnrD基因，对qnrD基因进行原核表达为后续试验提供了基础材料。

关键词：喹诺酮 qnrD基因耐药表型原核表达细菌菌种

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云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析

云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张泉鹏宋建领邱薇李刚山范泉水李作生鲍晓伟李乙江张富强郑钧丰王意银张应国张文东成都军区疾病预防控制中心云南昆明 650032 吉林大学动物科技学院吉林长春 130062 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明 650224 成都军区疾病预防控制中心云南昆明 650032 成都军区疾病预防控制中心云南昆明 650032 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明 650201 云南省动物疾病预防控制中心云南昆明 650051

2006年6月至2007年10月从云南省十六地州随机采集的各种家禽、家猪的6033份样品，应用RT-PCR进行检测，选择具有代表性的阳性样品，克隆NA全基因并进行基因序列分析和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明，云南省2006-2007 H9N2亚型... 详细信息

2006年6月至2007年10月从云南省十六地州随机采集的各种家禽、家猪的6033份样品，应用RT-PCR进行检测，选择具有代表性的阳性样品，克隆NA全基因并进行基因序列分析和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明，云南省2006-2007 H9N2亚型禽流感病毒在全省16个地州均有流行，且检测的鸡、鸭、鹅和猪均有感染;分离的19个毒株中的13个鸡源和1个鹅源毒珠的NA全基因长1407bp,编码469个氨基酸，同源性为97-100％，是目前云南省流行的优势亚群;3个鸭源毒株、1个鹅源和1个猪源毒株NA基因长1398 bp，编码466个氨基酸，5个非鸡源毒株的NA基因的同源性为99％，构成云南目前流行的另一分支，推导氨基酸第62-64位3个氨基酸的缺失是与优势分支的特征性区别;两个分支间NA基因同源性为90％，与国内外其它毒株比较神经氨酸酶基因序列具有多态性。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 NA基因糖基化位点基因多态性序列分析

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检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：黄立平刘长明危艳武陆月华郭龙军温士刚武嘉男吴洪丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

采用杂交瘤细胞融合技术,获得了一株具有分泌抗猪圆环病毒2型(PCV2)中和活性的单克隆抗体,利用该株单抗建立了一种阻断ELISA方法。用于检测该病毒感染猪血清中和抗体.该方法先用病毒多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,然后与待... 详细信息

采用杂交瘤细胞融合技术,获得了一株具有分泌抗猪圆环病毒2型(PCV2)中和活性的单克隆抗体,利用该株单抗建立了一种阻断ELISA方法。用于检测该病毒感染猪血清中和抗体.该方法先用病毒多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,然后与待检猪血清抗体及辣根过氧化物酶标记的单抗进行反应,通过测定酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与常规免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为96.0%;该方法的敏感性为97.9%,特异性为92.4%,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应.用阻断ELISA和血清中和试验检测PCV2血清中和抗体结果表明,两种方法呈显著正相关性(r=0.9970),其敏感性优于血清中和试验。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示,疫苗接种2 w开始能够检测到病毒中和抗体,4w后血清抗体阳转率达100%;此外,对来自东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测,抗体阳性检出率为73.4%,表明我国养猪场中PCV2感染率较高,该病毒危害严重.本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点,可为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段.

关键词：猪圆环病毒2型中和抗体检测单克隆抗体阻断ELISA

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