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1,216 篇 农学
- 1,074 篇 兽医学
- 120 篇 畜牧学
- 22 篇 作物学
- 7 篇 水产
- 5 篇 农业资源与环境
- 3 篇 林学
- 1 篇 植物保护
- 1 篇 草学
62 篇 医学
- 35 篇 药学(可授医学、理...
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- 8 篇 临床医学
- 7 篇 公共卫生与预防医...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 中西医结合
44 篇 理学
- 40 篇 生物学
- 3 篇 生态学
- 1 篇 物理学
43 篇 工学
- 23 篇 生物工程
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- 5 篇 化学工程与技术
- 5 篇 农业工程
- 3 篇 食品科学与工程（可...
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- 1 篇 生物医学工程（可授...
3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
1 篇 经济学
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主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
17 篇 混合感染
17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,247 篇 中文
53 篇 英文

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猪链球菌2型多重PCR诊断方法的建立及应用

猪链球菌2型多重PCR诊断方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：盛敏吴志明闫若潜赵明军钱勇张盼河南省动物疫病预防控制中心河南郑州 450008

根据GenBank已登录的SS2型特异性CPS2J基因及毒力因子基因MRP、EF设计引物，建立了SS2重PCR检测方法，并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省34例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测，并与常规细菌分离鉴... 详细信息

根据GenBank已登录的SS2型特异性CPS2J基因及毒力因子基因MRP、EF设计引物，建立了SS2重PCR检测方法，并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省34例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测，并与常规细菌分离鉴定方法进行了对比。结果表明成功建立了2型猪链球菌多重PCR检测方法，该方法的检测灵敏度可达100个细菌，特异性高且重复性良好;利用该方法对34份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明，其中有2份样品为2型猪链球菌阳性，与细菌分离鉴定阳性符合率为100％。本研究成功建立了2型猪链球菌多重PCR检测方法，可用于2型猪链球菌的临床快速诊断。

关键词：猪链球菌2型多重PCR检测 CPS2J基因毒力因子临床诊断

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猪传染性胃肠炎病毒S1基因重组乳酸菌的构建与表达研究

猪传染性胃肠炎病毒S1基因重组乳酸菌的构建与表达研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：胡桂学陈中秋董丽娜高凤山吉林农业大学动物科学技术学院长春 130118 大连大学生物工程学院大连 116622

对本实验室构建的含有猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突蛋白(S)基因的质粒进行PCR扩增，得到S基因约1 200bp的保护性抗原基因S1，克隆到pMD18-T载体并测订核酸序列。根据测序结果和乳酸菌表达载体pNZ8149特点，设计引物，PCR扩展，提纯扩... 详细信息

对本实验室构建的含有猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突蛋白(S)基因的质粒进行PCR扩增，得到S基因约1 200bp的保护性抗原基因S1，克隆到pMD18-T载体并测订核酸序列。根据测序结果和乳酸菌表达载体pNZ8149特点，设计引物，PCR扩展，提纯扩展产物，体外连接，构建了pNZ8149-S1质粒，电转化至乳酸乳球菌NZ3900中。重组菌经乳链菌肽诱导，通过SDS-PAGE和Western-Blot分析，S1基因获得了表达，表达产物可与FGEV血清发生反应。间接免疫荧光实验结果表明，重组乳酸菌表达的蛋白位于菌体表面。

关键词：猪传染性胃肠炎 TGEV病毒 S1基因重组乳酸菌基因表达载体

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猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组3'末端保守序列对病毒复制影响的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组3'末端保守序列对病毒复制影响的研...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘长龙孙志高飞陆嘉琦袁世山中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病研究室上海 200232

以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,将3’非翻译区中的一级结构进行了系列替换突变,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3’UTR突变对病毒复制的影响,目的是解析PRRSV病毒基因组复制与亚基因组转录的启动子序列,通过转染Ma... 详细信息

以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,将3’非翻译区中的一级结构进行了系列替换突变,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3’UTR突变对病毒复制的影响,目的是解析PRRSV病毒基因组复制与亚基因组转录的启动子序列,通过转染Marc-145细胞,针对核衣壳蛋白(N)和非结构蛋白2(nsp2)间接免疫荧光实验发现：3'末端第一位的碱基可以被替换成C,第二,三位碱基是不能被替换的,而第四位的碱基可以被替换成其他任何碱基。证明了PRRSV3’UTR的3’末端4个碱基是病毒复制所必需的。碱基AU对病毒基因组复制和亚基因组专录是特异的。为了解PRRSV复制过程奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作 3'非翻译区病毒复制亚基因组 mRNA转录

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野猪源PRRSV的分离鉴定及其动物感染试验

野猪源PRRSV的分离鉴定及其动物感染试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王波杨增岐张鹏张冲西北农林科技大学动物科技学院

将2007年陕西西安野生动物园送检的野猪的疑似高热病病料处理后接种于Marc-145细胞,出现细胞聚集、固缩、脱落等特异性细胞病变.通过NSP2基因的克隆测序,序列分析比较.表明,本研究所分离毒株Shaanxi-1的NSP2基因发生30个AA的不连续缺失... 详细信息

将2007年陕西西安野生动物园送检的野猪的疑似高热病病料处理后接种于Marc-145细胞,出现细胞聚集、固缩、脱落等特异性细胞病变.通过NSP2基因的克隆测序,序列分析比较.表明,本研究所分离毒株Shaanxi-1的NSP2基因发生30个AA的不连续缺失,且与JXA-1、HuN4、HUB2、Henan-1等毒株的序列缺失部位相同,与较早期分离HB-1、HB-2毒株进行比较,发现缺失部位不同.将分离毒株人工感染3头40日龄健康仔猪,并设空白对照组.结果感染猪3头全发病,所有感染猪于感染后5-7d内均出现体温升高,也出现喘气,腹式呼吸,呼吸困难等呼吸道症状,且感染后PRRSV抗原和抗体检测为阳性,但未见死亡.结果表明,本实验分离到的PRRSV属于美洲型的缺失变异株,且具有一定的致病性.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 Shaanxi-1 分离序列分析致病性

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猪细小病毒自然弱毒N株遗传稳定性研究

猪细小病毒自然弱毒N株遗传稳定性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：杜坚白安斌梁家幸梁保忠赵武李斌黄安国姚瑞英蒋玉雯广西兽医研究所广西南宁 530001

本研究将PPV-N株通过敏感猪三代、猪肾传代细胞25代,测定该毒株对敏感猪的致病性,结果表明将PPV-N株连续分别通过PPV H1抗体阴性的4月龄小猪、后备母猪、怀孕母猪三代,均未从试验猪检出病毒血症和分离到病毒,且母猪产仔正常.在IBRS-2细... 详细信息

本研究将PPV-N株通过敏感猪三代、猪肾传代细胞25代,测定该毒株对敏感猪的致病性,结果表明将PPV-N株连续分别通过PPV H1抗体阴性的4月龄小猪、后备母猪、怀孕母猪三代,均未从试验猪检出病毒血症和分离到病毒,且母猪产仔正常.在IBRS-2细胞中连续传代,随着传代次数的增加其细胞病变未见异常,毒价稳定在103.5TCID50/ml。将第1,5,10、15、20、25代病毒培养物接种PPV HI抗体阴性怀孕母猪,未从母猪测出病毒血症和检出病毒,所产仔猪PPV HI抗体阴性,来从弱仔猪脏器分离到病毒,说明该毒株毒力不返强,具有良好的遗传稳定性。这为该弱毒株成为—株良好的自然弱毒疫苗株提供了依据。

关键词：猪细小病毒自然弱毒N株遗传稳定性 PPV HI抗体毒株毒力

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SYBR GreenⅠ实时定量荧光PCR检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因方法的建立

SYBR GreenⅠ实时定量荧光PCR检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因方法...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：熊文婕谢芝勋唐熠谢丽基刘加波庞耀姗邓显文谢志勤广西大学动物科技学院广西兽医研究所

为了建立一种方法定量检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因,针对禽呼肠孤病毒δNS、δC基因和管家基因β-actin分别设计了特异性引物,并将PCR扩增的的片段分别连接到pMD18-T载体上,构建的重组质粒分别命名为βactin-pMD18-T、δC-pMD18-T和δ... 详细信息

为了建立一种方法定量检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因,针对禽呼肠孤病毒δNS、δC基因和管家基因β-actin分别设计了特异性引物,并将PCR扩增的的片段分别连接到pMD18-T载体上,构建的重组质粒分别命名为βactin-pMD18-T、δC-pMD18-T和δNS-pMD18-T。重组质粒经筛选、鉴定纯化后,梯度倍比稀释作为标准品,用于实时定量荧光PCR中禽呼肠孤病毒δNS、δC基因和看家基因β-actin标准曲线的构建.结果表明,建立的方法在1×10～1-1×10～7 copies/ul模板范围内具有良好的线性关系,相关系数均在0.99以上,至少可检测到10个copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,能够检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因的表达.

关键词：禽呼肠孤 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR 相对定量

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猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1蛋白二级结构及B细胞抗原表位预测

猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1蛋白二级结构及B细胞抗原表位...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯广西兽医研究所病毒室南宁 530001

以PPV-N株的VP1蛋白基因序列为材料,采用Chou-Fasman方法、Gamier-Robson方法和Karplus-Schultz方法来预测VP1蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle方法预测VP1蛋白的亲水性,用Emini法预测VP1蛋白的表面可能性,用Jameson-Wolf方法预测VP1蛋白的抗原指数,然后综合分析VP1蛋白的B细胞抗原表位.结果表明,PPV-N株VP1蛋白的二级结构以β-折叠为主,并有较多的转角和无规则卷曲区域,在序列的20.56,61.80,86-130,136-188区域最有可能是B细胞抗原表位的优势区域.本研究将为PPV-N株自然弱毒的分子机理以及反向疫苗学的研究提供一定的理论依据。

关键词： PPV-N株 VP1蛋白二级结构 B细胞抗原表位抗原指数预测分子机理

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全耐药鲍曼不动杆菌分子分型和分子流行病学调查

全耐药鲍曼不动杆菌分子分型和分子流行病学调查

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：欧阳萍黄晶雷连成尹立子林花吕爽韩文瑜吉林大学畜牧兽医学院吉林大学第一医院检验科

重复片段引物PCR和随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对临床分离全耐药不动杆菌分子分型,并进行流行病学调查。从ICU病房感染多重耐药不动杆菌患者的标本分离不动杆菌,碱裂解法提取全基因组,重复片段引物PCR(Rep-PCR)和随机引物扩增(RAPD),对... 详细信息

重复片段引物PCR和随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对临床分离全耐药不动杆菌分子分型,并进行流行病学调查。从ICU病房感染多重耐药不动杆菌患者的标本分离不动杆菌,碱裂解法提取全基因组,重复片段引物PCR(Rep-PCR)和随机引物扩增(RAPD),对8株临床分离的全耐药菌基因分型,并与生物学分型和质粒分型比较,调查医院流行全耐药菌的基因型。结果显示,8株分离菌经两对重复片段引物分型可分为5种和4种基因型,经随机引物分型为4种基因型,经质粒分型可分为2种基因型,生物学分型归属为1种表型。PCR方法用于全耐药不动杆菌分子分型简便易行,重复性好,适合医院感染流行病学调查,本医院同一部门出现多种基因型,各科室间不存在交叉传染。

关键词：不动杆菌聚合酶链反应基因分型流行病学调查

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猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原抗体复合物感染PAM的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原抗体复合物感染PAM的研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张凤华卢高峰夏平安徐红运赵琳刘玉松范旭崔保安河南农业大学牧医工程学院兽医微生物实验室河南郑州450002

用猪抗PRRSV特异性抗体和FTTC标记的兔抗猪IgG,在PAM和Mack-145细胞中建立了检测PRRSV的间接免疫荧光方法(IFA)。利用IFA在PAM和Mack-145细胞中分别测定猪抗PRRSV免疫血清的中和抗体效价,滴度分别为1:10和1:40。将1:40亚中和剂量抗体与2... 详细信息

用猪抗PRRSV特异性抗体和FTTC标记的兔抗猪IgG,在PAM和Mack-145细胞中建立了检测PRRSV的间接免疫荧光方法(IFA)。利用IFA在PAM和Mack-145细胞中分别测定猪抗PRRSV免疫血清的中和抗体效价,滴度分别为1:10和1:40。将1:40亚中和剂量抗体与200TCID50PRRSV作用后的抗原抗体复合物感染PAM细胞,同时将病毒抗体复合物与兔抗猪IgG作用后再感染PAM细胞进行Fc阻断试验,用间接免疫荧光(IFA)和RT-PCR方法测定PRRSV在PAM中复制。结果表明该亚中和剂量的病毒抗体复合物可以感染PAM细胞,而兔抗猪IgG能够成功阻断病毒抗体复合物感染PAM细胞。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 PAM细胞抗原抗体复合物 Fc阻断试验特异性抗体病毒感染

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猪圆环病毒2型ORF2基因的表达及活性研究

猪圆环病毒2型ORF2基因的表达及活性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：谢彩华闫若潜吴志明张志凌张健陈涛河南省动物疫病预防控制中心河南郑州 450008

根据猪园环病毒2型(PCV2)基因序列设计一对特异性引物PCR扩增PCV2去核定位信号(nuclear localizationsignal,NLS)的Cap蛋白基因(ORF2),经SphI/HindⅢ双酶切后将其克隆到表达载体pQE30中并转化大肠杆菌JM109,采用IPTG进行诱导表达,采用... 详细信息

根据猪园环病毒2型(PCV2)基因序列设计一对特异性引物PCR扩增PCV2去核定位信号(nuclear localizationsignal,NLS)的Cap蛋白基因(ORF2),经SphI/HindⅢ双酶切后将其克隆到表达载体pQE30中并转化大肠杆菌JM109,采用IPTG进行诱导表达,采用自行创新的纯化方法对表达的融合蛋白进行纯化,Western Blot鉴定纯化后的重组Cap蛋白(rCap)活性。结果表明,成功克隆了无核定位信号的ORE2基因,其分子量大小579bp;表达的rCap蛋白大小24-1 kD左右,与预期大小相一致;经纯化后的rCap蛋白纯度在95％以上;Wlestern Blot鉴定结果表明Cap蛋白可以和抗PCV2抗体反应,具有很好的抗原性。本研究为以后进一步建立以Cap蛋白为包被抗原的PCV2间接ELISA诊断方法以及PCV2疫苗的研究等奠定了基础。

关键词：猪园环病毒2型 ORF2基因基因序列蛋白纯化 Cap蛋白活性

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