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1,298 篇 会议
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1,216 篇 农学
- 1,074 篇 兽医学
- 120 篇 畜牧学
- 22 篇 作物学
- 7 篇 水产
- 5 篇 农业资源与环境
- 3 篇 林学
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- 1 篇 草学
62 篇 医学
- 35 篇 药学(可授医学、理...
- 31 篇 基础医学(可授医学...
- 8 篇 临床医学
- 7 篇 公共卫生与预防医...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 中西医结合
44 篇 理学
- 40 篇 生物学
- 3 篇 生态学
- 1 篇 物理学
43 篇 工学
- 23 篇 生物工程
- 7 篇 轻工技术与工程
- 5 篇 化学工程与技术
- 5 篇 农业工程
- 3 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 仪器科学与技术
- 1 篇 材料科学与工程（可...
- 1 篇 环境科学与工程（可...
- 1 篇 生物医学工程（可授...
3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
17 篇 混合感染
17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,247 篇 中文
53 篇 英文

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3种猪病毒性腹泻感染的多重PCR检测

3种猪病毒性腹泻感染的多重PCR检测

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：田小艳孙华邓雨修苏润环李春梅招丽婵王东东宋延华广东省温氏集团研究院新兴广东 527400

根据GenBank中猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的序列，设计了3对PCR引物，试验建立了用于检测这三种腹泻病原的三重RT-PCR方法，以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场... 详细信息

根据GenBank中猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的序列，设计了3对PCR引物，试验建立了用于检测这三种腹泻病原的三重RT-PCR方法，以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测，实验结果表明：猪流行性性腹泻病毒阳性率为33.7％，猪传染性胃肠炎病毒阳性率为4.2％，猪轮状病毒阳性率为20％;猪流行性性腹泻病毒和猪轮状病毒混合感染率为8.4％，猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染率为2.1％.

关键词：猪病毒性腹泻 PEDV病毒 TGEV病毒 PRV病毒多重PCR检测临床诊断

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Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：冯运巩李银聚程相朝张春杰吴庭才郁川王学强张旭张鹏河南科技大学动物科技学院

探讨Apo介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性.将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLDLy组装前体apo-B1OO进行融合,定向克隆到pCDNA表达载体CMV启动子下游,构建pCDNA-Apo-ΔtPA表达载体... 详细信息

探讨Apo介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性.将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLDLy组装前体apo-B1OO进行融合,定向克隆到pCDNA表达载体CMV启动子下游,构建pCDNA-Apo-ΔtPA表达载体。将pCDNA-Apo-ΔtPA以脂质体包裹后转入体外培养的鸡胚肝细胞,ELISA法检测融合蛋白表达水平,发色底物法检测表达产物生物学活性.结果显示,融合基因在鸡胚肝细胞中能有效表达并能够分泌到细胞外,48h表达水平最高达675.3ng/10～6 cells/24h,表达产物活性达135.8IU/10～6cells/24h。ado-B1OO介导的t-PA在鸡胚肝细胞中成功表达,为外源基因在鸡体内表达并实现在卵黄中积淀奠定了坚实的基础。

关键词： apo-B1OO 人组织型纤溶酶原激活剂鸡胚肝细胞活性检测

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猪链球菌2型多重PCR诊断方法的建立及应用

猪链球菌2型多重PCR诊断方法的建立及应用

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：盛敏吴志明闫若潜赵明军钱勇张盼河南省动物疫病预防控制中心

根据GenBank已登录的SS2型特异性CPS2J基因及毒力因子基因MRP、EF设计引物,建立了SS2多重PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省34例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规细菌分离鉴定... 详细信息

根据GenBank已登录的SS2型特异性CPS2J基因及毒力因子基因MRP、EF设计引物,建立了SS2多重PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省34例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规细菌分离鉴定方法进行了对比。结果表明成功建立了2型猪链球菌多重PCR检测方法,该方法的检测灵敏度可达100个细菌,特异性高且重复性良好;利用该方法对34份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明,其中有2份样品为2型猪链球菌阳性,与细菌分离鉴定阳性符合率为100%.本研究成功建立了2型猪链球菌多重PCR检测方法,可用于2型猪链球菌的临床快速诊断。

关键词： 2型猪链球菌多重PCR 检测应用

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猪口蹄疫病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制

猪口蹄疫病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：卢顺董晓辉张春娟郭晓峰但汉并吴斌华中农业大学动物传染病实验室

目的:研制以原核表达蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)抗体的ELISA试剂盒,为猪口蹄疫病毒抗体的监测提供帮助。方法:利用包含有O型口蹄疫病毒VP1上主要抗原表位的原核表达蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳包被浓... 详细信息

目的:研制以原核表达蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)抗体的ELISA试剂盒,为猪口蹄疫病毒抗体的监测提供帮助。方法:利用包含有O型口蹄疫病毒VP1上主要抗原表位的原核表达蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳包被浓度和血清稀释度,优化各项实验条件,在此基础上研制ELISA检测试剂盒并对试剂盒的特异性、重复性等方面进行了研究。结果:经过研究确定抗原包被浓度为20.75μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:40,阴阳性判定界限为0.34。稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数均小于10%。应用该ELISA方法和上海优耐特FMDV VP1 ELISA同时检测220份临床血清,结果显示两者总符合率达87.27%。结论:该ELISA试剂盒可用于口蹄疫血清学流行病调查和抗体水平的监测.

关键词：口蹄疫病毒抗体间接ELISA 试剂盒

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2008年广东省猪PCV2流行病学调查

2008年广东省猪PCV2流行病学调查

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：龚朋飞周庆丰刘忠华郑志青周美华广东温氏食品集团有限公司研究院云浮广东527400

从广东省5个市11个规模养猪场采取了共840份猪血清样品,用间接ELISA检测试剂盒进行了猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的检测,同时用PCR方法对60份血清进行了病原检测。结果显示,840份样品PCV2抗体阳性率为45.7％,其中后备猪、公猪、哺乳母... 详细信息

从广东省5个市11个规模养猪场采取了共840份猪血清样品,用间接ELISA检测试剂盒进行了猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的检测,同时用PCR方法对60份血清进行了病原检测。结果显示,840份样品PCV2抗体阳性率为45.7％,其中后备猪、公猪、哺乳母猪、哺乳仔猪、保育猪、怀孕母猪、流产母猪的阳性率分别为77.2％、60.8％,46.8％、20.9％.9.9％、60.0％、84.6％：被检11个猪场PCV2抗体阳性率为100％,不同猪场阳性率20.9％-93.9％,血清病原分子检测阳性率为75％;有PCV2临床特征的病猪血液的病原阳性率为93.3％,包括无名高热、苍白消瘦、胎儿流产、呼吸道疾病。调查结果表明,广东省猪场广泛存在PCV2感染。

关键词：猪圆环病毒2型病原检测流行病学调查抗体阳性率

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输卵管囊肿病鸡的病理学观察及相关病原的初步检测

输卵管囊肿病鸡的病理学观察及相关病原的初步检测

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘慧敏王川庆陈陆杨霞皇甫和平郑鹿平徐雪付仁一河南农业大学禽病研究所河南郑州 450002

目的：为研究卡氏杆菌与鸡输卵管囊肿之间的关系。方法：对42例临床自然发病病例进行了症状观察、病理剖检，并采取气管、肺脏、输卵管与卵巢组织块，经固定，脱水，石蜡切片，HE染色，光镜观察：利用PCR方法对上述组织进行了卡氏... 详细信息

目的：为研究卡氏杆菌与鸡输卵管囊肿之间的关系。方法：对42例临床自然发病病例进行了症状观察、病理剖检，并采取气管、肺脏、输卵管与卵巢组织块，经固定，脱水，石蜡切片，HE染色，光镜观察：利用PCR方法对上述组织进行了卡氏杆菌的特异性检测，并对其病原的混合感染进行了初步研究。结果：结果表明卡氏杆菌可以引起鸡呼吸道感染和生殖道损伤，显微镜下主要表现为呼吸道黏膜充血、肿胀，输卵管固有层腺体增多，卵巢中卵泡退化，呈空泡状;PCR方法对鸡群卡氏杆菌的阳性检出率为14％，组织阳性检出率为5.4％，且在被检组织中卡氏杆菌很少与其他病原体混合感染。结论：由此提示，卡氏杆菌可能与我国蛋鸡群中存在的输卵管囊肿有密切关系。

关键词：卡氏杆菌鸡输卵管囊肿临床症状病理剖检病原检测

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猪繁殖与呼吸障碍综合症临床病毒的分离与鉴定

猪繁殖与呼吸障碍综合症临床病毒的分离与鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张志刚王远微郑杰北京信德威特科技有限公司北京 100081

目的：建立适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV临床病毒的分离与鉴定方法。并对江西地区的流行毒株进行分离与鉴定。方法：利用发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞,传代培养,直到出现明显的CPE,收取细胞液并提取细胞液中的总R... 详细信息

目的：建立适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV临床病毒的分离与鉴定方法。并对江西地区的流行毒株进行分离与鉴定。方法：利用发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞,传代培养,直到出现明显的CPE,收取细胞液并提取细胞液中的总RNA,采用RT-PCR方法,对PRRSV中的目的基因片段特异性扩增,获得的PCR产物测序分析。结果：发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞培养传代至3代出现明显CPE,通过RT-PCR鉴定后,凝胶电泳结果显示,待鉴定样品与JX1 PRRSV毒株出现大小一致约220 bp的核酸条带,将PCR产物测序分析,通过与NCBI的GenBank数据库中公布的PRRSV美洲型病毒进行比对,具有高度同源性。结论：实验表明：通过采用Marc-145细胞对待鉴定样品进行分离培养,初步判断待鉴定样品中存在PRRSV病原,同时针对细胞培养物抽提的总RNA采用RT-PCR和PCR扩增产物测序的方法最终确诊待鉴定样品中存在PRRSV病原。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征 Marc145细胞病毒检测基因测序分离培养毒株鉴定

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猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP4蛋白的原核表达与纯化

猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP4蛋白的原核表达与纯化

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王中明夏平安徐红运刘玉松范旭赵琳张凤华崔保安河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF4基因序列,利用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为676bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF4的阳性克隆pTG19-T... 详细信息

根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF4基因序列,利用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为676bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF4的阳性克隆pTG19-T-GP4。将此基因亚克隆到原核表达载体pET-32a,经筛选获得了阳性重组质粒pET-GP4,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为29kD的融合蛋白GP4-His,纯化后经Westerm blot测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。从而进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP4的免疫特性和功能奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP4蛋白原核表达蛋白纯化生物学活性

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猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组3′末端保守序列对病毒复制影响的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组3′末端保守序列对病毒复制影响的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘长龙孙志高飞陆嘉琦袁世山中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病研究室

以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,将3'非翻译区中的一级结构进行了系列替换突变,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒复制的影响,目的是解析PRRSV病毒基因组复制与亚基因组转录的启动子序列,通... 详细信息

以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,将3'非翻译区中的一级结构进行了系列替换突变,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒复制的影响,目的是解析PRRSV病毒基因组复制与亚基因组转录的启动子序列,通过转染Marc-145细胞,针对核衣壳蛋白(N)和非结构蛋白2(nsp2)间接免疫荧光实验发现:3'末端第一位的碱基可以被替换成C,第二,三位碱基是不能被替换的,而第四位的碱基可以被替换成其他任何碱基.证明了PRRSV 3'UTR的3'末端4个碱基是病毒复制所必需的。碱基AU对病毒基因组复制和亚基因组专录是特异的。为了解PRRSV复制过程奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作 3′非翻译区基因组复制亚基因组mRNA转录

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凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性比较

凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张海燕杨宏军王长法何洪彬马卫明杨少华山东省农业科学院奶牛研究中心山东农业大学动物科技学院

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌溶血素蛋白作为研究对象,分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方... 详细信息

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌溶血素蛋白作为研究对象,分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物,Bradford法测定蛋白含量,兔红细胞测定半数溶血效价.结果显示这两种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带,达电泳级纯度.与此同时,凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04%,蛋白含量为0.337 mg/mL,溶血活性为1519 HU/mg;镍柱亲和层析的纯化率为17.5%,蛋白含量为0.35 mg/mL,溶血活性为1463 HU/mg。由此可见,凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒。

关键词：溶血素凝胶过滤层析镍柱亲和层析

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