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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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1,298 篇 会议
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- 120 篇 畜牧学
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- 5 篇 农业资源与环境
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- 1 篇 中西医结合
44 篇 理学
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- 3 篇 生态学
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43 篇 工学
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- 5 篇 化学工程与技术
- 5 篇 农业工程
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3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
1 篇 经济学
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主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
17 篇 混合感染
17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,247 篇 中文
53 篇 英文

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乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张丹刘昊鲁会军金扩世于长勇胡博颜雯金宁一军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春 130062 云南农业大学动物科技学院云南昆明 650201 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春 130062

目的：将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体，构建原核表达质粒pET-28a(+)/E，并使该基因在***中高效表达，为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法：以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物，通过RT-PCR... 详细信息

目的：将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体，构建原核表达质粒pET-28a(+)/E，并使该基因在***中高效表达，为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法：以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物，通过RT-PCR 方法扩增目的片段，将其克隆到pMD18-T载体中，得到克隆质粒pMD18-T/E。pMD18-T/E经Xho I和EcoR I酶切，测序后连接pET-28a(+)载体，构建了重组原核表达质粒pET-28a(+)/E。转化至大肠杆菌BL21(DE3)后，利用IPTG诱导获得高效表达。结果：扩增出了1500bp的基因片段，与预期大小一致，测序后经Blast验证与已发表乙型脑炎病毒SAl4-14-2株E蛋白基因序列同源性为98％，成功克隆至表达载体pET-28a(+)并获得高效表达，表达产物分子量约为53kDa。结论：该表达产物的稳定高效表达为乙脑的诊断试剂开发提供了依据。

关键词：猪乙型脑炎 JEV病毒 E蛋白大肠杆菌高效表达基因克隆

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猪繁殖与呼吸障碍综合症临床病毒的分离与鉴定

猪繁殖与呼吸障碍综合症临床病毒的分离与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张志刚王远微郑杰北京信德威特科技有限公司

【目的】:建立适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV临床病毒的分离与鉴定方法.并对江西地区的流行毒株进行分离与鉴定。【方法】:利用发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞,传代培养,直到出现明显的CPE,收取细胞液并提取细胞液中的总R... 详细信息

【目的】:建立适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV临床病毒的分离与鉴定方法.并对江西地区的流行毒株进行分离与鉴定。【方法】:利用发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞,传代培养,直到出现明显的CPE,收取细胞液并提取细胞液中的总RNA,采用RT-PCR方法,对PRRSV中的目的基因片段特异性扩增,获得的PCR产物测序分析。【结果】:发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞培养传代至3代出现明显CPE,通过RT-PCR鉴定后,凝胶电泳结果显示,待鉴定样品与JX1 PRRSV毒株出现大小一致约220 bp的核酸条带.将PCR产物测序分析,通过与NCBI的GenBank数据库中公布的PRRSV美洲型病毒进行比对,具有高度同源性.【结论】:实验表明:通过采用Marc-145细胞对待鉴定样品进行分离培养,初步判断待鉴定样品中存在PRRSV病原,同时针对细胞培养物抽提的总RNA采用RT-PCR和PCR扩增产物测序的方法最终确诊待鉴定样品中存在PRRSV病原.

关键词： PRRSV Marc145 RT-PCR 测序分离鉴定

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猪白细胞介素18基因的克隆及其腺病毒表达载体的构建

猪白细胞介素18基因的克隆及其腺病毒表达载体的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘忠华周庆丰龚朋飞周美华何津佳广东省温氏集团研究院

根据GenBank中收录的猪白细胞介素18(porcine interleukin 18,pIL-18)基因序列,设计了1对特异性引物。运用RT-PCR技术从经刀豆素(Con A)诱导的大约克猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到了pIL-18基因,并将其克隆至pGEM-T Easy载体上。核苷... 详细信息

根据GenBank中收录的猪白细胞介素18(porcine interleukin 18,pIL-18)基因序列,设计了1对特异性引物。运用RT-PCR技术从经刀豆素(Con A)诱导的大约克猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到了pIL-18基因,并将其克隆至pGEM-T Easy载体上。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长为579 bp的开放阅读框,编码192个氨基酸,与已知pIL-18核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达100%。将克隆的猪IL-2基因编码阅读框克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV,电转化含腺病毒基因组(Adeasy-1)的大肠杆菌细胞BJ5183-AD-1,成功获得了重组腺病毒DNA,将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD-293细胞,经过病毒基因组的PCR鉴定和转录水平的RT-PCR鉴定,初步表明获得了表达猪白细胞介素2的重组腺病毒。

关键词：猪白细胞介素2 基因克隆腺病毒载体基因表达

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微生态饲料添加剂金倍素对肉仔鸡肠道菌群和新城疫抗体水平的影响

微生态饲料添加剂金倍素对肉仔鸡肠道菌群和新城疫抗体水平的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：海洋高林白子金薛艳秋徐艳茹袁丽琨何凤艳沈阳科丰集团

本试验研究微生态饲料添加剂金倍素对内仔鸡肠道菌群和新城疫抗体水平的影响.将400只1日龄艾维菌肉仔鸡雏随机分为2组,每组200只,A组为空白对照,不添加任何添加剂,B组为试验组,在饲料中按0.5%全程添加金倍素。在35日龄时,检测鸡空肠和... 详细信息

本试验研究微生态饲料添加剂金倍素对内仔鸡肠道菌群和新城疫抗体水平的影响.将400只1日龄艾维菌肉仔鸡雏随机分为2组,每组200只,A组为空白对照,不添加任何添加剂,B组为试验组,在饲料中按0.5%全程添加金倍素。在35日龄时,检测鸡空肠和盲肠内大肠杆菌和乳酸杆菌的数量,结果显示,试验组空肠和盲肠的大肠杆菌浓度均比对照组低(P<0.05),乳酸菌浓度均比对照组高(P<0.05).在整个试验期间,试验组鸡的腹泻死亡数较对照组低,但差异不大。在14、21、28、35日龄时,检测新城疫抗体水平,结果表明,添加金倍素对试验鸡血清新城疫病毒(NDV)抗体水平有显著影响(P<0.01)。

关键词：金倍素肠道菌群新城疫抗体水平

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重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建

重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：潘群兴王永山何孔旺欧阳伟王晓丽诸玉梅夏兴霞江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1上T细胞表位肽(第21-40残基)基因嵌合在PPV VP2的N端,克隆到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV VP1:PPV VP2,转化含有穿梭载体Bacmid的*** DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白斑筛... 详细信息

将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1上T细胞表位肽(第21-40残基)基因嵌合在PPV VP2的N端,克隆到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV VP1:PPV VP2,转化含有穿梭载体Bacmid的*** DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白斑筛选获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV VP1:PPV VP2,转染昆虫草地夜蛾(Sf9)细胞,并在Sf9中进行了表达。用间接免疫荧光试验(IFA)、Western-blot分析,表达产物具有与PPV VP2天然蛋白相似的生物活性。电镜观察,表达的蛋白能够自我组装成病毒样粒子PPV:VLP(FMDV)。

关键词：猪O型口蹄疫细小病毒 T细胞表位肽 VP2蛋白生物活性

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猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用

猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：李安崔言顺沈志强谢金文王金良曲光刚李峰李建亮山东省滨州畜牧兽医研究院山东农业大学动物科技学院

对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp.该方法能将我国流行的不同基因... 详细信息

对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp.该方法能将我国流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒与疫苗弱毒完全区分开采,且不与其他猪源病毒和牛病毒性腹泻病病毒发生非特异反应.应用本研究建立的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法可以及早对猪瘟做出准确诊断,并可将强毒感染猪迅速从弱毒疫苗免疫猪群中筛选出来,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性。

关键词：猪瘟病毒反转录-复合套式聚合酶链式反应兔化弱毒疫苗鉴别

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检测蓝舌病病毒双抗夹心ELISA方法的建立及应用

检测蓝舌病病毒双抗夹心ELISA方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：杨俊兴花群义卢体康吕建强秦智峰陶虹阮周曦陈兵林庆燕深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

将纯化的蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)与弗氏佐剂乳化后,免疫6周龄BALB/c小鼠。分离免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经BTV-ELISA、BTV VP7-ELISA和BHK-ELISA筛选,得到了3株可以稳定分泌抗BTVVF7特异性单抗的杂交瘤细胞株(1F5、4E5和6... 详细信息

将纯化的蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)与弗氏佐剂乳化后,免疫6周龄BALB/c小鼠。分离免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经BTV-ELISA、BTV VP7-ELISA和BHK-ELISA筛选,得到了3株可以稳定分泌抗BTVVF7特异性单抗的杂交瘤细胞株(1F5、4E5和6A1).用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗。选用抗VF7单抗(1F5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了检测BTV双抗夹心ELISA方法.用ELISA分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水泡性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品,用RT-PCR作对照,结果表明ELISA具有良好的特异性.用ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,结果表明ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%.

关键词： ELISA 特异性 BTV 阳性样品双抗夹心

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放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测

放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：倪宏波刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳王春来司薇常月红彭玮王聃赫明雷中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江八一农垦大学动物科技学院

目的:构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),并检测其是否具有自身激活及毒性作用.方法:从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7... 详细信息

目的:构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),并检测其是否具有自身激活及毒性作用.方法:从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-omp在酵母双杂交系统中的自激活和毒性作用.结果:实验成功构建了诱饵质粒载体pGBKT7-omp,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用.结论:pGBKT7-omp可应用在酵母双杂交系统中,寻找猪肺泡上皮细胞cDNA文库中与omp相互作用的蛋白质,为筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白与肺泡上皮细胞相互作用的蛋白奠定了重要基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白诱饵质粒自激活作用毒性作用

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中国蝙蝠携带狂犬病毒研究进展

中国蝙蝠携带狂犬病毒研究进展

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘闻一邱薇江禹涂长春李作生郑钧丰覃敏黄勇王意银鲍晓伟李乙江范泉水张富强第三军医大学学员旅十队重庆400038 成都军区疾病预防控制中心昆明 650118 军事医学科学院11所长春130062

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies Virus,RV)引起的动物传染给人的自然疫源性疾病。该病毒既感染家畜和野生动物,也通过伤口接触感染动物的唾液传播给人,狂犬病呈全球性分布,全世界每年约有55000人死于该病,95％以上的死亡病例发生在... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies Virus,RV)引起的动物传染给人的自然疫源性疾病。该病毒既感染家畜和野生动物,也通过伤口接触感染动物的唾液传播给人,狂犬病呈全球性分布,全世界每年约有55000人死于该病,95％以上的死亡病例发生在亚洲和非洲。感染后一旦出现引症状,无法救治,均已死亡告终。研究表明,蝙蝠是包括狂犬病病毒在内的多种人兽共患病毒性疾病的储存宿主,几乎每种都曾检测出狂犬病毒。蝙蝠在我国物种丰富,分布广泛,其感染携带RV的流行病学数据报道甚少。本文对我国蝙蝠的种类、分布以及蝙蝠作为狂犬病毒自然宿主的国内外研究状况、主要是对我国蝙蝠中狂犬病病毒的检测状况进行了综述,为广大学者的进一步相关研究提供参考依据。

关键词：狂犬病毒蝙蝠自然疫源性疾病病毒检测储存宿主

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2008年广东省猪PCV2流行病学调查

2008年广东省猪PCV2流行病学调查

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：龚朋飞周庆丰刘忠华郑志青周美华广东温氏食品集团有限公司研究院

从广东省5个市11个规模养猪场采取了共840份猪血清样品,用间接ELISA检测试剂盒进行了猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的检测,同时用PCR方法对60份血清进行了病原检测.结果显示,840份样品PCV2抗体阳性率为45.7%,其中后备猪、公猪、哺乳母猪、哺... 详细信息

从广东省5个市11个规模养猪场采取了共840份猪血清样品,用间接ELISA检测试剂盒进行了猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的检测,同时用PCR方法对60份血清进行了病原检测.结果显示,840份样品PCV2抗体阳性率为45.7%,其中后备猪、公猪、哺乳母猪、哺乳仔猪、保育猪、怀孕母猪、流产母猪的阳性率分别为77.2%、60.8%、46.8%、20.9%、9.9%、60.0%,84.6%;被检11个猪场PCV2抗体阳性率为100%,不同猪场阳性率20.9%～93.9%.血清病原分子检测阳性率为75%;有PCV2临床特征的病猪血液的病原阳性率为93.3%,包括无名高热、苍白消瘦、胎儿流产、呼吸道疾病.调查结果表明,广东省猪场广泛存在PCV2感染.

关键词：流行情况阳性率无名高热广东省流行病学调查

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