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1,298 篇 会议
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1,216 篇 农学
- 1,074 篇 兽医学
- 120 篇 畜牧学
- 22 篇 作物学
- 7 篇 水产
- 5 篇 农业资源与环境
- 3 篇 林学
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62 篇 医学
- 35 篇 药学(可授医学、理...
- 31 篇 基础医学(可授医学...
- 8 篇 临床医学
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- 1 篇 中西医结合
44 篇 理学
- 40 篇 生物学
- 3 篇 生态学
- 1 篇 物理学
43 篇 工学
- 23 篇 生物工程
- 7 篇 轻工技术与工程
- 5 篇 化学工程与技术
- 5 篇 农业工程
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- 1 篇 生物医学工程（可授...
3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
17 篇 混合感染
17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,247 篇 中文
53 篇 英文

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水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：孟庆峰梁艳婷蔡阳钱爱东王伟利吉林出入境检验检疫局长春吉林 130062 吉林农业大学动物科学技术学院长春吉林 130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春吉林 130118 吉林出入境检验检疫局长春吉林 130062

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物，利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段，将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达... 详细信息

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物，利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段，将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中，构建原核表达载体pET-28a-VP2。阳性重组质粒转化宿主菌BL21，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE检测和免疫印迹分析。结果表明蛋白获得了表达，表达产物的分子质量为21KD，与理论推测的分子质量一致;终浓度为1mmol/L的IPTG诱导下，5h时其表达量达到高峰;Westernblot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别，具有相应的抗原性。

关键词：水貂阿留申病毒 VP2基因原核表达免疫蛋白

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猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘健陈瑞爱朱杰仪唐明森罗满林华南农业大学广东广州 510642 广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴 527439 华南农业大学广东广州 510642 广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴 527439

根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野... 详细信息

根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中，经ZeocinTM抗性筛选后获得大量多拷贝插入的重组子，SDS-PAGE和Western blot分析结果表明，所获得的重组子能够分泌表达出19KD左右的PoIFN-α特异蛋白，表达更容易，其有效蛋白表达量为54.105mg/L，并且经Vero-VSV系统测定，PoINF-α效价达到5.87×10(7)U/L。试验首次将猪干扰素α成熟肽蛋白的全基因密码子进行改造，重新设计实现了在毕赤酵母菌表达系统中的PoIFN-α基因的高效分泌表达。

关键词：猪干扰素-α 密码子改造 PoIFN-α基因毕赤酵母菌分泌表达

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鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：韩青松武小椿代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌 712100

目的：通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析，为研究P基因及V基因的功能奠定基础，也为防治新城疫(Newcastle disease，ND)提供科学依据。方法：用非... 详细信息

目的：通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析，为研究P基因及V基因的功能奠定基础，也为防治新城疫(Newcastle disease，ND)提供科学依据。方法：用非免疫鸡胚增值病毒，HA及HI试验鉴定增殖的病毒。参考GenBank发表的NDV基因序列设计1对特异性引物，RT-PCR扩增NDV/Pigeon/ShX/China/2003 P基因的全长片段，并进行克隆、序列测定和序列分析。结果：NDV/Pigeon/ShX/China/2003 P基因的全长1 451 bp，其完整的ORF长度为I 188 bp，编码395个氨基酸。同源性比较可知：NDV/Pigeon/ShX/China/2003与其他分离株P基因核苷酸序列同源性在63.6％～92.9％之间，推导氨基酸序列同源性在67.7％～92.2％之间。系统发育进化树表明NDV/Pigeon/Shx/china，2003与P68亲缘关系最近，与F48E9和La Sota毒株处于进化树的不同分支。结论：NDV/Pigeon/ShX/China/2003与国内外已报道的毒株间存在较大变异。

关键词：鸽源新城疫病毒 P基因序列分析基因克隆亲缘关系

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘华雷王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明郑东霞赵云玲孙承英中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心广西大学动物科学技术学院天津市畜牧兽医研究所

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析

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IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁丹王红宁高荣阳泰郭自成张云飞四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室” 四川农业大学动物医学院

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.... 详细信息

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.结果表明,在含有Kan的LB平板上连续传代100代后,质粒的目的基因片断没有缺失,具有结构稳定性;但在无抗生素选择压力下,连续传代20代开始出现质粒丢失的细胞,连续传代100代后80%的细胞含有正常质粒.结论:本实验构建的IBV真核表达质粒pVAX1-S1在宿主菌DH5α中具有稳定性,为进一步扩大生产提供技术支持。

关键词： IBV S1 真核质粒大肠杆菌DH5α 稳定性

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广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：侯韶毅高永锐冯建远卢桂娟陆有飞黄庆南黄伟坚赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯广西大学动物科学技术学院广西丽原生物股份有限公司广西兽医研究所

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸... 详细信息

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸和氨基酸序列同源性最高.三株SIV分离株的NA基因在氨基端胞浆尾区均由K6→R6,在非极性跨膜区均由V20→M20。系统发育分析表明本实验所分离的三个SIV毒株与H1N2亚型毒株亲缘性最相近,且来源于猪源H1N2亚型流感病毒。从时间上也发现,三个分离株的NA基因与1996年以后获得的H3N2毒株亲缘关系很近,都隶属于一个亚分支。

关键词：猪流感病毒分离 NA基因

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猪圆环病毒1、2型多重PCR诊断方法建立及应用

猪圆环病毒1、2型多重PCR诊断方法建立及应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王东方安春霞刘光辉闫若潜吴志明河南省动物疫病预防控制中心郑州河南 450008

为建立猪圆环病毒1、2型快速PCR鉴别诊断方法。本研究根据GenBank已登录的猪圆环病毒Ⅰ型Ⅱ型特异性基因设计引物,建立了猪猪圆环病毒Ⅰ型Ⅱ型快速PCR鉴别诊断方法,并进行了特异性,敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省13... 详细信息

为建立猪圆环病毒1、2型快速PCR鉴别诊断方法。本研究根据GenBank已登录的猪圆环病毒Ⅰ型Ⅱ型特异性基因设计引物,建立了猪猪圆环病毒Ⅰ型Ⅱ型快速PCR鉴别诊断方法,并进行了特异性,敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省13例疑似猪圆环病毒临床样品进行了应用检测,并对河南省18个省辖市展开PCV2/PCV1的PCR鉴别诊断应用。结果表明：成功建立了建立猪猪圆环病毒Ⅰ型Ⅱ型快速PCR鉴别诊断方法,该方法的检测灵敏度可达0.04pg,特异性高、重复性良好;利用该方法对13例疑似猪圆环病毒临床样品进行了应用检测表明,其中13份样品猪圆环病毒Ⅱ型阳性,猪圆环病毒Ⅰ型为阴性。而在省辖市的检测中PCV2的平均阳性率为18.6％,PCV1的平均阳性率为5.2％.本研究成功建立了猪圆环病毒1、2型快速PCR鉴别诊断方法,可用于猪圆环病毒的临床快速鉴别诊断。

关键词：猪圆环病毒多重PCR 鉴别诊断特异性基因

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禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张毅王红宁王霆高荣张云飞张安云樊汶樵田浪四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”四川成都望江路29号 610064

本研究测定了mV疫苗株H120的全基因组序列，通过与GenBank上公布的IBv全基因组序列进行比对，对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物，用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定，测定结果表明，H120基... 详细信息

本研究测定了mV疫苗株H120的全基因组序列，通过与GenBank上公布的IBv全基因组序列进行比对，对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物，用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定，测定结果表明，H120基因组全长27 631bp(不包括polyA)，包含有10个开放阅读框(ORF)。H120全基因组序列与GenBartk上公布的13株IBV基因组序列的同源率在84.6～94.5％之间，与ArkDPI11同源性最高为94.5％。本研究选择具有代表性的IBV H120疫苗株进行全基因组测序及序列分析，为对其分子特征及IBV的系统进化分析提供基础。

关键词：禽传染性支气管炎 IBV病毒疫苗株基因组测序序列分析

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流产布鲁氏菌强毒株544与疫苗株S2的差异基因筛选与鉴定

流产布鲁氏菌强毒株544与疫苗株S2的差异基因筛选与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张俊敏韩文瑜雷连成孙长江赵瑞利冯新赵伟栋杜涛峰吉林大学农学部畜牧兽医学院

布鲁氏菌是世界范围内广泛分布的、人畜共患病的重要病原体之一。目前广泛使用的布病疫苗在免疫原性和生物安全方面均存在严重缺陷,无法将自然感染与疫苗接种的动物相区别,使得布病难以在畜群中彻底根除。代表性差异分析(Representation... 详细信息

布鲁氏菌是世界范围内广泛分布的、人畜共患病的重要病原体之一。目前广泛使用的布病疫苗在免疫原性和生物安全方面均存在严重缺陷,无法将自然感染与疫苗接种的动物相区别,使得布病难以在畜群中彻底根除。代表性差异分析(Representational Difference Analysis,RDA)是通过差减杂交与PCR的巧妙结合,特异性的使靶序列在三轮杂交后被富集100万倍以上。本研究运用RDA技术,以强毒株流产布鲁氏菌(***)544和目前国内应用广泛的疫苗株S2作为样品来源,经过三轮差减杂交和PCR富集,以非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选,克隆测序后,最终得到在强毒株544中缺失,疫苗株S2上存在的的11条差异片段,以此11条差异片段设计特异性引物,进行PCR扩增后测序,与预期结果一致.经Blast分析及基因功能预测分析表明这些差异基因为具有相当毒力基因功能的已知基因和可能与毒力相关的新基因.对这些差异基因的功能研究为布鲁氏菌自然感染与疫苗接种鉴别诊断技术的建立奠定了基础,为毒力基因的研究提供参考。

关键词：布鲁氏菌鉴别诊断代表性差异分析

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Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：冯运巩李银聚程相朝张春杰吴庭才郁川王学强张旭张鹏河南科技大学动物科技学院河南洛阳 471003

探讨Apo介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性。将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLOLy组装前体apo-B100进行融合，定向克隆到pCDNA3表达载体CMV启动子下游，构建pCDNA3-Apo-△tPA表... 详细信息

探讨Apo介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性。将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLOLy组装前体apo-B100进行融合，定向克隆到pCDNA3表达载体CMV启动子下游，构建pCDNA3-Apo-△tPA表达载体。将pCDNA3-Apo-△tPA以脂质体包裹后转入体外培养的鸡胚肝细胞，ELISA法检测融合蛋白表达水平，发色底物法检测表达产物生物学活性。结果显示，融合基因在鸡胚肝细胞中能有效表达并能够分泌到细胞外，48h表达水平最高达675.3ng/10O(6)cells/24h，表达产物活性达135.8IU/10(6)cells/24h。apo-BlOO介导的t-PA在鸡胚肝细胞中成功表达，为外源基因在鸡体内表达并实现在卵黄中积淀奠定了坚实的基础。

关键词：人组织型纤溶酶原激活剂融合蛋白鸡胚肝细胞分泌表达生物学活性转基因技术

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