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- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
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主题

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54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
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21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
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18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
17 篇 混合感染
17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

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1,247 篇 中文
53 篇 英文

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检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用

检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：沈婷周斌南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

本实验以乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗株作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立了检测猪乙型脑炎病毒血清抗体的间接ELISA方法。应用该法检测从江苏、安徽、山东、浙江四省部分地区收集到的739份血样,对华东地区猪乙型脑炎血清... 详细信息

本实验以乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗株作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立了检测猪乙型脑炎病毒血清抗体的间接ELISA方法。应用该法检测从江苏、安徽、山东、浙江四省部分地区收集到的739份血样,对华东地区猪乙型脑炎血清流行病学进行初步调查,检测结果JEV抗体阳性率为78.9%,其中,种猪JEV抗体阳性率为85.7%,商品猪JEV抗体阳性率为67.3%.从中随机抽取135份血样与国产商品化试剂盒进行比较,间接ELISA方法的特异性和敏感性分别为92%和96.4%,两种方法的符合率为95.6%.与NSI蛋白包被建立的ELISA比较,两者的符合率为97.7%.同时,本法的阳性检出率显著高于临床普遍使用的乳胶凝集试验结果.表明本实验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,适于大规模猪乙型脑炎血清流行病学调查.

关键词：乙型脑炎病毒间接ELISA 血清流行病学

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PCR-DGGE技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落多样性

PCR-DGGE技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落多样性

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：曾志光王红宁高荣唐俊妮管仲兵四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”

本文采用PCR-DGGE指纹图谱技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落的多样性,进行了不同品种间肠道微生物群落差异比较。通过提取猪粪样总DNA,进行16S rDNA的V3区扩增及DGGE电泳分析.结果表明,在DGGE图谱中,荣昌猪肠道微生物群落... 详细信息

本文采用PCR-DGGE指纹图谱技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落的多样性,进行了不同品种间肠道微生物群落差异比较。通过提取猪粪样总DNA,进行16S rDNA的V3区扩增及DGGE电泳分析.结果表明,在DGGE图谱中,荣昌猪肠道微生物群落多样性最高,共34条较明显的种\属菌条带,长白、杜洛克猪分别有31条,27条种\属菌条带.其中有10个条带是三个品种猪共有的优势种\属菌条带.荣昌猪与杜洛克猪的肠道微生物群落差异为37.3%;荣昌猪与长白猪的肠道微生物群落差异为31.8%.研究初步表明,相同生长环境中,猪肠道微生物群落差异可能与品种不同有关.

关键词：变性梯度凝胶电泳(DGGE) 荣昌猪肠道微生物

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重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测

重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：马凤龙崔雪志傅兴伦刘焕奇山东信得药业有限责任公司青岛山东 266061 山东信得药业有限责任公司青岛山东 266061 青岛农业大学青岛山东 266109 济南军区疾病预防控制中心济南山东 250014 青岛农业大学青岛山东 266109

重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上，双酶切回收的Tα1插入到pET32a后，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导，经15％SDS-PAGE检测，胸腺素α1获得可溶性表达。检... 详细信息

重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上，双酶切回收的Tα1插入到pET32a后，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导，经15％SDS-PAGE检测，胸腺素α1获得可溶性表达。检测到与目的蛋白相对分子量(21.8KDa)相符的条带。重组Tα1在大肠杆菌中获得可溶性表达。诱导表达菌高压破碎后进行亲和层析纯化，收集的洗脱蛋白峰经脱盐处理后，15％SDS-PAGE检测纯化效果。通过BALB/c小鼠脾淋巴细胞转化实验测定纯化胸腺素α1融合蛋白的活性，与人用胸腺素α1的活性比较结果显示，基因工程表达的胸腺素α1明显具有促进淋巴细胞增殖的活性。

关键词：重组胸腺素α1 大肠杆菌可溶性表达活性检测

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致病性猪源肠球菌16S rDNA-RFLP研究及系统进化分析

致病性猪源肠球菌16S rDNA-RFLP研究及系统进化分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：杨霞陈陆常洪涛王新卫刘红英王川庆河南农业大学牧医工程学院 450002

为探讨分离之河南滑县、武陟等12个地域的猪源肠球菌的亲缘关系，采用对其16S rDNA基因的RFLP分析、序列分析、及系统进化树的构建等方法，对这12株疑似猪源肠球菌进行了研究：结果显示：12株分离株均与肠球菌同源性最高，同源率达98.1... 详细信息

为探讨分离之河南滑县、武陟等12个地域的猪源肠球菌的亲缘关系，采用对其16S rDNA基因的RFLP分析、序列分析、及系统进化树的构建等方法，对这12株疑似猪源肠球菌进行了研究：结果显示：12株分离株均与肠球菌同源性最高，同源率达98.1％-100％;而与猪链球菌同源率最高才达85.5％，且进化树中，12株菌株均位居与猪链球菌并列的肠球菌主干分支中。HandⅢ，XbaⅠ，ECORⅠ分别对这12株球菌的16SrDNA-RFLP分析发现，它们在该片段上有限制性位点，但没有产生限制性片段长度多态性;而HinfI单酶切结果出现了限制性片段长度多态性，且12株分离株可分为两大rDNA图谱类群，与实际测序分析的酶切位点相一致，且找到鉴定肠球菌的-350bp的分子标记,说明所分离这12株球菌均是肠球菌，且不同地理种群已出现分化。

关键词：猪细菌病致病性肠球菌 16S rDNA基因 RFLP分析序列分析系统进化树

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不同PRRSV毒株间ORF1a基因密码子偏爱性差异分析

不同PRRSV毒株间ORF1a基因密码子偏爱性差异分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：招丽婵邓雨修王东东苏润环李春梅徐贵娟宋延华广东温氏食品集团有限公司温氏研究院广东新兴 527400

运用Codon W、ClustalX、TreeView软件及EMBOSS(TheEuropean Molecular Biology Open Software Suite)、CIMMiner在线分析软件对选取的29株PRRSV ORF1a基因进行密码子偏爱性聚类分析CAI、CBI、Fop、Nc、GC3s和GC含量、基因长度等相关性分析显示PRRSV各毒株编码的ORF1a基因密码子偏爱性各有差异,其中Lelystadvirus、LV4.2.1、VR-2332、RespPRRS MLV与国内分离的高致病性PRRSV变异株之间差异较大,密码子使用概率聚类分析表明CC-1、NVSL-97-7895、CH-1a、***4.2.1、Lelystad virus与高致病性PRRSV变异株距离较远,而国内分离株相互间的聚类距离则较接近,此结果与基于氨基酸序列比对构建的系统进化树图谱基本一致,由此可见,PRRSV病毒ORFla基因密码子使用偏爱性的差别与病毒的遗传多样性密切相关。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF1a基因密码子偏爱性聚类分析生物信息学遗传多样性

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猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒的分离与鉴定

猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒的分离与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王川庆陈陆杨霞董加才常洪涛王新卫河南农业大学禽病研究所郑州河南 450002

在临床综合诊断和PCR确诊的基础上，通过细胞培养技术，作者从7个发病猪场的病料中分离到TGE和PED混合感染的病毒株(HN-TGE-PED).细胞培养结果表明，在PK-15细胞、vero细胞上的多次传代和蚀斑克隆不能将二者分离开，两种病毒始终处于混... 详细信息

在临床综合诊断和PCR确诊的基础上，通过细胞培养技术，作者从7个发病猪场的病料中分离到TGE和PED混合感染的病毒株(HN-TGE-PED).细胞培养结果表明，在PK-15细胞、vero细胞上的多次传代和蚀斑克隆不能将二者分离开，两种病毒始终处于混合感染状态。随后分别对混合分离物HN-TGE-PED中的TGEV部分S基因和PEDV M基因进行了克隆、测序、分析，结果表明TGEVS基因同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.0％和97.6％，在进化关系中与四川分离株(DQ443743)之间的距离最近;PEDV M基因同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7％和97.0％，在进化关系中与同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间距离最近。

关键词：猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻细胞培养病毒分离基因克隆序列分析

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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青山西农业大学动物科技学院山西太谷 030801 江苏省农业科学院兽医研究所.农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室.国家兽用生物制品工程技术研究中心.江苏省生物兽药筛选服务中心江苏南京 210014

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体PB6(L-乳酸脱氢酶)全基因序列，设计合成了2对引物，建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测。结果显示，该培养物能扩增出427bp的目的条带。特... 详细信息

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体PB6(L-乳酸脱氢酶)全基因序列，设计合成了2对引物，建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测。结果显示，该培养物能扩增出427bp的目的条带。特异性试验结果表明：鸡毒支原体、猪絮状支原体、猪鼻支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型和猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组DNA或cDNA扩增结果均为阴性。该方法的敏感性高，最低可以检测出10个猪肺炎支原体。建立的套式PCR方法可以用于猪肺炎支原体的临床诊断检测和分子流行病学调查。

关键词：猪肺炎支原体套式PCR检测临床诊断流行病学分析

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猴源细小病毒的分离鉴定

猴源细小病毒的分离鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：杨松涛王淑君冯浩张仁舟曾林夏志平邹啸环王承宇连海孙兆增孟轲音王泽夏咸柱军事医学科学院军事兽医研究所军事医学科学院实验动物中心

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动... 详细信息

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动物感染实验等方法对分离病毒进行了系统鉴定。结果F81细胞盲传三代后发生细小病毒样细胞病变,此分离病毒对猪红细胞的血凝效价为1:512;用845bp细小病毒通用引物进行PCR检测结果阳性;免疫组化检测肠绒毛上皮细胞呈细小病毒阳性反应;电镜负染和超薄切片观察见典型的细小病毒样粒子;直接免疫荧光检测结果阳性。用该病毒实验感染5只家猫,7日后相继发病死亡。序列分析结果表明,10个关键氨基酸位点中有8个与FPV相同,有2个与CPV相同。认为该病毒分离株为FPV变异株。该病毒是如何跨种传播给猴并发生致病性突变的尚需进一步研究。

关键词：细小病毒 FPV 猴分离

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共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定

共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：云涛余斌陈柳倪征华炯钢王根荣张彦明刘光清浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 西北农林科技大学动医学院杨凌712100 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所杭州310021 嘉兴市秀城区畜牧兽医站嘉兴 314005 西北农林科技大学动医学院杨凌712100

本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白... 详细信息

本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势作用。分别利用RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot等方法,对获得的重组腺病毒(rAd-GP5-2A-M)进行检测,结果均证明GP5-2A-M蛋白不仅获得了正确表达,而且能自我裂解为GP5和M蛋白。上述研究表明,在GP5和M蛋白之间插入具有自我裂解功能的FMDV2A策略是切实可行的,并为PRRSV多个蛋白的共表达奠定了基础,也为其它病毒的基因工程疫苗研制提供了全新的思路。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白重组腺病毒分离鉴定

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兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：陈柳刘光清倪征余斌云涛华炯钢李双茂浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室浙江杭州 310021

目的：VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus，RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP 12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体，进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。方法：首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋... 详细信息

目的：VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus，RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP 12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体，进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。方法：首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋白，然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP12的抗血清。再利用该抗体对转染pEGFP-VP12的BHK-21细胞进行检测，以研究VP12蛋白在细胞内的定位情况。结果：pEGFP-VP12转染BHK-21细胞后，不仅VP12蛋白得到了成功表达，而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断Vp12在细胞内的定位。检测结果显示，VP12蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质。结论：成功构建了VP12与绿色荧光蛋白融合的表达载体，并在真核细胞内实现了表达，通过检测荧光蛋白，发现VP12主要在细胞质内表达并分布，本研究为深入探讨VP12的生物学功能奠定了基础。

关键词：兔病毒性出血症 RHDV病毒次结构蛋白细胞内定位

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