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- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学
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主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
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22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
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19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测
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17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

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1,247 篇 中文
53 篇 英文

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猪链球菌1、7、9型多重PCR诊断方法的建立及初步应用

猪链球菌1、7、9型多重PCR诊断方法的建立及初步应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张健闫若潜吴志明盛敏王英华拜廷阳河南省动物疫病预防控制中心河南郑州 450008 周口市动物疫病预防控制中心河南周口 466000

为了建立猪链球菌(Streptococcus suis,SS)1、7、9型(SS1、SS7、SS9)的快速鉴别诊断和分型方法，本研究根据GenBank已登录的SS1型型特异性的CPSll基因、7型CPS7H基因、9型CPS9H基因设计引物，以标准SS1、SS7、SS9株基因组DNA为模板，建... 详细信息

为了建立猪链球菌(Streptococcus suis,SS)1、7、9型(SS1、SS7、SS9)的快速鉴别诊断和分型方法，本研究根据GenBank已登录的SS1型型特异性的CPSll基因、7型CPS7H基因、9型CPS9H基因设计引物，以标准SS1、SS7、SS9株基因组DNA为模板，建立了SS1、SS7和SS9的多重PCR检测方法，并进行了特异性、敏感性和重复性试验：利用所建立的多重PCR检测方法对11份猪链球菌的临床分离纯化菌株进行了的应用检测。结果表明成功SS1、SS7和SS9的多重PCR检测方法，该方法的检测灵敏度可达100个CFU，特异性和重复性好;利用多重PCR检测方法对11份猪链球菌临床分离纯化菌株检测结果表明：11份样品中有3份样品为SS9阳性、2份样品为SS71、份样品为SS1阳性阳性。本研究为临床上SS1、SS7、SS9的快速鉴别诊断提供了一种新方法。

关键词：猪链球菌菌种鉴定血清学分型临床诊断多重PCR检测

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2003～2008年湖南省猪圆环病毒2型分子流行研究

2003～2008年湖南省猪圆环病毒2型分子流行研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘道新邱伯根鲁杏华张志吴发兴何世成谈志祥郭成玲张燕霞邱立新范仲鑫唐小明黄建龙湖南省动物疫病预防控制中心湖南省兽医局中国动物卫生与流行病学中心湖南省动物卫生监督所

从2003年～2008年湖南省疑似PMWS病死猪组织中分离获得7株猪2型圆环病毒(PCV2),分别命名为:HuN-03、HuN-05、HuN-0601、HuN-0602、HuN-0701 HuN-0702、HuN-08。用PCR的方法对这7株病毒进行进行全基因扩增及测序分析,结果显示,7株PCV2分... 详细信息

从2003年～2008年湖南省疑似PMWS病死猪组织中分离获得7株猪2型圆环病毒(PCV2),分别命名为:HuN-03、HuN-05、HuN-0601、HuN-0602、HuN-0701 HuN-0702、HuN-08。用PCR的方法对这7株病毒进行进行全基因扩增及测序分析,结果显示,7株PCV2分离株基因组全长均为1767nt,有典型的PCV2基因组结构;病毒毒株间同源性在94.9～99.3%之间,与Genbank中的13株PCV2基因组同源性在93.6～99.7%之间,与2株PCV1亲缘关系较远,同源性只有75.7～76.5%;在遗传演化关系上,7株分离株分属4个进化方向,HuN-0601可能是外来毒株,HuN-03在一个独立的进化方向内,可能是其它5株病毒的母源性毒株,其它5株病毒可能代表了两个遗传种群,一个是国际流行稳定毒株,一个是国内地域性流行毒株。

关键词：湖南猪2型圆环病毒分子流行病学

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H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研究

H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研...

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：尹燕博张毅于明科李明义徐守振王建琳李吉达许江涛刘兴彩孙婷婷郭妍妍韩丽敏青岛农业大学动物科技学院中国农业大学动物医学院美国加州大学戴维斯分校中国动物卫生与流行病中心青岛澳兰百特生物工程有限公司

本试验从全国各地分离到的,已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中,根据其HA蛋白氨基酸序列的差异,挑选出有代表性的12个毒株,比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清,通过交叉HI试验,计算出不同毒株... 详细信息

本试验从全国各地分离到的,已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中,根据其HA蛋白氨基酸序列的差异,挑选出有代表性的12个毒株,比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清,通过交叉HI试验,计算出不同毒株间的抗原相关系数。通过对HA蛋白氨基酸序列的分析及抗原相关性的分析,我们发现这些毒株在抗原位点处,在第183位和188位氨基酸有所差异。通过对HA蛋白氨基酸序列差异性和抗原性差异的分析我们发现,二者呈正相关。HA蛋白氨基酸序列差异达到一定程度却可以造成抗原性的改变,当HA蛋白氨基酸序列差异大于7%时,抗原性的改变比较明显,而当HA蛋白氨基酸序列差异小于3.6%时,抗原性无明显差异。

关键词： H9N2 AIV HA蛋白抗原性相关性差异

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘华雷郑东霞赵云玲孙承英王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心山东青岛 266032 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 天津市畜牧兽医研究所天津 300112

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年-2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年-2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析 M2蛋白基因病毒鉴定

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3株相隔5到10年的H9N2亚型禽流感病毒HA基因差异分析

3株相隔5到10年的H9N2亚型禽流感病毒HA基因差异分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王金良沈志强李峰刘吉山山东省滨州畜牧兽医研究院山东绿都生物科技有限公司

对3株同一地区相隔5到10年的H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因进行扩增、测序,通过序列及关键位点分析,研究H9N2亚型流感病毒变异情况。分析测序结果表明:所扩增的HA基因全长1683 bp,编码560个氨基酸;3个毒株的裂解位点的氨基酸序列均... 详细信息

对3株同一地区相隔5到10年的H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因进行扩增、测序,通过序列及关键位点分析,研究H9N2亚型流感病毒变异情况。分析测序结果表明:所扩增的HA基因全长1683 bp,编码560个氨基酸;3个毒株的裂解位点的氨基酸序列均为R-S-S-R,属于低致病力毒株;分离株氨基酸推倒序列分析发现均存在7个相同的潜在糖基化位点,受体结合位点为禽源性流感病毒特异性序列,左侧壁氨基酸均为NGQQG,右侧壁均为GTSKA。与一些参考毒株的HA基因序列进行比较分析表明分离株与参考株核苷酸与氨基酸同源率均较高,仅有一些非关键位点突变,进化树分析表明3个毒株均属欧亚种系,与A/duck/Hong Kong/Y280/97代表株亲源关系较近。从分子水平证明了H9N2亚型禽流感病毒未发生较大变异,98年的疫苗毒株制备的疫苗能够对当前流行的毒株提供抵抗力.

关键词：禽流感病毒血凝素基因序列分析

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*** LTb与PRRSV gp5融合基因原核表达及小鼠免疫效果研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘焕王一成徐丽华张存浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳... 详细信息

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的蛋白大小为26KD.经WesternBlotting分析,表达蛋白均能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应.为了比较猪繁殖与呼吸综合症ORF5基因的原核表达蛋白gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白的免疫效果.将表达产物gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白免疫6-8周龄ICR小鼠,并设对照组,用间接ELISA法和MTT法检测小鼠血清中特异性抗体水平以及脾脏中T,B淋巴细胞增殖功能.结果gp5蛋白以肌肉注射途径免疫效果较好;三免后抗体达到较高水平,其中LTb-gp5 IM与gp5乳化组之间差异不显著,而这两组与gp5 IM差异显著;LTb-gp5 IM、gp5乳化组和gp5 IM均能够诱导脾脏T,B淋巴细胞增殖.

关键词： LTb PRRSV gp5 克隆表达免疫

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表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：鲁会军金宁一霍晓伟于长勇韩松胡博张丹金扩世军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 吉林大学畜牧兽医学院长春 130062

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经***和xba I双酶切后连接构建真核表达质粒pVAX Ⅰ-P1-2A,将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进行... 详细信息

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经***和xba I双酶切后连接构建真核表达质粒pVAX Ⅰ-P1-2A,将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γ ELISPOT试验,结果酶切结果与预期目的条带大小相符;荧光结果中经pVAX Ⅰ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光,说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达;小鼠免疫结果表明,用免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫,并且T淋巴细胞增殖教和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05).间接ELISA试验表明,在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。构建的真核表达质粒pVAX Ⅰ-P1-2A在小鼠免疫试验中重组质粒试验组能能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。

关键词： Asia1型口蹄疫病毒 P1-2A基因核酸疫苗免疫试验血清特异性

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B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁俊鹏田新贵罗满林李海涛周志超周荣华南农业大学兽医学院广州市儿童医院中心实验室

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化... 详细信息

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化的pSK-CMV-HA和经RsrⅡ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组,AsiS I酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞,进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdv3△E3-HA,并且通过病变观察、扫描电镜、RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测.结果:将HA基因克隆入psK-CMV获得重组穿梭质粒psK-CMV-HA,线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdv3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA,线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达.结论:成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA,为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据。

关键词： B型流感病毒 HA基因重组腺病毒

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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青山西农业大学动物科技学院江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省生物兽药筛选服务中心

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试... 详细信息

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试验结果表明:鸡毒支原体、猪絮状支原体、猪鼻支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型和猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组DNA或cDNA扩增结果均为阴性.该方法的敏感性高,最低可以检测出10个猪肺炎支原体。建立的套式PCR方法可以用于猪肺炎支原体的临床诊断检测和分子流行病学调查。

关键词：猪肺炎支原体 P36 套式PCR

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猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：司兴奎张济培陈建红顾万军马春全佛山科学技术学院广东省高校预防兽医学重点实验室

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流... 详细信息

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流式细胞术及血常规分析.结果表明,在PCV2感染后2周至5周间,A组白细胞含量均高于PA组,随后PA组白细胞恢复至与A组略高的正常水平;在整个试验中,除接种猪伪狂犬疫苗后1和9周(WPI)外的所有时相PA组的淋巴细胞含量均略高于A组;PCV2感染后可使记忆/激活Th细胞数量略有升高,幼稚型Th细胞含量的下降;PCV2感染后2-7周PA组Tc细胞均高于A组,在9WPI PA组Tc细胞数量显著下降(P<0.05);除9WPI外,A组的S/N值均低于PA组.结果提示,PCV2感染看降低机体产生针对PRV gB特异性抗体水平,且在一定程度上降低了幼稚型Th细胞及Tc细胞含量.

关键词：猪圆环病毒2型猪伪狂犬疫苗免疫应答阻断ELISA 流式细胞术

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