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- 1 篇 公共管理
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- 2 篇 教育学
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主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
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38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
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22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
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18 篇 病毒检测
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17 篇 猪流感病毒
17 篇 克隆
17 篇 副猪嗜血杆菌

机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
54 篇 广西兽医研究所
48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

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1,247 篇 中文
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11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张冠群马静云何晓明王连想朱玲毛燕毕英佐华南农业大学动物科学学院广东广州 510642

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的... 详细信息

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的氨基酸序列相似性在97.0％-99.5％,与国内外参考株推导的氨基酸序列的相似性在85.1％-99.0％,11个毒株处于同一个大分支下,又分属不同的小分支,与XH-GD、JXA1等遗传距离较近,与YN01、CC-1、MLV、VR-2332的遗传距离较远,与HL的遗传距离最远。11个毒株ORF5氨基酸序列在两端的高变区和中间的较保守区均有不同程度的突变,均存在位置和序列均一致的4个潜在糖基化位点;抗原表位分析结果显示,在不同的表位分别有不同位点的点突变,但这些位点的突变,可能不会改变该区域的疏水性能,不会引起抗原表位的变化。

关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒 ORF5基因序列分析抗原表位疏水性能

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猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张小波左玉柱刘媛范京惠李潭清李建辉孙彦新河北农业大学动物科技学院河北保定 071001

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列，设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物。利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因，并将其克隆到pMD18-T载体中，进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定，将获得的M基因片段定向亚... 详细信息

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列，设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物。利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因，并将其克隆到pMD18-T载体中，进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定，将获得的M基因片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中，构建了重组原核表达质粒pGEX-6P-M，转化Rossetta(DE3)感受态细胞，用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白。结果表明，从TGEV HB06株扩增得到了M基因片段，该基因全长789bp，编码262个氨基酸，与TS株、Purdue-115株、TFI株和H16株的M基因同源性分别为97％、99％，96％和97％。SDS-PAGE电泳结果显示，重组表达质粒获得了约56Kda的目的带，其中M蛋白的分子质量约为30kDa，与预期的结果一致，并且表达产物主要以包涵体的形式存在;Sestern-blot分析表明，表达的M重组蛋白可以被免源抗TGEV阳性血清识别;试验结果证明，TGEV的M基因高度保守，在大肠杆菌表达系统内成功表达了TGEVM蛋白。

关键词：猪传染性胃肠炎 TGEV病毒 M蛋白基因克隆原核表达

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新型鸭肝炎病毒GD株基因组序列分析

新型鸭肝炎病毒GD株基因组序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：袁率珍李虹姜畔张兵范小舟范书才中国兽医药品监察所北京 100081 四川大学华西公共卫生学院成都 610041

本研究对1999年从我国广东地区分离到的一株与1型鸭肝炎病毒无抗原交叉性的新型鸭肝炎病毒GD株全基因组序列测定的结果进行了分析。结果表明，基因组全长7786nt，包括652nt的5’UTR，6756nt的ORF，365nt的3’UTR和12nt的poly(A)尾。ORF... 详细信息

本研究对1999年从我国广东地区分离到的一株与1型鸭肝炎病毒无抗原交叉性的新型鸭肝炎病毒GD株全基因组序列测定的结果进行了分析。结果表明，基因组全长7786nt，包括652nt的5’UTR，6756nt的ORF，365nt的3’UTR和12nt的poly(A)尾。ORF编码一个2251aa的聚合蛋白，经3Cpro切割作用分为3个结构蛋白VP0/VP3/VP1和8个非结构蛋白2Al/2A2/2B，2C/3A/3B/3C/3D。GD株基因组核苷酸序列与DHV-1、台湾地区新型DHV、韩国新型DHV和我国广西分离的DHVG株的同源性分别为72.7-73.2％、78.2-78.3％、96.4-96.7％和99.2％。VP1蛋白氨基酸序列的同源性分别为76.9％、80.1-80.5％、92.9-93.3％和98.7％。依据小RNA病毒科肠道病毒属血清型分型标准，GD株与韩国新型DHV和DHVG株属于同一血清型，而与DHV-1和台湾地区新型DHV属于不同的血清型。

关键词：鸭肝炎病毒 GD株基因组序列血清型分型

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细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的比较

细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王玉红王红巧支海兵黄炯李黎薛英刘宏贺笋朱刚李延涛新疆天康畜牧生物技术股份有限公司乌鲁木齐 830000 中国兽医药品监察所北京 100081 新疆天康畜牧生物技术股份有限公司乌鲁木齐 830000 新疆畜牧科学院乌鲁木齐 830000

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案)，对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定，通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验，每头份(1ml)病... 详细信息

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案)，对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定，通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验，每头份(1ml)病毒含量均高于103TCID50，达到规程要求。在疫苗检验过程中，考虑规程中检验程序比较麻烦，历时较长(在试验比较顺利的情况下，一批苗最终得到结果至少花费8天)，并且还受到细胞质量等因素的影响，同时还对每批成品疫苗直接进行捕获ELISA(病毒不接种细胞)测定，对不同时期的病毒细胞液也同时作了大量的测定，以期从中找到一定的相关性，从而达到简化检验步骤，缩短检验时间的目的。结果显示：16个冻干疫苗样品，每个样品重复两次，两组数据的相关性r=0.9213;若再加16个病毒液样品，两组数据的相关性r=0.8751，这可能由于病毒液中有时可能有细胞，导致取样没有成品疫苗均匀的原因。通过两组数据的比较，可以认为直接用捕获ELISA法对成品苗检测是比较可行可靠的。

关键词：小反刍兽疫弱毒活疫苗细胞病变法免疫捕获ELISA法病毒含量

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5株流行性乙型脑炎病毒华东分离株NS1基因多态性研究

5株流行性乙型脑炎病毒华东分离株NS1基因多态性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鞠丽曹瑞兵吴鹏陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

流行性乙型脑炎是一种由乙型脑炎病毒引起的经蚊虫传播的人畜共患病,常导致猪的繁殖障碍.流行性乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原.NS1不含有中和抗原表位,但可诱导补体依赖性溶细胞反应,是一种重要的免... 详细信息

流行性乙型脑炎是一种由乙型脑炎病毒引起的经蚊虫传播的人畜共患病,常导致猪的繁殖障碍.流行性乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原.NS1不含有中和抗原表位,但可诱导补体依赖性溶细胞反应,是一种重要的免疫保护性抗原.为了探明乙型脑炎病毒流行株的NS1基因多态性,本研究通过RT-PCR扩增了5株2007-2008年间在华东地区猪场蚊虫分离的流行性乙型脑炎病毒的NS1基因,并对其测序结果进行了进化分析.结果显示,与疫苗株SA 14-14-2相比,5株JEV华东分离株的NS1基因在16个位点存在碱基的多态性,但编码氨基酸主要在4个位点发生变异,集中位于NS1蛋白的C端.由于JEV NS1的C端是其主要免疫抗原区域,JEV流行毒株NS1的这四个氨基酸的变异是否改变其抗原性值得进一步深入研究.

关键词：流行性乙型脑炎病毒 NS1基因基因克隆序列分析

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IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭自成王红宁阳泰高荣汪雪李玉玲管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定... 详细信息

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定特异性IgG抗体,血清中和抗体,CD4+,CD8+T细胞含量为免疫指标,并进行攻毒实验.结果表明,采用DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫,在加强免疫后4周CD4+、CD8+T细胞含量显著升高(P<0.05),特异性IgG抗体,血清中和抗体与灭活疫苗组无显著差异(P>0.05).用剂量为103EID50的IBV M41株病毒攻毒,保护率达86.7%,高于单独免疫灭活疫苗组(80%)和单独免疫DNA疫苗组(66.7%).可见,采用IBV N基因DNA疫苗首免,灭活疫苗加强免疫具免疫增强效果.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫

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猪圆环病毒2型ORF2与猪γ-干扰素基因的重组腺病毒转移载体的构建

猪圆环病毒2型ORF2与猪γ-干扰素基因的重组腺病毒转移载体的构建

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘根梅陈瑞爱韩静芳罗满林华南农业大学广东大华农动物保健品股份有限公司

以重组腺病毒转移载体P-ORF2,P-γ-IFN为模板,应用Primer5.0设计了2对引物,其中一对引物P1,P2用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增,另一对引物P3,P4则用于γ-IFN基因的扩增。再以所扩增的2段基因为模板,P1,P4为引物扩增融合基因ORF2-γ-IF... 详细信息

以重组腺病毒转移载体P-ORF2,P-γ-IFN为模板,应用Primer5.0设计了2对引物,其中一对引物P1,P2用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增,另一对引物P3,P4则用于γ-IFN基因的扩增。再以所扩增的2段基因为模板,P1,P4为引物扩增融合基因ORF2-γ-IFN。将所扩增的串联基因连接PMD-18T-Simple Vector,经PCR方法和限制性内切酶分析鉴定该串联基因已成功转入重组质粒中(命为PMD-ORF2-γ-IFN)。腺病毒转移载体Pshuttle-CMV和PMD-ORF2-γ-IFN经双酶切后再切胶回收并连接后,经PCR方法和限制性内切酶酶切法及测序证明两基因已成功连接,由此获得了重组腺病毒转移载体Pshuttle-CMV-ORF2-γ-IFN。重组腺病毒转移载体经PmeI酶切线性化后,在BJ5173细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAD-CMV-ORF2-γ-IFN.经PCR方法和PacI酶切方法及测序鉴定表明该重组腺病毒载体已得到成功构建。

关键词： ORF2 猪γ-干扰素转移载体重组腺病毒

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猴源细小病毒的分离鉴定

猴源细小病毒的分离鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：杨松涛孙兆增孟轲音王泽夏成柱王淑君冯浩张仁舟曾林夏志平邹啸环王承宇连海军事医学科学院军事兽医研究所长春 130062 军事医学科学院实验动物中心北京 100071

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡，临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎.采集发病猴肠内容物，通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动... 详细信息

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡，临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎.采集发病猴肠内容物，通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动物感染实验等方法对分离病毒进行了系统鉴定。结果F81细胞盲传三代后发生细小病毒样细胞病变，此分离病毒对猪红细胞的血凝效价为1：512;用845bp细小病毒通用引物进行PCR检测结果阳性;免疫组化检测肠绒毛上皮细胞呈细小病毒阳性反应;电镜负染和超薄切片观察见典型的细小病毒样粒子：直接免疫荧光检测结果阳性。用该病毒实验感染5只家猫，7日后相继发病死亡。序列分析结果表明， 10个关键氨基酸位点中有8个与FPV相同，有2个与CPV相同。认为该病毒分离株为FPV变异株。该病毒是如何跨种传播给猴并发生致病性突变的尚需进一步研究。

关键词：猴传染性腹泻细小病毒分离鉴定细胞病变

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47株H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白基因流行演化规律的研究

47株H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白基因流行演化规律的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张毅尹燕博王建琳于明科李明义韩丽敏崔尚金陈桂来青岛农业大学动物科技学院美国加州大学戴维斯分校中国动物卫生与流行病中心青岛澳兰百特生物工程有限公司中国农业科学院哈尔滨兽医研究所西南大学动物科技学院

本试验对1998-2008年覆盖我国东北、华北、华东、华南、西南及华中等地区的47株H9N2亚型禽流感分离株进行了HA蛋白全基因序列扩增及测序.研究发现:在中国犬陆流行的H9N2亚型禽流感既有欧亚分支的毒株也有美洲分支的毒株,而且我国大陆地... 详细信息

本试验对1998-2008年覆盖我国东北、华北、华东、华南、西南及华中等地区的47株H9N2亚型禽流感分离株进行了HA蛋白全基因序列扩增及测序.研究发现:在中国犬陆流行的H9N2亚型禽流感既有欧亚分支的毒株也有美洲分支的毒株,而且我国大陆地区流行的欧亚分支毒株只集中在A/Duck/Hong Kong/Y280/97(H9N2)亚分支中.中国大陆地区欧亚分支株的分离株亲源关系在86.8%-99.9%之间,美洲分支毒株与欧亚分支株的亲缘性在80.7%-89.1%之间。这些分离株的裂解位点氨基酸序列均符合低致病性禽流感的氨基酸序列特征.有部分毒株在218.220aa处缺少潜在的糖基化位点,HA蛋白的受体结合位点的氨基酸序列除198位变异比较大外,其余位置均比较保守.我国部分地区流行H9N2禽流感呈现一定的规律性.

关键词： H9N2亚型禽流感 HA基因遗传进化序列分析

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抗鸡NDV囊膜糖蛋白单抗的制备与抗原表位鉴定

抗鸡NDV囊膜糖蛋白单抗的制备与抗原表位鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：赵磊王旋龚争孙涛丁维民张训海家禽疫病防控监测安徽省重点实验室凤阳安徽 233100

将鸡新城疫病毒(NDV)WF00C株活毒以点眼途径首免BALB/c小鼠，采用超滤技术提纯其完整病毒粒子作为加强免疫原，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合，筛选鉴定出了2株单抗，分别命名为186和4E11。其腹水效价分别为1：3... 详细信息

将鸡新城疫病毒(NDV)WF00C株活毒以点眼途径首免BALB/c小鼠，采用超滤技术提纯其完整病毒粒子作为加强免疫原，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合，筛选鉴定出了2株单抗，分别命名为186和4E11。其腹水效价分别为1：3.2×105和1：1.6×105，对WF00C株、Lasota疫苗株、WF00D株和WF00G株的血凝抑制(HI)效价均在212-15，而与NDV-P/Sdong/1/00株和禽流感病毒H5、H9亚型的标准血凝抗原均无反应性。免疫印迹分析结果显示：1B6没有出现条带，可确定为构象性表位识别单抗，而4E11能够结合血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白：通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达短肽GST-HN14的免疫印迹分析结果显示，单抗4E11识别的表位在HN蛋白上aa343-355区域内，并经与P/Sdon/1/00等NDV毒株HN氨基酸序列进一步比对，可确定其识别的关键氨基酸为aa347位的谷氨酸和，或aa349位的天冬氨酸。

关键词：鸡新城疫病毒超滤技术囊膜糖蛋白单克隆抗体抗原表位鉴定

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