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- 2 篇 教育学
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主题

55 篇 原核表达
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38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
28 篇 临床诊断
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21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
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17 篇 猪流感病毒
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机构

63 篇 中国农业大学
59 篇 华南农业大学
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48 篇 吉林大学
47 篇 军事医学科学院军...
40 篇 广西大学
40 篇 四川农业大学
40 篇 河南农业大学
36 篇 南京农业大学
36 篇 山东农业大学
34 篇 华中农业大学
30 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
25 篇 河南科技大学
22 篇 云南农业大学
19 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 南京天邦生物科技...

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

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1,247 篇 中文
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猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：谢彬袁洁袁书智白安斌黄红梅吴健敏广西兽医研究所广西南宁 530001 惠朋动物药业有限责任公司广西南宁 530001 广东省农业科学院兽医研究所广东广州 510640 惠朋动物药业有限责任公司广西南宁 530001 广西兽医研究所广西南宁 530001

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌，呈四联状或成对排列，在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈。经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析，确定... 详细信息

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌，呈四联状或成对排列，在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈。经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析，确定这两株革兰阳性球菌为正常情况下非致病性绿色气球菌，分别命名为GDQY-1、GXBL-1(登录号分别为：GQ161096;GQ161097)。经系统发育分析表明，GDQY-1、GXBL-1菌株与绿色气球菌15MS(登录号：EU075039.1)同源性最高，分别达到99.4％和98.7％。药敏试验结果表明，这2株绿色气球菌除了对新霉素、氟哌酸、恩诺沙星、菌必治、环丙沙星等5种药物高度敏感外，对大部分抗菌素均不敏感。绿色气球菌为条件性致病菌，广泛分布于自然界，一般情况下不致病。近年来由于免疫抑制剂的广泛应用、抗菌药物滥用增加，该菌在人类临床上引起严重感染的报道不断增多，但从发病猪膝关节积液中分离到为首次报道。

关键词：猪病防治绿色气球菌分离鉴定药敏特性

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传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性的研究

传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：宣春玲王贵平李春玲罗满林贾爱卿广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室华南农业大学兽医学院

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失... 详细信息

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失基因,根据APP 1型菌apx基因组序列,利用软件设计分别扩增apxⅠCA上下游同源臂以及apxⅡCA上下游同源臂引物,构建重组自杀转移质粒,将该重组自杀转移质粒先后转移到亲本菌APP259后,利用同源重组筛选到基因缺失突变株。并对该重组菌株主要生物学特性,如溶血性、对小鼠的致病力以及免疫保护作用进行研究。【结果】经鉴定表明目的基因已经丢失、APP95基因缺失突变菌株丧失对绵羊血的溶血活性,毒力显著下降,并对免疫小鼠具有良好的安全性。免疫保护性实验表明,用该菌株免疫小鼠后,不仅对同血清型菌株的再次攻击保护率达到85%,对异种血清型菌株(7型)的攻击保护率达到75%。【结论】成功获得了apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株,可作为预防APP感染的疫苗候选株,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失突变弱毒疫苗

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猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘春生王新娟徐耀辉杨霞陈陆王川庆河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 郑州牧业高等专科学校河南郑州450002

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析，为进一步研究其功能打下基础。以zKHY的基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段，克隆于pMD-18T载体，构建成载体pMD-18T-gdh，转化宿主菌DH5a中进行筛... 详细信息

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析，为进一步研究其功能打下基础。以zKHY的基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段，克隆于pMD-18T载体，构建成载体pMD-18T-gdh，转化宿主菌DH5a中进行筛选鉴定和序列测定。测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。成功地克隆了猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因，序列分析显示ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有紧密的亲缘关系，核酸序列与2、7、9几个主要致病血清型的同源性在97.2％～98.4％，其中与2型菌株同源性在97.2％-97.3％;与7型菌株在98.4％;与9型在97.6％。其编码的氨基酸序列同源性则更高，与GenBank中已收录的序列同源性在98.9％以上。该分离株可能是属于2，7，9型之外的其它致病的血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守，可以进行表达，进行免疫学方面的相关研究。

关键词：猪链球菌 ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因克隆序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研究

H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：尹燕博孙婷婷郭妍妍韩丽敏张毅于明科李明义徐守振王建琳李吉达许江涛刘兴彩青岛农业大学动物科技学院山东青岛 266109 青岛澳兰百特生物工程有限公司山东青岛 266101 中国农业大学动物医学院北京 100094 美国加州大学戴维斯分校加利福尼亚州戴维斯 CA95616 中国动物卫生与流行病中心山东青岛 266032

本试验从全国各地分离到的，已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中，根据其HA蛋白氨基酸序列的差异，挑选出有代表性的12个毒株，比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清，通过交叉HI试验，计算出不... 详细信息

本试验从全国各地分离到的，已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中，根据其HA蛋白氨基酸序列的差异，挑选出有代表性的12个毒株，比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清，通过交叉HI试验，计算出不同毒株间的抗原相关系数。通过对HA蛋白氨基酸序列的分析及抗原相关性的分析，我们发现这些毒株在抗原位点处，在第183位和188位氨基酸有所差异。通过对HA蛋白氨基酸序列差异性和抗原性差异的分析我们发现，二者呈正相关。HA蛋白氨基酸序列差异达到一定程度却可以造成抗原性的改变，当HA蛋白氨基酸序列差异大于7％时，抗原性的改变比较明显，而当HA蛋白氨基酸序列差异小于3.6％时，抗原性无明显差异。

关键词： HA蛋白抗原性禽流感病毒 H9N2亚型氨基酸序列

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猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘大伟张小飞胡来根薛家宾尹秀凤毛火云南京天邦生物科技有限公司江苏南京211102 安徽农业大学安徽合肥230036 江苏省农业科学院江苏南京210014 南京天邦生物科技有限公司江苏南京211102 南京天邦生物科技有限公司江苏南京211102

在猪瘟兔化弱毒株较保守的EO基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法。结果表明：本方法检测的最低拷贝数为3.84持贝/μL,线性范围是107-100;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、... 详细信息

在猪瘟兔化弱毒株较保守的EO基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法。结果表明：本方法检测的最低拷贝数为3.84持贝/μL,线性范围是107-100;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻(BVDV)作为模板进行扩增,未出现阳性信号;试验组内变异系数1.05％-1.84％,组间变异系数为3.70％-5.43％,对32批猪瘟兔化弱毒细胞培养抗原样品进行定量检测,同时用兔定型热反应法测定兔体感染量(rabbit infection dose,RID)进行比较,两者有较好的相关性。本方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好的优点,初步应用表明对猪瘟疫苗生产配制及成品检验具有指导作用。

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量PCR 定量检测相关性分析

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2008年8省11株PRRS病毒分离株NSP2、ORF5、ORF7基因序列分析

2008年8省11株PRRS病毒分离株NSP2、ORF5、ORF7基因序列分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：李吉达尹燕博孙亭亭张毅刘兴彩韩丽敏郭妍妍青岛农业大学动物科技学院山东青岛 266109 青岛澳兰百特生物工程有限公司山东青岛 266101 中国农业大学动物医学院北京 100094

本实验室自2008年1月到2008年11月,对辽宁、吉林、河北、山东、河南、江苏、浙江、广西、等省蓝耳病疫情进行跟踪调查,共连续分离和鉴定出11株PRRS病毒。应用RT-PCR的方法对这11株病毒的NSP2基因、ORF5基因、ORF7基因进行了全基因序列... 详细信息

本实验室自2008年1月到2008年11月,对辽宁、吉林、河北、山东、河南、江苏、浙江、广西、等省蓝耳病疫情进行跟踪调查,共连续分离和鉴定出11株PRRS病毒。应用RT-PCR的方法对这11株病毒的NSP2基因、ORF5基因、ORF7基因进行了全基因序列扩增、克隆测序,并利用分子生物学软件对测序结果进行了序列比时。通过对序列的同源性及遗传发育进化分析,我们发现本次试验分离到的11株病毒同属于美洲株,并且与国内高致病性JXA1株高度同源。这些毒株均在NSP2基因处缺失了90个碱基,表明2008年的PRRSV流行株仍然以基因缺失株为主;我们发现这11株病毒在E蛋白的信号肽区以及跨膜区有着较为一致的突变,结合临床中传统PRRSV疫苗株对于当前流行毒株免疫保护性差的事实,由此提示或许应当从病原上寻找原因;分离株N蛋白Pat7基序的突变是一致的,这是否会影响到PRRSV的核定位,还需要进一步的研究去验证。

关键词：蓝耳病病毒序列分析分离鉴定遗传发育基因测序

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抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：廖丈军覃绍敏吴健敏王仰杰白安斌覃建飞广西大学动物科学技术学院南宁广西 530005 广西兽医研究所南宁广西530001 广西兽医研究所南宁广西530001 广西兽医研究所南宁广西530001 广西大学动物科学技术学院南宁广西 530005

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8SCFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分... 详细信息

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8SCFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E8kgE,经BamHI和EcoRI双酶切处理,纯化后,克隆至BamHI和EcoRI双酶切处理的表达载体pET-Trx中,构建了原核表达载体pET-Trx-2E8kgE：将pET-Trx-2E8kgE转化至BL2lplyss中,在IPTG的诱导下表达具有双功能的融合蛋白,经过SDS-PAGE和Western-blot检测;结果表明,重组菌BL2lplyss表达出约60.1kDa的目的蛋白,与猪伪狂犬标准阳性血清发生特异性反应。红细胞凝集试验证实：2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与PRV抗体反应,具有双功能特性。

关键词：猪伪狂犬病毒 gE基因原核表达重叠延伸PCR法 2E8kgE融合蛋白双功能特性

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猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘春生王新娟徐耀辉杨霞陈陆王川庆河南农业大学牧医工程学院郑州牧业高等专科学校

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,为进一步研究其功能打下基础.以ZKHY的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,构建成载体pMD-18T-gdh,转化宿主菌DH5α中进行筛选鉴定... 详细信息

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,为进一步研究其功能打下基础.以ZKHY的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,构建成载体pMD-18T-gdh,转化宿主菌DH5α中进行筛选鉴定和序列测定.测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析.成功地克隆了猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因,序列分析显示ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有紧密的亲缘关系,核酸序列与2、7、9几个主要致病血清型的同源性在97.2%～98.4%,其中与2型菌株同源性在97.2%～97.3%;与7型菌株在98.4%;与9型在97.6%.其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。该分离株可能是属于2,7,9型之外的其它致病的血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达,进行免疫学方面的相关研究。

关键词：猪链球菌谷氨酸脱氢酶基因克隆序列分析

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抗鸡NDV囊膜糖蛋白单抗的制备与抗原表位鉴定

抗鸡NDV囊膜糖蛋白单抗的制备与抗原表位鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：赵磊王旋龚争孙涛丁维民张训海家禽疫病防控监测安徽省重点实验室

将鸡新城疫病毒（NDV）WFC株活毒以点眼途径首免BALB/c小鼠,采用超滤技术提纯其完整病毒粒子作为加强免疫原,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,筛选鉴定出了2株单抗,分别命名为1B6和4E11。其腹水效价分别为1:3.2... 详细信息

将鸡新城疫病毒（NDV）WFC株活毒以点眼途径首免BALB/c小鼠,采用超滤技术提纯其完整病毒粒子作为加强免疫原,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,筛选鉴定出了2株单抗,分别命名为1B6和4E11。其腹水效价分别为1:3.2×10～5和1:1.6×10～5,对WFC株、LaSota疫苗株、WFD株和WFG株的血凝抑制（HI）效价均在2,而与NDV-P/Sdong/1/00株和禽流感病毒H5、H9亚型的标准血凝抗原均无反应性.免疫印迹分析结果显示:1B6没有出现条带,可确定为构象性表位识别单抗,而4E11能够结合血凝素-神经氨酸酶（HN）蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶（GST）融合表达短肽GST-HN14的免疫印迹分析结果显示,单抗4E11识别的表位在HN蛋白上aa343-355区域内,并经与P/Sdong/1/00等NDV毒株HN氨基酸序列进一步比对,可确定其识别的关键氨基酸为aa347位的谷氨酸和/或aa349位的天冬氨酸。

关键词： NDV 新城疫病毒抗原表位囊膜糖蛋白

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猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒实验中免疫保护性研究

猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒实验中免疫保护性研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张宁侯韶毅陈云霞韦英益李茂宁肖爱欢兰家暖廖承球谢丽华黄伟坚张远波刘芳禤雄标高永锐卢桂娟陆有飞曾晓飞广西大学动物科学技术学院梧州动物疫病预防控制中心广西兽医研究所广西丽原生物股份有限公司

猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病—断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、发育迟缓及皮肤苍白等为主要特征.PCV-2广泛存在于世界很... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病—断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、发育迟缓及皮肤苍白等为主要特征.PCV-2广泛存在于世界很多的养猪国家和地区。到目前为止,还没有有效的疫苗来预防此疾病,因此PCV-2成了近几年国内外兽医领域关注的研究热点之一。研究证实:猪圆环病毒2型的Cap蛋白能够诱导猪体产生特异性抗体,产生免疫保护作用.本研究用克隆到的PCV-2 GXWZ-1株的ORF2基因以及其截短基因片段构建真核表达质粒,通过组合免疫的方法肌肉注射小鼠,然后用经处理过的猪圆环病毒2型GXWZ-2株的阳性病料悬液腹腔注射免疫组和阳性对照组小鼠,对其进行体重记录、病理切片制作及PCR检测,以研究核酸疫苗在抵抗PCV-2方面的效果,以望能找到有效的候选疫苗,为该疾病的防控提供科学研究数据。

关键词：猪圆环病毒阳性对照注射免疫核酸疫苗攻毒实验免疫保护性

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